Name: nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography
Uploaded: 2018-10-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography at JoVE.com

Мы хотели бы отметить науки и технологии планирования проекта в провинции Гуандун Китая (2016B070701007) для поддержки этой работы.

1. разложению PGA леску на основе культуры ткани инженерии судов
<ol><li>Изготовление PGA эшафот<ol>
<li>Шить PGA сетки (диаметром 19 мм и толщиной 1 мм) вокруг Силиконовая трубка, стерилизована окисью этилена (длина 17 см, диаметр 5.0 мм и толщиной 0,3 мм) с помощью швов 5-0.</li>
		<li>Шить политетрафторэтилен?...

<ol>
	<li>Chan-Park, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomimetic+control+of+vascular+smooth+muscle+cell+morphology+and+phenotype+for+functional+tissue-engineered+small-diameter+blood+vessels.">Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).</li><li>Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+tissue+engineering.">Image-guided tissue engineering.</a> Journal of Cellular &amp; Molecular Medicine. 13, 1428-1436 (2009).</li><li>Smith, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+imaging+methodologies+for+3D+tissue+engineering.">A comparison of imaging methodologies for 3D tissue engineering.</a> Microscopy Research &amp; Technique. 73, 1123-1133 (2010).</li><li>Chang, W. G., Niklason, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+short+discourse+on+vascular+tissue+engineering.">A short discourse on vascular tissue engineering.</a> NPJ Regenerative Medicine. 2, (2017).</li><li>Appel, A. A., Anastasio, M. A., Larson, J. C., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+challenges+in+biomaterials+and+tissue+engineering.">Imaging challenges in biomaterials and tissue engineering.</a> Biomaterials. 34, 6615-6630 (2013).</li><li>Rice, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+characterization+of+structure+and+morphology+of+silk+fibroin+biomaterials+using+non-linear+microscopy.">Non-invasive characterization of structure and morphology of silk fibroin biomaterials using non-linear microscopy.</a> Biomaterials. 29, 2015-2024 (2008).</li><li>Niklason, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enabling+tools+for+engineering+collagenous+tissues+integrating+bioreactors,+intravital+imaging,+and+biomechanical+modeling.">Enabling tools for engineering collagenous tissues integrating bioreactors, intravital imaging, and biomechanical modeling.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 3335-3339 (2010).</li><li>Zheng, K., Rupnick, M. A., Liu, B., Brezinski, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+Dimensional+OCT+in+the+Engineering+of+Tissue+Constructs:+A+Potentially+Powerful+Tool+for+Assessing+Optimal+Scaffold+Structure.">Three Dimensional OCT in the Engineering of Tissue Constructs: A Potentially Powerful Tool for Assessing Optimal Scaffold Structure.</a> Open Tissue Engineering &amp; Regenerative Medicine Journal. 2, 8-13 (2009).</li><li>Gurjarpadhye, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+characterization+of+bioengineered+blood+vessels+within+a+bioreactor+using+free-space+and+catheter-based+OCT.">Imaging and characterization of bioengineered blood vessels within a bioreactor using free-space and catheter-based OCT.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 45, 391-400 (2013).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+remodeling+and+structural+characterization+of+degradable+polymer+scaffold-based+tissue-engineered+vascular+grafts+using+optical+coherence+tomography.">In vitro remodeling and structural characterization of degradable polymer scaffold-based tissue-engineered vascular grafts using optical coherence tomography.</a> Cell &amp; Tissue Research. 370, 417-426 (2017).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+natural+history+of+extracellular+matrix+production+in+tissue-engineered+vascular+grafts+during+neovessel+formation.">Characterization of the natural history of extracellular matrix production in tissue-engineered vascular grafts during neovessel formation.</a> Cells Tissues Organs. 195, 60-72 (2012).</li><li>Ye, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+conception+and+realization+of+pulsatile+ventricular+assist+devices-from+Spiral-Vortex+pump+to+Luo-Ye+pump.">The design conception and realization of pulsatile ventricular assist devices-from Spiral-Vortex pump to Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 9, 35-40 (2002).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+optical+coherence+tomography+in+tissue+engineered+blood+vessel+culture+based+on+Luo-Ye+pump.">Application of optical coherence tomography in tissue engineered blood vessel culture based on Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 31, 687-690 (2015).</li><li>Pickering, J. G., Boughner, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+the+age+of+fibrotic+lesions+using+polarized+light+microscopy+and+digital+image+analysis.">Quantitative assessment of the age of fibrotic lesions using polarized light microscopy and digital image analysis.</a> American Journal of Pathology. 138, 1225-1231 (1991).</li><li>Martinho, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+optical+attenuation+coefficient+and+mechanical+tension+of+irradiated+human+cartilage+measured+by+optical+coherence+tomography.">Dependence of optical attenuation coefficient and mechanical tension of irradiated human cartilage measured by optical coherence tomography.</a> Cell Tissue Bank. 16, 47-53 (2015).</li><li>Poirierquinot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+1.5-Tesla+magnetic+resonance+imaging+for+tissue-engineered+constructs:+a+noninvasive+tool+to+assess+three-dimensional+scaffold+architecture+and+cell+seeding.">High-resolution 1.5-Tesla magnetic resonance imaging for tissue-engineered constructs: a noninvasive tool to assess three-dimensional scaffold architecture and cell seeding.</a> Tissue Engineering Part C Methods. 16, 185-200 (2010).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+burst+pressure:+initial+evaluation+of+the+natural+history+of+the+biaxial+mechanical+properties+of+tissue-engineered+vascular+grafts+in+the+venous+circulation+using+a+murine+model.">Beyond burst pressure: initial evaluation of the natural history of the biaxial mechanical properties of tissue-engineered vascular grafts in the venous circulation using a murine model.</a> Tissue Engineering Part A. 20, 346-355 (2014).</li><li>Smart, N., Dube, K. N., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vessel+development+and+insight+towards+neovascular+therapy.">Coronary vessel development and insight towards neovascular therapy.</a> International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 90, 262-283 (2009).</li></ol>

Для создания инженерии судов с структурных и механические свойства аналогичны родной кровеносных сосудов может привести к сократить время для клинического использования и является конечной целью сосудистой техники. Оптические методы визуализации позволяют визуализации сосудистой ...

Ткани инженерии кровеносных сосудов (TEBVs) является наиболее перспективных материалов как идеальный сосудистого трансплантата1. Для того, чтобы развивать графтов клинически полезным с аналогичными структурных и функциональных свойств как родной судов, были разработаны несколько методов для поддержания функции сосудистого2,3. Хотя там были инженерии судов с приемлемым проходимость ставок во время имплантации и клиническое исследование III фазы4, долгосрочные культуры и высокой стоимости также показывают необходимость наблюдения за развитием TEBVs. Понимание процессов роста, модернизация и адаптация внеклеточные matrix(ECM) в TEBVs в среде химико механические biomimetic может предоставить важную информацию для развития сосудистой тканевой инженерии.
Идеальной стратегии для отслеживания развития инженерии судов малого диаметра5 должно быть неразрушающего контроля, стерильные, продольная, трехмерные и количественные. TEBVs условиях различные культуры могут оцениваться этой модальности изображений, включая даже изменения до и после трансплантации сосудов. Необходимо разработать стратегии для описания особенностей жизни инженерии судов. Оптические методы визуализации позволяют визуализации и количественной оценки осаждения ткани и биоматериалов. Другими преимуществами являются возможность включить глубокие ткани и этикетка бесплатные изображения с высоким разрешением6,7. Однако изображение конкретных молекул и менее легко доступны оптического оборудования для мониторинга в реальном времени является значительное практическое препятствие, которое имеет ограниченную широкое применение нелинейной оптической микроскопии. Оптическая когерентная томография (Окт) — это оптический подход с внутрисосудистого изображений модальности как широко используется клинический инструмент направлять сердечной интервенционной терапии8. В литературе метод октября было сообщено о том, как способ оценки толщины стенок TEBVs9,10, в сочетании с позитивных изображений условия для сосудистых тканей инженерных исследований. В то время как динамика инженерии сосудистой роста и реконструкции не наблюдалось.
В этой рукописи мы подробно подготовку биоразлагаемые полимерные основанных на эшафот TEBVs для четырех недель культуры. Человека пупочных артерий сосудистой гладкомышечные клетки (HUASMCs) расширил и посеяны в пористых разложению Полигликолидная кислота (PGA) леса в биореактор. Биоразлагаемые полимеры играть роль в временной субстрат для тканевой инженерии и имеют определенные11деградации ставка. С тем чтобы обеспечить соответствующий матч между деградацией лесов и нео-ткани, ECM и PGA подмостей являются важнейшими факторами для эффективного сосудистого ремоделирования. Система перфузии имитирует биомеханических микроокружения родной судов и поддерживает последовательную деформации под давлением стимуляции.
Цель представленных протокола-изложить стратегию относительно простой и неразрушающего контроля для TEBVs изображений и долгосрочный мониторинг культуры. Этот протокол может использоваться для визуализации морфологических изменений и измерения толщины инженерии судов в условиях иной культуры. Кроме того можно выполнить анализ деградации материалов на основе полимеров в ткани, инженерные строительные леса для идентификации. Комбинируя методы сканирования электрон microscopic(SEM) и поляризационный микроскоп, используемые в этот протокол, корреляции и количественной оценки распределения внеклеточного матрикса и PGA деградации может быть сделано, которая может содействовать оценке эшафот деградация в сочетании с октября изображений.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:797px;" width="797">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PGA mesh</td>
			<td style="width:265px;">Synthecon</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">silicone tube</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">connector</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">intravascular OCT system</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;">ILUMIEN&#8482; OPTIS&#8482; SYSTEM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">scanning electron microscopic</td>
			<td style="width:265px;">Philips&#160;</td>
			<td style="width:149px;">FEI Philips XL-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">polarized microscope</td>
			<td style="width:265px;">Olympus</td>
			<td style="width:149px;">Olympus BX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:216px;">sutures</td>
			<td style="width:265px;">Johnson &#38; Johnson</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:216px;">pulsatile pump</td>
			<td style="width:265px;">Guangdong Cardiovascular Institute</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LightLab Imaging software</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography

Инженерии сосудистых имплантатов с структурно-механические свойства, аналогичные природные кровеносных сосудов, как ожидается, удовлетворять растущий спрос на артериальной объездной. Характеристика динамики роста и модернизации процесса разложению полимер на основе эшафот инженерии тканей кровеносных сосудов (TEBVs) с пульсирующего стимуляции имеет решающее значение для сосудистой тканевой инженерии. Оптические методы визуализации выделяются как мощные инструменты для мониторинга васкуляризации инженерии тканей позволяет с высоким разрешением изображений в реальном времени культуры. Этот документ демонстрирует неразрушающего и быстро в реальном времени визуализации стратегии для мониторинга роста и реконструкции TEBVs в долгосрочные культуры с помощью оптическая когерентная томография (Окт). Оценивается геометрические морфологии, включая сосудистого ремоделирования процесс, толщина стенок и Сравнение толщины TEBV в моменты времени различные культуры и наличие пульсирующего стимуляции. Наконец OCT предоставляет практические возможности для реального времени наблюдения деградации полимера в реконструкции тканях под пульсирующего стимуляции или не и в каждом сегменте судна, по сравнению с оценкой использования деградации полимера Сканирование, microscopic(SEM) электронов и поляризационный микроскоп.

Система трехмерного культуры состояла из палаты культуры в биореактор и перфузии системы с замкнутым циклом жидкости10,13 (рис. 1). Окт изображений катетер был вставлен в дистальный конец Y-Джанкшн и вытащил обратно в силик?...

Watch this Scientific Journal Video about Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography at JoVE.com

Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography

Неразрушающего контроля развития разложению на основе эшафот инженерии тканей кровеносных сосудов с использованием оптическая когерентная томография

Шаг за шагом протокол для неразрушающего контроля и длительного периода наблюдения за процессом сосудистого ремоделирования и эшафот деградации в реальном времени культуры биоразлагаемые полимерные основанных на эшафот инженерии тканей кровеносных сосудов с пульсирующего стимуляции Здесь описывается использование оптическая когерентная томография.

Engineered vascular grafts with structural and mechanical properties similar to natural blood vessels are expected to meet the growing demand for arterial ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области сосудистой ткани инженерии, такие как мониторинг динамики инженерного роста сосудов и ремоделирования в долгосрочной культуре. Основным преимуществом использования оптической скогерентной томографии, или OCT, является то, что она является легкодоступной, в режиме реального времени и неразрушающей стратегией визуализации для характеристики структурных особенностей и процесса реконструкции инженерных сосудов. Демонстрация процедуры также будет Шанмин Лю, и Вентао Ма, техников из моей лаборатории.Чтобы начать эту процедуру, изготовить ЭША эшафот, как описано в текстовом протоколе Dip PGA леса в один моль на литр гидроксида натрия в течение одной минуты, чтобы настроить ледниковую структуру сетки. Затем, замочить леса в ткани культуры класса воды три раза в течение двух минут каждый. Каждый раз, осторожно погладить сухой эшафот с бумагой.Затем высушите строительные леса в капюшоне с воздуходувки в течение одного часа. Чтобы собрать биореактор и y-соединение для oct изображений, во-первых, замочить самостоятельно разработанный стеклянный цилиндрический биореактор, PGA леса, силиконовая трубка, био-совместимые трубки, разъемы, перемешать бар, и оборудование для сборки в 95 процентов этанола бак в течение двух часов. Потяните эшафот PGA через боковые руки биореактора, соединенные с одной стороны с разъемом, а также на другую сторону с y-соединением, используемым для доставки провода руководства OCT.Соберите еще один эшафот PGA в биореактор таким же образом. Приготовь полиэтилен к губам биореактора, затягивая его 4-0 швами. Положите биореактор в бак этанола снова в течение одного часа, прежде чем сушить его на ночь в капюшоне с воздуходувкой на.Теперь, изолировать человека пупочной артерии гладкие мышечные клетки из пупочной артерии человека стандартными методами explant В причине сохранения клеток в PGA леса, избежать капает клеточной подвески на дне биореактора. Кроме того, покрыть биореактор с силиконовой стоппер крышкой как можно скорее после клетки сидения для предотвращения загрязнения. Расширьте и поддерживайте клетки в гладкой среде роста мышц.Семя пупочной артерии человека гладкие мышечные клетки в концентрации 5 миллионов клеток на миллилитр в вышеупомянутой среде культуры на леса PGA. После размещения сэр бар в биореактор, покрыть его силиконовой пробкой крышкой, которая имеет одну трубку питания и три коротких сегментов трубки вставлены для обмена газа. Прикрепите фильтры PTFE 0.22 micron к каждой трубке изменения воздуха и прикрепите одну крышку гепарина к трубке для кормления.Отрегулируйте бар перемешивания со скоростью перемешивания 13 раундов в минуту. Затем соберите стеклянный биореактор, силиконовую крышку пробки и эшафот PGA в культурную систему. Позвольте клеткам придерживаться в течение 45 минут, опираясь на биореактор каждые 15 минут с подслой слева и справа.Теперь подключите насос LOO-OH-YEE, фосфат-буферный солевой мешок, и водитель с биосовместимыми трубками для того, чтобы создать систему изобилия. Откройте драйвер, чтобы заполнить трубки с PBS. Поместите общий биореактор во влажный инкубатор с 5 процентами CO2 при 37 градусах Цельсия.Заполните культурную камеру 450 миллилитров культурной среды. Выращивать семена леса в соответствии со статической культурой в течение одной недели, изменяя культуру среды каждые три-четыре дня, аспирируя половину старой среды через трубку для кормления и пополнения реактора с эквивалентным количеством свежей среды культуры. Чтобы подготовить систему изобилия для изображения OCT, насос жидкости в сумке PBS, чтобы распространить их через биосовместимые трубки и обратно в сумку.Откройте мощность водителя и регулировать настройки насоса с частотой 60 ударов в минуту и выход систолического давления 120 миллиметров ртути. Отрегулируйте механические параметры в соответствии с потребностями тканевой инженерной сосудистой культуры. Нажмите кнопку запуска, чтобы система изобилия работала.Обеспечить исправление пульсирующего моделирования сосудов в течение трех недель путем итеративного давления биосовместимых труб после одной недели статической культуры. Используйте источник света для обеспечения аксиального разрешения от десяти до двадцати микрон и глубины изображения от одного до двух миллиметров для определения структуры тканевых кровеносных сосудов, или TEVBs, на основе частотного домена OCT внутрисосудистой системы визуализации. Включите выключатель питания и откройте программное обеспечение захвата изображения Подключите волоконно-оптический катетер изображения к приводу двигателя и оптического контроллера, с функцией автоматического отступления катетера.Установите параметры скорости получения изображения до десяти кадров в секунду, с автоматической скоростью отката 10 миллиметров в секунду. Теперь прикрепите катетер к y-junction через крышку гепарина с иглой 18-го калибра. Поместите катетер в силиконовую трубку и определите герметичность структуры сетки PGA перед загрузкой эшафота PGA на биореактор.Теперь поместите катетер опрокинуть область интереса. Отрегулируйте устройство отката и проверьте качество изображения. Приобретайте изображения в один, четыре, семь, десять, 14, 17, 21 и 28 дней в культуре для каждого отдельного TEBV.Сохраните эти изображения последовательно с помощью наблюдения в режиме реального времени микроструктуры TEBV, включая поверхностную морфологию, внутреннюю структуру и композицию. Повторите измерение три раза, чтобы получить надежное измерение инженерных судов каждый раз. Захват серии изображений на протяжении всего тестирования с помощью программного обеспечения захвата изображения.Для использования программного обеспечения для анализа изображений для измерения толщины стенок кровеносных сосудов, разработанных тканей, сначала выберите изображение для анализа. Затем щелкните инструмент отслеживания, чтобы автоматически определить внутреннюю сторону ткани инженерии кровеносных сосудов с программным обеспечением и вручную эскиз внешней стороны. На экране появится диаграмма толщины.Повторите измерение в течение пяти раз, чтобы получить надежное измерение конструкций. Рассмотрите возможность использования двух независимых следователей, обязанных получить информацию. Откройте силиконовую крышку пробки, помещенную над биореактором, когда культура закончена, и отбросьте культурную среду.Расслабьте полиэтилен из биореакторных губ и вырежьте ножницами силиконовые трубки с внешней стороны полиэтилена. Урожай TEBVs из биореактора, и разрезать их на разделы для сканирования электронной микроскопии экспертизы. Вытяните поддерживающую силиконовую трубку и зафиксировать секции 4-процентным формальдегидом.Выполните рутинное гистологическое окрашивание трихромом Массона и серьым красным цветом для изучения морфологии коллагена и PGA. Для оценки содержания PGA и компонента коллагена, наблюдать гистологические образцы с sirious красным окрашивания через поляризованный микроскоп. Изображения OCT сравниваются с гистопатологическими находками TEBV после четырех недель культуры.Изображение OCT показывает компактную микроструктуру и специфические компоненты по сравнению с гистологической оценкой. Видна культурная среда, силиконовая трубка, TEBV и фрагмент PGA. Трихромное окрашивание Массона демонстрирует коллагеновые волокна, распределенные в определенном направлении, наряду с остатками PGA в медиаслое инженерных сосудов.Сириус красное окрашивание показывает остатки PGA и коллагенового компонента с помощью поляризованного микроскопа. Сканирующие-электронные микрографы инженерных сосудов демонстрируют компактную микроструктуру. Между тем, этот интралюминальный метод визуализации принимает неразрушающий и легкий мониторинг TEBV, включая процесс реконструкции и визуальную морфологию на месте в долгосрочной культуре.Как показано здесь, ремоделирование происходит раньше, и морфологические изменения проявляются более очевидно в динамической группе через сравнение толщины TEBV. Этот метод прокладывает путь для исследователей в области инженерии сосудистой ткани для изучения особенностей структуры и долгосрочного процесса реконструкции инженерных сосудов. Четкое отображение полимерных остатков с помощью поляризованной микроскопии в сочетании с ОКТ-изображением может быть полезно для оценки деградации лесов.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Магнитно резонансная Эластография методологии по оценке тканей Разработан Construct роста

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Мониторинг стены механики во время установки стента в сосуде

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Integrated Photoacoustic Ophthalmoscopy and Spectral-domain Optical Coherence Tomography

Комплексная Фотоакустический Офтальмоскопия и спектрально-домен Оптическая когерентная томография

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging ...

Protocol for Relative Hydrodynamic Assessment of Tri-leaflet Polymer Valves

Протокол Относительная оценка гидродинамических трехстворчатый клапан полимеров

Limitations of currently available prosthetic valves, xenografts, and homografts have prompted a recent resurgence of developments in the area of ...

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Хирургическая техника для имплантации тканей Engineered сосудистые протезы и последующих<em&gt; В Vivo</em&gt; Мониторинг

The development of Tissue Engineered Vessels (TEVs) is advanced by the ability to routinely and effectively implant TEVs (4-5 mm in diameter) into a large ...

Generation and Grafting of Tissue-engineered Vessels in a Mouse Model

Генерация и прививка тканевой инженерии сосудов в мышиной модели

The construction of vascular conduits is a fundamental strategy for surgical repair of damaged and injured vessels resulting from cardiovascular diseases. ...

Multimodal Volumetric Retinal Imaging by Oblique Scanning Laser Ophthalmoscopy (oSLO) and Optical Coherence Tomography (OCT)

Multimodal Volumetric Retinal Imaging by Oblique Scanning Laser Ophthalmoscopy oSLO and Optical Coherence Tomography OCT

Смешанных объемные сетчатки, Imaging наклонный офтальмоскопия лазерного сканирования (Осло) и оптическая когерентная томография (Окт)

While fluorescence imaging is widely used in ophthalmology, a large field of view (FOV) three-dimensional (3D) fluorescence retinal image is still a big ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Внутрисердечная боковая стрельба Световой катетер для мониторинга клеточного метаболизма с помощью трансмуральной абсорбции спектроскопии Перфизуд млекопитающих сердец

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

Tissue-Engineered Graft for Circumferential Esophageal Reconstruction in Rats

Ткань-инженерный трансплантат для обрезанной реконструкции пищевода у крыс

The use of biocompatible materials for circumferential esophageal reconstruction is a technically challenging task in rats and requires an optimal implant ...

Cerebral Blood Flow-Based Resting State Functional Connectivity of the Human Brain using Optical Diffuse Correlation Spectroscopy

Церебральный поток крови на основе отдыха государства функциональная связь человеческого мозга с помощью оптической диффузной корреляции спектроскопии

To obtain a comprehensive understanding of the human brain, utilization of cerebral blood flow (CBF) as a source of contrast is desired because it is a ...