Name: simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00
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Este trabalho foi apoiado em parte pelo Hong Kong Research Grants Council, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para o projeto Brain mapeamento eletrofisiologia guiada com aplicações em audição e pesquisa de poluição sonora. Agradecemos ao Posgrado en Ciencias Biomédicas, ao Instituto de Neurobiologiía da Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), ao Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México pela Bolsa de Pós-Graduação 578458 à FAM Manno.

O presente estudo e procedimentos foram aprovados pelos comitês de ética em pesquisa animal da Universidade da Cidade de Hong Kong, da Universidade de Hong Kong e do Departamento de Saúde da Região Administrativa Especial de Hong Kong.
1. Animais
<ol><li>Use ratos Sprague-Dawley (SD) de dois meses (N = 90, 200-250 g). NOTA: Roedores foram fornecidos pela unidade animal do laboratório acreditada da universidade de Hong Kong.</li>
	<li>Mantenha os ratos uma temperatura constante de 25 ...

<ol>
	<li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents.">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li><li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summary+health+statistics+for+U.S.+adults:+National+health+interview+survey,+2001.">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li><li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+hearing+screening+and+follow-up:+Aare+children+receiving+recommended+services?.">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?.</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li><li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex.">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li><li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception.">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li><li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil.">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li><li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+(Merionesunguiculatus).">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).</li><li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil.">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).</li><li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+Unguiculatis.">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li><li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral,+compound+action+potential,+and+single+unit+thresholds:+relationship+in+normal+and+abnormal+ears.">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li><li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+(Meriones+unguiculatus.">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li><li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression.">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audiograms+of+five+species+of+rodents:+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch.">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li><li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear.">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li><li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration.">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil.">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence.">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li><li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil.">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li><li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research.">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li><li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone.">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li><li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear.">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope.">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li><li>Albiin, N., Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane.">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li><li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats.">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li><li>Johansson, U., Hellstr&#246;m, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat.">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li><li>Magnuson, K., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media.">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity.">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats.">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li><li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation:+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone.">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li><li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane:+collagen+types+I,+II,+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane,+during+healing+of+a+perforation,+and+during+infection.">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head &amp; Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li><li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood.">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).</li></ol>

Descrevemos uma simples indução cirúrgica de CHL com verificação usando visualização de otoscópio e resposta comportamental de verniz em ratos. Aqui demonstramos o método em rato e anteriormente este método foi aplicado a gerbils e camundongos. O método pode ser facilmente adotado para outros roedores. A indução da CHL permite o estudo de uma forma sutil de perda auditiva que se manifesta em alterações corticais auditivas e achados comportamentais psicofísicos4,<sup clas...

A prevalência da perda auditiva em crianças e adultos é de aproximadamente 19,5%1 e 15,2%2, respectivamente. No entanto, aproximadamente 39,3% de todos os recém-nascidos com triagem auditiva anormal não recebem tratamento corretivo conforme relatado pelo Centers for Disease Control3. A perda auditiva é uma condição amplamente estudada, e o roedor é um modelo robusto para estudar distúrbios normais relacionados à audição e audição4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Distúrbios auditivos como perda auditiva condutiva (LE) levam a um aumento da depressão sináptica de curto prazo no córtex auditivo4,o que resulta em inclinações psicométricas mais rasas associadas a limiares de detecção de modulação de frequência 5. Modelos de perda auditiva condutora por remoção/deslocamento cirúrgico do malleus, punção da membrana tympanic (TM) ou tampão de ouvido são facilmente empregados e permitem a rápida indução do modelo de perda auditiva5,14 ,15,16,17,18. O objetivo do protocolo e método atual é demonstrar um modelo CHL simples e reproduzível em roedores.
O protocolo atual é barato (US$ 300 com todas as ferramentas) e prontamente alterado para diferentes atividades de pesquisa. O rato teve avaliações detalhadas da anatomia do ouvido médio19,20,21,22,23, abordagens cirúrgicas24, modelos em otitis media25, 26,27 e regeneração de perfuração TM16,17,18,28,29,30,tornando-se um modelo ideal para estudar perda auditiva. Aqui, um procedimento simples da indução de CHL é descrito com verificação pelo otoscope e pela avaliação com resposta do startle do aplauso no rato, que então pode ser usado para explorar sequelas adicionais da perda de audição. O procedimento de LE é induzido pela punção cirúrgica do TM. A verificação do procedimento de CHL é realizada por visualização de otoscópio para determinar a ausência do TM. A avaliação comportamental é realizada por um alto nível de pressão sonora (DB) (SPL) palmas. Este método foi aplicado previamente em uma variedade de roedores. É fácil de replicar, produz diferenças psicométricas robustas e mudanças nas respostas fisiológicas neurais4,5,16,17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:612px;" width="610">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Latex, polyvinyl or nitrile gloves</td>
			<td style="width:95px;">AMMEX</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:172px;">Use unpowdered gloves 8-mil</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Micro spring scissors (see Fig. 1b)</td>
			<td style="width:95px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:123px;">S11035-08</td>
			<td>8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Otoscope mini 3000</td>
			<td style="width:95px;">HEINE&#160;</td>
			<td style="width:123px;">D-008.70.120M</td>
			<td>Standard LED otoscope will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rat or mouse</td>
			<td style="width:95px;">JAX labs</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Any small rodent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Small rodent cage</td>
			<td style="width:95px;">Tecniplast</td>
			<td style="width:123px;">1284L</td>
			<td>Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat

A perda auditiva condutiva (CHL) é um comprometimento auditivo prevalente em seres humanos. O objetivo do protocolo é descrever um procedimento cirúrgico simples para induzir CHL em roedores. O protocolo demonstra CHL por punção de membrana tympanic. A verificação da cirurgia de CHL foi por exame de otoscópio e avaliação comportamental por resposta ao vermão, tanto replicável quanto confiável, e são métodos simples para demonstrar que a perda auditiva ocorreu. O procedimento simples de CHL é vantajoso devido à sua reprodutibilidade e flexibilidade a diferentes atividades na pesquisa de perda auditiva. As limitações da indução de LCH por abordagem cirúrgica estão associadas à curva de aprendizagem para realizar o procedimento cirúrgico e a confiança no exame audiológico. Induzir uma deficiência auditiva por CHL permite que um estude prontamente as manifestações neurais e os resultados comportamentais da perda auditiva.

O procedimento simples do CHL foi executado em 90 ratos e fora deste grupo 2 teve o sangramento significativo e 2 não teve a perda da audição o next day como avaliado pelo startle comportável do clap. Estes quatro ratos foram descartados. Os ratos devem ser descartados conforme descrito pelas razões da discussão devido a complicações. Induzir a punção e/ou o deslocamento/ou a remoção do malleus do TM(figura 2B)elicia CHL, que conduz às manifesta?...

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Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer uma indução de perda auditiva condutora replicável por meio de punção cirúrgica da membrana de tympanic e verificação por visualização de otoscópio e avaliação comportamental por verino de gonorreia.

Indução cirúrgica simples da perda auditiva condutora com verificação usando a visualização do otoscópio e a resposta comportável do startle do clap no rato

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

O objetivo geral deste estudo é estabelecer uma indução confiável de perda auditiva através de punção de membrana typanica cirúrgica e verificação por visualização otoscópio e avaliação comportamental por um início de bate-palmas. O objetivo da nossa prática é desenvolver um modelo para distúrbios condutores auditivos humanos. Demonstramos na prática, o procedimento cirúrgico de perda auditiva condutiva, que é uma simplificação na remoção de Malleus, o método para verificar a perda auditiva condutiva por visualização do otoscópio, e um simples início de palmas comportamental, que valida que ocorreu perda auditiva condutiva.A principal vantagem do procedimento que descrevemos são procedimentos não invasivos, verificação da perda auditiva condutiva por otoscópio e validação por surto de palmas. O presente estudo e procedimentos foram aprovados pelo comitê de ética em pesquisa animal e pela City University of Hong Kong, pela Universidade de Hong Kong e pelo Departamento de Saúde da Região Administrativa Especial de Hong Kong. Para o protocolo atual, escolhemos ratos, mas você pode escolher qualquer roedor.Pesar animais para garantir anestesia adequada para injeção de IP. Para anestesia, é importante que os animais tenham a dose adequada. Pegue seu rato pelo scruff.Certifique-se de sua dose correta de cetamina e xilazina para injeção ip, e injete. Certifique-se de realizar beliscão do dedo do pé para verificar nenhuma sensação de dor. Para a configuração cirúrgica consiste em seu rato anestesiado, os microscissores e seu otoscópio.Por favor, limpe completamente a área cirúrgica com etanol. Coloque a cortina cirúrgica no banco limpo. Posteriormente, introduza sua tesoura, otoscópio e rato.O tamanho da sua tesoura dependerá do tamanho do seu roedor. Sob otoscópio, visualize o ouvido esquerdo e direito do rato para garantir uma membrana timpânica saudável. Pegue a hélice e estenda o canal auditivo externo para ficar obscurecido e enevado.Aqui você vai introduzir os microscissores. Introduza os microscisores ao centro do canal auditivo, prestando muita atenção para não cortar o tecido. Ouça o som pop, depois torça para garantir o deslocamento do malleus.A confirmação de uma cirurgia de perda auditiva condutiva bem sucedida deve ser feita com um otoscópio. Avalie cada orelha de rato antes e depois da cirurgia com um otoscópio com um espéculo de pequeno diâmetro. Quando visualizada com otoscópio, devem ser estudadas as diferenças entre uma membrana timpânica normal e uma membrana timpânica perfurada.Aqui, a membrana timpânica normal à esquerda tem a cabeça do malleus no lugar e é drasticamente diferente da membrana timpânica perfurada à direita. A membrana timpânica perfurada, após a cirurgia de perda auditiva condutiva, tem o malleus deslocado e os pars tensas rompidos com o umbo do malleus e cabeça completamente ausente. Cuidados pós-operatórios para roedores.Coloque o roedor na gaiola de casa sob uma lâmpada quente e injete com agentes antibacterianos e glicose. Corroborar perda auditiva conjuntiva com o início da palmas comportamental. O rato CHL é colocado ao lado de um rato normal em duas gaiolas adjacentes.Estes são colocados em uma sala silenciosa. Fique a meio metro de distância e bata palmas em durações igualmente espaçadas um número específico de vezes. Aqui, escolhemos cinco.Aqui, nossos resultados comportamentais representativos. Note que o rato na parte inferior não pula para o som de palmas. O rato na parte superior da tela é assustado por esses sons altos de palmas.Por favor, estude o antes e depois da diferença de palmas para esses dois ratos. Falha em induzir perda auditiva condutiva. Uma falha em induzir perda auditiva condutiva pode ser causada por sangramento em uma ou ambas as orelhas.E neste caso, o roedor deve ser eutanizado. Isso indicaria que a tesoura não fez contato com a membrana timpânica. Um som sem estalo durante o procedimento.Um som sem estalo indicaria que o procedimento de perda auditiva condutiva era ruim e não limpo. Um som sem estalo significaria que seus microscisores não fizeram contato direto com a membrana timpânica. Visualização otoscópio.Se, ao visualizar por otoscópio, a membrana timpânica parece normal, isso indicaria que nenhum CHL ocorreu. Uma resposta ao teste de som de palmas. Isso indicaria que não ocorreu nenhum CHL e que o roedor não tenha perda auditiva condutiva.Isso ocorreria quando um rato pula ou é assustado por um som alto. A principal vantagem do procedimento que descrevemos são procedimentos não invasivos, verificação da perda auditiva condutiva por otoscópio e validação por surto de palmas. Depois de fazer a prática, você pode induzir perda auditiva condutiva em um modelo de roedor e explorar as manifestações comportamentais e psicofísicas deste transtorno auditivo.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Habituação e Prepulse Inibição de sobressalto acústico em Roedores

The acoustic startle response is a protective response, elicited by a sudden and intense acoustic stimulus. Facial and skeletal muscles are activated ...

Neurociência

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Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response ...

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

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Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantificação de filamentosas actina (F-actina) puncta no Rat neurônios corticais

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Cirurgia de implante coclear e gravações de resposta eletricamente evocado auditivo do tronco encefálico em camundongos C57BL/6

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Avaliação da indução de depressão em longo prazo em fatias Cerebelares adultas

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-range Channelrhodopsin-assisted Circuit Mapping of Inferior Colliculus Neurons with Blue and Red-shifted Channelrhodopsins

Mapeamento de circuito assistido pela canaldopsina de longo alcance de neurônios de coláculo inferior com canaldopsinas de mudança azul e vermelha

When investigating neural circuits, a standard limitation of the in vitro patch clamp approach is that axons from multiple sources are often intermixed, ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Rotulagem Balística de Neurônios Piramidais em Fatias Cerebrais e na Cultura Celular Primária

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

Um método de limpeza de tecido hidrofóbico para tecido cerebral de rato

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

Um modelo de rato de infecção cerebral ecohiv

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...