Name: simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00
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Questo lavoro è stato sostenuto in parte dall'Hong Kong Research Grants Council, Early Career Scheme, Project #21201217 to C. L., per il progetto Brain mapping ha guidato l'elettrofisiologia con applicazioni nella ricerca sull'inquinamento acustico e acustico. Ringraziamo il Posgrado en Ciencias Biomédicas, l'Instituto de Neurobiologa dell'Universidad Nacional Autnoma de México (UNAM), il Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACyT) México per la Graduate Fellowship 578458 a FAM Manno.

L'attuale studio e le procedure sono stati approvati dai comitati etici della ricerca sugli animali della City University di Hong Kong, dell'Università di Hong Kong e del Dipartimento della Salute della Regione Amministrativa Speciale di Hong Kong.
1. Animali
<ol><li>Utilizzare ratti Sprague-Dawley (SD) di due mesi (N - 90, 200-250 g). NOTA: i roditori sono stati forniti dall'unità animale da laboratorio accreditata dell'Università di Hong Kong.</li>
	<li>Mantenere i ratti sotto una te...

<ol>
	<li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents.">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li><li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summary+health+statistics+for+U.S.+adults:+National+health+interview+survey,+2001.">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li><li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+hearing+screening+and+follow-up:+Aare+children+receiving+recommended+services?.">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?.</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li><li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex.">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li><li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception.">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li><li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil.">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li><li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+(Merionesunguiculatus).">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).</li><li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil.">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).</li><li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+Unguiculatis.">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li><li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral,+compound+action+potential,+and+single+unit+thresholds:+relationship+in+normal+and+abnormal+ears.">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li><li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+(Meriones+unguiculatus.">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li><li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression.">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audiograms+of+five+species+of+rodents:+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch.">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li><li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear.">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li><li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration.">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil.">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence.">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li><li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil.">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li><li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research.">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li><li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone.">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li><li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear.">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope.">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li><li>Albiin, N., Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane.">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li><li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats.">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li><li>Johansson, U., Hellstr&#246;m, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat.">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li><li>Magnuson, K., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media.">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity.">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats.">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li><li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation:+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone.">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li><li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane:+collagen+types+I,+II,+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane,+during+healing+of+a+perforation,+and+during+infection.">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head &amp; Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li><li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood.">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).</li></ol>

Descriviamo una semplice induzione chirurgica di CHL con verifica utilizzando la visualizzazione dell'otoscopio e la risposta comportamentale dell'applauso nel ratto. Qui dimostriamo il metodo sul ratto e in precedenza questo metodo è stato applicato a gerbilli e topi. Il metodo può essere facilmente adottato per altri roditori. L'induzione di CHL consente lo studio di una sottile forma di perdita dell'udito che si manifesta nelle alterazioni corticali uditive e nei risultati comportamentali psicofisici<sup class="xref...

La prevalenza della perdita dell'udito nei bambini e negli adulti è di circa il 19,5%1 e 15,2%2 rispettivamente. Tuttavia, circa il 39,3% di tutti i neonati con uno screening acustico anomalo non riceve un trattamento correttivo come riportato dai Centers for Disease Control3. La perdita dell'udito è una condizione ampiamente studiata e il roditore è un modello robusto per studiare i normali disturbi dell'udito e dell'udito4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Disturbi dell'udito come la perdita dell'udito conduttiva (CHL) portano ad un aumento della depressione sinaptica a breve termine nella corteccia uditiva4, che si traduce in pendenze psicometriche meno profonde associate a soglie di rilevamento della modulazione di frequenza 5. I modelli di perdita dell'udito conduttivi mediante rimozione/spostamento chirurgico della malleus, della puntura della membrana timpanica (TM) o del tappo per le orecchie sono facilmente impiegabili e consentono la rapida induzione del modello di perdita dell'udito5,14 ,15,16,17,18. L'obiettivo del presente protocollo e metodo è quello di dimostrare un modello CHL semplice e riproducibile nei roditori.
L'attuale protocollo è poco costoso (300 USD con tutti gli strumenti) e facilmente modificabile per le diverse attività di ricerca. Il ratto ha avuto valutazioni dettagliate dell'anatomia dell'orecchio medio19,20,21,22,23, approcci chirurgici24, modelli in otite media25, 26,27 e TM rigenerazione foratura16,17,18,28,29,30, che lo rende un modello ideale per studiare perdita dell'udito. Qui, una semplice procedura di induzione di CHL è descritta con la verifica tramite otoscopio e valutazione comportamentale con risposta clap startle nel ratto, che poi può essere utilizzata per esplorare ulteriori sequele di perdita dell'udito. La procedura CHL è indotta dalla puntura chirurgica della TM. La verifica della procedura CHL viene eseguita dalla visualizzazione dell'otoscopio per determinare l'assenza della TM. La valutazione comportamentale viene eseguita da un livello di pressione sonora (SPL) ad alto decibel (dB). Questo metodo è stato applicato in precedenza in una varietà di roditori. È facile da replicare, produce robuste differenze psicometriche e cambiamenti nelle risposte fisiologiche neurali4,5,16,17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:612px;" width="610">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Latex, polyvinyl or nitrile gloves</td>
			<td style="width:95px;">AMMEX</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:172px;">Use unpowdered gloves 8-mil</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Micro spring scissors (see Fig. 1b)</td>
			<td style="width:95px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:123px;">S11035-08</td>
			<td>8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Otoscope mini 3000</td>
			<td style="width:95px;">HEINE&#160;</td>
			<td style="width:123px;">D-008.70.120M</td>
			<td>Standard LED otoscope will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rat or mouse</td>
			<td style="width:95px;">JAX labs</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Any small rodent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Small rodent cage</td>
			<td style="width:95px;">Tecniplast</td>
			<td style="width:123px;">1284L</td>
			<td>Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat

L'ipoacusia conduttiva (CHL) è un'imposizione uditiva prevalente negli esseri umani. L'obiettivo del protocollo è descrivere una semplice procedura chirurgica per indurre CHL nei roditori. Il protocollo dimostra CHL da puntura a membrana timpanica. La verifica della chirurgia CHL è stata effettuata mediante esame di otoscopio e valutazione comportamentale mediante risposta clap startle, sia replicabile che affidabile, e sono semplici metodi per dimostrare che si è verificata la perdita dell'udito. La semplice procedura CHL è vantaggiosa per la sua riproducibilità e flessibilità nei diversi inseguimenti nella ricerca sulla perdita dell'udito. I limiti di indurre CHL con un approccio chirurgico sono associati alla curva di apprendimento per eseguire la procedura chirurgica e la fiducia nell'esame audiologico. L'induzione di un'ipoacusia da parte della CHL consente di studiare facilmente le manifestazioni neurali e gli esiti comportamentali della perdita dell'udito.

La semplice procedura CHL è stata eseguita su 90 ratti e da questo gruppo 2 ha avuto sanguinamento significativo e 2 non hanno avuto perdita dell'udito il giorno successivo, come valutato da clap startle comportamentale. Questi quattro ratti sono stati scartati. I ratti dovrebbero essere scartati come descritto dai motivi della discussione a causa di complicazioni. L'induzione di foratura e/o malleus spostamento/rimozione di malleus (Figura 2B) provoca CHL, ...

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Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

Qui, presentiamo un protocollo per stabilire un'induzione della perdita dell'udito conduttiva replicabile tramite la puntura chirurgica della membrana tipopanica e la verifica mediante la visualizzazione dell'otoscopio e la valutazione comportamentale tramite clap startle.

Semplice induzione chirurgica della perdita dell'udito conduttiva con verifica utilizzando la visualizzazione dell'otoscopio e la risposta di clap di clap di comportamento in ratto

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

L'obiettivo generale di questo studio è quello di stabilire un'induzione affidabile della perdita dell'udito tramite puntura chirurgica della membrana timpanica e verifica mediante visualizzazione dell'otoscopio e valutazione comportamentale da parte di clap startle. Lo scopo del nostro pratico è quello di sviluppare un modello per i disturbi conduttivi dell'udito umano. Dimostriamo nella pratica, la procedura chirurgica conduttiva di perdita dell'udito, che è una semplificazione nella rimozione del malleo, il metodo per verificare la perdita dell'udito conduttiva tramite visualizzazione dell'otoscopio e una semplice startle comportamentale dell'applauso, che convalida che si è verificata una perdita dell'udito conduttiva.Il principale vantaggio della procedura che abbiamo descritto sono le procedure non invasive, la verifica della perdita dell'udito conduttiva mediante otoscopio e la convalida mediante clap startle. Il presente studio e le procedure sono stati approvati dal comitato etico per la ricerca sugli animali e dalla City University di Hong Kong, dall'Università di Hong Kong e dal Dipartimento della Salute della regione amministrativa speciale di Hong Kong. Per il presente protocollo, scegliamo ratti, ma puoi scegliere qualsiasi roditore.Pesare gli animali per garantire un'anestesia adeguata per l'iniezione IP. Per l'anestesia, è importante che gli animali abbiano la dose corretta. Prendi il tuo topo per la trasandata.Assicurarsi la dose corretta di chetamina e xiazina per iniezione IP e iniettare. Assicurarsi di eseguire il pizzicotto per verificare che non si verifichi la sensazione di dolore. Per la configurazione chirurgica è costituito dal topo anestetizzato, dai microscissori e dall'otoscopio.Si prega di pulire accuratamente l'area chirurgica con etanolo. Posizionare il drappo chirurgico sulla panca pulita. Successivamente introduci le forbici, l'otoscopio e il ratto.La dimensione delle forbici dipenderà dalle dimensioni del roditore. Sotto otoscopio, visualizzare l'orecchio sinistro e destro del ratto per garantire una membrana timpanica sana. Afferra l'elica ed estendi il canale uditivo esterno per diventare oscurato e annerito.Qui introdurrete i microscissori. Introdurre i microscissori al centro del canale uditivo, prestando molta attenzione a non intasare il tessuto. Ascolta il suono pop, quindi gira per assicurarti lo spostamento del malleo.La conferma di un intervento chirurgico di perdita dell'udito conduttiva di successo, deve essere effettuata con un otoscopio. Valutare ogni orecchio di ratto prima e dopo l'intervento chirurgico con un otoscopio con uno speculum di piccolo diametro. Quando viene visualizzato con un otoscopio, devono essere studiate le differenze tra una normale membrana timpanica e una membrana timpanica perforata.Qui, la normale membrana timpanica a sinistra ha la testa del malleo in posizione ed è drasticamente diversa dalla membrana timpanica perforata a destra. La membrana timpanica perforata, dopo l'intervento conduttivo di perdita dell'udito, ha il malleo spostato e la pars tensa interrotta con l'umbo del malleo e la testa completamente mancanti. Cura postoperatoria per i roditori.Posizionare il roditore nella gabbia domestica sotto una lampada calda e iniettare agenti antibatterici e glucosio. Corroborare la perdita dell'udito connettiva con la startle del clap comportamentale. Il ratto CHL è posto accanto a un topo normale in due gabbie adiacenti.Questi sono collocati in una stanza silenziosa. Stare a mezzo metro di distanza e applaudire in durate equamente distanziate un numero specifico di volte. Qui, ne scegliamo cinque.Qui, i nostri risultati comportamentali rappresentativi. Si noti che il topo nella parte inferiore non salta al suono forte dell'applauso. Il topo nella parte superiore dello schermo è sorpreso da questi forti suoni di applausi.Si prega di studiare la differenza prima e dopo l'applauso per questi due ratti. Mancata indurzione dell'ipoacusia conduttiva. La mancata indurzione della perdita dell'udito conduttiva potrebbe essere causata da sanguinamento in una o entrambe le orecchie.E in questo caso, il roditore dovrebbe essere eutanasiato. Ciò indicherebbe che le forbici non hanno avuto contatto con la membrana timpanica. Un suono senza spunta durante la procedura.Un suono senza sboccamento indicherebbe che la procedura di perdita dell'udito conduttiva era scarsa e non pulita. Un suono senza popping significherebbe che i tuoi microscissori non hanno avuto un contatto diretto con la membrana timpanica. Visualizzazione dell'otoscopio.Se, durante la visualizzazione tramite otoscopio, la membrana timpanica appare normale, ciò indicherebbe che non si è verificato alcun CHL. Una risposta al forte clap sound test. Ciò indicherebbe che non si è verificato alcun CHL e che il roditore non ha perdita dell'udito conduttiva.Ciò si verificherebbe quando un topo salta o è sorpreso da un forte segnale acustico. Il principale vantaggio della procedura che abbiamo descritto sono le procedure non invasive, la verifica della perdita dell'udito conduttiva mediante otoscopio e la convalida tramite clap startle. Dopo aver fatto il pratico, puoi indurre la perdita dell'udito conduttiva in un modello di roditore ed esplorare le manifestazioni comportamentali e psicofisiche di questo disturbo dell'udito.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Habituation and Prepulse Inhibition of Acoustic Startle in Rodents

Inibizione assuefazione e prepulse di shock acustici in roditori

The acoustic startle response is a protective response, elicited by a sudden and intense acoustic stimulus. Facial and skeletal muscles are activated ...

Ricerca

Neuroscienze

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

Un test comportamentale semplice for Testing Funzione visiva in<em&gt; Xenopus laevis</em

Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response ...

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

I neuroni olfattivi ottenuti attraverso nasale biopsia combinato con laser-Capture Microdissection: un approccio potenziale per studiare risposta al trattamento in Disturbi Mentali

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

La quantificazione di filamentosa Actina (F-actina) Puncta nel ratto neuroni corticali

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Chirurgia di impianto cocleare e registrazioni di risposta elettricamente evocate uditive del tronco cerebrale in topi C57BL/6

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Valutazione dell'induzione della depressione a lungo termine nelle fette di cerebellar adulto

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-range Channelrhodopsin-assisted Circuit Mapping of Inferior Colliculus Neurons with Blue and Red-shifted Channelrhodopsins

Mappatura del circuito a lungo raggio assistita da Channelrhodopsin dei neuroni Colliculus inferiori con Channelrhodopsins blu e rosso

When investigating neural circuits, a standard limitation of the in vitro patch clamp approach is that axons from multiple sources are often intermixed, ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Etichettatura balistica dei neuroni piramidali nelle sezioni cerebrali e nella cultura cellulare primaria

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

Un metodo di compensazione del tessuto idrofobico per il tessuto cerebrale del ratto

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

Un modello di ratto di infezione cerebrale EcoHIV

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...