Name: simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00
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Este trabajo fue apoyado en parte por el Consejo de Becas de Investigación de Hong Kong, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para el proyecto Brain mapping guided electrophysiology with applications in hearing and noise pollution research. Agradecemos a Posgrado en Ciencias Biomédicas, el Instituto de Neurobiología de la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México por la Beca de Posgrado 578458 a FAM Manno.

El presente estudio y procedimientos fueron aprobados por los comités de ética de investigación animal de la Universidad de la Ciudad de Hong Kong, la Universidad de Hong Kong y el Departamento de Salud de la Región Administrativa Especial de Hong Kong.
1. Animales
<ol><li>Utilice ratas Sprague-Dawley (SD) de dos meses (N .90, 200-250 g). NOTA: Los roedores fueron proporcionados por la Unidad de Animales de Laboratorio acreditada de la Universidad de Hong Kong.</li>
	<li>Mantener las ...

<ol>
	<li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents.">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li><li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summary+health+statistics+for+U.S.+adults:+National+health+interview+survey,+2001.">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li><li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+hearing+screening+and+follow-up:+Aare+children+receiving+recommended+services?.">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?.</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li><li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex.">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li><li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception.">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li><li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil.">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li><li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+(Merionesunguiculatus).">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).</li><li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil.">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).</li><li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+Unguiculatis.">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li><li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral,+compound+action+potential,+and+single+unit+thresholds:+relationship+in+normal+and+abnormal+ears.">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li><li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+(Meriones+unguiculatus.">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li><li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression.">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audiograms+of+five+species+of+rodents:+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch.">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li><li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear.">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li><li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration.">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil.">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence.">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li><li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil.">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li><li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research.">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li><li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone.">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li><li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear.">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope.">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li><li>Albiin, N., Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane.">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li><li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats.">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li><li>Johansson, U., Hellstr&#246;m, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat.">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li><li>Magnuson, K., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media.">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity.">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats.">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li><li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation:+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone.">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li><li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane:+collagen+types+I,+II,+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane,+during+healing+of+a+perforation,+and+during+infection.">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head &amp; Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li><li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood.">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).</li></ol>

Describimos una simple inducción quirúrgica de CHL con verificación utilizando la visualización del otoscopio y la respuesta de sobregolpe de aplausos conductuales en rata. Aquí demostramos el método en rata y anteriormente este método se ha aplicado a jerbos y ratones. El método se puede adoptar fácilmente a otros roedores. La inducción de CHL permite el estudio de una forma sutil de pérdida auditiva que se manifiesta en alteraciones corticales auditivas y hallazgos psicofísicos del comportamiento<sup class=...

La prevalencia de la pérdida auditiva en niños y adultos es de aproximadamente 19,5%1 y 15,2%2 respectivamente. Sin embargo, aproximadamente el 39,3% de todos los recién nacidos con un examen auditivo anormal no reciben tratamiento corrector según lo informado por los Centros para el Control de Enfermedades3. La pérdida auditiva es una condición ampliamente estudiada, y el roedor es un modelo robusto para estudiar trastornos normales relacionados con la audición y la audición4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Los trastornos auditivos como la hipoacusia conductiva (CHL) conducen a un aumento de la depresión sináptica a corto plazo en la corteza auditiva4,lo que da lugar a pendientes psicométricas más superficiales asociadas con umbrales de detección de modulación de frecuencia 5. Los modelos de pérdida auditiva conductiva por extracción quirúrgica/desplazamiento del malleus, la punción de la membrana timpánica (TM) o el tapón para los oídos se emplean fácilmente y permiten la inducción rápida del modelo de pérdida auditiva5,14 ,15,16,17,18. El objetivo del protocolo y método actual es demostrar un modelo CHL simple y reproducible en roedores.
El protocolo actual es barato (USD$300 con todas las herramientas), y fácilmente modificable para diferentes actividades de investigación. La rata ha tenido evaluaciones detalladas de la anatomía del oído medio19,20,21,22,23, enfoques quirúrgicos24, modelos en otitis media25, 26,27 y TM regeneración de pinchazos16,17,18,28,29,30, por lo que es un modelo ideal para estudiar pérdida auditiva. Aquí, un procedimiento de inducción de CHL simple se describe con la verificación por otoscopio y evaluación del comportamiento con respuesta de sobregolpe de aplausos en rata, que luego se puede utilizar para explorar secuencias adicionales de pérdida auditiva. El procedimiento de CHL es inducido por punción quirúrgica de la TM. La verificación del procedimiento CHL se realiza mediante visualización de otoscopio para determinar la ausencia de la TM. La evaluación del comportamiento se realiza mediante un aplauso manual de alto nivel de presión sonora (SPL) de decibelios (dB). Este método se ha aplicado previamente en una variedad de roedores. Es fácil de replicar, produce fuertes diferencias psicométricas y cambios en las respuestas fisiológicas neuronales4,5,16,17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:612px;" width="610">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Latex, polyvinyl or nitrile gloves</td>
			<td style="width:95px;">AMMEX</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:172px;">Use unpowdered gloves 8-mil</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Micro spring scissors (see Fig. 1b)</td>
			<td style="width:95px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:123px;">S11035-08</td>
			<td>8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Otoscope mini 3000</td>
			<td style="width:95px;">HEINE&#160;</td>
			<td style="width:123px;">D-008.70.120M</td>
			<td>Standard LED otoscope will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rat or mouse</td>
			<td style="width:95px;">JAX labs</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Any small rodent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Small rodent cage</td>
			<td style="width:95px;">Tecniplast</td>
			<td style="width:123px;">1284L</td>
			<td>Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat

La hipoacusia conductiva (CHL) es una deficiencia auditiva prevalente en los seres humanos. El objetivo del protocolo es describir un procedimiento quirúrgico simple para inducir CHL en roedores. El protocolo demuestra CHL por punción de membrana timpánica. La verificación de la cirugía de CHL fue por examen de otoscopio y evaluación del comportamiento por respuesta de sobrescopio de aplausos, replicable y confiable, y son métodos simples para demostrar que se ha producido pérdida auditiva. El sencillo procedimiento de CHL es ventajoso debido a su reproducibilidad y flexibilidad para diferentes actividades en la investigación de pérdida auditiva. Las limitaciones de inducir CHL por un enfoque quirúrgico se asocian con la curva de aprendizaje para realizar el procedimiento quirúrgico y la confianza en el examen audiológico. Inducir una discapacidad auditiva por CHL permite estudiar fácilmente las manifestaciones neuronales y los resultados conductuales de la pérdida auditiva.

El sencillo procedimiento de CHL se realizó en 90 ratas y de este grupo 2 tuvo sangrado significativo y 2 no tuvieron pérdida de audición al día siguiente, según lo evaluado por el contragolpe de aplausos conductuales. Estas cuatro ratas fueron descartadas. Las ratas deben descartarse como se describe por las razones en la discusión debido a complicaciones. Inducir la punción y/o el desplazamiento/eliminación de la TM (Figura 2B) provoca CHL, lo que r...

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Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

Aquí, presentamos un protocolo para establecer una inducción de pérdida auditiva conductiva replicable a través de la punción quirúrgica de la membrana timpánica y la verificación por visualización del otoscopio y evaluación del comportamiento por golpe de aplauso.

Inducción quirúrgica simple de pérdida auditiva conductiva con verificación mediante la visualización del otoscopio y la respuesta de golpe de golpe conductual en Rata

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

El objetivo general de este estudio es establecer una inducción fiable de la pérdida auditiva a través de la punción quirúrgica de la membrana timpánica y la verificación por visualización del otoscopio y evaluación del comportamiento por el sobresalto del clap. El propósito de nuestra práctica es desarrollar un modelo para los trastornos conductores auditivos humanos. Demostramos en el procedimiento quirúrgico práctico de pérdida auditiva conductiva, que es una simplificación en la eliminación del malleus, el método para verificar la pérdida auditiva conductiva por visualización del otoscopio, y un simple sobreso de aplausos conductuales, que validan que se ha producido una pérdida auditiva conductiva.La principal ventaja del procedimiento que describimos son los procedimientos no invasivos, la verificación de la pérdida auditiva conductiva por otoscopio y la validación por inicio de aplausos. El presente estudio y los procedimientos fueron aprobados por el comité de ética de la investigación animal y la Universidad de la Ciudad de Hong Kong, la Universidad de Hong Kong y el Departamento de Salud de la Región Administrativa Especial de Hong Kong. Para el presente protocolo, elegimos ratas, pero usted puede elegir cualquier roedor.Pesar los animales para asegurar la anestesia adecuada para la inyección IP. Para la anestesia, es importante que los animales tengan la dosis adecuada. Recoge a tu rata junto al escrúpulo.Asegúrese de que la dosis correcta de ketamina y xilazina para la inyección ip, e inyección. Asegúrese de realizar un pellizco en los dedo del dedo del año para verificar que no haya sensación de dolor. Para la configuración quirúrgica consiste en su rata anestesiada, los microscisores y su otoscopio.Limpie minuciosamente el área quirúrgica con etanol. Coloque la cortina quirúrgica en el banco limpio. Posteriormente introduzca sus tijeras, otoscopio y rata.El tamaño de sus tijeras dependerá del tamaño de su roedor. Bajo otoscopio, visualice el oído izquierdo y derecho de la rata para asegurar una membrana timpánica saludable. Agarre la hélice y extienda el canal auditivo externo para oscurecer y ennegredarse.Aquí introducirá los microscisores. Introducir los microescisores en el centro del canal auditivo, prestando mucha atención a no cortar el tejido. Escuchar el sonido pop, a continuación, girar para asegurar el desplazamiento del malleus.La confirmación de una cirugía de pérdida auditiva conductiva exitosa, debe hacerse con un otoscopio. Evalúe cada oído de rata antes y después de la cirugía con un otoscopio con un espéculo de diámetro pequeño. Cuando se visualiza con un otoscopio, se deben estudiar las diferencias entre una membrana timpánica normal y una membrana timpánica perforada.Aquí, la membrana timpánica normal a la izquierda tiene la cabeza del malleus en su lugar y es drásticamente diferente de la membrana timpánica perforada a la derecha. La membrana timpánica perforada, después de la cirugía de pérdida auditiva conductiva, tiene el malleus desplazado y el pars tensa roto con el umbo del malleus y la cabeza completamente falta. Cuidado postoperatorio para roedores.Coloque el roedor en la jaula del hogar debajo de una lámpara caliente e inyecte con agentes antibacterianos y glucosa. Corroborar la pérdida auditiva conectiva con el sobresóltela del aplauso conductual. La rata CHL se coloca junto a una rata normal en dos jaulas adyacentes.Estos se colocan en una habitación silenciosa. Párese a medio metro de distancia y aplauda en duraciones igualmente espaciadas un número específico de veces. Aquí, elegimos cinco.Aquí, nuestros resultados de comportamiento representativos. Tenga en cuenta que la rata en la parte inferior no salta al sonido de aplausos fuertes. La rata en la parte superior de la pantalla se asusta por estos sonidos de aplausos fuertes.Por favor, estudie el antes y después de la diferencia de aplausos para estas dos ratas. No inducir la pérdida auditiva conductiva. Una falta de inducir la pérdida auditiva conductiva podría ser causada por sangrado en uno o ambos oídos.Y en este caso, el roedor debe ser eutanasiado. Esto indicaría que las tijeras no hicieron contacto con la membrana timpánica. Un sonido sin estallido durante el procedimiento.Un sonido sin estallido indicaría que el procedimiento de pérdida auditiva conductiva era pobre y no estaba limpio. Un sonido sin estallido significaría que sus microscisores no hicieron contacto directo con la membrana timpánica. Visualización del otoscopio.Si, al visualizar por otoscopio, la membrana timpánica parece normal, esto indicaría que no se ha producido ningún CHL. Una respuesta a la fuerte prueba de sonido de aplausos. Esto indicaría que no se ha producido chL y que el roedor no tiene pérdida auditiva conductiva.Esto ocurriría cuando una rata salta o es sorprendido por un fuerte sonido de aplauso. La principal ventaja del procedimiento que describimos son los procedimientos no invasivos, la verificación de la pérdida auditiva conductiva por otoscopio y la validación por inicio de aplausos. Después de hacer lo práctico, puede inducir la pérdida auditiva conductiva en un modelo de roedores y explorar las manifestaciones conductuales y psicofísicas de este trastorno auditivo.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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The acoustic startle response is a protective response, elicited by a sudden and intense acoustic stimulus. Facial and skeletal muscles are activated ...

Investigación

Neurociencias

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Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

La cuantificación de la actina filamentosa (F-actina) puntos lagrimales en las neuronas corticales de rata

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Cirugía de implante coclear y eléctricamente evocada médula oblonga auditivo respuesta grabaciones en ratones C57BL/6

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Evaluación de la inducción a largo plazo de la depresión en rodajas de cerebelosores adultos

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-range Channelrhodopsin-assisted Circuit Mapping of Inferior Colliculus Neurons with Blue and Red-shifted Channelrhodopsins

Asignación de circuito asistida por Channelrhodopsin de largo alcance de neuronas coliculus inferiores con Channelrhodopsins de cambio azul y rojo

When investigating neural circuits, a standard limitation of the in vitro patch clamp approach is that axons from multiple sources are often intermixed, ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Etiquetado balístico de las neuronas piramidales en las rebanadas cerebrales y en el cultivo celular primario

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

Un método de limpieza de tejido hidrófobo para el tejido cerebral de rata

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

Un modelo de rata de la infección cerebral EcoHIV

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...