Name: a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits
Uploaded: 2018-10-06T15:00:00
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Wir anerkennen die technische Unterstützung von Evelyne Le Naour, Französisch nationalen Institut für landwirtschaftliche Forschung (INRA), Alain Bernier (INRA) und Océane Le Bidel (ANSES). Consuelo Almazán wurde durch ein Stipendium aus dem Labor of Excellence, Integrative Biology of Emerging Infectious Diseases (LabEx IBEID), Pasteur-Institut unterstützt. Die Hasen und Schafe wurden von ANSES gekauft. Teil dieser Arbeit wurde von der National Institutes of Health Grant RO1AI090062, Y. Park finanziert. Dr. Jeffrey L. Blair ist anerkannt für die Überprüfung der Handschrift.

Hinweis: In dieser Studie Kaninchen waren gepflegt in standardkäfige mit Lebensmitteln und Wasser angeboten Ad Libitum an die französische Agentur für Food, Umwelt- und Arbeitsschutz & Sicherheit (ANSES) akkreditiert Tierhaltungen in Maisons-Alfort, Frankreich. Tiere wurden zweimal täglich durch zwei erfahrene Techniker für abnorme Hautreaktionen, gesundheitliche Probleme oder Komplikationen beobachtet. Die Versuchsraum wurde gesichert durch die Gestaltung des Innenraum des Einganges mit doppelseitigem Kleb...

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	<li>Sonenshine, D. E., Roe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks,+People+and+Animals.">Ticks, People and Animals.</a> Biology of Ticks, Vol I. , (2014).</li><li>Kr&#246;ber, T., Guerin, P. 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Der wichtigste Schritt in diesem gesamten Protokoll soll die Kapsel fest auf die rasierte Haut kleben. Aus diesem Grund ist konstanter Druck für mindestens 3 Minuten kritisch, besonders an den Ecken. Wenn die Zecken in die Kapsel zu impfen, ist es wichtig, diese anzuwenden tief in die gegenüberliegende Ecke vom offenen zum Zecke während der Versiegelung zu vermeiden. Bei der Planung der Experimente ist darauf zu achten, dass die Jacke um Schäden zu vermeiden, Kauen oder kratzen die Kapseln abgedeckt sind. Stellen Sie...

Die harten Zecken (Ixodidae) sind bekannt als langsame Fütterung Arthropoden und aufsetzbar auf einem Host für mehrere Tage oder Wochen, je nach Tierart und Entwicklungs-Stufe1. Diese obligatorische Hematophagous Arthropoden sind Vektoren einer Vielzahl pathogener Erreger, wie Bakterien, Protozoen und Viren, und so stellen eine erhebliche Gefahr für Mensch und Tier1. Wenn Tick Biologie studieren oder Bewertung neuer Methoden, die Einrichtung eines effektiven Häckchens Fütterungssystem ist entscheidend, um effektiv die Experimente zu entwerfen und erreichen die Ziel(e) der Studie. Vor kurzem mehrere künstliche Tick Fütterungssysteme (Vermeidung des Einsatzes von lebenden Tieren) wurden entwickelt,2,3,4 und sollten wann immer möglich verwendet werden. Jedoch diese Systeme konnten nicht vollständig Zecken ernähren sich von lebenden Tieren zu ersetzen, und sie sind kein geeigneter Ersatz für viele physiologische Voraussetzungen für wissenschaftliche Studien. Daher in einigen Fällen ist der Einsatz von experimentellen Tiere beherbergt entscheidend für die Relevanz der experimentellen Ergebnisse garantieren.
Labor-Neuseeland-Kaninchen haben gezeigt, die am besten geeignete und zugänglich Gastgeber für mehrere Ixodid Häckchen Arten5,6,7,8,9. Zwei gemeinsame Strategien der Zecken ernähren sich von Kaninchen wurden häufig verwendet: (a) ernähren sich von Hasenohren bedeckt mit Baumwolle Tuch oder Socken6,7, und (b) Fütterung in Baumwolle Taschen9, Nylon-Flaschen10 oder Neopren Kammern11 an das Kaninchen Rücken geklebt. Die Fütterung auf die Hasenohren ist kein elegantes System, weil Zecken (vor allem Frühphase, Larven oder Nymphen) können kriechen und befestigen Sie tief in den Gehörgang, das ist unangenehm für das Tier und macht die Überwachung der Zecke Fütterung und/oder die Erholung der gestaut Zecken schwierig. Dieses System ist auch beschränkt sich auf nur zwei Tick Fachgruppen auf Ohren von Socken geschützt durch elisabethanischen Halsbänder, vollständig abgedeckt, die eine erhebliche Unannehmlichkeit für das Tier. Andere Systeme9,10,11 sind auf jeden Fall weiter fortgeschritten und gut geeignet für harte Tick Kolonie Wartung. Jedoch sind sie in der Anzahl der experimentellen Gruppen platziert auf das Kaninchen sowie in die veränderbaren Größen/Formen der Fütterungen Kammern eingeschränkt. Darüber hinaus müssen diese Protokolle oft humpelnd die hinteren Kaninchen Beine zur Vermeidung von kratzen und die Verwendung des elisabethanischen Halsbänder Pflege zu verhindern.
Hierin bieten wir eine einfache, nicht mühsam und sehr effektive Methode um mehrere Gruppen von harten Zecken in geschlossenen Kammern geklebt, um das Kaninchen wieder fallenden eine Jacke zu ernähren, überflüssig elisabethanischen Halsbänder oder humpelnd während des Experiments. Unser System verwendet insbesondere elastische Kapseln aus ein Ethylen-Vinyl-Acetat (EVA)-Schaumfolie von Moskito Netz abgedeckt und an das rasierten Kaninchen wieder mit schnellen erstarren (3 min) nicht reizend Latex Kleber geklebt. Diese Technik ermöglicht die Befestigung von mehreren Kapseln der gewünschten Größe oder Form, und nur wenige Wochen nach dem Experiment die Kaninchen sind vollständig erholt. Das System eignet sich vor allem für die nymphal und Erwachsenen schwer Tick-Phasen, aber mit einer kleinen Änderung kann es für Larven sowie Fütterung verwendet werden. Die EVA Schaumstoff-basierte Methoden für harte Tick Fütterung können auf andere Arten von Wirbeltieren Gastgeber, zum Beispiel Schafe angepasst werden (die als eine der Alternativen in diesem Papier gezeigt wird).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1157px;" width="1158">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg)</td>
			<td style="width:197px;">Charles River&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Strain Code 571</td>
			<td style="width:267px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Rambouillet sheep</td>
			<td style="width:197px;">Local provider-tick free farm</td>
			<td>Female 6 months old</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">EVA foam 5 mm thick&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Cosplay Shop</td>
			<td style="width:399px;">EVA-PE451kg (950mm x 450mm)</td>
			<td>10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Foam Sheet 9&#34; X 12&#34; 6 mm-White</td>
			<td style="width:197px;">Amazon</td>
			<td style="width:399px;">FOAMSHT6-20</td>
			<td>6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Full length rabbit jackets&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Harvard Apparatus, Inc.&#160;</td>
			<td style="width:399px;">620077- medium, 6270078 - large&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Non-toxic latex glue&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Tear mender&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Fabric &#38; Leather Adhesive</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Tubular cotton orthopedic stockinette</td>
			<td style="width:197px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:399px;">9076 (12-15 cm wide)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Mosquito mesh&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Loisirs Creatifs</td>
			<td style="width:399px;">Very fine filter nylon mesh fabric</td>
			<td>Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Leukoplast&#160;</td>
			<td style="width:197px;">BSN medical S.A.S</td>
			<td style="width:399px;">LF 72361-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:295px;">Adhesive hook-and-loop tape</td>
			<td style="width:197px;">AIEX store</td>
			<td style="width:399px;">AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour</td>
			<td>Fullfiled by Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fast drying glue &#160;</td>
			<td>Fixtout&#160;</td>
			<td>Superglue</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits

Der Einsatz von lebenden Tieren in der Zecke Forschung ist entscheidend für eine Vielzahl von experimentellen Zwecken, einschließlich der Wartung der harten Tick Kolonien im Labor. In Zecken alle Entwicklungsstadien (außer Ei) sind Hematophagous und erwerben eine Blutmahlzeit, wenn ihre Wirbeltier Wirte zugeordnet ist unerlässlich für den erfolgreichen Abschluss ihres Lebenszyklus. Hier zeigen wir Ihnen eine einfache Methode, die leicht öffenbare Kapseln verwendet für die Fütterung von harten Zecken auf Kaninchen. Die Vorteile der vorgeschlagenen Methode sind seine Einfachheit, kurzer Dauer und vor allem vielseitige Anpassung an die Bedürfnisse der spezifischen experimentellen Anforderungen. Die Methode ermöglicht die Verwendung von mehreren Industrie-und Handelskammern (verschiedene Größen) auf das gleiche Tier, das Fütterung mehrerer Phasen oder verschiedenen Versuchsgruppen senken die insgesamt tierische Anforderung erlaubt. Nicht reizend und leicht zugänglichen Materialien minimiert Beschwerden an die Tiere, die leicht erholt von einem Experiment und angeboten für Annahme oder wiederverwendet werden können wenn das ethische Protokoll erlaubt.

Hier schlagen wir zum ersten Mal eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Methode der harten Tick Fütterung aus EVA-Schaum Kapseln angewendet um eine rasierte Kaninchen Rücken, abgedeckt durch eine Jacke (Abbildung 1 und Abbildung 2). Dieses Protokoll eignet sich für verschiedene Arten von Experimenten, wenn unterschiedliche Tick Gruppen auf demselben Host erforderlich sind und können auch für massenhafte Auf...

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A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits

Wir haben eine einfache und vielseitige System um harten Zecken ernähren sich von Labor Kaninchen entwickelt. Unsere nicht mühsam Protokoll leicht zugängliche Materialien verwendet und kann je nach den Anforderungen der verschiedenen experimentellen Einstellungen angepasst werden. Die Methode ermöglicht die komfortable Überwachung bzw. Stichprobe von Zecken während der gesamten Dauer der Fütterung.

Ein vielseitiges Modell schwer Tick Befall an Kaninchen, Labor

The use of live animals in tick research is crucial for a variety of experimental purposes including the maintenance of hard tick colonies in the ...

Diese Methode eignet sich zur Aufrechterhaltung harter Kolonien, zum Studium der Zeckenbiologie oder der Wirtsvektorpathogen-Wechselwirkungen oder zur Bewertung verschiedener Kontrollmaßnahmen dieser medizinisch wichtigen Attribute. Die Hauptvorteile dieser Techniken sind seine Einfachheit und kurze Dauer. und vor allem die Fähigkeit, entsprechend den experimentellen Bedürfnissen der Studie verändert zu werden.Obwohl diese Methode für die Fütterung der verschiedenen Lebensstadien von harten Zecken auf Laborkaninchen verwendet werden kann. Es kann auch an andere Aufnahmesysteme wie Schafe angepasst werden. Beginnen Sie, indem Sie einen entsprechend großen Kapselrahmen aus einem Blatt EVA-Schaum schneiden, das die äußeren Ecken umrundet, um die versehentliche Ablösung beim Kleben zu minimieren.Schneiden Sie vier acht Millimeter breite Streifen selbstklebendes Hakenband und befestigen Sie die Streifen an den Seiten des Rahmens. Schneiden Sie die gleichen Größenstreifen aus dem selbstklebenden Schleifenband und binden Sie sie an das Hakenband am Rahmen. Als nächstes schneiden Sie ein Stück Kiefernmoskitome Mesh groß genug, um den Rahmen zu bedecken und kleben Sie das Netz auf die selbstklebenden Schleifenstreifen, schneiden Sie jedes überhängende Material nach Bedarf.Wenn die Kapsel fertig ist, halten Sie das Kaninchen manuell zurück und rasieren Sie die Versuchsbereiche auf dem Rücken und den Seiten des Tieres. Schnell trocknenden, nicht reizenden Latexkleber auf die gesamte Oberfläche der vorbereiteten Kapsel auftragen und nach einer Minute die Kapsel sanft auf die Haut gedrückt haben. Der wichtigste Schritt des Protokolls ist die Feldbefestigung der Kapsel an der Haut.Daher ist ein konstanter Druck der Kapsel auf die Kaninchenhaut vor allem an den Ecken für mindestens drei Minuten erforderlich. Heben Sie die Kapsel nach drei Minuten leicht an, um ihre Befestigung mit einem Spachtel zu bestätigen, um Kleber auf nicht angebrachte Teile aufzutragen. Wenn die Kapsel gesichert ist, tragen Sie Schutzband auf die hinteren Pfoten auf, um Einen Jackenschaden zu vermeiden, und legen Sie die Vorderbeine durch die vorderen Jackenöffnungen, die den Hals der Jacke auf eine Fingerbreite zwischen dem Tier und der Jacke anziehen.Um den Zeckenbefall zu initiieren, fügen Sie zuerst die Zecken in das Kolbenende eines Plastik-Baumwollsteckers zur Spritze mit einer Abgeschnittenentip hinzu. Heben Sie anschließend das Netz aus einer Ecke der Kapsel an und legen Sie die Spritze durch die Öffnung tief in die Kapsel. Legen Sie den Kolben den ganzen Weg in die Spritze, um das Tier mit den Zecken zu befallen.Dann drehen Sie langsam den Kolben in Richtung der Haut, um alle verbleibenden Zecken zu entfernen, während gleichzeitig ziehen Sie den Kolben aus der Kapsel. Wenn alle Ticks geliefert wurden, befestigen Sie den Haken und das Schleifenband neu. Schließen Sie die Jacke, indem Sie die Rückseite davon zippen und die Hinterbeine des Kaninchens in die hinteren elastischen Gehäuse einstecken.Dann kehren Sie das Kaninchen in seinen Käfig zurück. Zum entsprechenden Versuchszeitpunkt das Kaninchen auf die Bank geben und die Jacke entpacken. Halten Sie das Kaninchen vorsichtig zurück, öffnen Sie die Kapsel und verwenden Sie Zangen, um die voll verstrickten Erwachsenen und einen Zeckendreher zu sammeln, um die teilweise gefütterten Erwachsenen zu sammeln.Engorged Larven und Nymphen können gesammelt werden, indem sie in die Schale gebürstet werden. Schließen Sie dann die Kapsel wieder, wenn es experimentell angemessen ist. Entfernen Sie am Ende des Experiments das Moskitonetz vollständig aus der Kapsel, ohne die Jacke zu entfernen.Drei bis vier Wochen später, vorsichtig schneiden Sie eine der Ecken, um zu versuchen, die Kapsel zu entfernen. Sobald die Kapsel entfernt wurde, entfernen Sie die Jacke und lassen Sie das Kaninchen in seinem Käfig erholen. Wenn das Protokoll und die Experimente es zulassen, kann das zurückgewonnene Kaninchen wiederverwendet oder zur Adoption angeboten werden.Dieses Protokoll eignet sich für verschiedene Arten von Experimenten, einschließlich Der Massenaufzucht mehrerer Zeckengruppen auf demselben Host. Das EVA Foam Kapselsystem hat sich bei der Fütterung verschiedener Entwicklungsstadien verschiedener Hartzeckenarten als sehr erfolgreich erwiesen. Es kann auch für andere Arten von Laborwirten wie Schafe angepasst werden.Darüber hinaus ermöglicht diese vielseitige Methode die Erstellung einer Vielzahl von verschiedenen experimentellen Einstellungen basierend auf der veränderbaren Anzahl, Form und Zusammensetzung der Kapseln auf dem Host. Das Verfahren ermöglicht auch eine vollständige Genesung der Kaninchenwirte nach den Experimenten. Dieses Protokoll ist nicht mühsam und es ist kein intensives Training erforderlich, um sich mit der Technik vertraut zu machen.Darüber hinaus ist eine minimale Menge an Materialien, Schritten und Stress für die Versuchstiere erforderlich.

Research

JoVE Journal

Biology

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Forschung

Biologie

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