Name: the use of mouse splenocytes to assess pathogen-associated molecular pattern influence on clock gene expression
Uploaded: 2018-07-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Use of Mouse Splenocytes to Assess Pathogen-associated Molecular Pattern Influence on Clock Gene Expression at JoVE.com

Detta arbete stöds av fakulteten forskningsanslag från de College of Arts och vetenskaper rektorns kontor på universitet i Hartford.

Under studien, djurens vård och behandling med National Institutes of Health policy, var enligt institutionella riktlinjer och godkändes av universitet i Hartford institutionella djur djurvård och användning kommittén.
1. ångan av djur
Obs: Tjugo veckor gamla B6129SF2/J hanmöss används i studien.
<ol><li>Dra in möss till en 12 h ljus (standard overhead vitt ljus) / 12 h mörka cykel i 2 veckor innan experimentet. Obs: Här zeitgeber tid (ZT) 0 motsvara...

<ol>
	<li>Bell-Pedersen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+from+multiple+oscillators:+lessons+from+diverse+organisms.">Circadian rhythms from multiple oscillators: lessons from diverse organisms.</a> Nat. Rev. Genet. 6, 544-556 (2005).</li><li>Mohawk, J. A., Green, C. B., Takahashi, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+and+Peripheral+Circadian+Clocks+in+Mammals.">Central and Peripheral Circadian Clocks in Mammals.</a> Annu. Rev. Neurosci. 35, 445-462 (2012).</li><li>Balsalobre, A., Damiola, F., Schibler, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+serum+shock+induces+circadian+gene+expression+in+mammalian+tissue+culture+cells.">A serum shock induces circadian gene expression in mammalian tissue culture cells.</a> Cell. 93, 929-937 (1998).</li><li>Yoo, S. -. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PERIOD2::LUCIFERASE+real-time+reporting+of+circadian+dynamics+reveals+persistent+circadian+oscillations+in+mouse+peripheral+tissues.">PERIOD2::LUCIFERASE real-time reporting of circadian dynamics reveals persistent circadian oscillations in mouse peripheral tissues.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 101, 5339-5346 (2004).</li><li>Yamazaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resetting+Central+and+Peripheral+Circadian+Oscillators+in+Transgenic+Rats.">Resetting Central and Peripheral Circadian Oscillators in Transgenic Rats.</a> Science. 288, 682-685 (2000).</li><li>Lowrey, P. L., Takahashi, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+circadian+rhythms+in+mammalian+model+organisms.">Genetics of circadian rhythms in mammalian model organisms.</a> Adv. Genet. 74, 175-230 (2011).</li><li>Curtis, A. M., Bellet, M. M., Sassone-Corsi, P., O'Neill, L. A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+Clock+Proteins+and+Immunity.">Circadian Clock Proteins and Immunity.</a> Immunity. 40, 178-186 (2014).</li><li>Keller, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+circadian+clock+in+macrophages+controls+inflammatory+immune+responses.">A circadian clock in macrophages controls inflammatory immune responses.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106, 21407-21412 (2009).</li><li>Silver, A. C., Arjona, A., Hughes, M. E., Nitabach, M. N., Fikrig, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+expression+of+clock+genes+in+mouse+macrophages,+dendritic+cells,+and+B+cells.">Circadian expression of clock genes in mouse macrophages, dendritic cells, and B cells.</a> Brain. Behav. Immun. 26, 407-413 (2012).</li><li>Kawai, T., Akira, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+pattern-recognition+receptors+in+innate+immunity+update+on+Toll-like+receptors.">The role of pattern-recognition receptors in innate immunity update on Toll-like receptors.</a> Nat. Publ. Gr. 11, 373-384 (2010).</li><li>Marpeg&#225;n, L., Bekinschtein, T. A., Costas, M. A., Golombek, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+responses+to+endotoxin+treatment+in+mice.">Circadian responses to endotoxin treatment in mice.</a> J. Neuroimmunol. 160, 102-109 (2005).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injection+of+LPS+Causes+Transient+Suppression+of+Biological+Clock+Genes+in+Rats.">Injection of LPS Causes Transient Suppression of Biological Clock Genes in Rats.</a> J. Surg. Res. 145, 5-12 (2008).</li><li>Haimovich, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+endotoxin+synchronizes+and+suppresses+clock+gene+expression+in+human+peripheral+blood+leukocytes.">In vivo endotoxin synchronizes and suppresses clock gene expression in human peripheral blood leukocytes.</a> Crit. Care Med. 38, 751-758 (2010).</li><li>Curtis, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+control+of+innate+immunity+in+macrophages+by+miR-155+targeting+Bmal1.">Circadian control of innate immunity in macrophages by miR-155 targeting Bmal1.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 112, 7231-7236 (2015).</li><li>Silver, A. C., Arjona, A., Walker, W. E., Fikrig, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Circadian+Clock+Controls+Toll-like+Receptor+9-Mediated+Innate+and+Adaptive+Immunity.">The Circadian Clock Controls Toll-like Receptor 9-Mediated Innate and Adaptive Immunity.</a> Immunity. , (2012).</li><li>Gibbs, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nuclear+receptor+REV-ERB+&#945;+mediates+circadian+regulation+of+innate+immunity+through+selective+regulation+of+inflammatory+cytokines.">The nuclear receptor REV-ERB &#945; mediates circadian regulation of innate immunity through selective regulation of inflammatory cytokines.</a> PNAS. 109, 582-587 (2012).</li><li>Zee, P. C., Attarian, H., Videnovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythm+abnormalities.">Circadian rhythm abnormalities.</a> Contin. Lifelong Learn. Neurol. 19, 132-147 (2013).</li><li>Bovbjerg, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+disruption+and+cancer:+sleep+and+immune+regulation.">Circadian disruption and cancer: sleep and immune regulation.</a> Brain. Behav. Immun. 17, 48-50 (2003).</li><li>Fu, L., Lee, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circadian+clock:+pacemaker+and+tumour+suppressor.">The circadian clock: pacemaker and tumour suppressor.</a> Nat. Rev. Cancer. 3, 350-361 (2003).</li><li>Germain, A., Kupfer, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CIRCADIAN+RHYTHM+DISTURBANCES+IN+DEPRESSION.">CIRCADIAN RHYTHM DISTURBANCES IN DEPRESSION.</a> Hum. Psychopharmacol. 23, 571-585 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Mouse+Care+and+Maintenance.">Basic Mouse Care and Maintenance.</a> JoVE. , (2018).</li><li>Leary, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AVMA+Guidelines+for+the+Euthanasia+of+Animals+:+2013+Edition.">AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals : 2013 Edition.</a> AVMA. , (2013).</li><li>Silver, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen-associated+molecular+patterns+alter+molecular+clock+gene+expression+in+mouse+splenocytes.">Pathogen-associated molecular patterns alter molecular clock gene expression in mouse splenocytes.</a> PLoS One. , 12-15 (2017).</li><li>Silver, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Daily+oscillations+in+expression+and+responsiveness+of+Toll-like+receptors+in+splenic+immune+cells.">Daily oscillations in expression and responsiveness of Toll-like receptors in splenic immune cells.</a> Heliyon. , 00579 (2018).</li></ol>

Inom detta protokoll, kan en microvolume spektrofotometer användas för att kvantifiera och utvärdera renheten av RNA som används vid fastställandet av genuttryck. Nukleinsyror absorbera UV-ljus på 260 nm, proteiner normalt absorberar ljus vid 280 nm, medan andra potentiella föroreningar som används under en RNA extraktionsmetod (exempelvis fenol) är detekterbara 230 nm. Därför, genom att bedöma absorbans (A) baserat på 260/280 nm (RNA till protein) och 260/230 nm (RNA till icke-protein föroreningar...

Masterklockan hos däggdjur som orkestrerar 24 h svängningar för nästan alla aspekter av fysiologi och beteende, är beläget inom suprachiasmatiska kärnan (SCN) av hypotalamus1,2. Förutom att reglera biologiska processer på organismers nivå, synkroniserar masterklockan även perifera cellulära klockor i hela kroppen3,4,5. Medan den molekylära klockan maskinen består av minst tre samverkande transkriptionell-translationell återkopplingar, består kärnan av Period (Per1-3), Cryptochrome (Cry1-2), Bmal1, och klockan gener6,7. Förutom att upprätthålla perfekt timing av core molekylära klockan, vissa accessoriska klocka genprodukter (t.ex. Rev-erbα och Dbp) reglerar också icke-klocka genuttryck, klockan dvs kontrollerade gener (CCGs)6 , 7.
Funktionella molekylära klockor har beskrivits i olika immun vävnader (t.ex., mjälten och lymfkörtlarna)8 och celler (t.ex., B-celler, dendritiska celler, makrofager)8,9. Dessa celler upptäcka och svara på patogen-associerade molekylära mönster (PAMPs), bevarade mikrobiella komponenter, via medfödd immun erkännande receptorer såsom Toll-liknande receptorer (TLR)10. Hittills har har 13 funktionella TLRs beskrivits, som känner igen mikrobiella beståndsdelar såsom bakteriella cellväggen komponenter, flagellar protein och mikrobiell nukleinsyra10. PAMP, lipopolysackarid (LPS), beståndsdel cellväggen i gramnegativa bakterier igen av TLR4, har visat sig förändra dygnsrytmen på både organismer och molekylär nivå. Exempelvis i vivo utmaning av LPS inducerad photic-liknande fas förseningar mätt som aktivitet i möss11 och ledde till minskad klocka genuttryck i SCN och lever enligt fastställt i situ hybridisering och kvantitativ PCR, respektive i råttor12. Efter en i vivo utmaning med LPS avslöjade analys av människans perifera leukocyter13 och subkutan fettvävnad14 förändrat uttryck av flera klocka gener mätt via qPCR. Slutligen, ex vivo LPS utmaningar av mänskliga makrofager och mus peritoneal makrofager, ledde också till förändrad klocka uttryck mätt med qPCR14.
Här beskriver vi ett protokoll för att bedöma påverkan av PAMPs LPS, ODN1826 (syntetiska oligonukleotider som innehåller unmethylated CpG motiv), och värmeavdödade Listeria monocytogenes (HKLM), erkänd av TLR4, TLR9 och TLR2, respektive, på molekylära klockan genuttryck i mus splenocytes. Protokollet innehåller mus splenektomi, splenocyte isolering och utmaning, RNA extraktion, cDNA syntes och qPCR för att bedöma flera klocka genuttryck. Detta protokoll tillåter lägligt förvärvet av ett stort antal immunceller med mycket lite djur eller cellulära manipulation, som sedan kan utmanas ex vivo med olika PAMPs. Den molekylära klockan har visat att modulera olika aspekter av immunsvar8,15,16, därför störningar av molekylära klockan sannolikt skulle försämra korrekt tidsberoende variationen av den immunsvar. Dessutom, eftersom störningar av dygnsrytmen kan leda till allvarliga patologier17,18,19,20, kan det vara av intresse för forskare att utmana splenocytes med ett brett utbud av molekyler och bedöma deras inflytande på klockan.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:796px;" width="795">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:343px;">Frosted slides</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:137px;">12-550-343</td>
			<td style="width:200px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cell strainers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td align="right">22363547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lipopolysaccharide&#160;</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>ltrl-eklps</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ODN1826</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>Tlrl-1826-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">HKLM</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>Tlrl-hklm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RPMI 1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>20012-043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74104 or 74106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNase-Free DNase Set</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td align="right">79254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">6-well cell culture plate</td>
			<td>Denville</td>
			<td>T1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">50 ml tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td align="right">352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">15 ml tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td align="right">352097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td align="right">4368814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Assays b-actin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>Mm00607939_s1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Assays Per2</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>Mm00478113_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Assays Rev-erba</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>Mm00520708_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Assays Bmal1</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>Mm00500226_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Assays Dbp</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>Mm00497539_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">qPCR machine StepOnePlus</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td align="right">4369016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">MicroAmp Fast 96-well reaction plate (0.1 ml)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td align="right">4346907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Statistical Analysis Software</td>
			<td>Prism 7.0a</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the use of mouse splenocytes to assess pathogen-associated molecular pattern influence on clock gene expression

Från beteende till genuttryck reglera dygnsrytmen nästan alla aspekter av fysiologi. Här presenterar vi en metod för att utmana mus splenocytes med patogen-associerade molekylära mönster (PAMPs) lipopolysackarid (LPS), ODN1826 och värmeavdödade Listeria monocytogenes och bedöma deras inverkan på molekylära dygnsrytm klockan. Tidigare har studier fokuserat på att undersöka påverkan av LPS på molekylära klockan med hjälp av en mängd in-vivo och ex vivo metoder från ett sortiment av modeller (t.ex. mus, råtta och mänskliga). Det här protokollet beskriver isolering och utmaningen att splenocytes, liksom metoden att bedöma gen uttryck efter utmaningen klocka via kvantitativ PCR. Detta tillvägagångssätt kan användas för att bedöma inte bara påverkan av mikrobiella komponenter på den molekylära klockan men andra molekyler såväl som kan förändra uttrycket av klockan. Detta synsätt skulle kunna utnyttjas för att retas isär den molekylära mekanismen för hur PAMP-Toll-like receptor interaktionen påverkar klocka uttryck.

Möss offrades på ZT13, splenocytes isolerades och utmanade ex vivo med PAMPs LPS, ODN1826 eller HKLM. Efter 3 h, RNA isolerades och qPCR användes för att bedöma relativa uttrycksnivåerna för de molekylära klocka gener klocka, Per2, Dbp, och Rev-erbα jämfört med oemotsagda kontroll celler. Efter PAMP utmaning var klocka uttryck inte väsentligt annorlunda än uttryck i kontroll cellerna (figur 1<...

Watch this Scientific Journal Video about The Use of Mouse Splenocytes to Assess Pathogen-associated Molecular Pattern Influence on Clock Gene Expression at JoVE.com

The Use of Mouse Splenocytes to Assess Pathogen-associated Molecular Pattern Influence on Clock Gene Expression

Det här protokollet beskriver en teknik som använder musen splenocytes för att upptäcka patogen-associerade molekylära mönster som förändrar molekylära klockan genuttryck.

Användning av musen Splenocytes att bedöma patogen-associerade molekylära mönster inflytande på klocka genuttryck

From behavior to gene expression, circadian rhythms regulate nearly all aspects of physiology. Here, we present a methodology to challenge mouse ...

Research

JoVE Journal

Genetics

Parallel Measurement of Circadian Clock Gene Expression and Hormone Secretion in Human Primary Cell Cultures

Parallell Mätning av dygnsrytm klocka genuttryck och hormon i mänskliga primära cellkulturer

Circadian clocks are functional in all light-sensitive organisms, allowing for an adaptation to the external world by anticipating daily environmental ...

Single-cell Gene Expression Using Multiplex RT-qPCR to Characterize Heterogeneity of Rare Lymphoid Populations

Encelliga genuttryck Använda Multiplex RT-qPCR att karaktärisera Heterogena Sällsynta Lymfoida populationer

Gene expression heterogeneity is an interesting feature to investigate in lymphoid populations. Gene expression in these cells varies during cell ...

Studying Cell Cycle-regulated Gene Expression by Two Complementary Cell Synchronization Protocols

Studierande cellcykelreglerade genuttryck av två komplementära cellsynkroniseringsprotokoll

The gene expression program of the cell cycle represents a critical step for understanding cell cycle-dependent processes and their role in diseases such ...

Sample Preparation and Analysis of RNASeq-based Gene Expression Data from Zebrafish

Provberedning och analys av RNASeq-baserade gen uttryck Data från zebrafisk

The analysis of global gene expression changes is a valuable tool for identifying novel pathways underlying observed phenotypes. The zebrafish is an ...

A Standard Methodology to Examine On-site Mutagenicity As a Function of Point Mutation Repair Catalyzed by CRISPR/Cas9 and SsODN in Human Cells

En standardmetod att undersöka Hotellets mutagenicitet som en funktion av punktmutation reparation katalyseras av CRISPR/Cas9 och SsODN i mänskliga celler

Combinatorial gene editing using CRISPR/Cas9 and single-stranded oligonucleotides is an effective strategy for the correction of single-base point ...

Production and Purification of Baculovirus for Gene Therapy Application

Produktion och rening av baculoviridae för genterapi ansökan

Baculovirus has traditionally been used for the production of recombinant protein and vaccine. However, more recently, baculovirus is emerging as a ...

An Optogenetic Method to Control and Analyze Gene Expression Patterns in Cell-to-cell Interactions

En Optogenetic metod för att kontrollera och analysera gen uttrycksmönster i Cell-till-cell interaktioner

Cells should respond properly to temporally changing environments, which are influenced by various factors from surrounding cells. The Notch signaling ...

A Method to Study the C924T Polymorphism of the Thromboxane A2 Receptor Gene

En metod att studera den C924T polymorfism av tromboxan A2 receptorn gen

The thromboxane A2 receptor (TBXA2R) gene is a member of the G-protein coupled superfamily with seven-transmembrane regions. It is involved in ...

Using Mouse Oocytes to Assess Human Gene Function During Meiosis I

Använda mus oocyter att bedöma mänskliga geners funktion under meios jag

Embryonic aneuploidy is the major genetic cause of infertility in humans. Most of these events originate during female meiosis, and albeit positively ...

Exploring the Root Microbiome: Extracting Bacterial Community Data from the Soil, Rhizosphere, and Root Endosphere

Utforska den roten mikrobiomet: extrahera bakteriell gemenskapen Data från jord, odlingsbädden och rot Endosphere

The intimate interaction between plant host and associated microorganisms is crucial in determining plant fitness, and can foster improved tolerance to ...