Name: a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits
Uploaded: 2018-10-06T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits at JoVE.com

我们感谢法国国立农业研究研究所 (INRA)、阿兰伯尼尔 (INRA) 和 Océane Evelyne (Bidel) 的技术援助。肯翠萝 Almazán 得到了来自实验室的研究, 来自于巴斯德研究所的新兴传染病 (LabEx IBEID) 的综合生物学。兔子和绵羊是由 ANSES 购买的。这项工作的一部分由国立卫生研究院资助 RO1AI090062 公园。杰弗里. 布莱尔博士因审阅手稿而被承认。

注: 在本研究中, 在法国老字号 Alfort 的法国食品、环境和职业健康 & 安全机构 (ANSES) 认可的动物设施中, 兔子被保存在标准笼子里, 食物和水都提供广告随意。两名经验丰富的技术人员每天对动物进行两次监测, 以应对任何异常的皮肤反应、健康问题或并发症。实验室通过用双面胶带在门的内部构筑, 以避免意外的蜱逃逸。如果两个人作为一个团队工作, 这种方法是最好的, 但有经验的人可以?...

<ol>
	<li>Sonenshine, D. E., Roe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks,+People+and+Animals.">Ticks, People and Animals.</a> Biology of Ticks, Vol I. , (2014).</li><li>Kr&#246;ber, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L'hostis, M., Chauvin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transstadial+and+transovarial+persistence+of+Babesia+divergens+DNA+in+Ixodes+ricinus.ticks+fed+on+infected+blood+in+a+new+skin-feeding+technique.">Transstadial and transovarial persistence of Babesia divergens DNA in Ixodes ricinus.ticks fed on infected blood in a new skin-feeding technique.</a> Parasitology. 134 (2), 197-207 (2007).</li><li>Bonnet, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+artificial+infection+of+hard+ticks:+A+tool+for+the+analysis+of+tick-borne+pathogen+transmission.">Laboratory artificial infection of hard ticks: A tool for the analysis of tick-borne pathogen transmission.</a> Acarologia. 52 (4), 453-464 (2012).</li><li>Khols, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tick+rearing+methods+with+special+reference+to+the+Rocky+Mountain+Wood+Tick,+Dermacentor+andersoni+Stiles.">Tick rearing methods with special reference to the Rocky Mountain Wood Tick, Dermacentor andersoni Stiles.</a> Culture methods for invertebrate animals. , (1937).</li><li>Faccini, J. L. H., Chacon, S. C., Labruna, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbits+(Oryctolagus+cuniculus)+as+experimental+hosts+for+Amblyomma+dubitatum+Neumann+(Acari:+Ixodidae)+[Coelhos+(Oryctolagus+cuniculus)+como+hospedeiros+experimentais+de+Amblyomma+dubitatum+Neumann+(Acari:+Ixodidae).">Rabbits (Oryctolagus cuniculus) as experimental hosts for Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae) [Coelhos (Oryctolagus cuniculus) como hospedeiros experimentais de Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae).</a> Arquivo Brasileiro de Medicina Veterin&#225;ria e Zootecnia. 58 (6), 1236-1239 (2006).</li><li>Chacon, S. C., Freitas, L. H. T., Barbieri, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+weight+and+number+of+engorged+Amblyomma+cooperi.+Nuttal+(sic)+and+Warburton,+1908+(Acari:+Ixodidae)+larvae+and+nymphs+and+eggs+from+experimental+infestations+on+domestic+rabbits.">Relationship between weight and number of engorged Amblyomma cooperi. Nuttal (sic) and Warburton, 1908 (Acari: Ixodidae) larvae and nymphs and eggs from experimental infestations on domestic rabbits.</a> Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 13, 6-12 (2004).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+ticks+in+the+laboratory.">Maintenance of ticks in the laboratory.</a> Maintenance of Human, Animal, and Plant Pathogen Vectors. , (1999).</li><li>Levin, M. L., Schumacher, L. B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+for+maintenance+of+multi-host+ixodid+ticks+in+the+laboratory.">Manual for maintenance of multi-host ixodid ticks in the laboratory.</a> Experimental and Applied Acarology. 70 (3), 343-367 (2016).</li><li>Bouchard, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Maintenance and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , (2005).</li><li>Jones, L. D., Davies, C. R., Steele, G. M., Nutall, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rearing+and+maintenance+of+ixodid+and+argasid+ticks+in+the+laboratory.">The rearing and maintenance of ixodid and argasid ticks in the laboratory.</a> Animal Technology. 39, 99-106 (1988).</li><li>Slov&#225;k, M., Labuda, M., Marley, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+laboratory+rearing+of+Dermacentor+reticulatus+ticks+(Acarina,+Ixodidae).">Mass laboratory rearing of Dermacentor reticulatus ticks (Acarina, Ixodidae).</a> Biologia, Bratislava. 57 (2), 261-266 (2002).</li><li>Rechav, Y., Dauth, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+resistance+in+rabbits+to+immature+stages+of+the+Ixodid+tick+Rhipicephalus+appendiculatus.">Development of resistance in rabbits to immature stages of the Ixodid tick Rhipicephalus appendiculatus.</a> Medical and Veterinary Entomology. 1, 177-183 (1987).</li><li>Zacarias do Amaral, M. A., Azevedo Prata, M. C., Daemon, E., Furlong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+parameters+of+cattle+ticks+fed+on+rabbits.">Biological parameters of cattle ticks fed on rabbits.</a> Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 21 (1), 22-27 (2012).</li></ol>

这整个协议中最重要的一步是将胶囊牢固地粘在剃光的皮肤上。因此, 恒定的压力至少3分钟是关键的, 特别是在角落。当接种的蜱进入胶囊, 这是重要的是要把它们深入到对面的角落, 从开放的, 以避免蜱逃逸期间的密封。在计划实验时, 确保所有的胶囊都被夹克覆盖, 以避免咀嚼或刮伤。确保夹克的颈部区域足够紧, 以防止咀嚼, 但足够松, 使兔子保持舒适。
所描述的技术的主?...

硬蜱 (硬蜱科) 是众所周知的缓慢喂养节肢动物, 可以附加在主机上数天, 或几周, 取决于物种和发育阶段1。这些强制性的 hematophagous 节肢动物是多种传染性药物的载体, 如细菌、原生动物和病毒, 从而对人类和动物健康造成重大风险1。在研究蜱生物或评估新的控制方法时, 建立有效的蜱进给系统是至关重要的, 以便有效地设计实验并完成研究的目标。最近, 一些人工蜱喂养系统 (避免使用活的动物) 已经开发了2,3,4 , 他们应该尽可能使用。然而, 这些系统无法完全取代活体动物的蜱喂养, 而且它们不适合用于科学研究所需的许多生理条件。因此, 在某些情况下, 实验动物宿主的使用对于保证实验结果的相关性至关重要。
新西兰兔的实验室已证明是最适合和可访问的主机为几个 ixodid 蜱物种5,6,7,8,9。常用的两种方法是对家兔进行蜱喂养: a) 用棉布或袜子覆盖的兔耳喂养6、7和 b) 在棉袋中喂养9, 尼龙瓶10或氯丁橡胶11室粘在兔子的背上。喂养兔子的耳朵不是一个优雅的系统, 因为蜱 (特别是早期阶段, 幼虫或若虫) 可能爬行和附着在耳道深, 这是不舒服的动物, 使监测蜱喂养和/或恢复肿胀蜱很难。这个系统也仅限于两个刻度组的耳朵完全覆盖的袜子保护的伊丽莎白的衣领, 代表了一个很大的不适的动物。其他系统9,10,11肯定更先进, 非常适合于硬蜱殖民地维护。然而, 它们的数量有限的实验组放置在兔子, 以及在可修改的大小/形状的喂养室。此外, 这些协议往往需要蹒跚的后兔腿, 以避免擦伤和使用伊丽莎白的衣领, 以防止梳理。
在此, 我们提出了一个简单的, 非费力的和非常有效的方法, 以满足多组的硬蜱在封闭室粘着的兔子背部覆盖的夹克, 消除了对伊丽莎白时代的衣领或在实验中步履蹒跚的需要。具体来说, 我们的系统使用的弹性胶囊由乙烯-醋酸乙烯酯 (EVA) 泡沫板覆盖的蚊帐和粘附到剃光兔背部与快速固化 (3 分钟) 无刺激性乳胶胶水。这种技术允许附着多个理想大小或形状的胶囊, 并在实验后的几周内完全恢复家兔。该系统主要适用于若虫和成人硬蜱阶段, 但对幼虫喂养也有少许修改。以 EVA 泡沫为基础的硬蜱喂养方法可以适应其他类型的脊椎动物宿主, 例如绵羊 (这是本文所示的替代品之一)。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1157px;" width="1158">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg)</td>
			<td style="width:197px;">Charles River&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Strain Code 571</td>
			<td style="width:267px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Rambouillet sheep</td>
			<td style="width:197px;">Local provider-tick free farm</td>
			<td>Female 6 months old</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">EVA foam 5 mm thick&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Cosplay Shop</td>
			<td style="width:399px;">EVA-PE451kg (950mm x 450mm)</td>
			<td>10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Foam Sheet 9&#34; X 12&#34; 6 mm-White</td>
			<td style="width:197px;">Amazon</td>
			<td style="width:399px;">FOAMSHT6-20</td>
			<td>6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Full length rabbit jackets&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Harvard Apparatus, Inc.&#160;</td>
			<td style="width:399px;">620077- medium, 6270078 - large&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Non-toxic latex glue&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Tear mender&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Fabric &#38; Leather Adhesive</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Tubular cotton orthopedic stockinette</td>
			<td style="width:197px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:399px;">9076 (12-15 cm wide)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Mosquito mesh&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Loisirs Creatifs</td>
			<td style="width:399px;">Very fine filter nylon mesh fabric</td>
			<td>Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Leukoplast&#160;</td>
			<td style="width:197px;">BSN medical S.A.S</td>
			<td style="width:399px;">LF 72361-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:295px;">Adhesive hook-and-loop tape</td>
			<td style="width:197px;">AIEX store</td>
			<td style="width:399px;">AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour</td>
			<td>Fullfiled by Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fast drying glue &#160;</td>
			<td>Fixtout&#160;</td>
			<td>Superglue</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits

在蜱的研究中使用活的动物对于各种实验目的, 包括在实验室中维持硬蜱菌落是至关重要的。在蜱, 所有发育阶段 (除了鸡蛋) 是 hematophagous, 并获得一个血餐时, 附着在他们的脊椎动物寄主是必不可少的, 成功地完成他们的生命周期。在这里, 我们演示了一个简单的方法, 使用方便可开启式胶囊喂养的硬蜱在兔子。所提出方法的优点包括简单性、工期短和对特定实验要求的需要进行最重要的多功能调整。该方法使在同一动物上使用多个腔 (各种大小) 成为可能, 允许多阶段或不同实验组喂养, 同时减少整体动物需求。使用的非刺激性和容易接近的材料减少了对动物的不适, 这可以很容易地从实验中恢复, 并提供通过或重用, 如果伦理协议允许它。

在这里, 我们第一次提出了一个详细的分步方法的硬蜱喂养的 EVA 泡沫胶囊适用于剃光兔的背部, 覆盖在夹克 (图 1和 图 2)。该协议适用于各种类型的实验, 当同一主机上的不同刻度组是必需的, 也可以用于大规模饲养的硬蜱。蜱喂养成功在实验室里主要依赖于蜱个体的适用性和兔子宿主对特定蜱种的适用性, 而不是?...

Watch this Scientific Journal Video about A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits at JoVE.com

A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits

我们开发了一个简单和多功能的系统, 以满足实验兔的硬蜱。我们的非费力协议使用容易接近的材料并且可以根据不同的实验设置的要求调整。该方法允许舒适的监测和/或取样的蜱在整个喂养期间。

实验家兔硬蜱的多用途模型

The use of live animals in tick research is crucial for a variety of experimental purposes including the maintenance of hard tick colonies in the ...

该方法适用于维护硬菌落、研究虱子生物学或宿主-载体病原体相互作用或评估这些医学上重要属性的不同控制措施。这些技术的主要优点是简单和持续时间短。最重要的是能力被修改，根据实验的需要的研究。虽然这种方法可用于喂养实验室兔子上硬虱子的不同生命阶段。它也可以适应其他宿主系统，如绵羊。首先，从一块 EVA 泡沫中切割一个大小适当的胶囊框架，将外角四舍五入，以最大限度地减少粘合过程中意外分离。切割四条八毫米宽的自粘钩胶带，将条贴在框架的两侧。从自粘循环胶带上切割相同尺寸的条带，并将其绑定到框架上的钩胶带上。接下来，切割一块足够大的松木蚊网，以覆盖框架，将网状网粘在自粘环条上，必要时修剪任何悬垂材料。当胶囊准备就绪时，手动约束兔子，剃掉动物背部和侧面的实验区域。将快速干燥的非刺激性乳胶涂抹到准备胶囊的整个表面，一分钟后，轻轻将胶囊压到皮肤上。协议最关键的步骤是胶囊与皮肤的场连接。因此，胶囊对兔子皮肤的恒定压力，特别是在角落至少三分钟是必需的。三分钟后，稍微抬起胶囊，用铲子将胶水涂抹在任何未连接的零件上，以直观地确认其附件。当胶囊固定时，在后爪上涂抹保护胶带以防止护套损坏，并通过前护套开口将护套的颈部拧紧到动物和夹克之间的一个手指宽度的前腿。要启动滴答声侵扰，首先将滴答声添加到塑料棉塞的柱塞端，并带一个切口尖端的注射器。接下来，从胶囊的一角抬起网眼，通过开口将注射器深入胶囊。将柱塞一直插入注射器，使动物感染滴答声。然后缓慢地将柱塞向皮肤倾斜，以去除任何剩余的滴答声，同时将柱塞拉出胶囊。当所有刻度已送达时，重新发挂挂钩和循环磁带。通过拉链其背面关闭夹克，并将兔子的后腿插入后弹性外壳。然后把兔子还到笼子里。在适当的实验时间点，将兔子转移到长凳上，解压缩夹克。轻轻约束兔子，打开胶囊，用钳子收集完全充满的成年人和滴答声扭曲收集部分喂养的成年人。通过将幼虫和仙女刷入菜中，可以收集它们。然后重新关闭胶囊，如果实验适当。在实验结束时，在不取下夹克的情况下，将蚊网从胶囊中完全取出。三到四周后，轻轻修剪一个角，试图取出胶囊。取出胶囊后，取下夹克，让兔子在笼子里恢复。如果协议和实验允许，回收的兔子可以重复使用或提供收养。该协议适用于各种类型的实验，包括在同一主机上大量饲养多个滴答组。EVA泡沫胶囊系统已被证明在喂养不同硬滴答剂物种的不同发育阶段时非常成功。它也可以适用于其他类型的实验室宿主，如绵羊。此外，这种通用方法有助于根据宿主胶囊的可修改数量、形状和组成创建各种不同的实验设置。该过程还允许在实验后完全恢复兔子宿主。此协议并不费力，无需强化培训才能熟悉该技术。此外，需要少量的材料、步骤和实验动物的压力。

Research

JoVE Journal

Biology

Laser-Induced Chronic Ocular Hypertension Model on SD Rats

激光诱导SD大鼠慢性高眼压高压模型

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular ...

科研

生物学

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

游离成年哺乳动物元DNA的细胞核内内微量注射

Primary neuronal cell cultures are valuable tools to study protein function since they represent a more biologically relevant system compared to ...

Genetic Studies of Human DNA Repair Proteins Using Yeast as a Model System 

人类DNA修复蛋白的遗传研究利用酵母作为模型系统

Understanding the roles of human DNA repair proteins in genetic pathways is a formidable challenge to many researchers.  Genetic studies in mammalian ...

Measurement and Analysis of Extracellular Acid Production to Determine Glycolytic Rate

测量外产酸和分析，以确定糖酵解率

Extracellular measurement of oxygen consumption and acid production is a simple and powerful way to monitor rates of respiration and glycolysis1. Both ...

Techniques to Induce and Quantify Cellular Senescence

技术诱导和量化细胞衰老

In response to cellular stress or damage, proliferating cells can induce a specific program that initiates a state of long-term cell-cycle arrest, termed ...

Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter

用聚丙烯导管引导家兔气管插管

Endotracheal intubation in rabbits can be challenging due to their unusual anatomy. Achieving a patent airway during anesthesia is critical for the ...

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

一种用于阴南芥叶片安装的通用方法

The plant immune response associated with a genome-wide transcriptional reprogramming is initiated at the site of infection. Thus, the immune response is ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

质谱分析，用于识别 EYFP 标记 CENP-A （EYFP-CENP-A） 的泛化

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

A Capsule-Based Model for Immature Hard Tick Stages Infestation on Laboratory Mice

基于胶囊的模型，用于在实验鼠身上的不成熟硬滴答阶段侵扰

Ticks are obligatory blood feeding parasites at all stages of development (except eggs) and are recognized as vectors of various pathogens. The use of ...

Maintaining Laboratory Cultures of Gryllus bimaculatus, a Versatile Orthopteran Model for Insect Agriculture and Invertebrate Physiology

Maintaining Laboratory Cultures of Gryllus bimaculatus, a Versatile Orthopteran Model for Insect Agriculture and Invertebrate Physiology

维持 双斑蝽螈的实验室培养物，这是一种用于昆虫农业和无脊椎动物生理学的多功能正翅目动物模型

Gryllus bimaculatus (De Geer)&#160;is a large-bodied cricket distributed throughout Africa and Southern Eurasia where it is often wild-harvested as human ...