Name: simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat at JoVE.com

Detta arbete stöddes delvis av Hong Kongs forskningsanslag rådet, tidiga karriärprogram, projekt #21201217 till C. L., för projektet Brain Mapping guidad elektrofysiologi med tillämpningar i hörsel och bullerforskning. Vi tackar Posgrado en Ciencias Biomédicas, Instituto de Neurobiología vid Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México för Graduate Fellowship 578458 till FAM Manno.

Den nuvarande studien och förfarandena godkändes av djur forskningsetiska kommittéer vid City University of Hong Kong, University of Hong Kong, och Department of Health i Hong Kongs särskilda administrativa region.
1. djur
<ol><li>Använd Sprague-Dawley (SD) råttor av två månader (N = 90, 200-250 g). Anmärkning: gnagare tillhandahölls av den ackrediterade laboratoriedjur enheten vid University of Hong Kong.</li>
	<li>Håll råttorna under en konstant temperatur på 25 ° c och 60...

<ol>
	<li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents.">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li><li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summary+health+statistics+for+U.S.+adults:+National+health+interview+survey,+2001.">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li><li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+hearing+screening+and+follow-up:+Aare+children+receiving+recommended+services?.">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?.</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li><li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex.">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li><li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception.">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li><li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil.">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li><li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+(Merionesunguiculatus).">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).</li><li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil.">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).</li><li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+Unguiculatis.">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li><li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral,+compound+action+potential,+and+single+unit+thresholds:+relationship+in+normal+and+abnormal+ears.">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li><li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+(Meriones+unguiculatus.">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li><li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression.">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , (2006).</li><li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audiograms+of+five+species+of+rodents:+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch.">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li><li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear.">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li><li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration.">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil.">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li><li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence.">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li><li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil.">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li><li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research.">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li><li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone.">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li><li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear.">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope.">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li><li>Albiin, N., Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane.">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li><li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats.">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li><li>Johansson, U., Hellstr&#246;m, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat.">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li><li>Magnuson, K., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media.">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li><li>Hellstr&#246;m, S., Sal&#233;n, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity.">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats.">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li><li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation:+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone.">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li><li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellstr&#246;m, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane:+collagen+types+I,+II,+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane,+during+healing+of+a+perforation,+and+during+infection.">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head &amp; Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li><li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood.">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).</li></ol>

Vi beskriver en enkel kirurgisk induktion av CHL med verifiering med otoskop visualisering och beteendemässiga klappa skrämsel respons i råtta. Här visar vi metoden på råtta och tidigare denna metod har tillämpats på gerbiler och möss. Metoden kan lätt antas till andra gnagare. Induktion av CHL tillåter studiet av en subtil form av hörselnedsättning som manifesteras i auditiva kortikala förändringar och psykofysiska beteendemässiga fynd4,5,</...

Förekomsten av hörselnedsättning hos barn och vuxna är cirka 19,5%1 respektive 15,2%2 . Emellertid, cirka 39,3% av alla nyfödda med en onormal hörsel screening får inte avhjälpande behandling som rapporterats av Centers for Disease Control3. Hörselnedsättning är ett allmänt studerat tillstånd, och gnagare är en robust modell för att studera normal hörsel och hörsel relaterade störningar4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Hörsel störningar såsom konduktiv hörselnedsättning (CHL) leder till en ökning av den kortsiktiga synaptiska depressionen i hörselbarken4, vilket resulterar i grundare psykometriska sluttningar i samband med frekvensmodulering detektions trösklar 5. konduktiv hörselnedsättning modeller av kirurgiskt avlägsnande/förskjutning av Malleus, tympanic membran (TM) punktering eller Öronpropp är lätt anställda och möjliggöra en snabb induktion av hörselnedsättning modell5,14 ,15,16,17,18. Målet med det nuvarande protokollet och metoden är att demonstrera en enkel och reproducerbar CHL-modell på gnagare.
Det nuvarande protokollet är billigt (≈ USD $300 med alla verktyg), och lätt kan ändras till olika forskningsaktiviteter. Råttan har haft detaljerade bedömningar av mellanörat anatomi19,20,21,22,23, kirurgiska metoder24, modeller i otitis media25, 26,27 och TM punkteringförnyelse 16,17,18,28,29,30, vilket gör det till en idealisk modell för att studera Hörselnedsättning. Här, en enkel CHL induktion förfarande beskrivs med verifiering av otoskop och beteendemässiga bedömning med klappa skrämsel respons i råtta, som sedan kan användas för att utforska ytterligare följdtillstånd av hörselnedsättning. CHL-proceduren induceras av kirurgisk punktering av TM. Verifiering av CHL förfarande utförs av otoskop visualisering för att avgöra frånvaro av TM. Beteendemässig bedömning utförs av en hög decibel (dB) Ljudtrycksnivå (SPL) hand-CLAP. Denna metod har tillämpats tidigare i en mängd gnagare. Det är lätt att replikera, producerar robusta psykometriska skillnader och förändringar i neurala fysiologiska svar4,5,16,17,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:612px;" width="610">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Latex, polyvinyl or nitrile gloves</td>
			<td style="width:95px;">AMMEX</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:172px;">Use unpowdered gloves 8-mil</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Micro spring scissors (see Fig. 1b)</td>
			<td style="width:95px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:123px;">S11035-08</td>
			<td>8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Otoscope mini 3000</td>
			<td style="width:95px;">HEINE&#160;</td>
			<td style="width:123px;">D-008.70.120M</td>
			<td>Standard LED otoscope will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rat or mouse</td>
			<td style="width:95px;">JAX labs</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Any small rodent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Small rodent cage</td>
			<td style="width:95px;">Tecniplast</td>
			<td style="width:123px;">1284L</td>
			<td>Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodent are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple surgical induction of conductive hearing loss with verification using otoscope visualization and behavioral clap startle response in rat

Konduktiv hörselnedsättning (CHL) är en utbredd hörselnedsättning hos människor. Målet med protokollet är att beskriva ett enkelt kirurgiskt ingrepp för att inducera CHL på gnagare. Protokollet visar CHL av tympanic membran punktering. Verifiering av CHL kirurgi var genom otoskop undersökning och beteendemässiga bedömning av klappa skrämma svar, både Replikerbar och pålitlig, och är enkla metoder för att demonstrera hörselnedsättning har inträffat. Den enkla CHL förfarande är fördelaktigt på grund av dess reproducerbarhet och flexibilitet till olika sysselsätt i hörselnedsättning forskning. Begränsningarna av inducerande CHL genom en kirurgisk metod är förknippade med inlärningskurvan att utföra kirurgiska ingrepp och förtroende för audiologiska undersökning. Inducera en hörselnedsättning av CHL tillåter en att lätt studera neurala manifestationer och beteendemässiga resultat av hörselnedsättning.

Den enkla CHL förfarande utfördes på 90 råttor och ut ur denna grupp 2 hade betydande blödning och 2 hade inte hörselnedsättning nästa dag som bedöms av beteendemässiga klappa startle. Dessa fyra råttor kastades bort. Råttor bör kasseras som beskrivs av orsakerna i diskussionen på grund av komplikationer. Inducera TM punktering och/eller Malleus förskjutning/avlägsnande (figur 2b) framkallar CHL, vilket resulterar i beteendemässiga manifestat...

Watch this Scientific Journal Video about Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat at JoVE.com

Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

Här presenterar vi ett protokoll för att etablera en replikerbar konduktiv hörselnedsättning induktion via kirurgiska tympanic membran punktering och verifiering av otoskop visualisering och beteendemässiga bedömning av klappa startle.

Enkel kirurgisk induktion av konduktiv hörselnedsättning med verifiering med otoscope visualisering och beteendemässiga CLAP skrämsel respons i råtta

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

Det övergripande målet med denna studie är att etablera en tillförlitlig hörselnedsättning induktion via kirurgiska tympanic membran punktering och verifiering av otoscope visualisering och beteendemässiga bedömning genom att klappa startle. Syftet med vårt praktiska är att utveckla en modell för mänskliga hörselledningsstörningar. Vi visar i den praktiska, den konduktiva hörselnedsättning kirurgiska ingrepp, som är en förenkling i malleus avlägsnande, metoden för att verifiera konduktiv hörselnedsättning genom otoscope visualisering, och en enkel beteendemässiga klappa startle, som validerar att konduktiv hörselnedsättning har inträffat.Den största fördelen med förfarandet vi beskrivit är icke-invasiva förfaranden, kontroll av konduktiv hörselnedsättning genom otoskop och validering genom att klappa startle. Den föreliggande studien och förfarandena godkändes av den etiska kommittén för djurforskning och City University of Hong Kong, University of Hong Kong och Hälsodepartementet i Hong Kongs särskilda administrativa region. För det föreliggande protokollet väljer vi råttor, men du kan välja vilken gnagare som helst.Väg djuren för att säkerställa korrekt anestesi för IP-injektion. För anestesi är det viktigt att djur har rätt dos. Plocka upp din råtta vid scruffen.Se till att din korrekta dos av ketamin och xylazin för IP-injektion, och injicera. Se till att utföra tå nypa för att kontrollera ingen smärta känsla. För kirurgiska setup består av din sövda råtta, mikroscissorerna, och din otoskop.Vänligen rengör noggrant operationsområdet med etanol. Placera operationsdrape på den rengjorda bänken. Därefter införa din sax, otoskop, och råtta.Storleken på din sax kommer att bero på storleken på din gnagare. Under otoskop, visualisera vänster och höger öra av råttan för att säkerställa en hälsosam tympaniskt membran. Ta tag i helix och utvidga den externa hörselgången för att bli skymd och svärtad.Här kommer du att introducera mikroscissirerna. Introducera mikroscissirerna till centrum av hörselgången, med stor uppmärksamhet inte för att nicka vävnaden. Lyssna efter popljudet, vrid sedan för att säkerställa förskjutning av malleus.Bekräftelsen av en framgångsrik konduktiv hörselnedsättning kirurgi, bör göras med ett otoskop. Utvärdera varje råtta öra före och efter operationen med ett otoskop med en liten diameter spekulum. När visualiseras med ett otoskop, bör skillnaderna mellan ett normalt tympaniskt membran och ett punkterat tympaniskt membran studeras.Här har det normala tympaniska membranet till vänster chefen för malleus på plats och är drastiskt annorlunda än det punkterade tympaniska membranet till höger. Den punkterade tympaniska membranet, efter den ledande hörselnedsättning kirurgi, har malleus fördrivna och pars tensa brusten med umbo av malleus och huvudet helt saknas. Postoperativ vård för gnagare.Placera gnagaren i hemburen under en varm lampa och injicera med antibakteriella medel och glukos. Bekräfta bindning hörselnedsättning med beteendemässiga klappa startle. CHL-råttan placeras bredvid en normal råtta i två angränsande burar.Dessa placeras i ett tyst rum. Stå en halv meter bort och klappa i lika fördelade löptider ett visst antal gånger. Här väljer vi fem.Här, våra representativa beteendemässiga resultat. Notera råttan längst ner inte hoppa till högt klappa ljud. Råttan högst upp på skärmen är skrämd av dessa höga klappande ljud.Vänligen studera före och efter klappa skillnaden för dessa två råttor. Underlåtenhet att framkalla konduktiv hörselnedsättning. En underlåtenhet att framkalla konduktiv hörselnedsättning kan orsakas av blödning i ena eller båda öronen.Och i det här fallet bör gnagaren avlivas. Detta skulle tyda på att saxen inte fick kontakt med det tympaniska membranet. En ingen poppar ljud under förfarandet.En no popping ljud skulle tyda på att den konstruktiva hörselnedsättning förfarandet var dålig och inte ren. En ingen popping ljud skulle innebära att din microscissors inte göra direkt kontakt med tympaniska membranet. Otoscope visualisering.Om, när visualisera genom otoskop, tympaniskt membranet visas normala, skulle detta indikera att ingen CHL har inträffat. Ett svar på det högljudda klappljudtestet. Detta skulle tyda på att ingen CHL har inträffat och gnagaren inte har konduktiv hörselnedsättning.Detta skulle inträffa när en råtta hoppar eller blir skrämd av ett högt klappa ljud. Den största fördelen med det förfarande vi beskrev, är icke-invasiva förfaranden, kontroll av konduktiv hörselnedsättning genom otoskop och validering genom att klappa startle. Efter att ha gjort det praktiska kan du inducera konduktiv hörselnedsättning i en gnagare modell och utforska beteendemässiga och psykofysiska manifestationer av denna hörselstörning.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Habituation and Prepulse Inhibition of Acoustic Startle in Rodents

Tillvänjning och Prepulse Hämning av Acoustic skrämma hos gnagare

The acoustic startle response is a protective response, elicited by a sudden and intense acoustic stimulus. Facial and skeletal muscles are activated ...

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

En enkel Behavioral analys för Testa Visual Function i<em&gt; Xenopus laevis</em

Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response ...

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

Lukt Nervceller erhållits genom Nasal Biopsi Kombinerad med Laser-Capture Microdissection: En Potentiell Approach att studera behandlingssvar hos psykiska störningar

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

Kvantifiering av fintrådiga aktin (F-aktin) puncta i Rat kortikala Neuroner

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Cochleaimplantat kirurgi och elektriskt frammanade auditiv hjärnstammen svar inspelningar i C57BL/6 möss

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Bedömning av långvarig depression induktion hos vuxna cerebellär skivor

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-range Channelrhodopsin-assisted Circuit Mapping of Inferior Colliculus Neurons with Blue and Red-shifted Channelrhodopsins

Långväga Channelrhodopsin-assisterad Krets Kartläggning av sämre colliculus nervceller med blå och röd-skiftade Channelrhodopsins

When investigating neural circuits, a standard limitation of the in vitro patch clamp approach is that axons from multiple sources are often intermixed, ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Ballistisk märkning av pyramidal neuroner i hjärnan skivor och i primär cell kultur

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...

A Hydrophobic Tissue Clearing Method for Rat Brain Tissue

En hydrofobisk vävnadsrensningsmetod för råtta hjärnvävnad

Hydrophobic tissue clearing methods are easily adjustable, fast, and low-cost procedures that allows for the study of a molecule of interest in unaltered ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

En råttmodell av EcoHIV hjärninfektion

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...