Name: quantitative cell biology of neurodegeneration in drosophila through unbiased analysis of fluorescently tagged proteins using imagej
Uploaded: 2018-08-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ at JoVE.com

هذا العمل تدعمه شيلا، وديفيد فوينتي الأعصاب الألم برنامج الدراسات العليا زمالة بحثية (إلى J.M.B.)، وبرنامج الزملاء حياة البابا لويس (للبنود و Y.Z. و J.M.B.)، "زمالة مؤسسة" سنايدر-روبنسون بريدوكتورال (للبنود)، تي جون د. . مؤسسة ماكدونالد (للبنود)، العقود، منح من المعاهد الوطنية للصحة (المعاهد الوطنية للصحة) HHSN268201300038C و R21GM119018 و R56NS095893 (R.G.Z.)، ومشروع الباحث تايشان (مقاطعة شاندونغ، جمهورية الصين الشعبية) (إلى R.G.Z.).

1-الاعتبارات والتحضير لتصميم التجربة تحليل الصورة
<ol><li>تحدد مسبقاً الخلوية التشريحية، مناسبة، أو علامات سوبسيلولار لتكون بمثابة معالم لتوحيد منطقة الاهتمام (ROI) عبر عينات مختلفة، على سبيل المثال 4 ', 6-دياميدينو-2-فينيليندولي (DAPI)، علامات غشاء، فلوري مترجمة البروتين، و ما إلى ذلك
</li>
	<li...

<ol>
	<li>Erkkinen, M. G., Kim, M. -. O., Geschwind, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Neurology+and+Epidemiology+of+the+Major+Neurodegenerative+Diseases.">Clinical Neurology and Epidemiology of the Major Neurodegenerative Diseases.</a> Cold Spring Harbor perspectives in biology. , a033118 (2017).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature methods. 9 (7), 671 (2012).</li><li>Mauvezin, C., Ayala, C., Braden, C. R., Kim, J., Neufeld, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+to+monitor+autophagy+in+Drosophila.">Assays to monitor autophagy in Drosophila.</a> Methods. 68 (1), 134-139 (2014).</li><li>Weiss, K. R., Kimura, Y., Lee, W. -. C. M., Littleton, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Huntingtin+aggregation+kinetics+and+their+pathological+role+in+a+Drosophila+Huntington's+disease+model.">Huntingtin aggregation kinetics and their pathological role in a Drosophila Huntington's disease model.</a> Genetics. 190 (2), 581-600 (2012).</li><li>Babcock, D. T., Ganetzky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcellular+spreading+of+huntingtin+aggregates+in+the+Drosophila+brain.">Transcellular spreading of huntingtin aggregates in the Drosophila brain.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 112 (39), E5427-E5433 (2015).</li><li>DeVorkin, L., Gorski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+autophagy+in+Drosophila+using+fluorescent+reporters+in+the+UAS-GAL4+system.">Monitoring autophagy in Drosophila using fluorescent reporters in the UAS-GAL4 system.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (9), (2014).</li><li>Williamson, W. R., Hiesinger, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+developing+and+adult+Drosophila+brains+and+retinae+for+live+imaging.">Preparation of developing and adult Drosophila brains and retinae for live imaging.</a> Journal of visualized experiments: JoVE. (37), (2010).</li><li>Sweeney, S. T., Hidalgo, A., de Belle, J. S., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+adult+Drosophila+brains.">Dissection of adult Drosophila brains.</a> Cold Spring Harbor Protocols. (12), (2011).</li><li>Fox, C. H., Johnson, F. B., Whiting, J., Roller, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formaldehyde+fixation.">Formaldehyde fixation.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 33 (8), 845-853 (1985).</li><li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+for+Drosophila+neural+development.">Mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) for Drosophila neural development.</a> Trends in neurosciences. 24 (5), 251-254 (2001).</li><li>Fischbach, K. -. F., Dittrich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+optic+lobe+of+Drosophila+melanogaster.+I.+A+Golgi+analysis+of+wild-type+structure.">The optic lobe of Drosophila melanogaster. I. A Golgi analysis of wild-type structure.</a> Cell and tissue research. 258 (3), 441-475 (1989).</li><li>Ruan, K., Zhu, Y., Li, C., Brazill, J. M., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+splicing+of+Drosophila+Nmnat+functions+as+a+switch+to+enhance+neuroprotection+under+stress.">Alternative splicing of Drosophila Nmnat functions as a switch to enhance neuroprotection under stress.</a> Nature Communications. 6, 10057 (2015).</li><li>Zhai, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NAD+synthase+NMNAT+acts+as+a+chaperone+to+protect+against+neurodegeneration.">NAD synthase NMNAT acts as a chaperone to protect against neurodegeneration.</a> Nature. 452 (7189), 887 (2008).</li><li>Li, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spermine+synthase+deficiency+causes+lysosomal+dysfunction+and+oxidative+stress+in+models+of+Snyder-Robinson+syndrome.">Spermine synthase deficiency causes lysosomal dysfunction and oxidative stress in models of Snyder-Robinson syndrome.</a> Nat Commun. 8 (1), 1257 (2017).</li><li>Prokop, A., Meinertzhagen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+structure+of+synaptic+contacts+in+Drosophila.">Development and structure of synaptic contacts in Drosophila.</a> Semin Cell Dev Biol. 17 (1), 20-30 (2006).</li><li>Maday, S., Holzbaur, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagosome+biogenesis+in+primary+neurons+follows+an+ordered+and+spatially+regulated+pathway.">Autophagosome biogenesis in primary neurons follows an ordered and spatially regulated pathway.</a> Dev Cell. 30 (1), 71-85 (2014).</li><li>Mizushima, N., Yamamoto, A., Matsui, M., Yoshimori, T., Ohsumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+autophagy+in+response+to+nutrient+starvation+using+transgenic+mice+expressing+a+fluorescent+autophagosome+marker.">In vivo analysis of autophagy in response to nutrient starvation using transgenic mice expressing a fluorescent autophagosome marker.</a> Molecular biology of the cell. 15 (3), 1101-1111 (2004).</li><li>Lee, S., Sato, Y., Nixon, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+lysosomal+dysfunction+causes+cargo-specific+deficits+of+axonal+transport+leading+to+Alzheimer-like+neuritic+dystrophy.">Primary lysosomal dysfunction causes cargo-specific deficits of axonal transport leading to Alzheimer-like neuritic dystrophy.</a> Autophagy. 7 (12), 1562-1563 (2011).</li><li>Vincent, L., Soille, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Watersheds+in+digital+spaces:+an+efficient+algorithm+based+on+immersion+simulations.">Watersheds in digital spaces: an efficient algorithm based on immersion simulations.</a> IEEE Transactions on Pattern Analysis &amp; Machine Intelligence. (6), 583-598 (1991).</li><li>Najman, L., Schmitt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geodesic+saliency+of+watershed+contours+and+hierarchical+segmentation.">Geodesic saliency of watershed contours and hierarchical segmentation.</a> IEEE Transactions on pattern analysis and machine intelligence. 18 (12), 1163-1173 (1996).</li><li>Shiber, A., Breuer, W., Ravid, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+quantification+and+characterization+of+intracellular+protein+aggregates+in+yeast.">Flow cytometric quantification and characterization of intracellular protein aggregates in yeast.</a> Prion. 8 (3), 276-284 (2014).</li><li>Mizushima, N., Yoshimori, T., Levine, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+mammalian+autophagy+research.">Methods in mammalian autophagy research.</a> Cell. 140 (3), 313-326 (2010).</li></ol>

يمكن استخدام البروتوكول الواردة هنا قوة وتكاثر كوانتيتاتي خلية العمليات البيولوجية التي تصور بتصوير المستندة إلى الأسفار. السياق البيولوجي والقيود التقنية بحاجة إلى النظر بعناية لتوجيه تصميم تجريبي. علامات مضيئة من هياكل سوبسيلولار للفائدة، سواء المناعي، صبغي، أو أعرب وراثيا، بحاجة إ?...

أمراض الأعصاب تؤثر على ملايين الناس كل عام، وهو تزايد حالات الإصابة شيخوخة سكان1. بينما كل مرض الأعصاب مسببات فريدة من نوعها، يتم تجميع البروتينات تجمعات وانهيار شبكة بروتيوستاسيس بصمات المرضية الشائعة لكثير من هذه الأمراض. توضيح كيفية تعطيل هذه العمليات المترابطة والأساسية تخفق لتسهم في وفاة الخلل والخلايا العصبية أمر بالغ الأهمية لفهم أمراض الأعصاب، فضلا عن توجيه التدخلات العلاجية. تصوير المستندة إلى الأسفار يسمح للتحقيق في هذه العمليات المعقدة والديناميكية في الخلايا العصبية، وقد ساهم إلى حد كبير في فهمنا لبيولوجيا الخلايا العصبية. تحليل البروتينات فلوريسسينتلي المعلمة يمثل تحديا، لا سيما عندما يتم إجراء التجارب في فيفو، سبب الأنسجة المدمجة عالية وأنواع الخلايا المختلفة وعدم تجانس الخصائص المورفولوجية. ساعد يدوياً التقدير الكمي هو بأسعار معقولة وواضحة، ولكن في كثير من الأحيان مضيعة للوقت وعرضه للتحيز البشري. ولذلك، هناك حاجة لنهج غير متحيز، واستنساخه، وموجودا لاستخراج البيانات القابلة للقياس الكمي من التصوير الدراسات.
وقد اوجزنا سير عمل بسيطة وقابلة للتكيف باستخدام فيجي/إيماجيج، صورة قوية، ويمكن الوصول إليها بحرية تجهيز البرمجيات2،3، لاستخراج البيانات الكمية من دراسات التصوير fluorescence في نماذج تجريبية من نيوروديجينيريشن استخدام المورفولوجية. باتباع هذا البروتوكول التحديد الكمي لتجميع البروتين والتمويه أوتوفاجيك – هما الخلية السمات البيولوجية التي ذات صلة وثيقة بعلم الأمراض مرض الأعصاب-أظهرنا حساسية وإمكانية تكرار نتائج هذا النهج. وكشف تحليل البروتينات هونتينجتين متحولة المعلمة فلوريسسينتلي (Htt) في الفص البصري المورفولوجية في عدد وحجم وكثافة المجاميع البروتين. يمكننا تصور مراسل فلورسنت جنبا إلى جنب للتمويه أوتوفاجيك داخل النظام المرئي المورفولوجية ، الذي يعرض إشارات الانبعاثات المختلفة تبعاً للبيئة يغلب4. التحليل القائم على راتيوميتريك للمراسل جنبا إلى جنب يسمح لطريقة عرض الكمية وشاملة للتمويه يحلول أوتوفاجي من تشكيل أوتوفاجوسومي، والنضج، والنقل إلى تدهور في يحلول، وأبرز بالإضافة إلى ذلك ضعفا المقصورات تعطلت في ظروف الأعصاب. الأهم من ذلك، في كل التحليلات نفذنا خطوات العتبة وتجزئة شبه الآلي لدينا بروتوكول للتقليل من التحيز فاقداً للوعي وزيادة قوة أخذ العينات وتقدم معياراً تيسير إجراء المقارنات بين دراسات مماثلة. سير العمل مباشرة يهدف إلى جعل قوية الإضافات فيجي/إيماجيج (وضعها علماء الكمبيوتر على أساس خوارزميات الرياضيات) أكثر يسرا نيوروبيولوجيستس والمجتمع علوم الحياة بصفة عامة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1102">
	<tbody>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:347px;">SYLGARD(R) 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td style="width:164px;">Dow Corning Corporation</td>
			<td style="width:243px;">PF184250</td>
			<td style="width:349px;">Dissection dish</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:347px;">Falcon 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish</td>
			<td style="width:164px;">Corning</td>
			<td style="width:243px;">351008</td>
			<td style="width:349px;">Dissection dish</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Dumont #5 Forceps</td>
			<td style="width:164px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:243px;">11251-20</td>
			<td style="width:349px;">Dissection tool</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:164px;">Sigma</td>
			<td style="width:243px;">S3014</td>
			<td style="width:349px;">PBS solution</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Sodium Phosphate Dibasic&#160;</td>
			<td style="width:164px;">Sigma</td>
			<td style="width:243px;">S5136</td>
			<td style="width:349px;">PBS solution</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Potassium Phosphate Monobasic</td>
			<td style="width:164px;">Sigma</td>
			<td style="width:243px;">P5655</td>
			<td style="width:349px;">PBS solution</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Triton&#160;X-100</td>
			<td style="width:164px;">Sigma</td>
			<td style="width:243px;">T9284</td>
			<td style="width:349px;">Washing and antibody incubaton solution.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">37% Formaldehyde</td>
			<td style="width:164px;">VWR</td>
			<td style="width:243px;">10790-710</td>
			<td style="width:349px;">Fixation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Disposable Microcentrifuge Tubes (0.5mL, blue)</td>
			<td style="width:164px;">VWR</td>
			<td style="width:243px;">89000-022</td>
			<td style="width:349px;">Fixation, washing, and antibody incubaton.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Plain and Frosted Micro Slides (25&#215;75mm)</td>
			<td style="width:164px;">VWR</td>
			<td style="width:243px;">48312-004</td>
			<td style="width:349px;">Slides for confocal imaging</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Micro Cover Glasses, rectangular (22&#215;40mm)</td>
			<td style="width:164px;">VWR</td>
			<td style="width:243px;">48393-172</td>
			<td style="width:349px;">Slides for confocal imaging</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Rubber Cement</td>
			<td style="width:164px;">Slime</td>
			<td style="width:243px;">1051-A</td>
			<td style="width:349px;">Mounting</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:347px;">VECTASHIELD Antifade Mounting Medium</td>
			<td style="width:164px;">Vector Laboratories, Inc.</td>
			<td style="width:243px;">H-1000</td>
			<td style="width:349px;">Mounting</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">Scotch Magic 810 Invisible Tape (19mm&#215;25.4m)</td>
			<td style="width:164px;">3M Company</td>
			<td style="width:243px;">810</td>
			<td style="width:349px;">Mounting</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:347px;">Normal Goat Serum</td>
			<td style="width:164px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:243px;">PCN5000</td>
			<td style="width:349px;">Antibody incubaton</td>
		</tr>
		<tr height="76">
			<td height="76" style="height:76px;width:347px;">DAPI (4&#39;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)&#160;</td>
			<td style="width:164px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:243px;">D1306</td>
			<td style="width:349px;">Nucleic acid staining. Dissolve in deionized water to make a 5 mg/mL stock solution and store at -80&#176;C. Dilute to a working concentration of 10-20 &#956;g/mL in PBTx.</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:347px;">3.5X-90X Stereo Zoom Inspection Industrial Microscope</td>
			<td style="width:164px;">AmScope</td>
			<td style="width:243px;">SM-1BNZ</td>
			<td style="width:349px;">Dissection scope. Equipped with 6W LED Dual Gooseneck Illuminator</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">ImageJ/Fiji</td>
			<td style="width:164px;">NIH</td>
			<td style="width:243px;">v1.51u</td>
			<td style="width:349px;">With SCF_MPI_CBG plugins (version 1.1.2)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:347px;">FV1000-IX81 Confocal-laser Scanning Microscope</td>
			<td style="width:164px;">Olympus</td>
			<td style="width:243px;"></td>
			<td style="width:349px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Recombinant Construct</td>
			<td>Bloomington Drosophila Stock Center</td>
			<td style="width:243px;">BL37749</td>
			<td style="width:349px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative cell biology of neurodegeneration in drosophila through unbiased analysis of fluorescently tagged proteins using imagej

مع تزايد انتشار أمراض الأعصاب، من المهم فهم الفيزيولوجيا المرضية الكامنة التي تؤدي إلى الخلل في الخلايا العصبية وفقدان. تكنولوجيات وأدوات التصوير القائم على الأسفار تمكين تحليل لم يسبق لها مثيل للعمليات العصبية الحيوية سوبسيلولار، ومع ذلك لا يزال هناك حاجة إلى اتباع نهج غير متحيز، واستنساخه، وموجودا لاستخراج البيانات القابلة للقياس الكمي من التصوير الدراسات . قمنا بتطوير سير عمل بسيطة وقابلة للتكيف لاستخراج البيانات الكمية من دراسات التصوير القائم على الأسفار باستخدام نماذج المورفولوجية نيوروديجينيريشن. على وجه التحديد، يمكننا وصف نهج شبه الآلي، وسهلة لمتابعة استخدام فيجي/إيماجيج لتحليل العمليات الخلوية هما: أولاً، نحن قياس محتوى البروتين الكلي والشخصية في الفص البصري المورفولوجية استخدام المسخ معلم فلوري البروتينات هونتينجتين؛ وثانيا، نقيم التمويه يحلول أوتوفاجي في نظام البصرية المورفولوجية الكمي على أساس راتيوميتريك لمراسل الفلورسنت جنبا إلى جنب مع أوتوفاجي. الأهم من ذلك، يتضمن البروتوكول الواردة هنا خطوة تقسيم شبه الآلي لضمان يتم تحليل جميع الهياكل الفلورية إلى أدنى حد تحيز الانتقاء وزيادة دقة مقارنات دقيقة. يمكن توسيع هذا النهج لتحليل الهياكل البيولوجية الأخرى الخلية وعمليات متورطين في نيوروديجينيريشن، مثل بونكتا البروتينية (حبيبات الإجهاد ومجمعات متشابك)، كذلك غشاء ربط الأجزاء الأخرى (الميتوكوندريا و غشاء الحويصلات الاتجار بالبشر). يوفر هذا الأسلوب الموحد، بعد إشارة قابلة للتكيف نقطة لتحليل الصور والقياس الكمي، ويمكن تيسير والموثوقية وإمكانية تكرار نتائج عبر الحقل، وفي نهاية المطاف تعزيز فهم الميكانيكية نيوروديجينيريشن.

التحديد الكمي لعدد ومجال، وكثافة للمعلمة فلوريسسينتلي المجاميع Htt المسخ في الفص البصري المورفولوجية
للتحقيق في تجميع البروتين تجمعات في الجهاز العصبي المركزي لنموذج المورفولوجية لمرض هنتنغتون، معلم RFP المسخ Htt البشرية مع غير ال...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ at JoVE.com

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

بيولوجيا الخلية كمية من نيوروديجينيريشن في المورفولوجية من خلال تحليل غير منحازة للبروتينات فلوريسسينتلي المعلمة باستخدام إيماجيج

لقد قمنا بتطوير سير عمل بسيطة وقابلة للتكيف لاستخراج البيانات الكمية من دراسات بيولوجية الخلية المستندة إلى تصوير fluorescence تجميع البروتين والتمويه أوتوفاجيك في الجهاز العصبي المركزي لنماذج المورفولوجية نيوروديجينيريشن.

With the rising prevalence of neurodegenerative diseases, it is increasingly important to understand the underlying pathophysiology that leads to neuronal ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

Automated Sholl Analysis of Digitized Neuronal Morphology at Multiple Scales

الآلي Sholl تحليل الصرف متعلق بالخلايا العصبية رقمية على مستويات متعددة

Neuronal morphology plays a significant role in determining how neurons function and communicate1-3.  Specifically, it affects the ability of neurons to ...

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

يعاير الحركي ، والتعلم ، والذاكرة في العجز ذبابة الفاكهة نماذج من تنكس عصبي

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of ...

Quantitative Analysis of Synaptic Vesicle Pool Replenishment in Cultured Cerebellar Granule Neurons using FM Dyes

تحليل كمي متشابك الحويصلة التجديد حمام سباحة في الخلايا العصبية مثقف الحبيبية للدماغ باستخدام الأصباغ FM

After neurotransmitter release in central nerve terminals, SVs are rapidly retrieved by endocytosis.  Retrieved SVs are then refilled with ...

Spectral Confocal Imaging of Fluorescently tagged Nicotinic Receptors in Knock-in Mice with Chronic Nicotine Administration

متحد البؤر التصوير الطيفي من المستقبلات النيكوتينية الموسومة Fluorescently في نوك في الفئران مع الإدارة النيكوتين المزمن

Ligand-gated ion channels in the central nervous system (CNS) are implicated in numerous conditions with serious medical and social consequences.  For ...

Quantitative Analysis of Climbing Defects in a Drosophila Model of Neurodegenerative Disorders

التحليل الكمي من العيوب تسلق في نموذج ذبابة الفاكهة من الاضطرابات العصبية

Locomotive defects resulting from neurodegenerative disorders can be a late onset symptom of disease, following years of subclinical degeneration, and ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

في نقل فيفو جين لخلايا شوان في العصب القوارض وركي من Electroporation لل

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

Mass Histology to Quantify Neurodegeneration in Drosophila

Mass Histology to Quantify Neurodegeneration in Drosophila

كتلة الأنسجة لتحديد تنكس عصبي في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Progressive neurodegenerative diseases like Alzheimer&#39;s disease (AD) or Parkinson&#39;s disease (PD) are an increasing threat to human health ...

Using Linear Agarose Channels to Study Drosophila Larval Crawling Behavior

Using Linear Agarose Channels to Study Drosophila Larval Crawling Behavior

عن طريق القنوات الخطي الاغاروز لدراسة<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; اليرقات الزحف السلوك

Drosophila larval crawling is emerging as a powerful model to study neural control of sensorimotor behavior. However, larval crawling behavior on flat ...

Quantitative Analysis of Neuronal Dendritic Arborization Complexity in Drosophila

Quantitative Analysis of Neuronal Dendritic Arborization Complexity in Drosophila

التحليل الكمي لتعقيد أربوريزاتيون الجذعية العصبية في المورفولوجية

Dendrites are the branched projections of a neuron, and dendritic morphology reflects synaptic organization during the development of the nervous system. ...

An Unbiased Approach of Sampling TEM Sections in Neuroscience

نهج غير منحازة لأخذ العينات الأقسام تيم في علم الأعصاب

Investigations of the ultrastructural features of neurons and their synapses are only possible with electron microscopy. Especially for comparative ...