Name: analyzing spatial learning and prosocial behavior in mice using the barnes maze and damsel-in-distress paradigms
Uploaded: 2018-11-17T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms at JoVE.com

ハンプデン ・ シドニー大学で我々 はバーンズ迷路と乙女の苦痛実験のプロトコルのテストに関与することをアントン Kheirani ハンター ・ リー、ザック ライトナー ショーン ウォールデンの承認と感謝を与えます。バーンズ迷路と、ランドルフ ・ メイコン大学生物学教室検査スペースを提供するための建設のためランドルフメーコン カレッジでジェイムズ ・ フォスターに感謝したいと思いますも。

ここで説明したすべてのメソッドは、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) ハンプデン ・ シドニー ・ カレッジのランドルフメーコン カレッジ (、いくつかの仕事が以前実行された) によって承認されました。
マウスの基本住宅
<ol><li>固体底と側面、柔らかい寝具と紙のシュレッダーのような材料を入れ子のレイヤーとプラスチックのケージ内マウスを家します。細切...

<ol>
	<li>Sunyer, B., Patil, S., H&#246;ger, H., Lubec, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barnes+maze,+a+useful+task+to+assess+spatial+reference+memory+in+the+mice.">Barnes maze, a useful task to assess spatial reference memory in the mice.</a> Protocol Exchange. 2007, (2016).</li><li>Vorhees, V., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+Spatial+Learning+and+Memory+in+Rodents.">Assessing Spatial Learning and Memory in Rodents.</a> ILAR Journal. 55 (2), 310-332 (2014).</li><li>Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+deficits+associated+with+senescence:+A+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat.">Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 93 (1), 74-104 (1979).</li><li>Harrison, F. E., Hosseini, A. H., McDonald, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+anxiety+and+stress+responses+in+water+maze+and+Barnes+maze+spatial+memory+tasks.">Endogenous anxiety and stress responses in water maze and Barnes maze spatial memory tasks.</a> Behavioural Brain Research. 198 (1), 247-251 (2009).</li><li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism.">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (7), 490 (2010).</li><li>Bartal, I. B. A., Decety, J., Mason, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Empathy+and+pro-social+behavior+in+rats.">Empathy and pro-social behavior in rats.</a> Science. 334 (6061), 1427-1430 (2011).</li><li>Langford, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice.">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312 (5782), 1967-1970 (2006).</li><li>Smith, M. L., Hostetler, C. M., Heinricher, M. M., Ryabinin, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+transfer+of+pain+in+mice.">Social transfer of pain in mice.</a> Science Advances. 2 (10), e1600855 (2016).</li><li>Melia, K. R., Ryabinin, A. E., Schroeder, R., Bloom, F. E., Wilson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+habituation+of+immediate+early+gene+expression+in+rat+brain+by+acute+and+repeated+restraint+stress.">Induction and habituation of immediate early gene expression in rat brain by acute and repeated restraint stress.</a> Journal of Neuroscience. 14 (10), 5929-5938 (1994).</li><li>Watanabe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Empathy+and+reversed+empathy+of+stress+in+mice.">Empathy and reversed empathy of stress in mice.</a> Public Library of Science (PloS) One. 6 (8), e23357 (2011).</li><li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice.">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 46 (1), 28-34 (2007).</li><li>Houl&#233;, K., Abdi, M., Clabough, E. B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ethanol+exposure+during+late+mouse+neurodevelopment+results+in+long+term+deficits+in+memory+retrieval,+but+not+in+social+responsiveness.">Acute ethanol exposure during late mouse neurodevelopment results in long term deficits in memory retrieval, but not in social responsiveness.</a> Brain and Behavior. , (2017).</li><li>Sales, G. D., Wilson, K. J., Spencer, K. E., Milligan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+ultrasound+in+laboratories+and+animal+houses:+A+possible+cause+for+concern+in+the+welfare+and+use+of+laboratory+animals.">Environmental ultrasound in laboratories and animal houses: A possible cause for concern in the welfare and use of laboratory animals.</a> Laboratory Animals. 22, 369-375 (1988).</li><li>Crabbe, J. C., Walhsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+Interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: Interactions with laboratory environment.</a> Science. 248, 1670-1672 (1999).</li><li>Attar, A., Liu, T., Chan, W. T. C., Hayes, J., Nejad, M., Lei, K., Bitan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+shortened+Barnes+maze+protocol+reveals+memory+deficits+at+4-months+of+age+in+the+triple-transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A shortened Barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> PloS One. 8 (11), (2013).</li><li>Inman-Wood, S. L., Williams, M. T., Morford, L. L., Vorhees, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+prenatal+cocaine+on+Morris+and+Barnes+maze+tests+of+spatial+learning+and+memory+in+the+offspring+of+C57BL/6J+mice.">Effects of prenatal cocaine on Morris and Barnes maze tests of spatial learning and memory in the offspring of C57BL/6J mice.</a> Neurotoxicology and Teratology. 22 (4), 547-557 (2000).</li><li>Harrison, F. E., Reiserer, R. S., Tomarken, A. J., McDonald, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+and+nonspatial+escape+strategies+in+the+Barnes+maze.">Spatial and nonspatial escape strategies in the Barnes maze.</a> Learning and Memory. 13 (6), 809-819 (2006).</li><li>O'Leary, T. P., Savoie, V., Brown, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning,+memory+and+search+strategies+of+inbred+mouse+strains+with+different+visual+abilities+in+the+Barnes+maze.">Learning, memory and search strategies of inbred mouse strains with different visual abilities in the Barnes maze.</a> Behavioural Brain Research. 216 (2), 531-542 (2011).</li><li>Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+social+interaction+behaviors.">Assessment of social interaction behaviors.</a> Journal of Visualized Experiments. 48, (2011).</li></ol>

バーンズ迷路、乙女の苦痛実験マウスの向社会的行動、自発運動、空間学習を評価する方法が安価、迅速、かつ比較的簡単。他の利点には、あからさまなストレス、苦痛、または動物のための食事制限がない場合があります。ほとんどの学習/記憶パラダイムのようなバーンズ迷路の不利な点はターゲットの穴の位置を学ぶして動物に必要な試行回数です。
データの収集:...

このプロトコルの目的は、バーンズ迷路と同様の社会的応答と乙女の苦痛のパラダイムを使用して歩行を用いたマウスの記憶・学習能を測定することです。齧歯動物などマルチ スポークの装置の 1 つの腕で隠された食品を見つけるためにマウスの能力を測定する放射状迷路モリス水迷路は、大きな浴槽やプールの水、マウスの空間学習・記憶テストを用い、隠された水中プラットフォームを見つける時間を評価します。通常、これらのパラダイムのための訓練は複数の試験にまたがるし、両方の測定を可能集録速度や保存期間を短期的および長期的なメモリ試験を学習します。
放射状迷路とモリス水迷路は齧歯動物でメモリをテストするための信頼性の高い方法であるが、一部の研究者の合併症を呈する。両方の迷路は、補強1として剥奪や強い嫌悪刺激を使用します。放射状迷路は、齧歯動物の食糧報酬を見つける、適切に動機づけを確実に絶食を使用します。モリス水迷路の中で強制水泳による応力の効果はマウス2で結果を変更できます。
バーンズ迷路は、明るく、開いている迷路表面3を脱出するために穴の位置を学ぶための齧歯動物を必要とする代替の空間認識タスクです。マウスがプラットフォームからの脱出の可能性を高めるに弱い嫌悪刺激 (光や音) が適用されます。バーンズ迷路は、絶食を必要としない ― 動物の準備の量はより放射状迷路。動作や食事、ホルモン調節、または視床下部経路に関連付けられている分子を調査する研究者によって、競合することがなく使用できます。
バーンズ迷路は、モリス水迷路上の利点もあります。モリス水迷路、マウス4コルチコステロンのより高いレベルを引き起こしているよりもストレスが少ないです。また、それを組み立てるためにはるかに簡単で、テスト プロシージャとストレージの間に以下の専用領域が必要です。
乙女の苦痛のアッセイは、向社会的行動が続く運動を評価することが簡単な 2 つの部分実験です。乙女の苦痛のアッセイは、探索行動と内包された女性齧歯類に応えて男性齧歯動物の社会的応答性を評価するために設計されています。社会性 (と同様社会の目新しさのための好み) を評価するために一般的に使用されるメソッドの近くや他のマウス5から離れて時間を過ごすマウスの自由な選択を評価するクローリーの 3 商工会議所社交性テストの使用であります。
クローリーの 3 商工会議所社交性テストと同様に、苦痛の乙女アッセイも別のマウスの存在下で時間を費やすことについて自由に選択を測定しますが、また社会的機能のより深い側面の測定を提供します: 1) で、乙女の苦痛の試金、オープン フィールドに男性の潜在的な嫌悪感が社会的探索または同種の苦しめられた女性を調査する彼のドライブに対してピットインされてので、閉じ込められた雌マウスはオープン フィールドの中心に開催されます。2) 苦痛の乙女のモデルは、マウスで頻繁に探索されていないトラップのマウスへの応答で共感および向社会的行動パターンを評価する方法を提供します。
動物の共感は間違いなく観測と測定可能なこの目的のためのない多くのパラダイムが存在します。たとえば、ラット、捕獲おりの仲間は、ラットが閉じ込められた動物を解放していく、向社会的行動のモチベーションの状態を引き起こすことができます。実際、ラットはチョコレート スナックを含む類似のコンテナーを開く前にも閉じ込められた動物を支援するを選択し、チョコレートにアクセスし、新たに解放されたラット6と共有します。
マウスにおける共感性の対策で通常は極度の痛みの実際、痛みの他のマウスを見てマウス、7、8自体の痛みに敏感。拘束応力は齧歯動物に特徴づけられる現象で、ショック マウス9,10に共感の一つとしてストレス反応を調べると結合されています。
ストレスを誘発する選択肢が必要なので、誘発される痛みやショックに関連付けられている倫理的な考慮事項があります。痛みやショック治療の不在で共感行動の尺度として苦痛の乙女パラダイムを開発しました。私達の苦痛の乙女のプロトコルに閉じ込められたマウスは、彼らは小さな容器内を好転させることができないまだ彼らはその苦痛に対応する他のマウスのための機会を提供しながら無傷だけいくつかの瞬間後苦痛の明白な徴候を表示します。
乙女の苦痛の評価を開始するには、雄マウスは小さな空中央のシリンダーを含む大規模な新規アリーナに配置されます。アリーナのどのように多くのセクションを交差しているし、中央のオープン エリアで費やされているどのくらいの時間を含むいくつかの分の探索行動が記録されます。このメソッドは、正常に完了の協調運動が必要な学習状況の潜在的な交絡因子として運動障害を除外するための迅速かつ簡単な方法を提供します。また、オープンのセンター フィールドにどのくらい嫌悪感が存在の基本的な指標を提供します。両方の措置はバーンズ迷路パフォーマンスに影響可能性があります。
初期の探査の後、男性がアリーナから削除され雌マウスは、囲まれた、小さい明確な中央のシリンダー (マウスから血を収集するために使用に似ています) に配置されます。元の雄マウスは、アリーナに再導入し、探索行動を再び獲得しました。乙女の苦痛パラダイム マウス (のセンター広場で、掘りエピソードの数時間で得点)、閉じ込められた女性が存在する場合、かどうか行動パターンの変更に基づく社会的相互作用に興味があるかどうかを評価する、マウスの展示 (シリンダー調査と閉じ込められた女性と接触イベントの量で得点) 閉じ込められた女性に向けて向社会的行動。乙女の苦痛の試金を使用して、研究者が馴染み深く、新しいマウスをトラップするかどうかに応じて (クローリーの 3 商工会議所社交性テストに類似) 社会の目新しさのための傾向を測定できます。
一緒に、バーンズ迷路と乙女の苦痛実験マウスの正確な評価学習能力と社会的な反応で許可非常にストレスの刺激の欠如。すべての行動実験と同様これらの実験は動物によって経験される不快感を最小限に抑え、動物の経験に向けて素晴らしい感度で行わなければなりません。
ほとんどの迷路のような自発運動の違いに影響を及ぼすバーンズ迷路のパフォーマンス研究者も評価してください運動、特に (よう運動を損なう可能性のある突然変異マウスの学習を評価するためにバーンズ迷路を使用する場合、ハンチントン病マウス モデルで見つけられるそれらまたはさらされる毒素は、多動性は、誘導やエタノールなどの動きを遅らせる可能性があります)。さらに、迷路と商工会議所の表面を徹底的に掃除する必要があり、香りキューを避けるためにそれぞれの動物の間変更された寝具を困惑させます。
重要なは、最小限の投資でのサイトにすべての材料を加工できます、ほぼすべての設定は、大きな柔軟性を可能にこれらの実験をレプリケートできることを意味するこれらのアッセイの物理的な設置面積が小さい。この種のアクセスは、パイロット データが実質的なサポートの欠如ですばやく収集する必要がある場合、限られた資源でより小さい機関で実行する良い科学をことができます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1391px;" width="1389">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Damsel-in-Distress</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:317px;"></td>
			<td style="width:731px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50 mL conical tube</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:317px;">14-432-22</td>
			<td>Any brand of 50 mL conical tube will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber bands</td>
			<td>Sprano Brand</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Size 62, used to keep caps held to plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">hammer</td>
			<td style="width:127px;">Grainger</td>
			<td style="width:317px;">6R252</td>
			<td>Any standard hammer will work</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">nail (size 8D)</td>
			<td style="width:127px;">Grainger</td>
			<td style="width:317px;">4NFE3</td>
			<td>Similarly-sized nails should work just as well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">opaque, topless plastic box</td>
			<td style="width:127px;">AcmePlastics</td>
			<td style="width:317px;">CUT-TO-SIZE-ACRYLIC-CAST-BLACK-SHEET-2025</td>
			<td>Opaque plastic, cut to size (30 cm L x 19 cm W x 3-6 cm H). Step may be added to ensure no more than a 3.5 cm entrance depth for the mouse.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">video camera (smartphone)</td>
			<td style="width:127px;">N/A</td>
			<td style="width:317px;">N/A</td>
			<td>Any camera-equipped smartphone will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">bite-resistant gloves</td>
			<td style="width:127px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:317px;">GLVDYN02</td>
			<td>Any brand offering appropriate protection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">transparency sheet</td>
			<td style="width:127px;">Staples</td>
			<td style="width:317px;">954145</td>
			<td>Any brand of clear plastic sheet will work, used for scoring&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barnes Maze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Petri Dishes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353025</td>
			<td>Spray painted and used as covers for Barnes maze holes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plywood (3/4 in.)</td>
			<td>LP Building Products</td>
			<td>22487</td>
			<td>To contruct Barnes maze</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spray Paint</td>
			<td>Krylon</td>
			<td>1274937</td>
			<td>Used to paint petri dish caps black, white paint used to paint plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cup Hooks (5/8 in.)</td>
			<td>Ace Hardware</td>
			<td>5360615</td>
			<td>2 used on either side of ventral hole surfaces; rubberband wraps around hooks to hold cap flat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Poster Board</td>
			<td>Creatology</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used at edges of maze as extra cues</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Bulbs</td>
			<td>Phillips</td>
			<td>n/a</td>
			<td>100W light bulb, used to during the trials</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber bands</td>
			<td>Sprano Brand</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Size 62, used to keep caps held to plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ultrasonic noisemaker</td>
			<td style="width:127px;">Victor mini PestChaser</td>
			<td>M753SN</td>
			<td>Used as aversive stimuli</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analyzing spatial learning and prosocial behavior in mice using the barnes maze and damsel-in-distress paradigms

バーンズ迷路は、空間的な学習と食餌制限または非常にストレス刺激への暴露を必要としないメモリの信頼性の高い尺度です。バーンズ迷路迷路のプラットフォームと探索行動から脱出する一般的な動機などの他のマウス動作を評価することも。バーンズ迷路は、遺伝子の突然変異であるかどうかを測定できる環境変数が取得及び空間記憶の保持に影響を与えると同様またはマウスで採用されている検索方法に関する情報を提供します。ここでバーンズ迷路を使用して単一発達エタノールの露出イベント アダルト マウスのメモリの赤字を検出します。新しく記述された乙女の苦痛のパラダイムは、アリーナのオープン センター フィールドで商工会議所の中に閉じ込めて雌マウスに男性マウスを公開します。それは社会的に閉じ込められた女性への対応、向社会的行動を示すマウスのための機会を提供します。新規アリーナとメジャーの自発運動のマウスの動作を調べるため乙女の苦痛パラダイムを使用もできます。バーンズ迷路と乙女の苦痛のプロトコルの両方で必要最小限の金融投資と共通の実験用品からテストの大部分を構築できます。これらのツールの柔軟性とアクセスは、開発の過程での行動の変化を検出するも使用できます。

バーンズ迷路
バーンズ迷路の使用方法を示すため、単一初期エタノール曝露がマウスの開発のコースを学習の違いを原因かどうかを検討しました。2.5 g/kg のエタノール溶液を注入したか C57Bl6/J マウス (n = 8) または生理食塩水 (n = 6) 2 回、2 時間おきに生後 6 日目で。我々 は思春期 (P30)、バーンズ迷路上...

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Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

空間的な学習とバーンズ迷路と乙女の苦痛のパラダイムを用いたマウスの向社会的行動の分析

このプロトコルは、バーンズ迷路を使用して記憶・学習能を測定します。新たな乙女の苦痛パラダイムは、自発運動量とマウスにおける向社会的行動を評価するために使用されます。

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...

この方法は、遺伝子変異または環境変数が社会的行動に影響を与えるか、または記憶の有無の取得と保持に影響を与えるかどうかについての行動神経科学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。これらの技術の主な利点は、両方の研究は、単に最小限の金融投資で構築することができ、どちらのプロトコルも極端またはストレスの多い刺激を経験する動物を必要としないです.ダムゼル・イン・遭難法は、マウスの社会的行動に関する洞察を提供することができるが、他の哺乳類モデル生物の共感尺度としても使用することができる。バーンズ迷路試験手順を開始する前に、水と70%エタノールで迷路成分のすべてを洗浄してください。コンポーネントが乾燥したら、迷路を組み立て、テスト期間中に使用するターゲットホールに各マウスをランダムに割り当てます。穴は迷路の底に1〜20のラベルを付けることができますか、迷路の外から見えない迷路の周囲の外側に。トレーニングテストを開始するには、割り当てられた穴ディスクを23 x 11センチメートルのブラックボックスに置き換え、ゴムバンドとフックを使用して迷路にしっかりと箱を取り付けます。次に、カップの下のバーンズ迷路の中央にマウスを置き、マウスを30秒間順応させます。順応期間の終わりに、ビデオ録画を開始し、光と超音波ノイズメーカーをオンにします。動物の最初の方位を偏らないように、文字列機構を介してカップを持ち上げ、観察カーテンの後ろでタイマーを開始します。迷路の図を使用して紙の上で動物の動きを追跡し、図を使用してマウスの検索戦略を分析し、ターゲットの反対側の象限で探索された穴の数を決定します。マウスがターゲットホールに入ったら、重い不透明なバインダーで穴を覆い、超音波ノイズメーカーをオフにします。マウスが5分後にターゲットに入っていない場合は、動物をターゲットホールに集めます。次に、マウスを1分間邪魔されずにターゲットボックスに残し、超音波ノイズをオフにします。その後、そのケージに動物を返します。すべてのマウスをテストしたら、手動で記録を確認してマウスの全体的な動きを追跡し、ターゲットが見つかる前後に探索された誤った穴の数、およびターゲットホールから最初の穴までの穴数、および注目すべきグルーミング動作を決定します。遭難テストでの探索的行動Damselのために、閉鎖された空のストレスチャンバーを共感アリーナの中央に置き、中断されたカメラで記録を開始します。アリーナの左下隅にあるカップの下にオスのマウスを30秒間そっと置きます。その後、文字列機構を介してカップを取り外し、記録中に視界から離れるように注意して10分間マウスを探索できるようにします。探検期間の終わりに、マウスをアリーナからホールディングケージに5分間移動させ、録音を停止して保存します。苦痛テストの社会的応答性のDamselのために、穏やかに手動でメスのマウスを拘束し、拘束室にマウスを下げる。マウスの後ろのチャンバーの開いた端を閉じ、マウスが回転できないことを確認します。中断されたカメラで記録を開始し、アリーナの中央に拘束室を内部に配置します。動物が視界から外れたままの世話をして10分間順応できるようにします。その後、保持エリアから男性のマウスを10秒間共感アリーナに戻し、男性マウスにさらに5分間を入れてアリーナを探索し、視界から離れるように注意を払います。探索期間の終了時に、ビデオ ファイルを停止して保存し、両方のマウスをケージに戻します。その後、トウモロコシの寝具を交換し、70%エタノールでアリーナとストレスチャンバーの両方を消毒します。データを分析するには、適切なトラッキングソフトウェアでビデオファイルを開き、透明なシートを画面に配置します。マーカーでアリーナの広場を概説し、9つの等しいコンパートメントにアリーナ広場を分割します。最初の探索的測定の最初の5分間のビデオデータを確認し、交差したコンパートメントの数、アリーナの中央広場で費やされた時間、掘削とグルーミングのエピソードの数、およびマウスが空の中心拘束室に触れた回数を記録します。その後、男性がアリーナに再導入された直後の社会的応答性測定の5分間のビデオデータを見直し、閉じ込められた女性が最初の探索的措置と同じデータを記録するが、男性のマウスが閉じ込められた女性のマウスで鼻に触れた回数の追跡を追加する。バーンズ迷路が訓練した新生児が単一の長期試験で成人として実行されるとき、エタノール注入されたマウスは、生理液注入された対照動物よりも標的穴がどこにあるかを覚えるのが難しい。エタノール処理マウスはまた、ターゲットとは反対の象限の有意に多くの穴を探索し、正しい一般的な容量位置を覚えておらず、穴が見つかるまでリング状の方法で穴を開けるためにシーケンシャルホールを使用しなかったことを示している。苦痛モデルのダムゼルでは、古いマウスは若いマウスよりも多くの正方形を横切る。しかし、閉じ込められた女性の存在下では、両方の年齢の雄のマウスはアリーナを探索する時間を減らします。少年男性は、閉じ込められた女性に対する不安や社会的行動を示唆するよりも、閉じ込められた女性のマウスの前でアリーナでの時間を掘る時間が多くなります。対照的に、雄のマウスは閉じ込められた女性を含むチューブに触れ、閉じ込められた女性の接触を少年よりも成人として有意に頻繁に開始する。この手順を試みる際には、試験の間と試験内で条件を一定に保ち、環境変数がスタディの結果を混乱させないようにすることを忘れないでください。これらの行動アッセイの最初の使用に続いて、同じ動物は、長期的な記憶と社会的行動の可能な変化に関する質問に答えるために、開発中に様々な時点で再テストすることができます。

Research

JoVE Journal

Behavior

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

マウスにおけるビデオ解析システムを用いた文脈と手掛り恐怖条件付け試験

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

小型·大齧歯類モデルとバーンズ迷路テスト戦略

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

マウスにおける自発運動と不安様行動を測定するために、オープンフィールド迷路の利用

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

ダブルH迷路：げっ歯類での学習と記憶のための堅牢な行動試験

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

オープンフィールドタワー迷路に置き、レスポンス学習

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

マウスの記憶・学習の調査のための新規オブジェクト認識テスト

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

半径方向水迷路迷路を用いた外傷性脳損傷のマウスモデルにおける空間記憶障害の評価

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

The (Spatial) Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

The Spatial Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

(空間的) メモリ ゲーム: テスト空間言語、オブジェクトの知識と空間認知との関係

The memory game paradigm is a behavioral procedure to explore the relationship between language, spatial memory, and object knowledge. Using two different ...

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

マウスで本能的な防衛中に空間記憶の役割を調査するため行動分析

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

Paradigms of Lower Extremity Electrical Stimulation Training After Spinal Cord Injury

脊髄損傷後下肢電気刺激の訓練のパラダイム

Skeletal muscle atrophy, increased adiposity and reduced physical activity are key changes observed after spinal cord injury (SCI) and are associated with ...