Name: a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits
Uploaded: 2018-10-06T15:00:00
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我々 は、イブリン ル Naour、研究所フランス国立農業研究 (INRA)、アラン ・ ベルニエ (INRA) ホテル ル Bidel (ANSES) ・の技術的な支援を認めます。コンスエロ ・ Almazán は、卓越性、統合的な生物学の新興感染症 (LabEx IBEID)、パスツール研究所の研究室から奨学金によって支えられました。ウサギと羊が ANSES によって購入されました。この仕事の一部健康グラント RO1AI090062 Y の公園に国立衛生研究所によって資金を供給されました。博士ジェフリー ・ l ・ ブレアは、原稿のレビューに認められています。

注: この研究では、食物と一緒に標準ケージの中で維持されたウサギと水提供食品、環境・衛生・安全 (ANSES) 認定動物施設カルカソンヌ、フランスでのフランス語代理店の自由。動物が異常な皮膚反応や健康上の問題の合併症のための 2 つの経験豊富な技術者が 2 回毎日。実験室は、タイマー刻みの偶発的なエスケープを避けるために両面テープで戸口のインテリアをフレーミングに?...

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	<li>Sonenshine, D. E., Roe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks,+People+and+Animals.">Ticks, People and Animals.</a> Biology of Ticks, Vol I. , (2014).</li><li>Kr&#246;ber, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L'hostis, M., Chauvin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transstadial+and+transovarial+persistence+of+Babesia+divergens+DNA+in+Ixodes+ricinus.ticks+fed+on+infected+blood+in+a+new+skin-feeding+technique.">Transstadial and transovarial persistence of Babesia divergens DNA in Ixodes ricinus.ticks fed on infected blood in a new skin-feeding technique.</a> Parasitology. 134 (2), 197-207 (2007).</li><li>Bonnet, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+artificial+infection+of+hard+ticks:+A+tool+for+the+analysis+of+tick-borne+pathogen+transmission.">Laboratory artificial infection of hard ticks: A tool for the analysis of tick-borne pathogen transmission.</a> Acarologia. 52 (4), 453-464 (2012).</li><li>Khols, G. 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C., Daemon, E., Furlong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+parameters+of+cattle+ticks+fed+on+rabbits.">Biological parameters of cattle ticks fed on rabbits.</a> Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 21 (1), 22-27 (2012).</li></ol>

このプロトコルの全体の最も重要なステップは、剃毛肌にしっかりとカプセルを接着することです。このため、少なくとも 3 分間一定の圧力は、コーナーで特に重要です。それはそれらを適用する重要なカプセルにダニを接種シールの中にカチカチのエスケープを避けるためにオープンされているものから反対側の隅に深く。実験を計画するときは、すべてのカプセルが咀嚼や傷によって損?...

ハード タイマー刻み (された) 低速送り節足動物としてよく知られているし、数日間ホストに付けることができるまたは週間、種に応じて、発達段階1。これらの義務の吸血性節足動物はさまざまな細菌、原虫、ウイルスなどの病原菌の媒介し、このように人間と動物の健康1に重大なリスクを提示します。ときダニの生物学を勉強したり、新しい制御法の評価、飼養管理方式の効果的な目盛りの確立は効果的に実験を設計し、研究の目的を達成するために重要。最近、(生きている動物の使用を避ける) いくつかの人工チック給餌システムの開発2,3,4をされている、可能な限り使用されるべきであります。しかし、これらのシステムは、ティック、生きている動物の給餌を完全に置き換えることができるしていない、彼らは科学的な研究に必要な多くの生理学的な条件のための適切な代替ではありません。したがって、いくつかのケースで実験動物のホストの使用は、実験結果の妥当性を保証することが重要です。
研究所ニュージーランドのウサギは、いくつかマダニ マダニ種5,6,7,8,9の最も適切なアクセス可能なホストに示されています。ウサギの餌目盛りの 2 つの一般的な戦略が頻繁に使用されている: a) コットン布や靴下6、7で覆われているウサギの耳に餌と b) 綿袋9、ナイロン ボトル10またはネオプレンで給餌部屋11ウサギの背中に釘付け。ウサギの耳に餌はエレガントなシステム タイマー刻み (特に初期段階、幼虫や幼虫) 可能性がありますクロールし、動物のために快適ではないし、ダニの餌やのリカバリの監視は、外耳道の奥深くに添付充血ダニは難しい。このシステムは動物のためのかなりの不快感を表すエリザベスつばによって保護されたソックスで覆われて完全に耳に 2 つだけのティック グループも。他システムの9,10,11は間違いなくより高度なマダニ植民地維持のために適して。しかし、ウサギは、実験グループの数だけでなく、授乳室の変更のサイズ/形状に制限されます。さらに、これらのプロトコルがよく傷および手入れをすることを防ぐためにエリザベス朝の首輪の使用を避けるために後部のウサギの足をちょこちょこ必要があります。
ここエリザベス カラーの必要性を除去する実験中にちょこちょこチャンバ ジャケットで覆われて戻ってウサギに釘付けのハード タイマー刻みの複数のグループをフィードする単純な非骨の折れると非常に効果的な手法を提案します。具体的には、当社のシステムは、蚊メッシュで覆われ、剃毛のウサギに戻って高速凝固 (3 分) 非刺激性ラテックス接着剤で接着エチレンビニル アセテート (EVA) 発泡シートから作られた弾性のカプセルを使用します。このテクニックにより、望みの大きさや形の複数のカプセルの添付ファイルと実験後の数週間、ウサギが完全に回復します。システムは主にマダニ幼虫および大人の段階に適したが、少しの変更で幼虫も餌の使用することができます。供給ハードのティックの EVA フォーム ベースの方法は、脊椎動物のホスト (本稿での選択肢の 1 つとして示されて) いる羊などの他の種類に適応する可能性があります。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1157px;" width="1158">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg)</td>
			<td style="width:197px;">Charles River&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Strain Code 571</td>
			<td style="width:267px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Rambouillet sheep</td>
			<td style="width:197px;">Local provider-tick free farm</td>
			<td>Female 6 months old</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">EVA foam 5 mm thick&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Cosplay Shop</td>
			<td style="width:399px;">EVA-PE451kg (950mm x 450mm)</td>
			<td>10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Foam Sheet 9&#34; X 12&#34; 6 mm-White</td>
			<td style="width:197px;">Amazon</td>
			<td style="width:399px;">FOAMSHT6-20</td>
			<td>6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Full length rabbit jackets&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Harvard Apparatus, Inc.&#160;</td>
			<td style="width:399px;">620077- medium, 6270078 - large&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Non-toxic latex glue&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Tear mender&#160;</td>
			<td style="width:399px;">Fabric &#38; Leather Adhesive</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Tubular cotton orthopedic stockinette</td>
			<td style="width:197px;">BSN Medical</td>
			<td style="width:399px;">9076 (12-15 cm wide)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Mosquito mesh&#160;</td>
			<td style="width:197px;">Loisirs Creatifs</td>
			<td style="width:399px;">Very fine filter nylon mesh fabric</td>
			<td>Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:295px;">Leukoplast&#160;</td>
			<td style="width:197px;">BSN medical S.A.S</td>
			<td style="width:399px;">LF 72361-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:295px;">Adhesive hook-and-loop tape</td>
			<td style="width:197px;">AIEX store</td>
			<td style="width:399px;">AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour</td>
			<td>Fullfiled by Amazon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fast drying glue &#160;</td>
			<td>Fixtout&#160;</td>
			<td>Superglue</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a versatile model of hard tick infestation on laboratory rabbits

ダニ研究の動物の使用は、さまざまな実験室でマダニの植民地の維持を含む実験の目的のため重要です。ダニ、(卵) を除くすべての発達段階は、吸血性、血食事、脊椎動物のホストに接続されている場合を取得自分の生活サイクルが正常に完了のために不可欠。ウサギのハードのダニの餌に簡単に開閉式のカプセルを使用する単純な方法を示します。提案手法の利点には、そのシンプルさ、短い期間と実験の特定の要件のニーズに最も重要な汎用性の高い調整があります。メソッドになります動物全体的な要件を軽減しながら複数の段階または別の実験グループの供給を可能にする同じ動物に (各種サイズ) の複数室の使用可能。非刺激性、簡単にアクセスできる材料を使用ことができます簡単に実験から回復し採用のために提供または倫理的なプロトコルは、それを許可されている場合を再利用、動物に不快感を最小限に抑えます。

ここで提案する初めてのマダニは EVA 発泡体の供給の詳細なステップバイ ステップ法 (図 1および 図 2) のジャケットで覆われて剃毛ウサギの背中に適用されるカプセル。このプロトコルは、同じホスト上の別のティック グループが必要とマダニの大量飼育にも使える各種実験に適しています。研究室で主に吸...

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A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits

ウサギをハードのダニを餌にシンプルで汎用性の高いシステムを提案します。私たち非骨の折れるプロトコルやすい材料を使用して、さまざまな実験的設定の要件に応じて調整することができます。メソッドでは、快適な監視および/または全体の給餌期間中にダニのサンプリングをことができます。

ウサギに寄生したマダニの汎用性の高いモデル

The use of live animals in tick research is crucial for a variety of experimental purposes including the maintenance of hard tick colonies in the ...

この方法は、硬いコロニーを維持し、ダニ生物学または宿主ベクター病原体相互作用を研究したり、これらの医学的に重要な属性の異なる制御尺度を評価するのに適している。これらの技術の主な利点は、そのシンプルさと短い期間です。そして最も重要な研究の実験ニーズに従って、修正される能力。この方法は、実験室のウサギのハードダニの異なるライフステージを供給するために使用することができますが。また、羊などの他のホストシステムに適応することができます。溶け込み時の偶発的な剥離を最小限に抑えるために、外側のコーナーを丸めるEVA Foamのシートから適切なサイズのカプセルフレームを切断することから始めます。自己接着フックテープの幅8ミリメートルのストリップを4枚カットし、フレームの側面にストリップを取り付けます。自己接着ループテープから同じサイズのストリップをカットし、フレーム上のフックテープにバインドします。次に、フレームを覆うのに十分な大きさの松の蚊のメッシュをカットし、必要に応じて張り出した材料をトリミングし、自己接着ループストリップにメッシュを貼り付けます。カプセルの準備ができたら、ウサギを手動で拘束し、動物の背中と側面の実験領域を剃ります。速乾性非刺激性ラテックス接着剤を、調製したカプセルの全面に塗布し、1分後にカプセルを皮膚に軽く押し付けます。プロトコルの最も重要なステップは、皮膚にカプセルのフィールドアタッチメントです。そのため、特に少なくとも3分間は角部でウサギの皮にカプセルの一定の圧力が必要となる。3分後、カプセルを少し持ち上げて、スパチュラを使って付着を視覚的に確認し、取り付けられていない部品に接着剤を塗布します。カプセルが固定されたら、ジャケットの損傷を防ぐために後足に保護テープを貼り、前脚を前のジャケットの開口部を通して、動物とジャケットの間の1本の指幅にジャケットの首を締めます。ダニの侵入を開始するには、まず、カットオフチップで注射器にプラスチック綿栓のプランジャーエンドにダニを追加します。次に、カプセルの片隅からメッシュを持ち上げ、注射器をカプセルの奥深くに入れ、開口部を通ります。スポイトにプランジャーを挿入して、動物にダニをはびかせます。その後、ゆっくりとカプセルからプランジャーを引っ張り出しながら、残りのダニを取り除くために皮膚に向かってプランジャーをねじります。すべてのティックが配信されたら、フックとループテープを再取り付けします。ジャケットの裏側をジッピングしてジャケットを閉じ、ウサギの後ろ足を後部弾性エンクロージャに挿入します。その後、そのケージにウサギを返します。適切な実験時に、ウサギをベンチに移し、ジャケットを解凍します。ウサギを穏やかに拘束し、カプセルを開き、鉗子を使用して完全に魅了された成人とダニのツイスターを収集して、部分的に供給された成人を収集します。エンゴージド幼虫とニンフは、皿にそれらをブラッシングすることによって収集することができます。次に、実験的に適切であればカプセルを再び閉じる。実験の最後に、ジャケットを外さずにカプセルから蚊のメッシュを完全に取り除きます。3~4週間後、片方の角をそっとトリミングしてカプセルを取り除きます。カプセルを取り外したら、ジャケットを取り外し、ウサギがケージの中で回復できるようにします。プロトコルと実験が許せば、回収されたウサギを再利用するか、または採用のために提供することができます。このプロトコルは、同じホスト上の複数のティック群の大量飼育を含む様々なタイプの実験に適しています。EVA発泡カプセルシステムは、様々なハードダニ種の異なる発達段階を供給する際に非常に成功することが証明されています。また、羊などの他のタイプの実験室の宿主に適応してもよい。さらに、この多目的な方法は、宿主上のカプセルの変更可能な数、形状および組成に基づいて、様々な異なる実験設定の作成を容易にする。この手順では、実験後のウサギのホストの完全な回復も可能になります。このプロトコルは面倒ではなく、この技術に慣れるには集中的な訓練は必要ありません。また、実験動物への材料、ステップおよびストレスの最小限の量が必要です。

Research

JoVE Journal

Biology

Laser-Induced Chronic Ocular Hypertension Model on SD Rats

SDラットにおけるレーザー誘起慢性高眼圧症モデル

Glaucoma is one of the major causes of blindness in the world. Elevated intraocular pressure is a major risk factor. Laser photocoagulation induced ocular ...

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

解離成体哺乳類の神経細胞へのDNAの核内マイクロインジェクション

Primary neuronal cell cultures are valuable tools to study protein function since they represent a more biologically relevant system compared to ...

Genetic Studies of Human DNA Repair Proteins Using Yeast as a Model System 

人間のDNA修復タンパク質の遺伝的研究は、モデルシステムとして酵母を使用

Understanding the roles of human DNA repair proteins in genetic pathways is a formidable challenge to many researchers.  Genetic studies in mammalian ...

Measurement and Analysis of Extracellular Acid Production to Determine Glycolytic Rate

外酸生産の測定と解析は、解糖速度を決定するために

Extracellular measurement of oxygen consumption and acid production is a simple and powerful way to monitor rates of respiration and glycolysis1. Both ...

Techniques to Induce and Quantify Cellular Senescence

誘導および定量化細胞老化するテクニック

In response to cellular stress or damage, proliferating cells can induce a specific program that initiates a state of long-term cell-cycle arrest, termed ...

Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter

ポリプロピレン ガイド カテーテルを用いた家兎気管内挿管

Endotracheal intubation in rabbits can be challenging due to their unusual anatomy. Achieving a patent airway during anesthesia is critical for the ...

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

A Versatile Method for Mounting Arabidopsis Leaves for Intravital Time-lapse Imaging

シロイヌナズナの取付汎用性の高い方法は、生体のタイムラプス イメージングの葉します。

The plant immune response associated with a genome-wide transcriptional reprogramming is initiated at the site of infection. Thus, the immune response is ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

EYFP タグ付き CENP-A (EYFP-CENP-A) のユビキタス性を同定するための質量分析分析

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

A Capsule-Based Model for Immature Hard Tick Stages Infestation on Laboratory Mice

実験室マウスにおける未熟なハードティックステージのカプセルベースモデル

Ticks are obligatory blood feeding parasites at all stages of development (except eggs) and are recognized as vectors of various pathogens. The use of ...

Maintaining Laboratory Cultures of Gryllus bimaculatus, a Versatile Orthopteran Model for Insect Agriculture and Invertebrate Physiology

Maintaining Laboratory Cultures of Gryllus bimaculatus, a Versatile Orthopteran Model for Insect Agriculture and Invertebrate Physiology

昆虫農業と無脊椎動物の生理学のための汎用性の高いオルソプテランモデルである Gryllus bimaculatusの実験室培養の維持

Gryllus bimaculatus (De Geer)&#160;is a large-bodied cricket distributed throughout Africa and Southern Eurasia where it is often wild-harvested as human ...