Name: ferric chloride-induced canine carotid artery thrombosis: a large animal model of vascular injury
Uploaded: 2018-09-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury at JoVE.com

Gostaríamos de agradecer o centro cognitiva e comportamental cérebro Imaging no The Ohio State University, pelo apoio financeiro e científico desenvolver e executar a canina imagiologia por ressonância magnética.

As investigações descritas de acordo com as orientações para o cuidado e o uso de animais de laboratório do institutos nacionais da saúde e foram aprovadas pelo Comitê de uso (#2015A00000029) e The Ohio estado Universidade institucional Cuidado Animal. Todas as manipulações cirúrgicas foram realizadas sob anestesia profunda e os animais não se sentiu dor em qualquer altura durante o procedimento. Todos os experimentos descritos foram não-cobrança.
1. preparação
<ol><li>Recente...

<ol>
	<li>Adams, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke:+a+vascular+pathology+with+inadequate+management.">Stroke: a vascular pathology with inadequate management.</a> Journal of Hypertension Supplement. 21 (5), S3-S7 (2003).</li><li>Lansberg, M. G., Bluhmki, E., Thijs, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+tissue+plasminogen+activator+3+to+4.5+hours+after+acute+ischemic+stroke:+a+metaanalysis.">Efficacy and safety of tissue plasminogen activator 3 to 4.5 hours after acute ischemic stroke: a metaanalysis.</a> Stroke. 40 (7), 2438-2441 (2009).</li><li>Nagel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapy+of+acute+basilar+artery+occlusion:+intraarterial+thrombolysis+alone+vs+bridging+therapy.">Therapy of acute basilar artery occlusion: intraarterial thrombolysis alone vs bridging therapy.</a> Stroke. 40 (1), 140-146 (2009).</li><li>Ciccone, A., Motto, C., Abraha, I., Cozzolino, F., Santilli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycoprotein+IIb-IIIa+inhibitors+for+acute+ischaemic+stroke.">Glycoprotein IIb-IIIa inhibitors for acute ischaemic stroke.</a> The Cochrane database of systematic reviews. 3 (3), (2014).</li><li>The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Plasminogen+Activator+for+Acute+Ischemic+Stroke.">Tissue Plasminogen Activator for Acute Ischemic Stroke.</a> New England Journal of Medicine. 333 (24), 1581-1588 (1995).</li><li>Leadley, R., Chia, L., Rebellob, S., Gagnon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+in+vivo+models+of+thrombosis+to+the+discovery+and+development+of+novel+antithrombotic+agents.">Contribution of in vivo models of thrombosis to the discovery and development of novel antithrombotic agents.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 43 (2), 101-116 (2000).</li><li>Bodary, P. F., Eitzman, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Thrombosis.">Animal Models of Thrombosis.</a> Current Opinion In Hematology. 16 (5), 342-346 (2009).</li><li>Sachs, U. J. H., Nieswandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+thrombus+formation+in+murine+models.">In vivo thrombus formation in murine models.</a> Circulation Research. 100 (7), 979-991 (2007).</li><li>Bonnard, T., Hagemeyer, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferric+Chloride-induced+Thrombosis+Mouse+Model+on+Carotid+Artery+and+Mesentery+Vessel.">Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52838 (2015).</li><li>Kurz, K. D., Main, B. W., Sandusky, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+arterial+thrombosis+induced+by+ferric+chloride.">Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride.</a> Thrombosis Research. 60 (4), 269-280 (1990).</li><li>Karatas, H., Erdener, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombotic+distal+middle+cerebral+artery+occlusion+produced+by+topical+FeCl(3)+application:+a+novel+model+suitable+for+intravital+microscopy+and+thrombolysis+studies.">Thrombotic distal middle cerebral artery occlusion produced by topical FeCl(3) application: a novel model suitable for intravital microscopy and thrombolysis studies.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 31 (6), 1452-1460 (2011).</li><li>Li, W., McIntyre, T. M., Silverstein, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ferric+chloride-induced+murine+carotid+arterial+injury:+A+model+of+redox+pathology.">Ferric chloride-induced murine carotid arterial injury: A model of redox pathology.</a> Redox Biology. 1 (1), 50-55 (2013).</li><li>Vilahur, G., Padro, T., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis+and+Thrombosis:+Insights+from+Large+Animal+Models.">Atherosclerosis and Thrombosis: Insights from Large Animal Models.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 1-12 (2011).</li><li>Coller, B. S., Folts, J. D., Smith, S. R., Scudder, L. E., Jordan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abolition+of+in+vivo+Platelet+Thrombus+Formation+in+Primates+with+Monoclonal+Antibodies+to+the+Platelet+GPIIb/IIIa+Receptor.+Correlation+with+Bleeding+Time,+Platelet+Aggregation,+and+Blockade+of+GPIIb/IIIa+Receptors.">Abolition of in vivo Platelet Thrombus Formation in Primates with Monoclonal Antibodies to the Platelet GPIIb/IIIa Receptor. Correlation with Bleeding Time, Platelet Aggregation, and Blockade of GPIIb/IIIa Receptors.</a> Circulation. 80 (6), 1766-1774 (1989).</li><li>Folts, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vivo+Model+of+Experimental+Arterial+Stenosis,+Intimal+Damage,+and+Periodic+Thrombosis.">An in vivo Model of Experimental Arterial Stenosis, Intimal Damage, and Periodic Thrombosis.</a> Circulation. 83 (6 Suppl), (1991).</li><li>Yasuda, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+canine+model+of+coronary+artery+thrombosis+with+superimposed+high+grade+stenosis+for+the+investigation+of+rethrombosis+after+thrombolysis.">A canine model of coronary artery thrombosis with superimposed high grade stenosis for the investigation of rethrombosis after thrombolysis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 13 (6), 1409-1414 (1989).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+Between+Aquaporin+4+Expression+and+Different+DWI+Parameters+in+Grade+I+Meningioma.">Correlation Between Aquaporin 4 Expression and Different DWI Parameters in Grade I Meningioma.</a> Molecular Imaging and Biology : MIB : the Official Publication of the Academy of Molecular Imaging. 19 (1), 138-142 (2017).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusion-Weighted+Imaging+Using+a+Readout-Segmented,+Multishot+EPI+Sequence+at+3+T+Distinguishes+between+Morphologically+Differentiated+and+Undifferentiated+Subtypes+of+Thyroid+Carcinoma-A+Preliminary+Study.">Diffusion-Weighted Imaging Using a Readout-Segmented, Multishot EPI Sequence at 3 T Distinguishes between Morphologically Differentiated and Undifferentiated Subtypes of Thyroid Carcinoma-A Preliminary Study.</a> Translational Oncology. 9 (5), 403-410 (2016).</li><li>Schob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusion-Weighted+MRI+Reflects+Proliferative+Activity+in+Primary+CNS+Lymphoma.">Diffusion-Weighted MRI Reflects Proliferative Activity in Primary CNS Lymphoma.</a> Public Library of Science One. 11 (8), e0161386 (2016).</li></ol>

O modelo de lesão vascular induzida FeCl3 é amplamente utilizado para estudar a trombose em pequenos animais e é fácil de se traduzir em um modelo animal, pré-clínicos grande com uma infinidade de vantagens. Pequenas modificações para adaptar o protocolo em um canino permitem a utilização de ambas as imagens de ressonância magnética para avaliar volumes de acidente vascular cerebral e hemorragia após uma intervenção farmacológica e a angiografia para avaliar a canalização de navio antes, dura...

Terapia de acidente vascular cerebral em grande parte é modelada após o tratamento de doença arterial coronariana, principalmente porque intervenções na doença cardiovascular tem respondido bem ao medicamento terapia e endovascular intervenções1. Estes tratamentos, no entanto, não com êxito traduzidas para infarto cerebral. São as dificuldades com o atual tratamento de acidente vascular cerebral que o ativador de plasminogênio tecidual recombinante (rTPA) não pode ser revertido, e que a administração carrega um risco significativo de 6,4% de conversão hemorrágica2,3, 4. a morbimortalidade resultante limita seu uso para uma janela pequena, muitas vezes inatingível,5. Também, reestenose e oclusão ocorrem frequentemente após trombólise inicial, invertendo melhora neurológica inicial. Em resumo, há uma estreita janela temporal para administrar rTPA que exclui a grande maioria (90%) dos pacientes que sofrem insultos cerebrovasculares isquêmicos.
O papel da Terapia antiplaquetária intravenosa se mostrou promissor no tratamento do acidente vascular cerebral isquêmico com recanalização do vaso melhorada, sobrevivência e resultado2. Infelizmente, estas drogas têm um efeito colateral previsível de hemorragia intracraniana e extra-craniana, em grande parte porque não há nenhuma maneira para adequadamente reverter ou controlar sua atividade2. Ao mesmo tempo eficaz na prevenção da agregação plaquetária, o risco de hemorragia e a incapacidade de reverter sua atividade impedido o seu uso na rotina de cuidados a pacientes com AVC. Portanto, existe uma necessidade, para medicamentos anti-coagulantes potentes que agir sozinhos ou em combinações para prevenir e lisar coágulos ainda têm um perfil de segurança que permitirá o uso em um espaço fechado, baixa o volume, como o cérebro, onde a hemorragia é mal tolerada.
Compreendendo o mecanismo da trombose arterial e re-estenose e avaliação dos trombolíticos e drogas que impedem a re-estenose, requerem modelos animais pequenos e grandes, como parte do desenvolvimento pré-clínico. Lesão vascular induzida por cloreto férrico é uma técnica amplamente utilizada para rapidamente e com precisão, induzir a formação de trombos nos vasos expostos de camundongos, ratos, cobaias e coelhos6,7,8, 9 , 10 , 11 , 12. estas espécies menores oferecem várias vantagens, incluindo a facilidade de manipulação genética, compra animal de baixo custo e baixa diárias custos de habitação. Infelizmente, as experiências com animais pequenas negam vários empates de sangue durante a cirurgia de acesso plaquetas reatividade, gasometria arterial e resposta inflamatória. Mais importante ainda, animais de grandes porte muito mais pròxima imitam plaquetária humana fisiologia6,13. O modelo de lesão de artéria carótida3 FeCl tem desempenhado um papel predominante no estudo da fisiopatologia da trombose, na validação de novos medicamentos anti-plaquetários e anti-coagulante e na descoberta de potenciais trombolíticos6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12. Previous modelos em camundongos, ratos, cobaias e coelhos forneceram facilidade e flexibilidade para a manipulação genética, mas traduzíveis modelos pré-clínicos são essenciais para pacientes estudos de dosagem e toxicidade da terapêutica potencial6 ,13. Apesar de vários modelos de distúrbios trombóticos foram desenvolvidos em ratos, grandes modelos animais de trombose que são aplicáveis para a doença vascular periférica, acidente vascular cerebral e infarto do miocárdio são poucos e distante. Os primeiros modelos de trombose em macacos, cachorros e porcos focada na estenose, aplicando hemostatos e cilindros posteriores aos navios, geralmente resultando em fluxo cíclico reduções14,15,16. Em vez de um trombo oclusivo no local do dano endotelial como no modelo de cloreto férrico, o trombo nesses modelos resultou em trombose cíclica, embolização distal e retornar para o fluxo de sangue normal. Em comparação, o modelo de cloreto férrico modificado aqui em um animal grande, resulta em um trombo oclusivo no local da lesão e é estabilizado e verificado por angiografia antes do tratamento trombolítico. Desde que o investigador tem fundos amplos para per diem e compra de caninos e perícia cirúrgica adequada, detalhamos aqui um grande modelo canino de lesão vascular para permitir que os laboratórios estudar trombose utilizando cirúrgica, imagiologia e histológicas técnicas.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1136">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:397px;">1/8&#8221; umbilical tape&#160;</td>
			<td style="width:195px;">Jorgensen Laboratories Inc.,&#160;</td>
			<td style="width:344px;">#J0025UA&#160;</td>
			<td style="width:201px;">for ferric chloride application</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4% paraformaldehyde in PBS</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>AAJ61899AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">10% neutral buffered formalin&#160;</td>
			<td>Richard-Allan Scientific</td>
			<td>5701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#160;2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC in PBS, pH 7.4)&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ADP/Collagen cartridges</td>
			<td>Siemens Diagnostics</td>
			<td>B417021A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4.5 ml 3.2% sodium citrate blood vacutainer&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD 369714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">4.5 ml lithium heparin vacutainer&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD 368056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">EDTA K3 vacutainers&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>BD455036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Doppler flow probe</td>
			<td>Transonic Systems Inc</td>
			<td>MA2.5PSL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Hematoxylin 560&#160;</td>
			<td>Surgipath</td>
			<td>3801570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eosin</td>
			<td>Surgipath</td>
			<td>3801602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">LabChart Software</td>
			<td>ADInstruments Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Prisma Fit 3 tesla (3T) magnet</td>
			<td>Siemen&#39;s Diagnostics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sodium heparin for injection (to coat blood gas syringe)</td>
			<td>NovaPlus</td>
			<td>402525D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HUG-U-VAC positioning system &#160;</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td>1320</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ferric chloride-induced canine carotid artery thrombosis: a large animal model of vascular injury

Trombose arterial oclusiva, levando a isquemia cerebral e infarto do miocárdio contribui para 13 milhões de mortes todos os anos globalmente. Aqui, traduzimos um modelo de lesão vascular de um pequeno animal em um animal grande (canino), com pequenas modificações que podem ser usadas para a seleção pré-clínica de agentes profiláticos e trombolíticos. Além dos métodos cirúrgicos, o protocolo modificado descreve os métodos passo a passo para avaliar a canalização de artéria carótida por angiografia, instruções detalhadas para processar o cérebro e a artéria carótida para análise histológica verificar a carótida canalização e hemorragia cerebral e parâmetros específicos para completar uma avaliação de eventos tromboembólicos a jusante, utilizando a ressonância magnética (MRI). Além disso, alterações processuais específicas do modelo animal pequeno bem estabelecida anteriormente necessário para traduzir em uma lesão vascular animal grande (canino) são discutidas.

Seguindo os procedimentos detalhados neste documento resultará no desenvolvimento de um modelo que pode ser usado para avaliação profiláctica ou trombolítica das intervenções arteriais oclusivas. A figura 1A mostra a velocidade de fluxo da linha de base e a velocidade de fluxo de sangue resultante antes, durante e após o tratamento, gravado por um software comercial. Dados de gravação podem ser usados para determinar o percentual de re-perfusão com...

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Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Aqui, apresentamos as modificações necessárias para um bem caracterizado e comumente usado pequenos induzida por cloreto férrico (FeCl3) artéria carótida lesão modelo animal para uso em um modelo de grandes animais de lesão vascular. O modelo resultante pode ser utilizado para avaliação experimental pré-clínicos profilática e trombolítica intervenções farmacológicas e mecânica.

Trombose da artéria carótida canino induzida por cloreto férrico: Um modelo Animal grande de lesão Vascular

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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