Name: nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography
Uploaded: 2018-10-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography at JoVE.com

Bu eser desteklemek için bilim ve teknoloji planlama projeyi Çin Guangdong Eyaleti (2016B070701007) kabul etmek istiyoruz.

1. parçalanabilir PGA iskele doku mühendisliği damarları kültür dayalı
<ol><li>PGA iskele imalatı<ol>
<li>PGA mesh (19 mm çap ve 1 mm kalınlığında) Etilen oksit (17 cm uzunluk, 5.0 mm çap ve 0.3 mm kalınlığında) tarafından sterilize silikon tüp etrafında dikmek 5-0 dikiş kullanarak.</li>
		<li>Politetrafloroetilen (ePTFE, 1 cm uzunluk) 4-0 dikiş üzerine her iki ucuna PGA mesh ile dikmek ve 2 mm tarafından üst üste.</li>
		<li>PGA İskele 1 mol/L NaOH 1 dk. için mesh kayma yapısını ayarlam...

<ol>
	<li>Chan-Park, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomimetic+control+of+vascular+smooth+muscle+cell+morphology+and+phenotype+for+functional+tissue-engineered+small-diameter+blood+vessels.">Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).</li><li>Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+tissue+engineering.">Image-guided tissue engineering.</a> Journal of Cellular &amp; Molecular Medicine. 13, 1428-1436 (2009).</li><li>Smith, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+imaging+methodologies+for+3D+tissue+engineering.">A comparison of imaging methodologies for 3D tissue engineering.</a> Microscopy Research &amp; Technique. 73, 1123-1133 (2010).</li><li>Chang, W. G., Niklason, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+short+discourse+on+vascular+tissue+engineering.">A short discourse on vascular tissue engineering.</a> NPJ Regenerative Medicine. 2, (2017).</li><li>Appel, A. A., Anastasio, M. A., Larson, J. C., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+challenges+in+biomaterials+and+tissue+engineering.">Imaging challenges in biomaterials and tissue engineering.</a> Biomaterials. 34, 6615-6630 (2013).</li><li>Rice, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+characterization+of+structure+and+morphology+of+silk+fibroin+biomaterials+using+non-linear+microscopy.">Non-invasive characterization of structure and morphology of silk fibroin biomaterials using non-linear microscopy.</a> Biomaterials. 29, 2015-2024 (2008).</li><li>Niklason, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enabling+tools+for+engineering+collagenous+tissues+integrating+bioreactors,+intravital+imaging,+and+biomechanical+modeling.">Enabling tools for engineering collagenous tissues integrating bioreactors, intravital imaging, and biomechanical modeling.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 3335-3339 (2010).</li><li>Zheng, K., Rupnick, M. A., Liu, B., Brezinski, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+Dimensional+OCT+in+the+Engineering+of+Tissue+Constructs:+A+Potentially+Powerful+Tool+for+Assessing+Optimal+Scaffold+Structure.">Three Dimensional OCT in the Engineering of Tissue Constructs: A Potentially Powerful Tool for Assessing Optimal Scaffold Structure.</a> Open Tissue Engineering &amp; Regenerative Medicine Journal. 2, 8-13 (2009).</li><li>Gurjarpadhye, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+characterization+of+bioengineered+blood+vessels+within+a+bioreactor+using+free-space+and+catheter-based+OCT.">Imaging and characterization of bioengineered blood vessels within a bioreactor using free-space and catheter-based OCT.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 45, 391-400 (2013).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+remodeling+and+structural+characterization+of+degradable+polymer+scaffold-based+tissue-engineered+vascular+grafts+using+optical+coherence+tomography.">In vitro remodeling and structural characterization of degradable polymer scaffold-based tissue-engineered vascular grafts using optical coherence tomography.</a> Cell &amp; Tissue Research. 370, 417-426 (2017).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+natural+history+of+extracellular+matrix+production+in+tissue-engineered+vascular+grafts+during+neovessel+formation.">Characterization of the natural history of extracellular matrix production in tissue-engineered vascular grafts during neovessel formation.</a> Cells Tissues Organs. 195, 60-72 (2012).</li><li>Ye, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+conception+and+realization+of+pulsatile+ventricular+assist+devices-from+Spiral-Vortex+pump+to+Luo-Ye+pump.">The design conception and realization of pulsatile ventricular assist devices-from Spiral-Vortex pump to Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 9, 35-40 (2002).</li><li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+optical+coherence+tomography+in+tissue+engineered+blood+vessel+culture+based+on+Luo-Ye+pump.">Application of optical coherence tomography in tissue engineered blood vessel culture based on Luo-Ye pump.</a> Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 31, 687-690 (2015).</li><li>Pickering, J. G., Boughner, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+the+age+of+fibrotic+lesions+using+polarized+light+microscopy+and+digital+image+analysis.">Quantitative assessment of the age of fibrotic lesions using polarized light microscopy and digital image analysis.</a> American Journal of Pathology. 138, 1225-1231 (1991).</li><li>Martinho, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+optical+attenuation+coefficient+and+mechanical+tension+of+irradiated+human+cartilage+measured+by+optical+coherence+tomography.">Dependence of optical attenuation coefficient and mechanical tension of irradiated human cartilage measured by optical coherence tomography.</a> Cell Tissue Bank. 16, 47-53 (2015).</li><li>Poirierquinot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+1.5-Tesla+magnetic+resonance+imaging+for+tissue-engineered+constructs:+a+noninvasive+tool+to+assess+three-dimensional+scaffold+architecture+and+cell+seeding.">High-resolution 1.5-Tesla magnetic resonance imaging for tissue-engineered constructs: a noninvasive tool to assess three-dimensional scaffold architecture and cell seeding.</a> Tissue Engineering Part C Methods. 16, 185-200 (2010).</li><li>Naito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+burst+pressure:+initial+evaluation+of+the+natural+history+of+the+biaxial+mechanical+properties+of+tissue-engineered+vascular+grafts+in+the+venous+circulation+using+a+murine+model.">Beyond burst pressure: initial evaluation of the natural history of the biaxial mechanical properties of tissue-engineered vascular grafts in the venous circulation using a murine model.</a> Tissue Engineering Part A. 20, 346-355 (2014).</li><li>Smart, N., Dube, K. N., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vessel+development+and+insight+towards+neovascular+therapy.">Coronary vessel development and insight towards neovascular therapy.</a> International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 90, 262-283 (2009).</li></ol>

Oluşturmak için gemi ile yapısal mühendislik ve mekanik özellikleri yerel kan damarları benzer klinik kullanım süresini kısaltmak için yol açabilir ve vasküler mühendislik amacıdır. Optik görüntüleme teknikleri kültür ve pozlama Greftler bir kültür ortamına boyunca bireysel yapıları kısırlık7ödün vermeden izlenemiyor mühendislik doku vasküler belirli bileşenleri, görselleştirme izin. Bu makalede, kültür odası perfüzyon sistemden ayrılır. Nispeten bağımsı...

Kan damarları (TEBVs) doku mühendisliği en umut verici malzeme bir ideal vasküler greft1' dir. Klinik olarak benzer yapısal ve işlevsel özellikleri olarak yerli gemiler ile yararlı olması için Greftler geliştirmek için bir çok teknik vasküler işlevi2,3korumak için tasarlanmıştır. Her ne kadar kabul edilebilir a_ılabilinirse oranları ile mühendislik damarları implantasyon sırasında ve faz III klinik çalışmada4, uzun vadeli kültür ve yüksek maliyet de TEBVs gelişimi izleme gerekliliği gösterir. Hücre dışı matrix(ECM) büyüme, yenileme ve uyum süreçlerinde TEBVs biomimetic kemoterapi-mekanik ortamında anlayış damar doku mühendisliği gelişimi için çok önemli bilgiler sağlar.
Küçük çaplı mühendislik damarları5 gelişimini izlemek için ideal strateji zararsız, steril, boyuna, üç boyutlu ve nicel olmalıdır. TEBVs farklı kültür koşullar altında bile değişiklikler öncesi ve sonrası damar nakli dahil olmak üzere bu görüntüleme yöntemi tarafından değerlendirildi. Mühendislik yaşam gemilerin özelliklerini açıklamak üzere stratejileri ihtiyaç vardır. Optik görüntüleme teknikleri görselleştirme ve miktar Biyomalzeme ve doku birikimi sağlar. Diğer avantajları ile yüksek çözünürlük6,7derin doku ve etiket içermeyen görüntülemede etkinleştirmek için olasılığı vardır. Ancak, görüntü özgü molekülleri ve daha az kolayca erişilebilir optik donanımları, gerçek zamanlı izleme için doğrusal olmayan optik mikroskobu kapsamlı uygulama sınırlı olan önemli bir pratik engel olur. Optik koherens tomografi (OCT) kardiyak girişimsel tedavi8rehberlik için bir çok kullanılan klinik araç olarak damar içi görüntüleme yöntemi ile optik bir yaklaşımdır. Literatürde, Ekim yöntemi TEBVs9,10damar doku mühendisliği araştırma için olumlu görüntüleme yöntemleri ile birleştiğinde, duvar kalınlığı değerlendirmek için bir yol olarak bildirildi. Dinamikleri vasküler mühendislik ise büyüme ve remodeling değil görülmektedir.
Bu makale, biyobozunur polimer iskele tabanlı TEBVs hazırlanması için dört hafta kültür ayrıntı. İnsan göbek arterlerin vasküler düz kas hücreleri (HUASMCs) genişletilmiş ve gözenekli parçalanabilir Poliglikolik Asit (PGA) iskele biyoreaktör içinde içine tohumlari. Biyobozunur polimerler doku mühendisliği için geçici bir substrat rolü oynamak ve bir belirli bozulma hızı11var. İskele bozulması ve neo-doku oluşumu arasında uygun bir eşleşme sağlamak için ECM ve PGA iskele etkili vasküler remodeling için çok önemli faktörlerdir. Perfüzyon sistemi yerli gemilerin biyomekanik microenvironment taklit ve tutarlı bir deformasyon basınç stimülasyon altında tutar.
Sunulan Protokolü amacı görüntüleme TEBVs ve uzun vadeli kültürünü izleme için nispeten basit ve zararsız bir strateji tarif etmektir. Bu iletişim kuralı görselleştirme morfolojik değişiklikler ve farklı kültür koşullar altında mühendislik gemilerin kalınlığı ölçümleri için yararlı olabilir. Ayrıca, polimer esaslı malzemeler bozulması iskele mühendislik doku analizleri için kimlik gerçekleştirilebilir. Elektron tarama yöntemleri birleştirerek microscopic(SEM) ve bu iletişim kuralı, korelasyon ve miktar hücre dışı matriks dağıtım ve PGA yıkımı kullanılan polarize mikroskop, hangi değerlendirilmesi iskele kolaylaştırabilir yapılabilir bozulma OCT görüntüleme ile birlikte.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:797px;" width="797">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PGA mesh</td>
			<td style="width:265px;">Synthecon</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">silicone tube</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">connector</td>
			<td style="width:265px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">intravascular OCT system</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;">ILUMIEN&#8482; OPTIS&#8482; SYSTEM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">scanning electron microscopic</td>
			<td style="width:265px;">Philips&#160;</td>
			<td style="width:149px;">FEI Philips XL-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">polarized microscope</td>
			<td style="width:265px;">Olympus</td>
			<td style="width:149px;">Olympus BX51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:216px;">sutures</td>
			<td style="width:265px;">Johnson &#38; Johnson</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:216px;">pulsatile pump</td>
			<td style="width:265px;">Guangdong Cardiovascular Institute</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LightLab Imaging software</td>
			<td style="width:265px;">St. Jude Medical, Inc</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nondestructive monitoring of degradable scaffold-based tissue-engineered blood vessel development using optical coherence tomography

Yapısal ve mekanik özellikleri doğal kan damarları için benzer ile mühendislik vasküler Greftler atardamar bypass için artan talebi karşılamak için bekleniyor. Büyüme dinamikleri karakterizasyonu ve remodeling süreci parçalanabilir polimer iskele tabanlı doku mühendisliği kan damarlarının (TEBVs) pulsatil stimülasyon ile damar doku mühendisliği için önemlidir. Optik görüntüleme teknikleri vaskülarizasyon mühendislik doku yüksek çözünürlüklü görüntü gerçek zamanlı kültür etkinleştirme izleme için güçlü araçlar olarak göze çarpıyor. Bu kağıt bir zararsız ve hızlı gerçek zamanlı strateji büyüme izlemek için görüntüleme ve TEBVs uzun vadeli kültüründe optik koherens tomografi (OCT) kullanarak remodeling gösteriyor. Geometrik morfoloji vasküler remodeling süreci, duvar kalınlığı ve karşılaştırma TEBV kalınlıkta farklı kültür zaman puan ve pulsatil stimülasyon varlığı da dahil olmak üzere değerlendirilir. Son olarak, OCT veya gerçek zamanlı gözlem altında pulsatil stimülasyon reconstructing dokularda polimer bozulması için pratik olanakları sağlar tarafından değil ve her gemi segmentinde polimer bozulması kullanarak değerlendirmesi ile karşılaştırıldığında Tarama elektron microscopic(SEM) ve polarize mikroskop.

Üç boyutlu kültür sistemi biyoreaktör ve perfüzyon sistemi bir kapalı sıvı döngüsü10,13 (Şekil 1) ile bir kültür odasında oluşuyordu. OCT görüntüleme kateter Y kavşak distal uç eklenen ve görüntüleme için silikon tüp geri çekti. OCT görüntüleme ilk biyobozunur polimer iskele tabanlı TEBVs yapısal karakterizasyon sırasında biyoreaktör ekimi betimlemek için kullanıl...

Watch this Scientific Journal Video about Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography at JoVE.com

Nondestructive Monitoring of Degradable Scaffold-Based Tissue-Engineered Blood Vessel Development Using Optical Coherence Tomography

Geri dönüşlü optik koherens tomografi kullanarak parçalanabilir iskele tabanlı doku mühendisliği kan damarı gelişimi izleme

Zararsız ve uzun-dönem için bir adım adım Protokolü vasküler remodeling ve gerçek zamanlı kültür iskele yıkımı biyobozunur polimer iskele tabanlı doku mühendisliği kan damarlarının pulsatil stimülasyon ile işlem izleme Optik koherens tomografi kullanılarak burada açıklanmıştır.

Engineered vascular grafts with structural and mechanical properties similar to natural blood vessels are expected to meet the growing demand for arterial ...

Bu yöntem, mühendis vasküler büyüme dinamiklerinin izlenmesi ve uzun vadeli kültür boyunca yeniden biçimlenme gibi vasküler doku mühendisliği alanında anahtar soruların cevaplanmasına yardımcı olabilir. Optik koherens tomografi, ya da OCT kullanmanın en büyük avantajı, mühendislik gemilerinyapısal özellikleri ve yeniden şekillendirme sürecini karakterize etmek için hazır, gerçek zamanlı ve tahribatsız görüntüleme stratejisi olmasıdır. Prosedürü gösteren de Shangmin Liu ve Wentao Ma, benim laboratuvar teknisyenleri olacaktır.Bu prosedürü başlatmak için, bir dakika için bir mol-per-litre sodyum hidroksit metin protokolü Dip PGA iskeleler açıklandığı gibi PGA iskele imal, mesh aralıklı yapısını ayarlamak için. Daha sonra, her biri iki dakika doku-kültür sınıf su iskeleleri üç kez ıslatın. Her zaman, hafifçe bir kağıt mendil ile iskele kuru pat.Sonra, bir saat için bir üfleyici ile bir başlık içinde iskelekuru. Oct görüntüleme için biyoreaktör ve y-kavşak monte etmek için, ilk olarak, kendi geliştirdiği cam silindirik biyoreaktör, PGA iskeleler, silikon tüp, biyo-uyumlu tüpler, konektörler, karıştırma çubuğu ve iki saat boyunca yüzde 95 etanol tankı montaj için ekipman ıslatın. PGA iskelesini, bir konektörle bir tarafa bağlanan biyoreaktörün yan kollarından ve OCT kılavuz kablosunu teslim etmek için kullanılan y-kavşağı ile başka bir tarafa çekin.Biyoreaktörde aynı şekilde başka bir PGA iskelesi monte edin. Politetrafloroetilen'i 4-0 dikişle sıkarak biyoreaktör dudaklarına takın. Biyoreaktörü, üfleyici açık bir başlıkta bir gecede kurutmadan önce bir saat boyunca tekrar etanol tankına koyun.Şimdi, standart explant teknikleri ile insan göbek arter düz kas hücrelerini izole PGA iskeleiçine hücreleri kurtarma nedeni, biyoreaktör altında hücre süspansiyon herhangi bir damlama önlemek. Ayrıca, kontaminasyonu önlemek için hücre oturma sonra en kısa sürede silikon-stoper kapağı ile biyoreaktör kapağı. Genişletmek ve düz kas büyüme orta hücreleri korumak.Tohum insan göbek arter düz kas hücreleri pga iskeleler üzerine yukarıdaki kültür ortamda 5 milyon hücre başına mililitre konsantrasyonu. Biyoreaktör bir sir bar yerleştirdikten sonra, bir besleme tüpü ve gaz değişimi için takılı üç kısa boru segmentleri olan silikon stoper kapağı kapağı. Her hava değişim tüpüne PTFE 0,22 mikron filtreler takın ve besleme tüpüne bir heparin kapağı takın.Karıştırma çubuğunu dakikada 13 mermi lik karıştırma hızıyla ayarlayın. Sonra, kültür sistemine cam biyoreaktör, silikon stoper kapağı ve PGA iskele monte. Hücrelerin biyoreaktörü her 15 dakikada bir sola ve sağa doğru bir duruşla yaslayarak 45 dakika yapışmasını bekleyin.Şimdi, loo-OH-YEE pompa, fosfat tamponlu tuzlu çanta ve sürücü biyouyumlu tüpler ile profüzyon sistemi oluşturmak için bağlayın. Tüpleri PBS ile doldurmak için sürücüyü açın. Genel biyoreaktörü 37 santigrat derecede yüzde 5 CO2 ile nemlendirilmiş bir kuvöze yerleştirin.Kültür odasını 450 mililitre kültür ortamıile doldurun. Bir hafta boyunca statik kültür altında tohumlu iskeleler büyümek, beslenme tüpü ile eski ortamın yarısını spirating ve taze kültür ortamı eşdeğer miktarda reaktör doldurarak her üç ila dört günde bir kültür ortamı değiştirerek. OCT görüntüleme için profüzyon sistemi hazırlamak için, biyouyumlu tüpler aracılığıyla bunları sirküle ve geri çanta için PBS çanta sıvıları pompa.Sürücünün gücünü açın ve dakikada 60 atım frekansı ve 120 milimetrecıcı lık bir çıkış sistolik basıncı ile pompa ayarını düzenleyin. Mekanik parametreleri doku mühendisliği vasküler kültürünün ihtiyaçlarına göre ayarlayın. Profüzyon sisteminin çalışması için çalıştır düğmesini tıklatın.Statik kültür bir hafta sonra yinelemeli biyouyumlu tüpler basınç tarafından üç hafta boyunca gemilere düzeltme pulsatil simülasyon sağlayın. On ila yirmi mikron eksenel çözünürlüğü ve doku mühendisliği kan damarlarıveya TEVBs yapısını belirlemek için bir ila iki milimetre görüntü derinliği sağlamak için bir ışık kaynağı kullanın, frekans etki OCT intravasküler görüntüleme sistemine dayalı. Güç düğmesini açın ve görüntü yakalama yazılımını açın Fiber optik görüntüleme kateterini kateter otomatik geri çekilme fonksiyonu ile sürücü motoruna ve optik kumandaya bağlayın.Görüntü edinme hızının parametrelerini saniyede on milimetre otomatik geri çekme hızıyla saniyede on kare olarak ayarlayın. Şimdi, görüntüleme kateterini 18 kalibrelik bir iğneyle heparin kapağı ile y-kavşağına takın. Kateteri silikon tüpün içine yerleştirin ve PGA iskelesini biyoreaktöre yüklemeden önce PGA kafesinin yapı sıkılığını belirleyin.Şimdi, kateter ucunu ilgi alanının üzerine yerleştirin. Geri çekme aygıtını ayarlayın ve görüntü kalitesini kontrol edin. Her bir TEBV için bir, dört, yedi, on, 14, 17, 21 ve 28 günlük kültür görüntüleri edinin.Yüzey morfolojisi, iç yapısı ve bileşimi de dahil olmak üzere TEBV mikroyapısının gerçek zamanlı gözlemi ile bu görüntüleri sırayla kaydedin. Her seferinde tasarlanmış gemilerin güvenilir bir ölçümünü almak için ölçümü üç kez tekrarlayın. Görüntü yakalama yazılımını kullanarak test boyunca bir dizi görüntü yakalayın.Doku mühendisliği kan damarı duvar kalınlığıölçmek için görüntü analizi yazılımı kullanmak için, öncelikle analiz edilecek görüntü seçin. Ardından, doku mühendisliğiyle tasarlanmış kan damarının iç tarafını yazılımla otomatik olarak tanımlamak ve dış tarafı el ile çizmek için izleme aracını tıklatın. Ekranda kalınlık diyagramı görünür.Yapıların güvenilir bir ölçüm almak için beş kez ölçüm tekrarlayın. Bilgi almak la yükümlü iki bağımsız araştırmacı kullanmayı düşünün. Kültür bittiğinde biyoreaktörün üzerine yerleştirilen silikon stoper kapağını açın ve kültür ortamını atın.Biyoreaktör dudaklarından politetrafloroetilen gevşetin ve makas ile politetrafloroetilen dış tarafında silikon tüpler kesti. TebVs'leri biyoreaktörden toplayın ve tarama-elektron mikroskobu incelemesi için kesin. Destekleyici silikon tüp çekin ve yüzde 4 güç formaldehit ile bölümleri düzeltmek.Kollajen ve PGA morfolojisini incelemek için masson'un trikrom ve sirious kırmızısı ile rutin histolojik boyama yapın. PGA içeriğini ve kollajen bileşenini değerlendirmek için, polarize mikroskop ta sirious kırmızı boyama ile histolojik örnekleri gözlemleyin. OCT görüntüleri dört haftalık kültürden sonra TEBV'lerin histopatolojik buluntuları ile karşılaştırılır.OCT görüntüsü, histolojik değerlendirmeile karşılaştırıldığında kompakt mikroyapı ve belirli bileşenleri gösterir. Kültür ortamı, silikon tüp, TEBV ve PGA parçası görülebilir. Masson'un üç renkli boyama, tasarlanmış gemilerin medya katmanındaki PGA kalıntılarıyla birlikte belirli bir yönde dağıtılan kollajen lifleri göstermektedir.Sirius kırmızı boyama polarize mikroskop kullanarak PGA kalıntıları ve kollajen bileşeni ortaya koymaktadır. Mühendislik yapılı gemilerin tarama-elektron mikrografları kompakt bir mikroyapı gösterir. Bu arada, bu intraluminal görüntüleme yöntemi, uzun soluklu kültürde remodeling süreci ve görsel morfoloji dahil olmak üzere TEBV'lerin zararsız ve kolay izlenmesini benimser.Burada gösterildiği gibi, remodeling daha erken gerçekleşir ve morfolojik değişiklikler TEBV kalınlığı nın karşılaştırılması ile dinamik grupta daha belirgin bir şekilde ortaya çıkmaktadır. Bu teknik, vasküler doku mühendisliği alanında araştırmacıların yapı özelliklerini ve mühendislik yapılarının uzun vadeli yeniden biçimlenme sürecini keşfetmelerinin önünü açtır. Polimerik kalıntıların polarize mikroskopi ile açık bir şekilde gösterilmesi, OKK görüntüleme siperatrinin değerlendirilmesinde yararlı olabilir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Doku Değerlendirilmesinde Manyetik Rezonans Elastography Metodoloji Construct Büyüme Tasarlandı

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Bir Gemi Stent Dağıtım sırasında Duvar Mekaniği izlenmesi

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

Integrated Photoacoustic Ophthalmoscopy and Spectral-domain Optical Coherence Tomography

Entegre Photoacoustic Oftalmoskopi ve Spektral-domain optik koherens tomografi

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging ...

Protocol for Relative Hydrodynamic Assessment of Tri-leaflet Polymer Valves

Tri-broşür Polimer Vanalar göreceli hidrodinamik Değerlendirme Protokolü

Limitations of currently available prosthetic valves, xenografts, and homografts have prompted a recent resurgence of developments in the area of ...

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Doku Engineered Vasküler Greftlerinin ve sonraki İmplantasyonunda Cerrahi Tekniği<em&gt; İn Vivo</em&gt; İzleme

The development of Tissue Engineered Vessels (TEVs) is advanced by the ability to routinely and effectively implant TEVs (4-5 mm in diameter) into a large ...

Generation and Grafting of Tissue-engineered Vessels in a Mouse Model

Bir Fare Modeli Doku mühendisliği Kapların Üretimi ve Tırnak

The construction of vascular conduits is a fundamental strategy for surgical repair of damaged and injured vessels resulting from cardiovascular diseases. ...

Multimodal Volumetric Retinal Imaging by Oblique Scanning Laser Ophthalmoscopy (oSLO) and Optical Coherence Tomography (OCT)

Multimodal Volumetric Retinal Imaging by Oblique Scanning Laser Ophthalmoscopy oSLO and Optical Coherence Tomography OCT

Eğik tarama Lazer Ophthalmoscopy (oSLO) ve optik koherens tomografi (OCT) tarafından Multimodal hacimsel Retina Görüntüleme

While fluorescence imaging is widely used in ophthalmology, a large field of view (FOV) three-dimensional (3D) fluorescence retinal image is still a big ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Perfkullanılmış Mammalin kalpleri transmural absorbance spektroskopisi kullanarak hücresel metabolizmayı Izleme için kalp içi yan ateş ışık kateter

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

Tissue-Engineered Graft for Circumferential Esophageal Reconstruction in Rats

Sıçanlarda Çevresel Özofagus Rekonstrüksiyonu için Doku-Mühendislik Greft

The use of biocompatible materials for circumferential esophageal reconstruction is a technically challenging task in rats and requires an optimal implant ...

Cerebral Blood Flow-Based Resting State Functional Connectivity of the Human Brain using Optical Diffuse Correlation Spectroscopy

Optik Diffüz Korelasyon Spektroskopisi ile İnsan Beyninin Serebral Kan Akışı Nadayalı Dinlenme Durumu Fonksiyonel Bağlantısı

To obtain a comprehensive understanding of the human brain, utilization of cerebral blood flow (CBF) as a source of contrast is desired because it is a ...