Name: nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography
Uploaded: 2018-10-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography at JoVE.com

Nous tenons à remercier la Science et la technologie de planification de projet de la Province du Guangdong en Chine (2016B070701007) pour soutenir ce travail.

1. dégradable PGA échafaudage base tissulaire navires Culture
<ol><li>Fabrication de l’échafaudage de la PGA<ol>
<li>Coudre maille PGA (diamètre de 19 mm et 1 mm d’épaisseur) autour de tubes en silicone stérilisé par l’oxyde d’éthylène (longueur 17 cm, diamètre 5,0 mm et 0,3 mm d’épaisseur) à l’aide de la suture de 5-0.</li>
		<li>Coudre en polytétrafluoroéthylène (ePTFE, 1cm de longueur) avec suture 4-0 sur chaque extrémité de la maille PGA et se chevauchent de 2 mm.</li>
		<li>Tremper les...

<ol>
	<li>Chan-Park, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomimetic+control+of+vascular+smooth+muscle+cell+morphology+and+phenotype+for+functional+tissue-engineered+small-diameter+blood+vessels.">Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).</li><li>Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+tissue+engineering.">Image-guided tissue engineering.</a> Journal of Cellular &amp; Molecular Medicine. 13, 1428-1436 (2009).</li><li>Smith, L. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+challenges+in+biomaterials+and+tissue+engineering.">Imaging challenges in biomaterials and tissue engineering.</a> Biomaterials. 34, 6615-6630 (2013).</li><li>Rice, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+characterization+of+structure+and+morphology+of+silk+fibroin+biomaterials+using+non-linear+microscopy.">Non-invasive characterization of structure and morphology of silk fibroin biomaterials using non-linear microscopy.</a> Biomaterials. 29, 2015-2024 (2008).</li><li>Niklason, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enabling+tools+for+engineering+collagenous+tissues+integrating+bioreactors,+intravital+imaging,+and+biomechanical+modeling.">Enabling tools for engineering collagenous tissues integrating bioreactors, intravital imaging, and biomechanical modeling.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 3335-3339 (2010).</li><li>Zheng, K., Rupnick, M. A., Liu, B., Brezinski, M. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+characterization+of+bioengineered+blood+vessels+within+a+bioreactor+using+free-space+and+catheter-based+OCT.">Imaging and characterization of bioengineered blood vessels within a bioreactor using free-space and catheter-based OCT.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 45, 391-400 (2013).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+remodeling+and+structural+characterization+of+degradable+polymer+scaffold-based+tissue-engineered+vascular+grafts+using+optical+coherence+tomography.">In vitro remodeling and structural characterization of degradable polymer scaffold-based tissue-engineered vascular grafts using optical coherence tomography.</a> Cell &amp; Tissue Research. 370, 417-426 (2017).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+natural+history+of+extracellular+matrix+production+in+tissue-engineered+vascular+grafts+during+neovessel+formation.">Characterization of the natural history of extracellular matrix production in tissue-engineered vascular grafts during neovessel formation.</a> Cells Tissues Organs. 195, 60-72 (2012).</li><li>Ye, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+conception+and+realization+of+pulsatile+ventricular+assist+devices-from+Spiral-Vortex+pump+to+Luo-Ye+pump.">The design conception and realization of pulsatile ventricular assist devices-from Spiral-Vortex pump to Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 9, 35-40 (2002).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+optical+coherence+tomography+in+tissue+engineered+blood+vessel+culture+based+on+Luo-Ye+pump.">Application of optical coherence tomography in tissue engineered blood vessel culture based on Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 31, 687-690 (2015).</li><li>Pickering, J. G., Boughner, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+the+age+of+fibrotic+lesions+using+polarized+light+microscopy+and+digital+image+analysis.">Quantitative assessment of the age of fibrotic lesions using polarized light microscopy and digital image analysis.</a> American Journal of Pathology. 138, 1225-1231 (1991).</li><li>Martinho, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+optical+attenuation+coefficient+and+mechanical+tension+of+irradiated+human+cartilage+measured+by+optical+coherence+tomography.">Dependence of optical attenuation coefficient and mechanical tension of irradiated human cartilage measured by optical coherence tomography.</a> Cell Tissue Bank. 16, 47-53 (2015).</li><li>Poirierquinot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+1.5-Tesla+magnetic+resonance+imaging+for+tissue-engineered+constructs:+a+noninvasive+tool+to+assess+three-dimensional+scaffold+architecture+and+cell+seeding.">High-resolution 1.5-Tesla magnetic resonance imaging for tissue-engineered constructs: a noninvasive tool to assess three-dimensional scaffold architecture and cell seeding.</a> Tissue Engineering Part C Methods. 16, 185-200 (2010).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+burst+pressure:+initial+evaluation+of+the+natural+history+of+the+biaxial+mechanical+properties+of+tissue-engineered+vascular+grafts+in+the+venous+circulation+using+a+murine+model.">Beyond burst pressure: initial evaluation of the natural history of the biaxial mechanical properties of tissue-engineered vascular grafts in the venous circulation using a murine model.</a> Tissue Engineering Part A. 20, 346-355 (2014).</li><li>Smart, N., Dube, K. N., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vessel+development+and+insight+towards+neovascular+therapy.">Coronary vessel development and insight towards neovascular therapy.</a> International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 90, 262-283 (2009).</li></ol>

Pour générer conçu navires avec structure et propriétés mécaniques similaires à ceux des natifs des vaisseaux sanguins peuvent entraîner pour raccourcir le temps pour l’usage clinique et sont le but ultime de l’ingénierie vasculaire. Les techniques d’imagerie optiques permettent la visualisation de l’ingénierie des tissus vasculaires composants spécifiques, qui ne peut pas contrôler des constructions individuelles tout au long des greffes de la culture et de l’exposition à un milieu de culture sans...

Tissulaire des vaisseaux sanguins (TEBVs) est le matériau plus prometteurs comme une prothèse vasculaire idéal1. Afin de développer les greffes pour être cliniquement utile avec des propriétés structurales et fonctionnelles similaires comme navires indigènes, plusieurs techniques ont été conçus pour maintenir les fonctions vasculaires2,3. Bien qu’il y a eu des navires conçus avec des taux de perméabilité acceptable pendant l’implantation et à l' étude clinique de Phase III4, culture à long terme et des coûts élevés montrent également la nécessité de suivre le développement de TEBVs. Compréhension des processus matrix(ECM) extracellulaire de croissance, remodelage et l’adaptation en TEBVs dans l’environnement de chimio-mécanique biomimétiques peut fournir des informations cruciales pour le développement de l’ingénierie des tissus vasculaires.
La stratégie idéale pour suivre le développement de vaisseaux machiné de petit diamètre5 devrait être non destructive, stérile, longitudinal, tridimensionnelle et quantitative. TEBVs dans des conditions de culture différente pourraient être évaluées par cette modalité d’imagerie, y compris même les changements avant et après la transplantation vasculaire. Stratégies pour décrire les caractéristiques des navires de vie conçue sont nécessaires. Techniques d’imagerie optiques permettent la visualisation et la quantification des dépôts de tissu et des biomatériaux. Autres avantages sont la possibilité d’activer l’imagerie des tissus profonds et sans étiquette avec haute résolution6,7. Cependant, les molécules d’image spécifique et des équipements optiques moins facilement accessible pour surveiller en temps réel est un obstacle pratique, qui a limité l’application extensive de la microscopie optique non linéaire. Tomographie par cohérence optique (OCT) est une approche optique avec un système d’imagerie intravasculaire comme outil clinique largement utilisé pour guider la thérapie interventionnelle cardiaque8. Dans la littérature, la méthode de OCT a été signalée comme un moyen d’évaluer l’épaisseur de la paroi de TEBVs9,10, couplé avec affirmatives modalités d’imagerie pour la recherche en génie tissu vasculaire. Considérant que, la dynamique de l’ingénierie vasculaire croissance et remodelage observe pas.
Dans ce manuscrit, nous détaillons la préparation du TEBVs d’axée sur l’échafaud polymères biodégradables pour la culture de quatre semaines. Les cellules musculaires lisses vasculaires des artères ombilicale humaine (HUASMCs) sont élargies et ensemencés dans un échafaudages de (PGA) l’acide polyglycolique dégradable poreux dans le bioréacteur. Polymères biodégradables jouent un rôle dans un substrat temporaire pour l’ingénierie tissulaire et ont une certaine dégradation taux11. Afin d’assurer une correspondance appropriée entre la dégradation de l’échafaudage et formation des neo-tissus, ECM et PGA échafaudages sont des facteurs cruciaux pour un remodelage vasculaire efficace. Le système de perfusion simule le microenvironnement biomécanique des vaisseaux natifs et maintient une déformation uniforme sous la stimulation de la pression.
Le protocole présenté vise à décrire une stratégie relativement simple et non destructive pour TEBVs d’imagerie et de surveillance à long terme de la culture. Ce protocole peut être utilisé pour la visualisation des changements morphologiques et mesures d’épaisseur de navires conçus dans des conditions de culture différente. En outre, les analyses de la dégradation des matériaux à base de polymères dans les tissus techniques échafaudages peuvent être exécutées pour l’identification. En combinant les méthodes de balayage électronique microscopic(SEM) et polarisée microscope utilisé dans ce protocole, la corrélation et la quantification de la distribution de la matrice extracellulaire et de la dégradation de la PGA sont possibles, qui peuvent faciliter l’évaluation d’échafaudage dégradation, combiné avec l’imagerie OCT.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:797px;" width="797">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PGA mesh</td>
			<td style="width:265px;">Synthecon</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">silicone tube</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">connector</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">intravascular OCT system</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;">ILUMIEN&#8482; OPTIS&#8482; SYSTEM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">scanning electron microscopic</td>
			<td style="width:265px;">Philips&#160;</td>
			<td style="width:149px;">FEI Philips XL-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">polarized microscope</td>
			<td style="width:265px;">Olympus</td>
			<td style="width:149px;">Olympus BX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:216px;">sutures</td>
			<td style="width:265px;">Johnson &#38; Johnson</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:216px;">pulsatile pump</td>
			<td style="width:265px;">Guangdong Cardiovascular Institute</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LightLab Imaging software</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography

Ingénierie des greffons vasculaires aux propriétés structurelles et mécaniques similaires à des vaisseaux sanguins naturels sont censés satisfaire la demande croissante de pontage artériel. Caractérisation de la dynamique de croissance et le processus de remodelage des polymères dégradables axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins (TEBVs) avec une stimulation pulsatile sont cruciales pour l’ingénierie des tissus vasculaires. Les techniques d’imagerie optiques se démarquent comme de puissants outils pour surveiller la vascularisation du tissu machiné permettant l’imagerie haute résolution en culture en temps réel. Cet article démontre une non destructive et rapide en temps réel d’imagerie stratégie pour surveiller la croissance et la rénovation des TEBVs dans les cultures à long terme en utilisant la tomographie par cohérence optique (OCT). La morphologie géométrique est évaluée, y compris le processus de remodelage vasculaire, épaisseur de paroi et comparaison de l’épaisseur de la TEBV à des moments différents de la culture et de la présence de stimulation pulsatile. Enfin, les PTOM fournit des possibilités pratiques pour l’observation en temps réel de la dégradation du polymère dans les tissus reconstituante profonde sous stimulation pulsatile ou pas et dans chaque segment du navire, par contre l’évaluation de l’utilisation de dégradation du polymère balayage électronique microscopic(SEM) et microscope polarisé.

Le système de culture en trois dimensions se composait d’une chambre de culture dans le bioréacteur et le système de perfusion avec un cycle fermé de fluide10,13 (Figure 1). Le cathéter d’imagerie OCT a été inséré dans l’extrémité distale de la jonction en Y et tiré vers l’arrière dans le tube de silicone pour l’imagerie. L’imagerie OCT a été utilisée pour délimiter la car...

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Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography

Contrôles non destructifs suivi du développement de dégradable axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins à l’aide de la tomographie à cohérence optique

Un protocole étape par étape pour les essais non destructifs et longue période suivi le processus de remodelage vasculaire et la dégradation de l’échafaudage en culture en temps réel de biodégradables polymériques axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins avec stimulation pulsatile à l’aide de la tomographie par cohérence optique est décrite ici.

Engineered vascular grafts with structural and mechanical properties similar to natural blood vessels are expected to meet the growing demand for arterial ...

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l’ingénierie tissulaire vasculaire, comme la surveillance de la dynamique de la croissance vasculaire de l’ingénieur et le remodelage pendant la culture à long terme. Le principal avantage de l’utilisation de la tomographie par cohérence optique, ou OCT, est qu’il s’agit d’une stratégie d’imagerie facilement disponible, en temps réel et non constructive pour caractériser les caractéristiques structurelles et le processus de remodelage des navires d’ingénierie. Shangmin Liu et Wentao Ma, techniciens de mon laboratoire, feront également la démonstration de la procédure.Pour commencer cette procédure, fabriquez l’échafaudage PGA tel que décrit dans le protocole de texte Dip PGA échafaudages dans un hydroxyde de sodium mol-per-litre pendant une minute, pour ajuster la structure spaciale de la maille. Ensuite, tremper les échafaudages dans de l’eau de qualité tissulaire trois fois pendant deux minutes chacun. Chaque fois, tapoter doucement l’échafaudage avec un papier de soie.Ensuite, séchez les échafaudages dans une hotte avec un ventilateur pendant une heure. Pour assembler le bioréacteur et la jonction y pour l’imagerie OCT, d’abord, tremper le bioréacteur cylindrique en verre auto-développé, échafaudages PGA, tube de silicone, tubes biocompatibles, connecteurs, barre de remue-remuer, et l’équipement pour l’assemblage dans un réservoir d’éthanol de 95 pour cent pendant deux heures. Tirez l’échafaudage PGA à travers les bras latéraux du bioréacteur relié à un côté avec un connecteur, ainsi que d’un autre côté avec la jonction y utilisée pour livrer le fil guide OCT.Assembler un autre échafaudage pga dans le bioréacteur de la même manière. Adapter le polytétrafluoroéthylène aux lèvres bioréacteurs en le serrant avec des sutures 4-0. Remettre le bioréacteur dans le réservoir d’éthanol pendant une heure avant de le sécher toute la nuit dans une hotte avec le ventilateur.Maintenant, isoler les cellules musculaires ombilicales humaines lisses des artères ombilicales humaines par des techniques d’explantation standard Dans la cause de sauver les cellules dans les échafaudages pga, éviter toute goutte de suspension cellulaire sur le fond du bioréacteur. En outre, couvrez le bioréacteur avec le couvercle de silicone-bouchon dès que possible après le siège cellulaire pour empêcher la contamination. Développer et maintenir les cellules dans le milieu de croissance musculaire lisse.Ensemencer les cellules musculaires lisses de l’artère ombilicale humaine à une concentration de 5 millions de cellules par millilitre dans le milieu de culture ci-dessus sur les échafaudages pga. Après avoir placé une barre de monsieur dans le bioréacteur, couvrez-la du couvercle du bouchon en silicone qui a un tube d’alimentation et trois courts segments de tubes insérés pour l’échange de gaz. Fixez les filtres PTFE 0,22 micron à chaque tube de changement d’air et fixez un bouchon d’héparine au tube d’alimentation.Ajustez la barre de remue-remuer à une vitesse de 13 tours par minute. Ensuite, assemblez le bioréacteur en verre, le couvercle du bouchon en silicone et l’échafaudage PGA dans le système culturel. Laissez les cellules adhérer pendant 45 minutes en appuyant sur le bioréacteur toutes les 15 minutes avec un support vers la gauche et vers la droite.Maintenant, connectez la pompe LOO-OH-YEE, sac salin tamponné phosphate, et le conducteur avec les tubes biocompatibles afin de créer le système de profusion. Ouvrez le conducteur pour remplir les tubes de PBS. Placez le bioréacteur global dans un incubateur humidifié avec 5 pour cent de CO2 à 37 degrés Celsius.Remplissez la chambre de culture de 450 millilitres du milieu culturel. Cultivez les échafaudages ensemencés sous culture statique pendant une semaine, en changeant le milieu de culture tous les trois à quatre jours en aspirant la moitié de l’ancien milieu à travers le tube d’alimentation et en remplissant le réacteur d’une quantité équivalente de milieu de culture frais. Pour préparer le système de profusion pour l’imagerie OCT, pompez les fluides dans le sac PBS pour les faire circuler à travers les tubes biocompatibles et retourner au sac.Ouvrez la puissance du conducteur et réglez le réglage de la pompe avec une fréquence de 60 battements par minute et une pression systolique de sortie de 120 millimètres de mercure. Ajuster les paramètres mécaniques en fonction des besoins de la culture vasculaire d’ingénierie tissulaire. Cliquez sur le bouton exécuter pour faire fonctionner le système de profusion.Fournir la simulation pulsatile fix aux navires pendant trois semaines en pressurisant itérativement les tubes biocompatibles après une semaine de culture statique. Utilisez une source de lumière pour assurer la résolution axianale de dix à vingt microns et la profondeur d’image d’un à deux millimètres pour identifier la structure des vaisseaux sanguins conçus par les tissus, ou TEVBs, sur la base du système d’imagerie intravasculaire oct domaine de fréquence. Allumez le commutateur d’alimentation et ouvrez le logiciel de capture d’image Connectez le cathéter d’imagerie à fibre optique au moteur d’entraînement et au contrôleur optique, avec la fonction de retraite automatique par cathéter.Définissez les paramètres du taux d’acquisition d’image à dix images par seconde, avec une vitesse de retrait automatique de dix millimètres par seconde. Maintenant, fixez le cathéter d’imagerie à la jonction y par le bouchon d’héparine avec une aiguille de calibre 18. Placez le cathéter dans le tube de silicone et identifiez l’étanchéité de la structure du maillage PGA avant de charger l’échafaudage pga sur le bioréacteur.Maintenant, placez le bout de cathéter au-dessus de la région d’intérêt. Ajustez le dispositif de retrait et vérifiez la qualité de l’image. Obtenez des images à un, quatre, sept, dix, 14, 17, 21 et 28 jours en culture pour chaque TEBV individuel.Enregistrez ces images séquentiellement avec une observation en temps réel de la microstructure TEBV comprenant la morphologie de surface, la structure interne et la composition. Répétez la mesure trois fois pour obtenir une mesure fiable des navires d’ingénierie à chaque fois. Capturez une série d’images tout au long des tests à l’aide du logiciel de capture d’image.Pour utiliser un logiciel d’analyse d’image pour mesurer l’épaisseur de la paroi des vaisseaux sanguins, sélectionnez d’abord l’image à analyser. Ensuite, cliquez sur l’outil de suivi pour identifier automatiquement le côté intérieur du vaisseau sanguin conçu par les tissus avec le logiciel et esquisser manuellement le côté externe. Un diagramme d’épaisseur apparaîtra à l’écran.Répétez la mesure cinq fois pour obtenir une mesure fiable des constructions. Envisagez d’utiliser deux enquêteurs indépendants obligés d’obtenir des renseignements. Ouvrez le couvercle du bouchon en silicone placé sur le bioréacteur lorsque la culture est terminée, et jetez le milieu de culture.Desserrer le polytétrafluoroéthylène des lèvres bioréacteurs et couper les tubes de silicone du côté extérieur du polytétrafluoroéthylène avec des ciseaux. Récoltez les TÉLÉVISEURS du bioréacteur et coupez-les en sections pour un examen de microscopie à balayage électronique. Retirez le tube de silicone de soutien, et fixez les sections avec le formaldéhyde de puissance de 4 pour cent.Effectuez des taches histologiques de routine avec le rouge trichrome et sirious de Masson pour examiner la morphologie du collagène et de la PGA. Pour évaluer le contenu de la PGA et le composant de collagène, observez des échantillons histologiques avec des taches rouges sirious à travers un microscope polarisé. Les images oct sont comparées aux découvertes histopathologiques des TÉLÉVISEURS après quatre semaines de culture.L’image OCT montre une microstructure compacte et des composants spécifiques par rapport à l’évaluation histologique. Le milieu culturel, le tube de silicone, le TEBV et le fragment pga sont visibles. La coloration trichrome de Masson démontre des fibres de collagène distribuées dans une certaine direction, ainsi que des restes pga dans la couche médiatique des navires d’ingénierie.La coloration rouge Sirius révèle les restes de la PGA et un composant de collagène à l’aide d’un microscope polarisé. Les micrographes à balayage électronique des vaisseaux d’ingénierie démontrent une microstructure compacte. Pendant ce temps, cette modalité d’imagerie intraluminale adopte une surveillance non constructive et facile des TEBV, y compris le processus de remodelage et la morphologie visuelle in situ dans la culture de longue durée.Comme indiqué ici, le remodelage se produit plus tôt et les changements morphologiques se manifestent plus évidemment dans le groupe dynamique par la comparaison de l’épaisseur tebv. Cette technique ouvre la voie aux chercheurs dans le domaine de l’ingénierie des tissus vasculaires afin d’explorer les caractéristiques de la structure et le processus de remodelage à long terme des vaisseaux d’ingénierie. L’affichage clair des restes polymériques par microscopie polarisée combinée à la formation image d’OCT pourrait être utile pour évaluer la dégradation d’échafaudage.

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Multimodal d’imagerie rétinienne volumétrique Oblique à balayage Laser ophtalmologique (oSLO) et la tomographie en cohérence optique (OCT)

While fluorescence imaging is widely used in ophthalmology, a large field of view (FOV) three-dimensional (3D) fluorescence retinal image is still a big ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Cathéter de lumière à tir latéral intra-cardiaque pour la surveillance du métabolisme cellulaire à l'aide de la spectroscopie d'absorption transmurale des cœurs de mammifères perfusés

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

Tissue-Engineered Graft for Circumferential Esophageal Reconstruction in Rats

Greffe tissulaire pour la reconstruction oesophagielle circonférence chez les rats

The use of biocompatible materials for circumferential esophageal reconstruction is a technically challenging task in rats and requires an optimal implant ...

Cerebral Blood Flow-Based Resting State Functional Connectivity of the Human Brain using Optical Diffuse Correlation Spectroscopy

Connectivité fonctionnelle de l’état de repos basée sur le flux sanguin cérébral du cerveau humain à l’aide de la spectroscopie optique de corrélation diffuse

To obtain a comprehensive understanding of the human brain, utilization of cerebral blood flow (CBF) as a source of contrast is desired because it is a ...