Name: analyzing spatial learning and prosocial behavior in mice using the barnes maze and damsel-in-distress paradigms
Uploaded: 2018-11-17T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms at JoVE.com

Мы в колледже Хэмпден-Сидней дать признание и благодарность Шон Walden, Зак Leitner, Хантер ли и Антон Kheirani за их участие в тестировании протоколы для Барнс лабиринт и девицы в беде экспериментов. Мы также хотели бы поблагодарить Джеймс Фостер в колледж Рэндольф-Макон для строительства лабиринт Барнс и Рэндольф-Макон колледж Департамента биологии для предоставления тестирования пространства.

Все методы, описанные здесь были утверждены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) колледжа Hampden-Сидней или колледж Рэндольф-Макон (где некоторые ранее работ).
1. Основные жилья мышей
<ol><li>Дом мышей в пластиковые клетки с твердых Боттомс и сторонами ...

<ol>
	<li>Sunyer, B., Patil, S., H&#246;ger, H., Lubec, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barnes+maze,+a+useful+task+to+assess+spatial+reference+memory+in+the+mice.">Barnes maze, a useful task to assess spatial reference memory in the mice.</a> Protocol Exchange. 2007, (2016).</li><li>Vorhees, V., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+Spatial+Learning+and+Memory+in+Rodents.">Assessing Spatial Learning and Memory in Rodents.</a> ILAR Journal. 55 (2), 310-332 (2014).</li><li>Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+deficits+associated+with+senescence:+A+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat.">Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 93 (1), 74-104 (1979).</li><li>Harrison, F. E., Hosseini, A. H., McDonald, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+anxiety+and+stress+responses+in+water+maze+and+Barnes+maze+spatial+memory+tasks.">Endogenous anxiety and stress responses in water maze and Barnes maze spatial memory tasks.</a> Behavioural Brain Research. 198 (1), 247-251 (2009).</li><li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism.">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (7), 490 (2010).</li><li>Bartal, I. B. A., Decety, J., Mason, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Empathy+and+pro-social+behavior+in+rats.">Empathy and pro-social behavior in rats.</a> Science. 334 (6061), 1427-1430 (2011).</li><li>Langford, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice.">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312 (5782), 1967-1970 (2006).</li><li>Smith, M. L., Hostetler, C. M., Heinricher, M. M., Ryabinin, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+transfer+of+pain+in+mice.">Social transfer of pain in mice.</a> Science Advances. 2 (10), e1600855 (2016).</li><li>Melia, K. R., Ryabinin, A. E., Schroeder, R., Bloom, F. E., Wilson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+habituation+of+immediate+early+gene+expression+in+rat+brain+by+acute+and+repeated+restraint+stress.">Induction and habituation of immediate early gene expression in rat brain by acute and repeated restraint stress.</a> Journal of Neuroscience. 14 (10), 5929-5938 (1994).</li><li>Watanabe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Empathy+and+reversed+empathy+of+stress+in+mice.">Empathy and reversed empathy of stress in mice.</a> Public Library of Science (PloS) One. 6 (8), e23357 (2011).</li><li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice.">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 46 (1), 28-34 (2007).</li><li>Houl&#233;, K., Abdi, M., Clabough, E. B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ethanol+exposure+during+late+mouse+neurodevelopment+results+in+long+term+deficits+in+memory+retrieval,+but+not+in+social+responsiveness.">Acute ethanol exposure during late mouse neurodevelopment results in long term deficits in memory retrieval, but not in social responsiveness.</a> Brain and Behavior. , (2017).</li><li>Sales, G. D., Wilson, K. J., Spencer, K. E., Milligan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+ultrasound+in+laboratories+and+animal+houses:+A+possible+cause+for+concern+in+the+welfare+and+use+of+laboratory+animals.">Environmental ultrasound in laboratories and animal houses: A possible cause for concern in the welfare and use of laboratory animals.</a> Laboratory Animals. 22, 369-375 (1988).</li><li>Crabbe, J. C., Walhsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+mouse+behavior:+Interactions+with+laboratory+environment.">Genetics of mouse behavior: Interactions with laboratory environment.</a> Science. 248, 1670-1672 (1999).</li><li>Attar, A., Liu, T., Chan, W. T. C., Hayes, J., Nejad, M., Lei, K., Bitan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+shortened+Barnes+maze+protocol+reveals+memory+deficits+at+4-months+of+age+in+the+triple-transgenic+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">A shortened Barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> PloS One. 8 (11), (2013).</li><li>Inman-Wood, S. L., Williams, M. T., Morford, L. L., Vorhees, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+prenatal+cocaine+on+Morris+and+Barnes+maze+tests+of+spatial+learning+and+memory+in+the+offspring+of+C57BL/6J+mice.">Effects of prenatal cocaine on Morris and Barnes maze tests of spatial learning and memory in the offspring of C57BL/6J mice.</a> Neurotoxicology and Teratology. 22 (4), 547-557 (2000).</li><li>Harrison, F. E., Reiserer, R. S., Tomarken, A. J., McDonald, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+and+nonspatial+escape+strategies+in+the+Barnes+maze.">Spatial and nonspatial escape strategies in the Barnes maze.</a> Learning and Memory. 13 (6), 809-819 (2006).</li><li>O'Leary, T. P., Savoie, V., Brown, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning,+memory+and+search+strategies+of+inbred+mouse+strains+with+different+visual+abilities+in+the+Barnes+maze.">Learning, memory and search strategies of inbred mouse strains with different visual abilities in the Barnes maze.</a> Behavioural Brain Research. 216 (2), 531-542 (2011).</li><li>Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+social+interaction+behaviors.">Assessment of social interaction behaviors.</a> Journal of Visualized Experiments. 48, (2011).</li></ol>

Лабиринт Барнс и девицы в беде экспериментов являются недорогой, быстрый и относительно легко способы оценки пространственного обучения, двигательной активности и социальная поведение у мышей. Другие преимущества включают в себя отсутствие явной стресс, боль или ограничение питания ...

Целью настоящего Протокола является измерение пространственного обучения и памяти у мышей с использованием Барнс лабиринт, а также социальная отзывчивость и передвижения с использованием парадигмы девицы в беде. Часто используемые пространственного обучения и памяти тесты для грызунов включать Радиальный/консольный торцовочный лабиринт, который измеряет способность мыши найти скрытые еду в одной руке со спицами multi аппарата, и Моррис воды лабиринт, который помещает мышь в большой ванне или бассейне воды и Определяет, сколько времени потребовалось, чтобы найти скрытые подводные платформы. Как правило, обучение для эти парадигмы охватывает несколько судебных процессов и позволяет измерение обоих обучения цены приобретения и удержания через краткосрочной и долгосрочной памяти испытаний.
Хотя радиально АРМ лабиринт и Моррис воды лабиринт надежных способов тестирования памяти на грызунах, они представляют собой осложнения для некоторых исследователей. Обе лабиринты использовать лишение или сильной отрицательной стимулы как подкрепление1. Радиальный/консольный торцовочный maze использует лишение пищи обеспечить надлежащим образом мотивированы, чтобы найти пищи награды грызунов. В лабиринте воды Моррис последствия стресса, вызванного вынуждены плавать может изменить результаты в мыши2.
Лабиринт Барнс является альтернативным пространственной осведомленности задача, которая требует грызунов узнать позицию отверстие для того чтобы избежать лабиринт яркие, открытые поверхности3. Слабой отрицательной стимуляции (свет или звук) применяется для повышения вероятности того, что мышь будет бежать от платформы. Барнс лабиринт не требует лишение пищи, поэтому количество животных подготовки меньше, чем в Радиальный/консольный торцовочный лабиринт. Он может использоваться без конфликта исследователи, которые изучают поведение или связанные с еды, гормональной регуляции или каналы гипоталамические молекул.
Барнс лабиринт также имеет преимущества над лабиринтом воды Моррис. Это менее напряженный, чем Моррис воды лабиринт, вызывая менее повышенный уровень кортикостерона в мышей4. Кроме того она гораздо проще собрать и требует меньше выделенного пространства во время процедуры тестирования и хранения.
Девица в беде assay является простой эксперимент двух частей, которые можно оценить двигательной активности, следуют социальная поведение. Девица в беде assay предназначен для оценки произвольного поведения и социальной реакции мужчины грызунов в ответ на зависшие женского грызунов. Часто используемый метод для оценки коммуникабельность (а также предпочтение социальной новизна) является использование Кроули-трехкамерный коммуникабельность теста, который оценивает свободный выбор мыши проводить время вблизи или от других мышей5.
Подобно Кроули-трехкамерный коммуникабельность тест, девицы в беде assay также меры свободный выбор о том, как провести время в присутствии другой мыши, но он также обеспечивает измерения для более глубоких аспектов социального функционирования: 1) в Пробирного девицы в беде, захваченных женщин мыши проводится в центре открытого поля, поэтому мужчины потенциальных отвращение к открытом поле выступают против его диск социально исследовать или расследовать проблемные девушки conspecific. 2 девицы в беде модель также предоставляет способ оценки социальная и чуткими поведение в ответ на ловушку мышь, которая не была изучена часто у мышей.
Животных эмпатии определенно заметных и поддающихся измерению, хотя для этой цели существует не так много парадигм. Например у крыс, захваченных Кейдж Мате может побудить государство социальная мотивации, где крыс будет работать на свободное захваченные животного. В самом деле крысы будет выбрать, чтобы помочь ловушку животных даже перед открытием подобный контейнер, содержащий шоколад закуска, затем доступ шоколад и поделиться им с освобожденным крыса6.
Меры эмпатии в мышей, как правило, включают причинение боли; действительно мышей, которые смотреть другие мышей в боль более чувствительны к боли сами7,8. Сдержанность стресс это явление характеризуется грызунов и сопровождается шоком для изучения реакции стресса, как одной из мер эмпатии в мышей9,10.
Есть этические соображения, связанные с индуцированных боли или шок, поэтому необходимы стресса заставить альтернатив. Мы разработали девицы в беде парадигмы как мера чуткими поведения в отсутствие боли или шоковой терапии. Захваченных мышей в наши девицы в беде протокол признаки явной бедствия после лишь несколько моментов как они не могут развернуться в небольшой контейнер, но они целым и невредимым, обеспечивая возможность для других мышей, чтобы ответить на их бедственном положении.
Чтобы начать оценку девицы в беде, мужчины мыши помещается в большой роман Арена, содержащий небольшой пустой центрального цилиндра. Произвольного поведения, записываются на несколько минут, включая пересекли сколько разделов арены и сколько времени провел в районе центральной открытой. Этот метод обеспечивает быстрый и простой способ исключает двигательного дефицита как потенциальных confounder в ситуации обучения, которая требует скоординированного движения для успешного завершения. Она также обеспечивает основной показатель сколько отвращение в открытом поле центр присутствует. Обе эти меры могут повлиять на производительность лабиринт Барнс.
После первоначального исследования самец удаляется от арены и женского мыши помещается в закрытых, небольшие ясно центрального цилиндра, (аналогичный тому, который используется для сбора крови от мышей). Затем оригинальный мужской мыши вновь на арену, и произвольное поведение снова забил. Девица в беде парадигмы оценивает ли мышь заинтересована в социального взаимодействия на основе изменений в поведенческих моделей, когда женщина ловушке присутствует (забил, время, проведенное в центре площади и количество серий рытье) и является ли мышь экспонатов социальная поведение по отношению к ловушке самка (забил на количество цилиндров расследований и контактных события с захваченных девушки). Девица в беде assay может использоваться для измерения склонность к социальной Новинка (аналогично Кроули-трехкамерный коммуникабельность тест) в зависимости от ли исследователи ловушки мыши знакомые или роман.
Вместе Барнс лабиринт и девицы в беде эксперименты позволяют точной оценки мыши возможности обучения и социальной реакции в отсутствие крайне стрессовых раздражителей. Как и в случае всех поведенческих анализов, эти эксперименты должны быть выполнены с большой чувствительностью к животного опыт, свести к минимуму неудобства, испытываемые животного.
Как большинство лабиринтов различия в двигательной активности могут влиять производительность на лабиринт Барнс, поэтому исследователи также следует оценить двигательной активности, особенно при использовании Барнс лабиринт для оценки обучения у мышей с мутациями, которые могут ухудшить движения (такие, как те нашли в моделях мыши болезни Гентингтона, или тех, кто подвергается токсинов, которые могут вызывать гиперактивность или замедлить движение, например этанола). Кроме того лабиринт и камеры поверхности должны быть тщательно очищены и постельные принадлежности, изменилось между каждое животное, чтобы избежать запах кий путает.
Главное все материалы могут быть изготовлены на месте с минимальными финансовыми инвестициями и физическую компактность этих анализов означает, что эти эксперименты могут быть воспроизведены практически в любых условиях, что позволяет большую гибкость. Этот тип доступности позволяет хорошо науки выполняться в небольших учреждениях с ограниченными ресурсами или в ситуациях, где экспериментальные данные должны быть собраны быстро в отсутствие существенной поддержки.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1391px;" width="1389">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Damsel-in-Distress</td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:317px;"></td>
			<td style="width:731px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50 mL conical tube</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:317px;">14-432-22</td>
			<td>Any brand of 50 mL conical tube will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber bands</td>
			<td>Sprano Brand</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Size 62, used to keep caps held to plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">hammer</td>
			<td style="width:127px;">Grainger</td>
			<td style="width:317px;">6R252</td>
			<td>Any standard hammer will work</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">nail (size 8D)</td>
			<td style="width:127px;">Grainger</td>
			<td style="width:317px;">4NFE3</td>
			<td>Similarly-sized nails should work just as well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">opaque, topless plastic box</td>
			<td style="width:127px;">AcmePlastics</td>
			<td style="width:317px;">CUT-TO-SIZE-ACRYLIC-CAST-BLACK-SHEET-2025</td>
			<td>Opaque plastic, cut to size (30 cm L x 19 cm W x 3-6 cm H). Step may be added to ensure no more than a 3.5 cm entrance depth for the mouse.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">video camera (smartphone)</td>
			<td style="width:127px;">N/A</td>
			<td style="width:317px;">N/A</td>
			<td>Any camera-equipped smartphone will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">bite-resistant gloves</td>
			<td style="width:127px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:317px;">GLVDYN02</td>
			<td>Any brand offering appropriate protection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">transparency sheet</td>
			<td style="width:127px;">Staples</td>
			<td style="width:317px;">954145</td>
			<td>Any brand of clear plastic sheet will work, used for scoring&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barnes Maze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Petri Dishes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353025</td>
			<td>Spray painted and used as covers for Barnes maze holes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plywood (3/4 in.)</td>
			<td>LP Building Products</td>
			<td>22487</td>
			<td>To contruct Barnes maze</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spray Paint</td>
			<td>Krylon</td>
			<td>1274937</td>
			<td>Used to paint petri dish caps black, white paint used to paint plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cup Hooks (5/8 in.)</td>
			<td>Ace Hardware</td>
			<td>5360615</td>
			<td>2 used on either side of ventral hole surfaces; rubberband wraps around hooks to hold cap flat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Poster Board</td>
			<td>Creatology</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Used at edges of maze as extra cues</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Bulbs</td>
			<td>Phillips</td>
			<td>n/a</td>
			<td>100W light bulb, used to during the trials</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber bands</td>
			<td>Sprano Brand</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Size 62, used to keep caps held to plywood</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ultrasonic noisemaker</td>
			<td style="width:127px;">Victor mini PestChaser</td>
			<td>M753SN</td>
			<td>Used as aversive stimuli</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analyzing spatial learning and prosocial behavior in mice using the barnes maze and damsel-in-distress paradigms

Лабиринт Барнс является надежной мерой пространственного обучения и памяти, которая не требует питания ограничение или воздействия крайне стрессовых раздражителей. Барнс лабиринт может также оценить другие расширения функциональности мыши, таких как общей мотивации, чтобы вырваться из лабиринта платформы и произвольное поведение. Барнс лабиринт может измерять ли генетической мутации или переменной среды может повлиять на приобретение и сохранение пространственных воспоминания, а также предоставить информацию о стратегии поиска, используемых мышей. Здесь мы используем Барнс лабиринт для выявления дефицита памяти в взрослых мышей после воздействия события единого развития этанола. Недавно описан парадигмы девицы в беде предоставляет мужчины мыши женского мышь в ловушке в камере в открытом поле центр арены. Это дает возможность для мыши социально реагировать захваченных женщин и социальная поведение. Девица в беде парадигма также может использоваться для изучения поведения мыши в Роман Арена и мера двигательной активности. Лабиринт Барнс и девицы в беде протоколы требуют минимальных финансовых инвестиций и большинство аспектов тесты могут быть построены от общих поставок лаборатории. Эти гибкие и доступные инструменты могут также использоваться для выявления поведенческих изменений в течение развития.

Лабиринт Барнс
Чтобы проиллюстрировать, как могут быть использованы в лабиринте Барнс, мы исследовали, привело ли единый раннего воздействия этанола разница в обучении в течение развития мыши. C57Bl6/J мышей либо вводили 2,5 м...

Watch this Scientific Journal Video about Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms at JoVE.com

Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

Анализ пространственной обучение и социальная поведение у мышей с использованием Барнс лабиринт и девицы в беде парадигмы

Этот протокол меры пространственного обучения и памяти с помощью Барнс лабиринт. Роман парадигмы девицы в беде используется для оценки двигательной активности и социальная поведение у мышей.

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области поведенческой нейронауки о том, генетическая мутация или экологическая переменная может повлиять на социальное поведение или приобретение и сохранение спациальных воспоминаний. Основные преимущества этих методов являются то, что оба исследования могут быть просто построены с минимальными финансовыми инвестициями, и что ни протокол требует от животных, чтобы испытать экстремальные или стрессовые стимулы. Damsel в беде метод может обеспечить понимание мыши про-социального поведения, но он также может быть использован в качестве меры сопереживания в других организмов модели млекопитающих.Перед началом процедуры тестирования лабиринта Барнса очистите все компоненты лабиринта водой и 70%этанолом. Когда компоненты высохнут, соберите лабиринт и случайным образом назначите каждую мышь в целевое отверстие для использования в течение всего периода тестирования. Отверстия могут быть помечены от одного до 20 на дне лабиринта или на внешней стороне периметра лабиринта, где они не видны из лабиринта.Чтобы начать учебный тест, замените назначенный отверстие диска с 23 на 11 сантиметров черный ящик и использовать резинки и крючки, чтобы прочно прикрепить коробку к лабиринту. Затем поместите мышь на центр лабиринта Барнса под чашкой и позвольте мыши акклиматизироваться в течение 30 секунд. В конце периода акклиматизации, начать видеозапись и включить свет и ультразвуковой шумоизоляции.Поднимите чашку через струнный механизм, чтобы избежать смещения первоначального заголовка животного и начать таймер за занавеской наблюдения. Отслеживайте движения животного на листе бумаги с помощью диаграммы лабиринта и используйте диаграмму для анализа стратегий поиска мыши, а также для определения количества отверстий, которые были исследованы в квадранте напротив цели. Когда мышь входит в целевое отверстие, накройте отверстие тяжелым непрозрачным связующим звеном и выключите ультразвуковой шумоизоляционный производитель.Если мышь не вошла в цель через пять минут, загон животное в целевое отверстие. Затем позвольте мыши оставаться в целевой коробке в течение одной минуты спокойно, убедившись, что выключить ультразвуковой шум. Затем верните животное в клетку.Когда все мыши были протестированы, вручную просмотрите их записи для отслеживания общего движения мыши, чтобы определить количество неправильных отверстий, исследованных до и после того, как цель найдена, а также количество отверстий от целевого отверстия до первого исследованного отверстия и любого заметного поведения ухода. Для исследовательского поведения Damsel в distress Testing поместите закрытую и пустую стресс-камеру в центр арены эмпатии и начните запись с подвесной камеры. Аккуратно поместите мышь-мужчину под чашку в левом нижнем углу на арене в течение 30 секунд.Затем удалите чашку с помощью струнного механизма и позвольте мыши исследовать в течение 10 минут заботу, чтобы держаться подальше от поля зрения во время записи. В конце периода исследования, переместить мышь с арены в клетку проведения в течение пяти минут и остановиться и сохранить запись. Для социальной отзывчивости Damsel в distress Testing, аккуратно вручную удерживайте самку мыши и опустите мышь в удерживающая камеру.Закройте открытый конец камеры позади мыши и подтвердите, что мышь не может развернуться. Начните запись с подвесной камеры и поместите удерживающих камер внутри в центре арены. Позвольте животному акклиматизироваться в течение 10 минут, заботясь о том, чтобы оставаться вне поля зрения.Затем перенесите мышь-мужчину из зоны удерживания обратно на арену эмпатии в течение 10 секунд и позвольте мышке еще пять минут, чтобы исследовать арену, заботясь о том, чтобы оставаться вне поля зрения. В конце периода исследования остановитесь и сохраните видеофейс и верните обоих мышей в клетки. Затем замените кукурузные постельные принадлежности и продезинфицировать как арену, так и стресс-камеру 70%этанолом.Чтобы проанализировать данные, откройте видео файл в соответствующем программном обеспечении отслеживания и поместите прозрачный лист над экраном. Очертите площадь арены маркером и разделите площадь арены на девять равных отсеков. Просмотрите видео данные за первые пять минут первоначальной исследовательской меры, записывающие количество пересекаемых отсеков, время, проведенное на центральной площади арены, количество эпизодов рытья и ухода, а также количество раз, когда мышь касалась пустой центральной удерживаемой камеры.Затем просмотрите видео данные за пять минут измерения социальной отзывчивости сразу после того, как самец будет вновь введен в арену с захваченной самкой, записывающей те же данные, что и для первоначальной исследовательской меры, но добавляя отслеживание количества раз, когда мышонок коснулся носа с пойманной в ловушку самкой мыши. Когда Барнс Лабиринт обученных новорожденных работают как взрослые в одном долгосрочном испытании, этанол вводили мышей труднее вспомнить, где цель отверстие было расположено, чем солевой вводили контроль животных. Этанол обработанных мышей также изучить значительно больше отверстий в противоположном квадранте от цели, что свидетельствует о неспособности вспомнить правильное общее географическое положение и использовать последовательное отверстие для поиска отверстия в форме кольца моды, пока отверстие не найдено.В модели Damsel in Distress более старые мыши пересекают больше квадратов, чем молодые мыши. В присутствии захваченных женщин, однако, мышей обоих возрастов тратить меньше времени на изучение арене. Несовершеннолетние самцы тратят больше времени на раскопки во время своего времени на арене в присутствии пойманной в ловушку самки мыши, чем когда только предлагая беспокойство или про-социальное поведение по отношению к пойманной в ловушку женщине.В отличие от этого, мышей мужского пола коснуться трубки, содержащей захваченных женщин и инициировать захваченных женский контакт значительно чаще, как взрослые, чем в качестве несовершеннолетних. При попытке этой процедуры, важно помнить, чтобы сохранить условия постоянными между и в рамках испытаний, чтобы экологические переменные не путать результаты исследования. После первоначального использования этих поведенческих анализов, те же животные могут быть повторно протестированы в различных точках времени во время развития, чтобы ответить на вопросы о долгосрочной памяти и возможных изменений в социальном поведении.

Research

JoVE Journal

Behavior

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Контекстная и подают реплики Страх принадлежности Тест Использование видео параметры системы у мышей

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Барнс Лабиринт Стратегии Тестирование с малого и крупного моделях грызунов

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

Использование открытом поле Лабиринт измерить опорно-двигательного аппарата и тревоги типа поведения у мышей

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Дважды Н лабиринт: Прочная Поведенческая Тест для обучения и памяти у грызунов

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

Место и реагирования обучение в Открытом поле башня лабиринт

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

Роман объект признание тест для расследования обучения и памяти у мышей

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Оценка нарушения пространственной памяти в мышиной модели травматической травмы головного мозга с использованием лабиринта с радиальной водой

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

The (Spatial) Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

The Spatial Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

Игра (пространственной) памяти: Тестирование взаимосвязи между пространственной языка, объект знаний и пространственной познания

The memory game paradigm is a behavioral procedure to explore the relationship between language, spatial memory, and object knowledge. Using two different ...

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Поведенческие Assay для расследования роли пространственной памяти во время инстинктивное обороны у мышей

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

Paradigms of Lower Extremity Electrical Stimulation Training After Spinal Cord Injury

Парадигмы нижней конечности электрическая стимуляция обучения после травмы спинного мозга

Skeletal muscle atrophy, increased adiposity and reduced physical activity are key changes observed after spinal cord injury (SCI) and are associated with ...