Name: multimodal bioluminescent and positronic-emission tomography/computational tomography imaging of multiple myeloma bone marrow xenografts in nog mice
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Multimodal Bioluminescent and Positronic-emission Tomography/Computational Tomography Imaging of Multiple Myeloma Bone Marrow Xenografts in NOG Mice at JoVE.c

עבודה זו נתמכה על ידי grant1I01BX001532 VA ההצטיינות מן ארצות הברית מחלקת ותיקי לענייני ביו מעבדות מחקר ומקבל שירות פיתוח (קריינות) P.F., ולאחר E.C. תמיכה (VA המדע קליני R & D שירות . ראויות I01CX001388 פרס), שיקום VA R & D שירות (I01RX002604 פרס הצטיינות). תמיכה נוספת הגיעה מענק זרע סגל אוניברסיטת קליפורניה בלוס אנג'לס כדי J.K. תכנים אלה ואינן מייצגות בהכרח את נופי את בנו המחלקה לענייני חיילים משוחררים או הממשלה.

כל ההליכים בבעלי חיים המתוארים להלן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של מערכת הבריאות VA לוס אנג'לס רבתי, בוצעו בתנאים סטריליים ונטולת הפתוגן.
1. הכנת לבטא לוציפראז 8226 תאים (8226-לוק)
<ol><li>לשמור על הקו האנושי תא מ מ, 8226, בינוני RPMI-1640 בתוספת 10% סרום שור עובר?...

<ol>
	<li>Raab, M. S., Podar, K., Breitkreutz, I., Richardson, P. G., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+Myeloma.">Multiple Myeloma.</a> The Lancet. 374 (9686), 324-339 (2009).</li><li>Galson, D. L., Silbermann, R., Roodman, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Multiple+Myeloma+Bone+Disease.">Mechanisms of Multiple Myeloma Bone Disease.</a> BoneKEy Reports. 1, 135 (2012).</li><li>Anderson, K. C., Carrasco, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+Myeloma.">Pathogenesis of Myeloma.</a> Annual Review of Pathology. 6, 249-274 (2011).</li><li>Reagan, M. R., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Navigating+the+Bone+Marrow+Niche:+Translational+Insights+and+Cancer-Driven+Dysfunction.">Navigating the Bone Marrow Niche: Translational Insights and Cancer-Driven Dysfunction.</a> Nature Reviews Rheumatology. 12 (3), 154-168 (2016).</li><li>Frost, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+Target+of+Rapamycin+Inhibitors+Induce+Tumor+Cell+Apoptosis+in+Vivo+Primarily+by+Inhibiting+Vegf+Expression+and+Angiogenesis.">Mammalian Target of Rapamycin Inhibitors Induce Tumor Cell Apoptosis in Vivo Primarily by Inhibiting Vegf Expression and Angiogenesis.</a> Journal of Oncology. 2013, 897025 (2013).</li><li>Mysore, V. S., Szablowski, J., Dervan, P. B., Frost, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+DNA-Binding+Molecule+Targeting+the+Adaptive+Hypoxic+Response+in+Multiple+Myeloma+Has+Potent+Antitumor+Activity.">A DNA-Binding Molecule Targeting the Adaptive Hypoxic Response in Multiple Myeloma Has Potent Antitumor Activity.</a> Molecular Cancer Research. 14 (3), 253-266 (2016).</li><li>Podar, K., Chauhan, D., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+Marrow+Microenvironment+and+the+Identification+of+New+Targets+for+Myeloma+Therapy.">Bone Marrow Microenvironment and the Identification of New Targets for Myeloma Therapy.</a> Leukemia. 23 (1), 10-24 (2009).</li><li>Campbell, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laglambda-1:+A+Clinically+Relevant+Drug+Resistant+Human+Multiple+Myeloma+Tumor+Murine+Model+That+Enables+Rapid+Evaluation+of+Treatments+for+Multiple+Myeloma.">Laglambda-1: A Clinically Relevant Drug Resistant Human Multiple Myeloma Tumor Murine Model That Enables Rapid Evaluation of Treatments for Multiple Myeloma.</a> International Journal of Oncology. 28 (6), 1409-1417 (2006).</li><li>Miyakawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+New+Model+of+Human+Multiple+Myeloma+Using+Nod/Scid/Gammac(Null)+(Nog)+Mice.">Establishment of a New Model of Human Multiple Myeloma Using Nod/Scid/Gammac(Null) (Nog) Mice.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 313 (2), 258-262 (2004).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nod/Scid/Gamma(C)(Null)+Mouse:+An+Excellent+Recipient+Mouse+Model+for+Engraftment+of+Human+Cells.">Nod/Scid/Gamma(C)(Null) Mouse: An Excellent Recipient Mouse Model for Engraftment of Human Cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Frost, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Antitumor+Effects+of+the+Mtor+Inhibitor+Cci-779+against+Human+Multiple+Myeloma+Cells+in+a+Xenograft+Model.">In Vivo Antitumor Effects of the Mtor Inhibitor Cci-779 against Human Multiple Myeloma Cells in a Xenograft Model.</a> Blood. 104 (13), 4181-4187 (2004).</li><li>Asosingh, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+Hypoxic+Bone+Marrow+Microenvironment+in+5t2mm+Murine+Myeloma+Tumor+Progression.">Role of the Hypoxic Bone Marrow Microenvironment in 5t2mm Murine Myeloma Tumor Progression.</a> Haematologica. 90 (6), 810-817 (2005).</li><li>Storti, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-Inducible+Factor+(Hif)-1alpha+Suppression+in+Myeloma+Cells+Blocks+Tumoral+Growth+in+Vivo+Inhibiting+Angiogenesis+and+Bone+Destruction.">Hypoxia-Inducible Factor (Hif)-1alpha Suppression in Myeloma Cells Blocks Tumoral Growth in Vivo Inhibiting Angiogenesis and Bone Destruction.</a> Leukemia. 27 (8), 1697-1706 (2013).</li><li>Fryer, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+Novel+Mouse+Model+of+Multiple+Myeloma+and+Its+Use+in+Preclinical+Therapeutic+Assessment.">Characterization of a Novel Mouse Model of Multiple Myeloma and Its Use in Preclinical Therapeutic Assessment.</a> PLoS One. 8 (2), e57641 (2013).</li><li>Gould, S. J., Subramani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Firefly+Luciferase+as+a+Tool+in+Molecular+and+Cell+Biology.">Firefly Luciferase as a Tool in Molecular and Cell Biology.</a> Analytical Biochemistry. 175 (1), 5-13 (1988).</li><li>Czernin, J., Phelps, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positron+Emission+Tomography+Scanning:+Current+and+Future+Applications.">Positron Emission Tomography Scanning: Current and Future Applications.</a> Annual Review Medicine. 53, 89-112 (2002).</li><li>Pandey, M. K., Bhattacharyya, F., Belanger, A. P., Wang, S. Y., DeGrado, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pet+Imaging+of+Fatty+Acid+Oxidation+and+Glucose+Uptake+in+Heart+and+Skeletal+Muscle+of+Rats:+Effects+of+Cpt-1+Inhibition.">Pet Imaging of Fatty Acid Oxidation and Glucose Uptake in Heart and Skeletal Muscle of Rats: Effects of Cpt-1 Inhibition.</a> Circulation. 122 (21), (2010).</li><li>Wang, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+Vivo+Molecular+Imaging+Probe+(18)F-Annexin+B1+for+Apoptosis+Detection+by+Pet/Ct:+Preparation+and+Preliminary+Evaluation.">An in Vivo Molecular Imaging Probe (18)F-Annexin B1 for Apoptosis Detection by Pet/Ct: Preparation and Preliminary Evaluation.</a> Apoptosis. 18 (2), 238-247 (2013).</li></ol>

למרות מגוון דגמים xenograft פרה של מ מ6,9,11,12,13, היכולת ללמוד את האינטראקציות הגידול/מוניטור בתוך microenvironment מוניטור נשאר קשה 14. מהטכניקות שתוארו כאן מאפשרים engraftment מהיר ולא לשחזור 8226-לוק גידולים...

מ מ היא מחלה חשוכת מרפא של פלזמה ממאיר תאי-B לחדור ויטביע וגורמים להרס העצם, אנמיה, פגיעה כלייתית, זיהום. מ מ עד 10% - 15% של גידולים ממאירים hematological כל1 הנסיעה הוא הסרטן השכיח ביותר לערב את שלד2. הפיתוח של מ מ נובע השינוי oncogenic של תאים פלזמה מאריכים הנקבעים במרכזים נבטי של רקמות הלימפה לפני בסופו של דבר ביות מוניטור3. ויטביע מאופיין על-ידי נישות הטרוגנית מאוד; כולל רכיבים הסלולר מגוונות וקריטיים, אזורים של פו נמוך2 (היפוקסיה), vascularization נרחב, מורכבים מטריצות חוץ-תאית ציטוקין ורשתות פקטורי גדילה, אשר כולם לתרום tumorgenesis מ מ4. לפיכך, הפיתוח של מודל xenograft מ"מ המופץ מאופיין על ידי גידולים הם אך ורק engrafted ב ויטביע יהיה כלי רב עוצמה, הרלוונטית קלינית ללמוד מ מ פתולוגיה ויוו5,6. עם זאת, מכשולים טכניים רבים ניתן להגביל את האפקטיביות של רוב הדגמים xenograft, שהופך אותם יקר וקשה ליישם. זה כולל בעיות הקשורות engraftment גידול עקבי, לשחזור בתוך הגומחה מוניטור, זמן ממושך הגידול ופיתוח מגבלות ביכולת להתבונן ולמדוד ישירות שינויים של הגידול צמיחה/הישרדות ללא צורך להקריב עכברים במהלך ניסוי7,8.
פרוטוקול זה משתמש במודל xenograft ששונה בתחילה שפותח על-ידי. Miyakawa et al. 9, שבו התוצאה מהווה אתגר (IV) תוך ורידי עם תאים מיאלומה "המופץ" גידולים בעקביות ובאופן reproducibly engraft עכברים מוניטור של NOD/SCID/IL-2γ(null) (ליקר)10. הפריט החזותי בחיי עיר של גידולים אלה מושגת על ידי תרביות תאים יציב של הקו תא מ מ 8226 האנושי עם לוק אלל, באופן סדרתי מדידת השינויים רבנות בלי המיוצר על ידי אלו תאים סרטניים engrafted6. חשוב, מודל זה ניתן להרחיב לנצל שונים המבטאים לוק אנושי מ מ תא קווים אחרים (למשל, U266 ו- OPM2) עם נטייה דומה במיוחד engraft בשלד של עכברים NOG. הזיהוי של הגידולים על ידי הדמיה ביולומנאסן של העכברים לאחר מדידת ספיגת של הגששים radiopharmaceutical (כגון 18F-FDG) על ידי כן ביחד, דבר זה מאפשר אפיון נוסף של קריטי הביוכימי מסלולים (קרי, שינויים בחילוף חומרים, שינויים היפוקסיה ו של אינדוקציה של אפופטוזיס) בתוך microenvironment הגידול/מוניטור. נקודות החוזק העיקרי של מודל זה יכול להיות מודגשים בשל הזמינות של מגוון רחב של radiolabeled, זוהרים פלורסנט הגששים וסמנים שניתן ללמוד מ מ התקדמות, פתולוגיה בתוך vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>8226 human myeloma cell line</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ Mice (NOG)</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>5557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VivoGlo Luciferin substrate</td>
			<td>Promega</td>
			<td>P1041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypoxyprobe-1Kit</td>
			<td>HPL</td>
			<td>HP1-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-CD45 (clone H130)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555483</td>
			<td>Used for flow cytometry to identify human CD45+ tumor cells in BM exudate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rabbit anti-human CD45 (clone D3F8Q)</td>
			<td>Cell Signaling Technology</td>
			<td>70527</td>
			<td>Primary antibody used for Immunohistochemistry of excised bone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-rabbit IgG (HRP conjugated)</td>
			<td>ABCAM</td>
			<td>ab205718</td>
			<td>Seconday antibody used for Immunohistochemistry of excised bone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual-Luciferase Reporter Assay System</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E1910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pGL4.5 Luciferase Reporter Vector</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E1310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Lumina XRMS In Vivo Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sofie G8 PET/CT Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multimodal bioluminescent and positronic-emission tomography/computational tomography imaging of multiple myeloma bone marrow xenografts in nog mice

מיאלומה נפוצה (מ מ) גידולים engraft במח העצם (מוניטור), הישרדות והתקדמות שלהם תלויות לאינטרקציות מורכבות מולקולרית, תאית קיימים בתוך microenvironment הזה. עדיין microenvironment מוניטור לא יכול להיות בקלות משוכפל במבחנה, אשר פוטנציאל מגביל את הרלוונטיות הפיזיולוגיות של רבים במבחנה , שמחוץ ניסיוניות. נושאים אלה ניתן להתגבר על ידי ניצול מודל xenograft ב אילו לוציפראז (לוק)-תאים מ"מ 8226 transfected engraft במיוחד שלד העכבר. כאשר אלו עכברים מקבלים את המצע המתאים, D-luciferin, את ההשפעות של טיפול על הגידול והישרדות ניתן לנתח אותם על ידי מדידת שינויים של תמונות זוהרים (בלי) המיוצר על ידי גידולים בתוך vivo. נתונים אלה רבנות בלי בשילוב עם ניתוח פוזיטרונים (PET/CT) פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/חישובית באמצעות הסמן מטבולית 2-deoxy - 2 - (18F) פטור-D-גלוקוז (18F-FDG) משמש כדי לעקוב אחר השינויים בחילוף החומרים גידול לאורך זמן. פלטפורמות הדמיה אלה מאפשרים למדידות לא פולשנית מרובות בתוך microenvironment הגידול/מוניטור.

במחקרים טייס הראשונית, זריקות הרביעי של תאים 8226-לוק לתוך הנד/SCID עכברים לא לפתח גידולים BM-engrafted מ מ, למרות קשקשיים ממ גידולים היו בקלות נוצר (100% אחוזי הצלחה). לעומת זאת, אתגרים הרביעי עם תאים 8226 לתוך המשקה עכברים המופקים (במרחק של-15-25 ימים) גידולים השלד (ולא רק לעתים נדירות בנו?...

Watch this Scientific Journal Video about Multimodal Bioluminescent and Positronic-emission Tomography/Computational Tomography Imaging of Multiple Myeloma Bone Marrow Xenografts in NOG Mice at JoVE.c

Multimodal Bioluminescent and Positronic-emission Tomography/Computational Tomography Imaging of Multiple Myeloma Bone Marrow Xenografts in NOG Mice

הדמיה עם מודאלים מרובים זוהרים, פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/חישובית טומוגרפיה של מיאלומה נפוצה מח עצם Xenografts בעכברים ליקר ביצים

כאן נשתמש זוהרים, רנטגן, והדמיה פליטת פוזיטרונים טומוגרפיה/שחושב טומוגרפיה ללמוד איך מעכבים פעילות mTOR משפיעה על engrafted-מח עצם מיאלומה גידולים במודל xenograft. דבר זה מאפשר ניתוחים פיזיולוגית הרלוונטיים, לא פולשנית, והן עם מודאלים מרובים של מיאלומה נגד ההשפעה של טיפולים מיקוד engrafted מח עצם מיאלומה גידולים ויוו.

Multiple myeloma (MM) tumors engraft in the bone marrow (BM) and their survival and progression are dependent upon complex molecular and cellular ...

שיטה זו יכולה לשמש כדי לענות על שאלות מפתח על התפקיד של מיקרו-סביבה מח העצם ואת ההישרדות של גידולים מיאלומה חריטה. היתרון העיקרי של הליך זה הוא שניתן ליישם אותו על מחקרים אנטי-תרופתיים אורך ושמש כדי לסמן מסלולים ביוכימיים מרובים באופן לא פולשני. ביום הניסוי לשטוף לראשונה את 8226 תאים transfacted לוציפראז שלוש פעמים ב PBS קר כקרח ב 200 RCF במשך חמש דקות צנטריפוגה ו resuspend את גלולה בקרח טרי קר PBS בחמש פעמים עשרה לתאים השישי לכל 200 microliters של קרח קר PBS לכל עכבר.הבא לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר NOG הרדמה בן ארבעה עד שישה שבועות ולהחיל משחה עיניים על העיניים של החיה. לטעון את התאים לתוך מזרק אינסולין מיליליטר אחד מצויד מחט 26 מד. להזריק את כל נפח התאים לתוך וריד הזנב של החיה, לפני החזרת העכבר לכלוב שלו, ניטור עד התאוששות מלאה.עשרה עד עשרים יום לאחר האתגר, להזריק כל חיה חרוטה עם 200 microliters של מצע D-luciferin כיתה ויוו ב תמיסת מלח סטרילית תוך-אפית. מניחים את בעלי החיים הרדמה במצב סופין במערכת הדמיה של בעלי חיים קטנים בתוך 5 עד 10 דקות של הזריקה. למדוד את הזוהר הממוצע באזורים נבחרים של עניין בתוך תוכנת ההדמיה המתאימה.לטיפול ממוקד של 8226 גידולים Luciferase, לאחר מדידת הביולומינציה הבסיסית בכל בעל חיים כפי שהוכח רק, אקראי את בעלי החיים לקבוצות טיפול ולטפל בכל עכבר עם סדרה של 200 הזרקת IP מיקרוליטר של Temsirolimus או שליטה מלוחה. למדוד את פעילות לוציפראז פעמיים בשבוע ולתכנן את השינויים בבילומינציה לאורך זמן. כדי למדוד שינויים בחילוף החומרים של הגידול, תחילה להסיר את המזון מכלוב הבית של העכברים במשך 24 שעות, כדי למנוע ספיגת radiolabeled רדיואקטיבי עודף Fludeoxyglucose.למחרת לדלל 500 כדי 100 microcuries של 18 פלואור radiolabeled Fludeoxyglucose בדיקה מלוחים סטריליים לנפח סופי של 100 microliters לכל עכבר ולהקליט את הזמן והפעילות של הבדיקות עם כיול מנה. כאשר הבדיקות מוכנות למקם את החיה הראשונה הרדמה על כרית חימום עם הראש פונה משם ולהשתמש מזרק אינסולין אחד מיליליטר מוגן מצויד מחט 26 מד להזריק 100 microliters של החללית לתוך וריד הזנב. למדוד את רדיואקטיביות שיורית המחט ואת המזרק עם כיול המינון ולציין את הפעילות ואת הזמן.לאחר מכן למדוד את פעילות Fludeoxyglucose radiolabeled באזורים נבחרים של עניין התואמים את הגידולים חריטה במערכת הדמיה PET CT בעלי חיים קטנים. חריטה מוצלחת של גידול במח העצם יכולה להיות מאושרת על ידי הדמיית ביולומינציה כפי שהוכח. הדמיה סדרתית של בעלי חיים מרובים יכולה לשמש כדי לדמיין את ההפצה של מח העצם חריטה גידולים מיאלומה נפוצה.בנוסף ניתוח רנטגן הדמיה אופטי מראה קביעה מהירה ולא פולשנית של המיקום המדויק והפצה של גידולי מיאלומה מרובים בתוך שלד העכבר. הביולומינציה המיוצרת על ידי תאים סרטניים חריטים אלה יכולה להימדד באופן סדרתי ולא פולשני כדי להעריך שינויים בצמיחת הגידול. יתר על כן, ההישרדות של עכברים שטופלו מעכבי mTOR Temsirolimus ניתן לפקח פליטת פוזיטרונים וניתוח טומוגרפיה ממוחשבת עבור ספיגת Fludeoxyglucose radiolabeled הגידול יכול לשמש כדי להדגים Temsirolimus מתווך שינויים בחילוף החומרים של גלוקוז.בעת ביצוע הליך זה חשוב להזריק את התאים IEV. מצאנו כי כישלון להזריק את התאים לתוך הווריד תוצאות היווצרות של תאים סרטניים שאינם מח עצם חריטה ליד אתר ההזרקה. בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש בשיטות אחרות כמו אימונוהיסטוכימיה ומיקרו-CT כדי לענות על שאלות לגבי השפעת הגידולים על ארכיטקטורת העצם ועל הרכיבים התאיים והמולקולריים שאינם גידולים של סביבת מח העצם.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Conditional Knockdown of Gene Expression in Cancer Cell Lines to Study the Recruitment of Monocytes/Macrophages to the Tumor Microenvironment

נוקאאוט מותנה של ביטוי גנים בשורות תאים סרטן ללמוד הגיוס של Monocytes/מקרופאגים כדי Microenvironment הגידול

siRNA and shRNA-mediated knock down (KD) methods of regulating gene expression are invaluable tools for understanding gene and protein function. However, ...

Comprehensive Protocol to Sample and Process Bone Marrow for Measuring Measurable Residual Disease and Leukemic Stem Cells in Acute Myeloid Leukemia

פרוטוקולים מקיפה לדוגמה, מח עצם תהליך למדידת מחלה שיורית מדיד, לוקמיה בתאי גזע לוקמיה מיאלואידית חריפה

Response criteria in acute myeloid leukemia (AML) has recently been re-established, with morphologic examination utilized to determine whether patients ...

Dual Effects of Melanoma Cell-derived Factors on Bone Marrow Adipocytes Differentiation

השפעות כפול של מלנומה נגזר תא גורמים על בידול Adipocytes מח עצם

The crosstalk between bone marrow adipocytes and tumor cells may play a critical role in the process of bone metastasis. A variety of methods are ...

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

קרינה פלואורסצנטית טומוגרפיה מולקולרית עבור הדמיה In Vivo של גליובלסטומה Xenografts

Tumorigenicity is the capability of cancer cells to form a tumor mass. A widely used approach to determine if the cells are tumorigenic is by injecting ...

Repression of Multiple Myeloma Cell Growth In Vivo by Single-wall Carbon Nanotube (SWCNT)-delivered MALAT1 Antisense Oligos

Repression of Multiple Myeloma Cell Growth In Vivo by Single-wall Carbon Nanotube SWCNT-delivered MALAT1 Antisense Oligos

דיכוי צמיחת תאים מיאלומה In Vivo על ידי ננו-צינורית פחמן קיר אחד (SWCNT)-נמסר MALAT1 Antisense Oligos

The single-wall carbon nanotube (SWCNT) is a new type of nanoparticle, which has been used to deliver multiple kinds of drugs into cells, such as ...

In Vivo Imaging and Quantitation of the Host Angiogenic Response in Zebrafish Tumor Xenografts

בVivo הדמיה וככמת של התגובה המארחת אנגיוגנטית ב-Zebrafish גידול Xenografts

Tumor angiogenesis is a key target of anti-cancer therapy and this method has been developed to provide a new model to study this process in vivo. A ...

Establishment and Analysis of Three-Dimensional (3D) Organoids Derived from Patient Prostate Cancer Bone Metastasis Specimens and their Xenografts

Establishment and Analysis of Three-Dimensional 3D Organoids Derived from Patient Prostate Cancer Bone Metastasis Specimens and their Xenografts

הקמה וניתוח של תלת מימדי (3D) אורגנואידים נגזר החולה סרטן הערמונית העצם גרורות דגימות ושתלי Xenografts להם

Three-dimensional (3D) culture of organoids from tumor specimens of human patients and patient-derived xenograft (PDX) models of prostate cancer, referred ...

Drug Screening of Primary Patient Derived Tumor Xenografts in Zebrafish

הקרנת התרופה של החולה העיקרי הנגזר גידול Xenografts ב Zebrafish

Patient derived xenograft models are critical in defining how different cancers respond to drug treatment in an in vivo system. Mouse models are the ...

Dynamic Imaging of Chimeric Antigen Receptor T Cells with [18F]Tetrafluoroborate Positron Emission Tomography/Computed Tomography

Dynamic Imaging of Chimeric Antigen Receptor T Cells with [18F]Tetrafluoroborate Positron Emission Tomography/Computed Tomography

הדמיה דינמית של תאי T קולטן אנטיגן כימרי עם [18F]טטרפלואורובורט טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים/טומוגרפיה ממוחשבת

T cells genetically engineered to express chimeric antigen receptors (CAR) have shown unprecedented results in pivotal clinical trials for patients with B ...

Simultaneous Imaging and Flow-Cytometry-based Detection of Multiple Fluorescent Senescence Markers in Therapy-Induced Senescent Cancer Cells

הדמיה סימולטנית וזיהוי מבוסס זרימה-ציטומטריה של סמני סנסנציה פלואורסצנטיים מרובים בתאי סרטן סנסנטיים המושרים על ידי טיפול

Chemotherapeutic drugs can induce irreparable DNA damage in cancer cells, leading to apoptosis or premature senescence. Unlike apoptotic cell death, ...