Name: simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet delvis av Hong Kong Research Grants Council, tidlig karriere Scheme, Project #21201217 til C. L., for prosjektet Brain kartlegging guidet elektrofysiologi med programmer i hørsel og støyforurensning forskning. Vi takker Posgrado en Ciencias Biomédicas, Instituto de Neurobiología ved Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México for Graduate Fellowship 578458 til FAM Manno.

Den nåværende studien og prosedyrene ble godkjent av dyret forskningsetikk komiteer av City University of Hong Kong, Universitetet i Hong Kong, og Department of Health i Hong Kong Special administrative region.
1. dyr
<ol><li>Bruk Sprague-Dawley (SD) rotter på to måneder (N = 90, 200-250 g). Merk: gnagere ble levert av akkreditert Laboratory Animal Unit ved University of Hong Kong.</li>
	<li>Opprettholde rotter under en konstant 25 ° c temperatur og 60-70% fuktighet ved laboratoriet ...

<ol>
	<li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents.">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li><li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summary+health+statistics+for+U.S.+adults:+National+health+interview+survey,+2001.">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li><li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+hearing+screening+and+follow-up:+Aare+children+receiving+recommended+services?.">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?.</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li><li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex.">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li><li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception.">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li><li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil.">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li><li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+(Merionesunguiculatus).">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).</li><li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil.">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).</li><li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+Unguiculatis.">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li><li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral,+compound+action+potential,+and+single+unit+thresholds:+relationship+in+normal+and+abnormal+ears.">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li><li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+(Meriones+unguiculatus.">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li><li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression.">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audiograms+of+five+species+of+rodents:+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch.">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li><li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear.">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li><li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration.">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil.">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence.">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li><li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil.">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li><li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research.">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li><li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone.">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li><li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear.">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope.">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li><li>Albiin, N., Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane.">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li><li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats.">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li><li>Johansson, U., Hellstr&#246;m, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat.">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li><li>Magnuson, K., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media.">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity.">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats.">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li><li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation:+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone.">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li><li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane:+collagen+types+I,+II,+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane,+during+healing+of+a+perforation,+and+during+infection.">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head &amp; Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li><li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood.">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).</li></ol>

Vi beskriver en enkel kirurgisk induksjon av CHL med verifisering ved hjelp av Otoskop visualisering og atferdsmessige klapp skremme respons i rotte. Her over vi demonstrere metoden opp på rotten og tidligere denne metoden er blitt anvendt å gerbils og mus. Metoden kanne lett være adoptert å annet Red. Induksjon av CHL tillater studiet av en subtil form for hørselstap som manifesterer i hørbar kortikale endringer og psykofysiske atferds resultater4,5,<...

Utbredelsen av hørselstap hos barn og voksne er henholdsvis omtrent 19,5%1 og 15,2%2 . Men ca 39,3% av alle nyfødte med en unormal hørsel screening ikke får forebyggende behandling som rapportert av Centers for sykdom Control3. Hørselstap er en mye studert tilstand, og gnager er en robust modell for å studere normal hørsel og hørsel relaterte lidelser4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Hørsels lidelser som ledende hørselstap (CHL) fører til en økning på kort sikt Synaptic depresjon i hørsels barken4, noe som resulterer i grunnere psykometriske bakker assosiert med frekvens modulering deteksjon terskler 5. ledende hørselstap modeller ved kirurgisk fjerning/forskyvning av hekse, tromme membran (TM) punktering eller ørepropp er lett ansatt og tillater rask induksjon av hørselstap modell5,14 ,15,16,17,18. Målet med den nåværende protokollen og metoden er å demonstrere en enkel og reproduserbar CHL modell i gnagere.
Den nåværende protokollen er billig (≈ USD $300 med alle verktøy), og lett amendable til ulike forsknings sysler. Rotta har fikk detaljert vurderingen av midt øre anatomi19,20,21,22,23, inngrep tilnærmelser24, modeller inne otitis media25, 26,27 og TM punktering gjenfødelse16,17,18,28,29,30, noe som gjør det til en ideell modell for å studere hørselstap. Her over, en enkel CHL induksjon fremgangsmåte er beskrevet med bekreftelse av Otoskop og opptreden vurderingen med klapp skremme svaret inne rotten, hvilke så kanskje bli brukt til å utforske i tillegg sekvele av høring forlis. CHL prosedyren er indusert av kirurgisk punktering av TM. Verifisering av CHL prosedyren er utført av Otoskop visualisering for å bestemme fravær av TM. Behavioral vurdering er utført av en høy desibel (dB) lydtrykksnivå (SPL) hånd-klapp. Denne metoden har vært brukt tidligere i en rekke gnagere. Det er lett å gjenskape, produserer robuste psykometriske forskjeller og endringer i nevrale fysiologiske responser4,5,16,17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:612px;" width="610">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Latex, polyvinyl or nitrile gloves</td>
			<td style="width:95px;">AMMEX</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:172px;">Use unpowdered gloves 8-mil</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Micro spring scissors (see Fig. 1b)</td>
			<td style="width:95px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:123px;">S11035-08</td>
			<td>8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Otoscope mini 3000</td>
			<td style="width:95px;">HEINE&#160;</td>
			<td style="width:123px;">D-008.70.120M</td>
			<td>Standard LED otoscope will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rat or mouse</td>
			<td style="width:95px;">JAX labs</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Any small rodent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Small rodent cage</td>
			<td style="width:95px;">Tecniplast</td>
			<td style="width:123px;">1284L</td>
			<td>Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat

Mekanisk hørselstap (CHL) er en utbredt hørselsnedsettelse hos mennesker. Målet med protokollen er å beskrive en enkel kirurgisk prosedyre for inducing CHL i gnagere. Protokollen demonstrerer CHL av tromme membran punktering. Verifikasjon av CHL kirurgi var ved Otoskop undersøkelse og atferdsdata vurdering ved klapp skremme respons, både repliserbar og pålitelig, og er enkle metoder for å demonstrere hørselstap har oppstått. Den enkle CHL-prosedyren er fordelaktig på grunn av reproduserbarhet og fleksibilitet til ulike sysler i hørselstap forskning. Begrensningene ved å indusere CHL av en kirurgisk tilnærming er knyttet til læringskurven for å utføre den kirurgiske prosedyren og tilliten til audiologiske undersøkelse. Inducing en hørselshemming av CHL tillater en å lett studere nevrale manifestasjoner og atferds resultater av hørselstap.

Det enkel CHL fremgangsmåte var utført opp på 90 rotter og ute av denne gruppe 2 fikk betydelig blø og 2 bydde ikke ha høring forlis morgendagen idet vurdert av opptreden klapp skremme. Disse fire rottene ble forkastet. Rotter burde være kasserte idet beskrevet av årsakene inne diskusjonen på grunn av komplikasjoner. Inducing TM punktering og/eller hekse forskyvning/fjerning (figur 2b) utløser CHL, som resulterer i atferdsmessige manifestasjoner (dvs...

Watch this Scientific Journal Video about Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat at JoVE.com

Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

Her presenterer vi en protokoll for å etablere en repliserbar ledende hørselstap induksjon via kirurgisk tromme membran punktering og verifisering av Otoskop visualisering og atferdsdata vurdering av klapp skremme.

Enkel kirurgisk induksjon av ledende hørselstap med verifisering bruke Otoskop visualisering og Behavioral klapp skremme Response i Rat

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

Det overordnede målet med denne studien er å etablere en pålitelig induksjon av hørselstap via kirurgisk trommehinnepunktering og verifisering ved otoskopvisualisering og atferdsvurdering ved klappsoppstart. Hensikten med vår praktiske er å utvikle en modell for menneskelige hørselsforstyrrelser. Vi demonstrerer i den praktiske, den ledende hørselstap kirurgiske prosedyren, som er en forenkling i malleus fjerning, metoden for å verifisere ledende hørselstap ved otoskopvisualisering, og en enkel atferdsklappsmell, som validerer at ledende hørselstap har skjedd.Den største fordelen med prosedyren vi beskrev er ikke-invasive prosedyrer, verifisering av ledende hørselstap av otoskop og validering ved klappsennekt. Den nåværende studien og prosedyrene ble godkjent av dyreforskningsetikkkomiteen og City University of Hong Kong, University of Hong Kong, og Department of Health of the Hong Kong Special Administrative Region. For den nåværende protokollen velger vi rotter, men du kan velge hvilken som helst gnager.Veie dyr for å sikre riktig anestesi til IP-injeksjon. For anestesi er det viktig at dyr har riktig dose. Plukk opp rotta ved scruff.Kontroller riktig dose ketamin og xylazin til IP-injeksjon, og injiser. Sørg for å utføre tåklem for å bekrefte ingen smertefølelse. For kirurgisk oppsett består av din bedøvede rotte, mikroscissorene og otoskopet ditt.Rengjør det kirurgiske området grundig med etanol. Plasser den kirurgiske drapering på den rengjorte benken. Deretter introdusere saks, otoskop, og rotte.Størrelsen på saksen din vil avhenge av størrelsen på gnageren din. Under otoskop visualiser du venstre og høyre øre av rotten for å sikre en sunn trommehinne. Ta tak i helixen og utvid den eksterne hørselskanalen for å bli skjult og svertet.Her vil du introdusere mikroscissors. Introdder mikroscissorene til midten av hørselskanalen, og vær oppmerksom på ikke å nicke vevet. Lytt etter poplyden, og vri for å sikre forskyvning av malleus.Bekreftelsen av en vellykket ledende hørselstapkirurgi, bør gjøres med et otoskop. Evaluer hvert rotteøre før og etter operasjonen med et otoskop med en liten diameter spekulum. Når visualisert med et otoskop, bør forskjellene mellom en normal trommehinne og en punktert trommehinne studeres.Her har den normale trommehinnen til venstre hodet av malleus på plass og er drastisk annerledes enn den punkterte trommehinnen til høyre. Den punkterte tympaniske membranen, etter den ledende hørselstapsoperasjonen, har malleus forskjøvet og pars tensa sprukket med umbo av malleus og hodet helt mangler. Postoperativ omsorg for gnagere.Plasser gnageren i hjemmeburet under en varm lampe og injiser med antibakterielle midler og glukose. Korrobort tilkoblings hørselstap med atferdsklappsmerte. CHL-rotten plasseres ved siden av en normal rotte i to tilstøtende bur.Disse er plassert i et stille rom. Stå en halv meter unna og klapp i like mellomrom varigheter et bestemt antall ganger. Her velger vi fem.Her, våre representative atferdsresultater. Legg merke til at rotten nederst ikke hopper til den høye klapplyden. Rotta øverst på skjermen er skremt av disse høye klapplydene.Vennligst studer før og etter klappforskjellen for disse to rotter. Unnlatelse av å indusere ledende hørselstap. Hvis du ikke induserer konduktivt hørselstap, kan det skyldes blødning i ett eller begge ører.Og i dette tilfellet bør gnageren euthaniseres. Dette ville indikere at saksen ikke kom i kontakt med trommehinnen. En ingen popping lyd under prosedyren.En ingen popping lyd ville indikere at den ledende hørselstap prosedyren var dårlig og ikke ren. En ingen popping lyd ville bety at mikroscissors ikke gjorde direkte kontakt med trommehinnen. Otoskopvisualisering.Hvis trommehinnen ser normal ut ved visualisering ved otoskop, vil dette indikere at ingen CHL har oppstått. Et svar på den høye klapplydtesten. Dette indikerer at ingen CHL har skjedd, og gnageren har ikke ledende hørselstap.Dette vil skje når en rotte hopper eller blir skremt av en høy klapplyd. Den største fordelen med prosedyren vi beskrev, er ikke-invasive prosedyrer, verifisering av ledende hørselstap av otoskop og validering ved klappsennekt. Etter å ha gjort det praktiske, kan du indusere ledende hørselstap i en gnagermodell og utforske de atferdsmessige og psykofysiske manifestasjonene av denne hørselsforstyrrelsen.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Habituation and Prepulse Inhibition of Acoustic Startle in Rodents

The acoustic startle response is a protective response, elicited by a sudden and intense acoustic stimulus. Facial and skeletal muscles are activated ...

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

En enkel Behavioral analysen for Testing visuell funksjon i<em&gt; Xenopus laevis</em

Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response ...

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

Olfactory Nevroner innhentet gjennom Nasal Biopsi Kombinert med Laser-Capture mikrodisseksjon: En Potential tilnærming til Study Behandling Response i psykiske lidelser

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

Kvantifisering av Trådformede Actin (F-aktin) puncta i Rat kortikale nevroner

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Cochlear implantat kirurgi og elektrisk utløste auditiv hjernestammen svar opptak i C57BL/6 mus

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Vurdering av lang tids depresjon induksjon i voksen lillehjernen skiver

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-range Channelrhodopsin-assisted Circuit Mapping of Inferior Colliculus Neurons with Blue and Red-shifted Channelrhodopsins

Langdistanse Channelrhodopsin-assistert kretskartlegging av dårligere colliculus nevroner med blå og rød-forskjøvet channelrhodopsins

When investigating neural circuits, a standard limitation of the in vitro patch clamp approach is that axons from multiple sources are often intermixed, ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Ballistisk merking av pyramidale nevroner i hjerneskiver og i primær cellekultur

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

En hydrofob vevsryddingsmetode for rottehjernevev

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En rottemodell av EcoHIV hjerneinfeksjon

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...