Name: ferric chloride-induced canine carotid artery thrombosis: a large animal model of vascular injury
Uploaded: 2018-09-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury at JoVE.com

Vorremmo ringraziare il centro per Cognitive e comportamentali Brain Imaging presso la Ohio State University per il loro sostegno finanziario e scientifico sviluppare ed eseguire canini per risonanza magnetica.

Le indagini descritte sono conformi alle linee guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio del National Institutes of Health e sono state approvate dal comitato di uso (#2015A00000029) e The Ohio State University istituzionale Animal Care. Tutte le manipolazioni chirurgiche sono state eseguite sotto anestesia profonda e gli animali non hanno avvertito dolore in qualsiasi momento durante la procedura. Tutti gli esperimenti descritti erano mancato recupero.
1. preparazione
<ol><li>Appe...

<ol>
	<li>Adams, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke:+a+vascular+pathology+with+inadequate+management.">Stroke: a vascular pathology with inadequate management.</a> Journal of Hypertension Supplement. 21 (5), S3-S7 (2003).</li><li>Lansberg, M. G., Bluhmki, E., Thijs, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+tissue+plasminogen+activator+3+to+4.5+hours+after+acute+ischemic+stroke:+a+metaanalysis.">Efficacy and safety of tissue plasminogen activator 3 to 4.5 hours after acute ischemic stroke: a metaanalysis.</a> Stroke. 40 (7), 2438-2441 (2009).</li><li>Nagel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapy+of+acute+basilar+artery+occlusion:+intraarterial+thrombolysis+alone+vs+bridging+therapy.">Therapy of acute basilar artery occlusion: intraarterial thrombolysis alone vs bridging therapy.</a> Stroke. 40 (1), 140-146 (2009).</li><li>Ciccone, A., Motto, C., Abraha, I., Cozzolino, F., Santilli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycoprotein+IIb-IIIa+inhibitors+for+acute+ischaemic+stroke.">Glycoprotein IIb-IIIa inhibitors for acute ischaemic stroke.</a> The Cochrane database of systematic reviews. 3 (3), (2014).</li><li>The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Plasminogen+Activator+for+Acute+Ischemic+Stroke.">Tissue Plasminogen Activator for Acute Ischemic Stroke.</a> New England Journal of Medicine. 333 (24), 1581-1588 (1995).</li><li>Leadley, R., Chia, L., Rebellob, S., Gagnon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+in+vivo+models+of+thrombosis+to+the+discovery+and+development+of+novel+antithrombotic+agents.">Contribution of in vivo models of thrombosis to the discovery and development of novel antithrombotic agents.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 43 (2), 101-116 (2000).</li><li>Bodary, P. F., Eitzman, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Thrombosis.">Animal Models of Thrombosis.</a> Current Opinion In Hematology. 16 (5), 342-346 (2009).</li><li>Sachs, U. J. H., Nieswandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+thrombus+formation+in+murine+models.">In vivo thrombus formation in murine models.</a> Circulation Research. 100 (7), 979-991 (2007).</li><li>Bonnard, T., Hagemeyer, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferric+Chloride-induced+Thrombosis+Mouse+Model+on+Carotid+Artery+and+Mesentery+Vessel.">Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52838 (2015).</li><li>Kurz, K. D., Main, B. W., Sandusky, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+arterial+thrombosis+induced+by+ferric+chloride.">Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride.</a> Thrombosis Research. 60 (4), 269-280 (1990).</li><li>Karatas, H., Erdener, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombotic+distal+middle+cerebral+artery+occlusion+produced+by+topical+FeCl(3)+application:+a+novel+model+suitable+for+intravital+microscopy+and+thrombolysis+studies.">Thrombotic distal middle cerebral artery occlusion produced by topical FeCl(3) application: a novel model suitable for intravital microscopy and thrombolysis studies.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 31 (6), 1452-1460 (2011).</li><li>Li, W., McIntyre, T. M., Silverstein, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferric+chloride-induced+murine+carotid+arterial+injury:+A+model+of+redox+pathology.">Ferric chloride-induced murine carotid arterial injury: A model of redox pathology.</a> Redox Biology. 1 (1), 50-55 (2013).</li><li>Vilahur, G., Padro, T., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis+and+Thrombosis:+Insights+from+Large+Animal+Models.">Atherosclerosis and Thrombosis: Insights from Large Animal Models.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 1-12 (2011).</li><li>Coller, B. S., Folts, J. D., Smith, S. R., Scudder, L. E., Jordan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abolition+of+in+vivo+Platelet+Thrombus+Formation+in+Primates+with+Monoclonal+Antibodies+to+the+Platelet+GPIIb/IIIa+Receptor.+Correlation+with+Bleeding+Time,+Platelet+Aggregation,+and+Blockade+of+GPIIb/IIIa+Receptors.">Abolition of in vivo Platelet Thrombus Formation in Primates with Monoclonal Antibodies to the Platelet GPIIb/IIIa Receptor. Correlation with Bleeding Time, Platelet Aggregation, and Blockade of GPIIb/IIIa Receptors.</a> Circulation. 80 (6), 1766-1774 (1989).</li><li>Folts, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vivo+Model+of+Experimental+Arterial+Stenosis,+Intimal+Damage,+and+Periodic+Thrombosis.">An in vivo Model of Experimental Arterial Stenosis, Intimal Damage, and Periodic Thrombosis.</a> Circulation. 83 (6 Suppl), (1991).</li><li>Yasuda, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+canine+model+of+coronary+artery+thrombosis+with+superimposed+high+grade+stenosis+for+the+investigation+of+rethrombosis+after+thrombolysis.">A canine model of coronary artery thrombosis with superimposed high grade stenosis for the investigation of rethrombosis after thrombolysis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 13 (6), 1409-1414 (1989).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+Between+Aquaporin+4+Expression+and+Different+DWI+Parameters+in+Grade+I+Meningioma.">Correlation Between Aquaporin 4 Expression and Different DWI Parameters in Grade I Meningioma.</a> Molecular Imaging and Biology : MIB : the Official Publication of the Academy of Molecular Imaging. 19 (1), 138-142 (2017).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusion-Weighted+Imaging+Using+a+Readout-Segmented,+Multishot+EPI+Sequence+at+3+T+Distinguishes+between+Morphologically+Differentiated+and+Undifferentiated+Subtypes+of+Thyroid+Carcinoma-A+Preliminary+Study.">Diffusion-Weighted Imaging Using a Readout-Segmented, Multishot EPI Sequence at 3 T Distinguishes between Morphologically Differentiated and Undifferentiated Subtypes of Thyroid Carcinoma-A Preliminary Study.</a> Translational Oncology. 9 (5), 403-410 (2016).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusion-Weighted+MRI+Reflects+Proliferative+Activity+in+Primary+CNS+Lymphoma.">Diffusion-Weighted MRI Reflects Proliferative Activity in Primary CNS Lymphoma.</a> Public Library of Science One. 11 (8), e0161386 (2016).</li></ol>

Il modello di lesione vascolare indotta di FeCl3 è ampiamente usato per studiare le trombosi nei piccoli animali ed è facile da tradurre in un modello animale, pre-clinico grande con una moltitudine di vantaggi. Lievi modifiche per adattare il protocollo in un canino consentono l'utilizzo di entrambi la risonanza magnetica per valutare i volumi di ictus e l'emorragia dopo un intervento farmacologico e l'angiografia per valutare la canalizzazione di nave prima, durante, e dopo il trattamento. Altri modelli an...

Terapia di colpo in gran parte è modellata dopo il trattamento di malattia dell'arteria coronaria, principalmente perché gli interventi nella malattia cardiovascolare hanno risposto bene al farmaco terapia ed endovascolare interventi1. Questi trattamenti, tuttavia, non sono tradotti con successo ad infarto cerebrale. Le difficoltà con l'attuale trattamento di ictus sono che non può essere invertito il recombinant attivatore tissutale del plasminogeno (rTPA), e che la somministrazione comporta un rischio significativo di 6,4% di conversione emorragica2,3, 4. il risultato la morbosità e la mortalità limita l'utilizzo di una finestra piccola, spesso irraggiungibile5. Inoltre, restenosi e l'occlusione si verifica spesso dopo il thrombolysis iniziale, invertendo il miglioramento neurologico iniziale. In sintesi, c'è una stretta finestra temporale per amministrare rTPA che esclude la grandede maggioranza (~ 90%) dei pazienti che soffrono di insulti cerebrovascolari ischemici.
Il ruolo della terapia antiaggregante endovenosa ha indicato la promessa nel trattamento del colpo ischemico con nave migliorata ricanalizzazione, sopravvivenza e risultato2. Purtroppo, questi farmaci hanno un effetto collaterale prevedibile dell'emorragia intra-cranica ed extra-cranica, in gran parte perché non c'è alcun modo per adeguatamente invertire o controllare la loro attività2. Mentre efficace nell'impedire l'aggregazione della piastrina, il rischio di emorragia e l'incapacità di invertire la loro attività hanno precluso il loro uso nella routine di cura dei pazienti colpiti da ictus. Esiste pertanto, una necessità, per potenti farmaci antitrombotici che agiscono da soli o in combinazioni per prevenire e lisare coaguli ancora hanno un profilo di sicurezza che permette l'uso in uno spazio chiuso, a basso volume come il cervello, dove l'emorragia è mal tollerata.
La comprensione del meccanismo di re-stenosi e trombosi arteriosa e valutando trombolitici e farmaci che impediscono la re-stenosi, richiede modelli piccoli e grandi animali come parte dello sviluppo di farmaci pre-clinica. Lesione vascolare indotta da cloruro ferrico è una tecnica ampiamente utilizzata rapidamente e con precisione indurre la formazione di trombi nei vasi sanguigni esposti dei topi, ratti, cavie ed i conigli6,7,8, 9 , 10 , 11 , 12. queste specie più piccole offrono diversi vantaggi tra cui la facilità di manipolazione genetica, acquisto animali poco costoso e basso costi di alloggio al giorno. Purtroppo, gli esperimenti sugli animali piccoli negano più sangue disegna durante la chirurgia per accesso reattività piastrinica, emogasanalisi e risposta infiammatoria. Ancora più importante, grandi animali molto più strettamente imitano la fisiologia umana della piastrina6,13. Il modello di lesione dell'arteria carotica di FeCl3 ha svolto un ruolo predominante nello studio della fisiopatologia della trombosi, nella validazione di nuovi farmaci antiaggreganti e anticoagulanti e alla scoperta di potenziali trombolitici6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12. modelli precedenti in topi, ratti, cavie e conigli hanno fornito la facilità e la flessibilità per la manipolazione genetica, ma traducibili modelli pre-clinici sono fondamentali per studi di tossicità e dosaggio pazienti di terapeutica potenziale6 ,13. Anche se sono stati sviluppati diversi modelli di disordini trombotici nei topi, grandi modelli animali di trombosi che valgono per la malattia vascolare periferica, ictus e infarto miocardico sono pochi e lontani. I primi modelli di trombosi in scimmie, cani e maiali focalizzata sulla stenosi, applicazione emostatiche e cilindri successive ai vasi, comunemente conseguente flusso ciclico riduzioni14,15,16. Invece di un embolo occlusivo presso il sito del danno endoteliale come nel modello di cloruro ferrico, l'embolo in questi modelli ciclica trombosi, embolizzazione distale ha provocato e tornare al normale flusso sanguigno. In confronto, il modello di cloruro ferrico per volta qui in un animale di grandi dimensioni, risultati in un embolo occlusivo al sito di lesione ed è stabilizzato e verificato da angiografia prima del trattamento trombolitico. Condizione che lo sperimentatore ha ampi fondi per diem e acquisto di canini e adeguate competenze chirurgiche, dettagliamo qui un grande modello canino di lesione vascolare per consentire laboratori studiare la trombosi che utilizzano chirurgica, imaging e istologico tecniche.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1136">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:397px;">1/8&#8221; umbilical tape&#160;</td>
			<td style="width:195px;">Jorgensen Laboratories Inc.,&#160;</td>
			<td style="width:344px;">#J0025UA&#160;</td>
			<td style="width:201px;">for ferric chloride application</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4% paraformaldehyde in PBS</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>AAJ61899AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">10% neutral buffered formalin&#160;</td>
			<td>Richard-Allan Scientific</td>
			<td>5701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#160;2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC in PBS, pH 7.4)&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ADP/Collagen cartridges</td>
			<td>Siemens Diagnostics</td>
			<td>B417021A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4.5 ml 3.2% sodium citrate blood vacutainer&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD 369714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4.5 ml lithium heparin vacutainer&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD 368056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">EDTA K3 vacutainers&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD455036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Doppler flow probe</td>
			<td>Transonic Systems Inc</td>
			<td>MA2.5PSL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Hematoxylin 560&#160;</td>
			<td>Surgipath</td>
			<td>3801570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eosin</td>
			<td>Surgipath</td>
			<td>3801602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">LabChart Software</td>
			<td>ADInstruments Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Prisma Fit 3 tesla (3T) magnet</td>
			<td>Siemen&#39;s Diagnostics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sodium heparin for injection (to coat blood gas syringe)</td>
			<td>NovaPlus</td>
			<td>402525D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HUG-U-VAC positioning system &#160;</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td>1320</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ferric chloride-induced canine carotid artery thrombosis: a large animal model of vascular injury

Trombosi arteriosa occlusiva che portano a ictus cerebrale di tipo ischemico e infarto miocardico contribuisce a 13 milioni di morti ogni anno a livello globale. Qui, abbiamo tradotto un modello di lesione vascolare da un piccolo animale in un animale di grandi dimensioni (canino), con lievi modifiche che possono essere utilizzate per lo screening pre-clinico di agenti profilattici e trombolitici. Oltre ai metodi chirurgici, il protocollo modificato descrive i metodi dettagliati per valutare la canalizzazione dell'arteria carotica di angiografia, istruzioni dettagliate per elaborare il cervello e la carotide per analisi istologica verificare carotico canalizzazione e l'emorragia cerebrale e parametri specifici per completare una valutazione degli eventi tromboembolici a valle utilizzando la risonanza magnetica (MRI). Inoltre, specifici cambiamenti procedurali da precedentemente consolidato modello animale piccolo necessario tradurre in una lesione vascolare animale di grandi dimensioni (canino) sono discussi.

Seguendo le procedure dettagliate nel presente documento si tradurrà nello sviluppo di un modello che può essere utilizzato per la valutazione del profilattico o trombolitico degli interventi arteriosi occlusivi. Figura 1A Mostra velocità di flusso basale e la velocità di flusso sanguigno risultante prima, durante e dopo il trattamento registrati da un software commerciale. Dati da questa registrazione possono essere utilizzati per determinare la percentu...

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Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Qui, presentiamo le modifiche necessarie a un ben caratterizzato e comunemente usato piccolo indotta da cloruro ferrico (FeCl3) dell'arteria carotica ferita modello animale per l'uso in un modello di grande animale ferita vascolare. Il modello risultante può essere utilizzato per la valutazione pre-clinica prova degli interventi farmacologici e meccanici sia profilattici e trombolitici.

Trombosi dell'arteria carotica canini cloruro ferrico-indotta: Un grande modello animale di danno vascolare

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...

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