Name: a mouse distraction osteogenesis model
Uploaded: 2018-11-14T12:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Distraction Osteogenesis Model at JoVE.com

Yazarlar Bayan Makiko Kato bu çalışma tamamlamak için cesaret verdiğiniz için teşekkür ederiz. Biz Ayrıca deneysel hayvan bölümü ve tıbbi araştırma mühendislik, Nagoya Üniversitesi Lisansüstü Tıp Fakültesi, fareler konut için teşekkür ederiz.

Tüm deneylerin hayvan bakım ve kullanım Komitesi Kuruluşumuzun tarafından onaylanmış protokoller uyarınca gerçekleştirilmiştir. Önce yordamı tüm aletleri sterilize.
1. özel şık oluşturmak için hazırlanması bir kalıp
<ol><li>Parafin mumu (145 mm x 74 mm) bir levha ile şık, Evans balmumu carver kullanarak bir parçası olan iki eksik yüzük (dış çap, 20 mm; iç çapı, 10 mm), olun.<ol>
<li>4 aynı adet olun. Gaz yakıcı ile ısıtılan bir balmumu spatula kullanı...

<ol>
	<li>Watson, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distraction+osteogenesis.">Distraction osteogenesis.</a> The Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 14, 168-174 (2006).</li><li>Ilizarov, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tension-stress+effect+on+the+genesis+and+growth+of+tissues:+Part+II.+The+influence+of+the+rate+and+frequency+of+distraction.">The tension-stress effect on the genesis and growth of tissues: Part II. The influence of the rate and frequency of distraction.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 239, 263-285 (1989).</li><li>Wan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+hypoxia-inducible+factor-1+alpha+pathway+accelerates+bone+regeneration.">Activation of the hypoxia-inducible factor-1 alpha pathway accelerates bone regeneration.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (2), 686-691 (2008).</li><li>Fujio, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+cell-derived+factor-1+enhances+distraction+osteogenesis-mediated+skeletal+tissue+regeneration+through+the+recruitment+of+endothelial+precursors.">Stromal cell-derived factor-1 enhances distraction osteogenesis-mediated skeletal tissue regeneration through the recruitment of endothelial precursors.</a> Bone. 49 (4), 693-700 (2011).</li><li>Tong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+adhesion+kinase+expression+during+mandibular+distraction+osteogenesis:+evidence+for+mechanotransduction.">Focal adhesion kinase expression during mandibular distraction osteogenesis: evidence for mechanotransduction.</a> Plastic and reconstructive surgery. 111 (1), 211-222 (2003).</li><li>Rhee, S. T., El-Bassiony, L., Buchman, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+signal-+related+kinase+and+bone+morphogenetic+protein+expression+during+distraction+osteogenesis+of+the+mandible:+in+vivo+evidence+of+mechanotransduction+mechanism+for+differentiation+and+osteogenesis+by+mesenchymal+precursor+cells.">Extracellular signal- related kinase and bone morphogenetic protein expression during distraction osteogenesis of the mandible: in vivo evidence of mechanotransduction mechanism for differentiation and osteogenesis by mesenchymal precursor cells.</a> Plastic and reconstructive surgery. 117 (7), 2243-2249 (2006).</li><li>Isefuku, S., Joyner, C. J., Simpson, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+distraction+osteogenesis.">A murine model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 27 (5), 661-665 (2000).</li><li>Tay, B. K., Le, A. X., Gould, S. E., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histochemical+and+molecular+analyses+of+distraction+osteogenesis+in+a+mouse+model.">Histochemical and molecular analyses of distraction osteogenesis in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 16 (5), 636-642 (1998).</li><li>Carvalho, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+angiogenesis+in+a+murine+tibial+model+of+distraction+osteogenesis.">The role of angiogenesis in a murine tibial model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 34 (5), 849-861 (2004).</li><li>Osawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+FGFR3+promotes+bone+formation+via+accelerating+endochondral+ossification+in+mouse+model+of+distraction+osteogenesis.">Activated FGFR3 promotes bone formation via accelerating endochondral ossification in mouse model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 105, 42-49 (2017).</li></ol>

Büyük bir hayvanı deneysel bir model olarak kullanıldığında, bir hazır uzatma cihazı kullanılabilir ve iyi fiksasyonu elde edilir ve uzatma işlemi ve uzantısı miktarını değerlendirmek kolaydır. Ancak, bir fare deneysel bir model olarak kullanıldığında, bazı veya tüm ekipman geliştirmek gereklidir. Isefuku ve ark. ve Tay vd. cihazın yaptı ve bir fare modeli7,8yaratılmıştır. Carvahjo ve ark. kabul hazır geni...

Oyalama osteogenesis () bir iskelet bozuklukları, ekstremite uzunluk tutarsızlıklar, kemik defektleri ve uzuv deformiteleri1gibi çeşitli için kurulan tedavi yöntemidir. Bu benzersiz tedavi stratejisi "Ilizarov tarafından önerilen gerginlik stres prensibi" temel alır. Olgun kemik kurulan2olana Yöntem birkaç gün gecikme süresi, birkaç hafta için etkin oyalama ve konsolidasyon için birkaç ay için gerektirir.
Yerel hipoksik koşulları tıkanıklık nedeniyle kan akışı3,4 ve mekanik stimülasyon5,6 iyileşme sürecinde özellikle önemlidir. Hipoksi indüklenen angiogenez oksijen, besin, çözünür faktörler ve hücreleri yoluyla kan akışını yerel olarak doku onarımı için gerekli taşır. Uzatma işlemi tarafından mekanik stimülasyon mezenkimal kök hücre, kemik oluşumu, kalsifikasyon ve remodeling farklılaşma gibi biyolojik reaksiyonları neden olur. Seri tedavi sadece da yumuşak dokular, sinir, kas, kan damarları ve cilt dokular, kök hücre nakli için gerek kalmadan da dahil olmak üzere sert doku oluşumunu sağlar. Bu nedenle, bir modeli çeşitli dokularda yenilenme analiz etmek için mükemmel bir model olarak kabul edilir.
Tavşan ve köpek temel araştırma yapmak için en çok kullanılan hayvanlar vardır; Ancak, bu hayvanlar için birkaç analiz araçları mevcuttur. Daha ayrıntılı bir analiz bir fare modeli kullanımını kolaylaştırır. Nakavt fareler kullanarak deneyler için özellikle uygundur. Ancak, bir fare bir deneysel hayvan olarak kullanırken, bir uzantısı aygıt oluşturulmalıdır. Burada, biz mevcut bir fare tibial model özel yapım bir şık bir diş laboratuvar araç ve bir önceki çalışmada kullanılan tekniği kullanılarak oluşturulan kullanılarak geliştirilmiş.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:771px;" width="772">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Paraffin wax</td>
			<td style="width:203px;">YAMAHACHI DENTAL MFG. CO.</td>
			<td style="width:147px;">-</td>
			<td style="width:239px;">For preparation a mold for resin rings</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Labocone putty</td>
			<td style="width:203px;">GC Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td>For preparation a mold for resin rings</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Utility wax</td>
			<td style="width:203px;">GC Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td>For preparation a mold for resin rings</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Expansion screw</td>
			<td style="width:203px;">Ortho Dentaurum</td>
			<td style="width:147px;">600-301-30</td>
			<td>Component of custom-made distractor</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:183px;">Unifast III</td>
			<td style="width:203px;">GC Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td style="width:239px;">Immediate polymerization resin Component of custom-made distractor</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:183px;">Ortho Crystal</td>
			<td style="width:203px;">NISSIN</td>
			<td>-</td>
			<td style="width:239px;">Transparent resin Component of custom-made distractor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">25-gauge needle</td>
			<td style="width:203px;">TERUMO</td>
			<td style="width:147px;">NN-2516R</td>
			<td>For custom-made distractor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">27-gauge needle</td>
			<td style="width:203px;">TERUMO</td>
			<td style="width:147px;">NN-2719S</td>
			<td>For custom-made distractor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">ICR mouse</td>
			<td style="width:203px;">Chubu Kagaku Shizai Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td>Experimental animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Somnopentyl</td>
			<td style="width:203px;">Kyoritsu Seiyaku</td>
			<td>-</td>
			<td>Pentobarbital sodium salt</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:203px;">FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td>
			<td style="width:147px;">099-06571</td>
			<td>Isoflurane inhalation solution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse distraction osteogenesis model

Oyalama osteogenesis () iskelet doku rejenerasyonu hücre transplantasyonu olmadan içerir bir cerrahi işlemdir. Bir modeli aşağıdaki üç aşamadan oluşur: gecikme süresi aşamasından sonra osteotomi ve yerleşimini dış şıkkı; yavaş yavaş ve sürekli olarak ayrılmış kemik uçları neyin deli oyalama faz; ve konsolidasyon faz. Özel yapım bu şıkkı yapmak için kullanılan iki eksik akrilik reçine yüzük ve bir genişleme vida oluşur. İşlemi bir kalıp silikon izlenim malzeme ile yapım ve ısmarlama şık oluşturma başlatıldı. Diş reçine silikon izlenim malzemeden yapılmış kalıp dökülür ve ısmarlama şıkkı için gerekli eksik reçine halkaları oluşturmak için polimerize için izin verildi. Bu halkalar şeffaf reçine kullanarak bir genişleme vida ile tespit edildi. Bu yaklaşım ile oluşturulan özel şık fareler tibia bağlıydı. Tibia uzağından, 25 G iğneler bir çift kullanarak aygıt 27 G iğneler bir çift klemple, tespit edildi ve akrilik reçine. 5 gün sonra gecikme süresi, oyalama, 0.2 mm/12 h bir oranda başlatıldı. Uzatma 3.2 mm toplam bir boşluk ortaya çıkan 8 gün boyunca devam edildi. Fareler 4 hafta oyalama sonra kurban edildi. Oyalama boşluğu kemik oluşumu radyografi ve histoloji kullanılarak doğrulandı.

Şekil 1A ve 1B eksik halkalar (dış çapı, 20 mm iç çapı, 10 mm; kalınlığı, 5 mm) parafin ile mevcut. İki balmumu desen silikon izlenim malzeme içinde gömülü ve bir kalıp reçine halkaları (Şekil 1C) için kuruldu. Polimerli reçine hemen bu kalıp içine dökülür ve reçine halkalar (Şekil 1D) elde edilmiştir. Özel yapım bir şıkkı iki ...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Distraction Osteogenesis Model at JoVE.com

A Mouse Distraction Osteogenesis Model

Bir fare oyalama Osteogenesis modeli

Biz özel yapım bir şıkkı kullanılarak geliştirilmiş bir fare tibial oyalama osteogenesis modeli mevcut. Bir fare kullanımı bir analizi hedef olarak araştırma ilerlemek için avantajlıdır.

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the ...

Bu yöntem sert ve yumuşak doku rejenerasyon alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, fare kullanımının kemik yenilenmesinin ayrıntılı bir analizini sağlamasıdır. Tamamen anesteziedilmiş yetişkin fare ile başlayın.Cerrahi bölgeyi %10 iyot solüsyonu ile dikkatlice tıraş edin ve dezenfekte edin. Sonra, sağ alt ekstremitede% 0.5 lidokain hidroklorür uygulayın. Daha sonra, bir sayı 15 neşter ile sağ alt bacakta 15 milimetre boyunda deri kesi yaptıktan sonra, künt altta yatan kasları ayırmak, tüm periost kaldırmak için değil dikkat.Sonra, makasla fibula kes. Dar, ince forseps ile ayak bileği kavramak ve topuk yaklaşık beş milimetre, kemik bir delik yapmak için 27-gauge iğne kullanın. İğne bu sırada deri, kemik ve deri nüfuz etmelidir.İğne tamamen nüfuz ettiğinde, iğne yaklaşık 15 milimetre olacak şekilde bir ucu ve kökü bir ucu ve kökü kesin. Aynı şekilde başka bir delik yapmak, yaklaşık iki ila üç milimetre proksimal. Sonra, ayak bileği etrafında tutun ve aynı şekilde diz altında 25-gauge iğne geçmek.İğne girdikten sonra, ucu ve kökü bir ucu ile kesin. Aynı şekilde başka bir delik daha aç, yaklaşık 2-3 milimetre distal. Özel yapım dikkat dağıtıcıyı uzantı yönüne paralel olacak şekilde yerleştirin.İğneleri ve cihazı cihazın olukları doldurmak için yeterli polimerizasyon diş reçine ile düzeltin. Polimerizasyonun tamamlanmasını bekleyin, bu da yaklaşık beş dakika sürer. Daha sonra, çevre dokulara zarar vermemek için çok dikkatli olurken, tuzlu çözelti uygularken çok ince bir kesme diski kullanarak tibia diaphysis orta sını kesti.Yarayı 4-0 naylon dikişle kapatın. Ameliyattan hemen sonra analjezi için subkutan buprenorfin enjeksiyonları verin. Gecikme süresi ve dikkat dağıtma oranı hakkında çeşitli raporlar vardır, ancak burada, temsili protokoller gösterilir.Beş günlük bir gecikme süresinden sonra, dikkat dağıtma işlemine başlayın. Uzatma için, hızlı genleşme vidasına bağlı pimi kullanın. Pimi uzatma vidasına bağlı sarı ok yönünde hareket ettirin.Küçük parmak ve avuç içi ile kuyruk tutun ve işaret parmağı ve başparmak ile uzatma cihazı düzeltmek. Pimi sarı ok yönünde hareket ettirerek uzatmayı gerçekleştirin 0.2 milimetre lik bir dönüş için. Sekiz gün boyunca her 12 saatte bir 0,2 milimetre hızla uzamaya devam edin ve bu da toplam 3,2 milimetrelik bir boşlukla sonuçlanır.Bu görüntü, modelde dikkat dağıtıcı dört hafta sonra tipik radyografi bulguları gösterir. Yeni oluşan kemik dikkat dağıtıcı bölgede görülür. Burada hematoksilin ve eozin boyama sonuçları görülmektedir.Yeni oluşan bir kemik köprüsü gözlendi ve yeni oluşan kemik doğal kemikten kolayca ayırt edilebilirdi. Biz özel yapılmış bir dikkat dağıtıcı kullanılarak geliştirilen bir fare tibial DO modeli sundu. Fare DO modelinin kullanımı daha ayrıntılı bir analiz kolaylaştırır.Özellikle nakavt fareler kullanarak deneyler için uygundur.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation and Enrichment of Human Adipose-derived Stromal Cells for Enhanced Osteogenesis

İzolasyon ve İnsan zenginleştirilmesi Gelişmiş Osteogenezi için Stromal Hücreleri adipoz-türevi

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) are considered the gold standard for stem cell-based tissue engineering applications. However, the ...

Culture of Murine Embryonic Metatarsals: A Physiological Model of Endochondral Ossification

Fare Embriyonik metatarsallara Kültürü: endokondral Kemikleşmenin bir Fizyolojik Modeli

The fundamental process of endochondral ossification is under tight regulation in the healthy individual so as to prevent disturbed development and/or ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Üç boyutlu yüksek frekanslı Ultrasonografi romanı kullanımı için fare erken gebelik karakterizasyonu

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

A Seminiferous Tubule Squash Technique for the Cytological Analysis of Spermatogenesis Using the Mouse Model

Seminifer tübül Squash tekniği fare modeli kullanarak sperma saytolojik analizi için

Meiotic progression in males is a process that requires the concerted action of a number of highly regulated cellular events. Errors occurring during ...

A Familial Hypercholesterolemia Human Liver Chimeric Mouse Model Using Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocytes

İndüklenmiş Pluripotent kök hücre kaynaklı tetkikine kullanarak ailesel hiperkolesterolemi insan karaciğer Chimeric fare modeli

Familial hypercholesterolemia (FH) is mostly caused by low-density lipoprotein receptor (LDLR) mutations and results in an increased risk of early-onset ...

A Hyperandrogenic Mouse Model to Study Polycystic Ovary Syndrome

Polikistik over sendromu çalışmaya Hyperandrogenic fare modeli

Hyperandrogenemia plays a critical role in reproductive and metabolic function in females and is the hallmark of polycystic ovary syndrome. Developing a ...

Adult Mouse Digit Amputation and Regeneration: A Simple Model to Investigate Mammalian Blastema Formation and Intramembranous Ossification

Yetişkin fare basamak amputasyon ve rejenerasyonu: Mammalin Blastema oluşumu ve Intramembranous ossifikasyon araştırmak için basit bir model

Here, we present a protocol of adult mouse distal terminal phalanx (P3) amputation, a procedurally simple and reproducible mammalian model of epimorphic ...

Isolation and Differentiation of Primary Myoblasts from Mouse Skeletal Muscle Explants

Fare İskelet Kas Ekstranında Primer Miyoblastların İzolasyon ve Farklılaşması

Primary myoblasts are undifferentiated proliferating precursors of skeletal muscle. They can be cultured and studied as muscle precursors or induced to ...

Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging

Mikro-BT Görüntüleme için Erişkin ve Erken Postnatal Fare Akciğerlerinin Vasküler Döküm

Blood vessels form intricate networks in 3-dimensional space. Consequently, it is difficult to visually appreciate how vascular networks interact and ...

Generation and Culture of Lingual Organoids Derived from Adult Mouse Taste Stem Cells

Yetişkin Fare Tadı Kök Hücrelerinden Elde Edilen Lingual Organoidlerin Üretimi ve Kültürü

The sense of taste is mediated by taste buds on the tongue, which are composed of rapidly renewing taste receptor cells (TRCs). This continual turnover is ...