Name: a high-throughput cre-lox activated viral membrane fusion assay to identify inhibitors of hiv-1 viral membrane fusion
Uploaded: 2018-08-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי מענקים NIH/NIAID AI112423 ו- NIH/NIGMS GM113885 כדי בנימין ק' חן ו- NIH/NIAID K08-AI120806 כדי טליה ה שוורץ. ברצוננו להודות על Icahn בית הספר לרפואה באוניברסיטת הר סיני של דין לזרום Cytometry הליבה.

1. דור של שורות תאים היעד
הערה: שלב זה הוא אופציונלי; אם באמצעות קו תא היעד הקיים RG, להתחיל בשלב 2.
<ol><li>Cotransfect צלחת confluent 10 ס מ 70% של 293T תאים11 [10 מ"ל של מדיום הנשר שונה של Dulbecco (DMEM) עם 10% סרום שור עוברית (FBS)] עם pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE10 ו- pCL-10A112 (אריז?...

<ol>
	<li>Esposito, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high+throughput+Cre-lox+activated+viral+membrane+fusion+assay+identifies+pharmacological+inhibitors+of+HIV+entry.">A high throughput Cre-lox activated viral membrane fusion assay identifies pharmacological inhibitors of HIV entry.</a> Virology. 490, 6-16 (2016).</li><li>Cavrois, M., De Noronha, C., Greene, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+and+specific+enzyme-based+assay+detecting+HIV-1+virion+fusion+in+primary+T+lymphocytes.">A sensitive and specific enzyme-based assay detecting HIV-1 virion fusion in primary T lymphocytes.</a> Nature Biotechnology. 20, 1151-1154 (2002).</li><li>Huerta, L., Lamoyi, E., Baez-Saldana, A., Larralde, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+immunodeficiency+virus+envelope-dependent+cell-cell+fusion:+a+quantitative+fluorescence+cytometric+assay.">Human immunodeficiency virus envelope-dependent cell-cell fusion: a quantitative fluorescence cytometric assay.</a> Cytometry. 47, 100-106 (2002).</li><li>Sakamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+an+HIV+cell-cell+fusion+assay+by+using+two+genetically+modified+HeLa+cell+lines+and+reporter+gene.">Establishment of an HIV cell-cell fusion assay by using two genetically modified HeLa cell lines and reporter gene.</a> Journal of Virological Methods. 114, 159-166 (2003).</li><li>Herschhorn, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inducible+cell-cell+fusion+system+with+integrated+ability+to+measure+the+efficiency+and+specificity+of+HIV-1+entry+inhibitors.">An inducible cell-cell fusion system with integrated ability to measure the efficiency and specificity of HIV-1 entry inhibitors.</a> PLoS One. 6, e26731 (2011).</li><li>Swartz, T. H., Esposito, A. M., Durham, N. D., Hartmann, B. M., Chen, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P2X-selective+purinergic+antagonists+are+strong+inhibitors+of+HIV-1+fusion+during+both+cell-to-cell+and+cell-free+infection.">P2X-selective purinergic antagonists are strong inhibitors of HIV-1 fusion during both cell-to-cell and cell-free infection.</a> Journal of Virology. 88, 11504-11515 (2014).</li><li>Marin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Throughput+HIV-Cell+Fusion+Assay+for+Discovery+of+Virus+Entry+Inhibitors.">High-Throughput HIV-Cell Fusion Assay for Discovery of Virus Entry Inhibitors.</a> Assay and Drug Development Technologies. 13, 155-166 (2015).</li><li>Giroud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+and+Functional+Profiling+of+Small-Molecule+HIV-1+Entry+and+Fusion+Inhibitors.">Screening and Functional Profiling of Small-Molecule HIV-1 Entry and Fusion Inhibitors.</a> Assay and Drug Development Technologies. 15, 53-63 (2017).</li><li>Hubner, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+human+immunodeficiency+virus+type+1+(HIV-1)+Gag+localization+and+oligomerization+monitored+with+live+confocal+imaging+of+a+replication-competent,+fluorescently+tagged+HIV-1.">Sequence of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Gag localization and oligomerization monitored with live confocal imaging of a replication-competent, fluorescently tagged HIV-1.</a> Journal of Virology. 81, 12596-12607 (2007).</li><li>Koo, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+gene+expression+in+primary+Lgr5+organoid+cultures.">Controlled gene expression in primary Lgr5 organoid cultures.</a> Nature Methods. 9, 81-83 (2011).</li><li>Pear, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+high-titer+helper-free+retroviruses+by+transient+transfection.">Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 90, 8392-8396 (1993).</li><li>Naviaux, R. K., Costanzi, E., Haas, M., Verma, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pCL+vector+system:+Rapid+production+of+helper-free,+high+titer,+recombinant+retroviruses.">The pCL vector system: Rapid production of helper-free, high titer, recombinant retroviruses.</a> Journal of Virology. 70, 5701-5705 (1996).</li><li>Kingston, R. E., Chen, C. A., Okayama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+Phosphate+Transfection.">Calcium Phosphate Transfection.</a> Current Protocols in Immunology. 10, 10-13 (2001).</li></ol>

איסור פרסום-iCre וזמינותו הוכיחה להיות מאוד שימושי עבור מיון מועמדים סמים אשר עלול לעכב את שלב פיוז ' ן של שכפול ויראלי. בעת ביצוע וזמינותו הזה, הצעדים החשובים ביותר להשיג קליטה טובה דומים מבחני זיהום ויראלי ביותר. השלב הקריטי הראשון מפיק titers גבוהה של וירוס באיכות טובה. שלב זה דורש כי התאים 293T...

הצורך טיפולים חדשניים תרופתי יש בקשה הפיתוח של תריסים מעכבי של HIV-1 ערך תפוקה גבוהה. איסור פרסום-iCre כתב וזמינותו מפותחת לזהות מעכבי כניסה ויראלי בשלב פיוז'ן במערכת-לתא זיהום על ידי מדידת במיוחד ממברנה ויראלי פיוז'ן עם קרום התא המארח1. Assay פותחה עבור מעכבי הרומן כי פעלו במיוחד בשלבים מוקדמים של זיהום ב- HIV-1 עד לנקודה של קרום ויראלי היתוך מסך. אתגר אחד כדי מדידה תא-תא זיהום הוא inoculum הראשוני מכיל תאים נגועים התורם ותאי המטרה ininfected, ולכן מדידת זיהום חדש קשה להפלות את התאים קלט. המערכת אידיאלית מערבת סמן גנטי heterologous זה יכול להיגרם על ידי אתחול של זיהום תא היעד ואינו נוכח בתא התורם. מסגרת תוכן ויראלי פופולרי ערבוב assay מבוסס על שילוב חלבון נגיפי-אנזים, בלאם-Vpr, יכול להיות יעיל, אבל יש מגבלות עבור תפוקה גבוהה, תא-תא ההקרנה2. Assay הזה כרוך גן כתב בטא לקטמאז (בום) כי דבוקה Vpr HIV-1, הארוזים לתוך virions, מועברת לתוך תאי היעד על קרום ויראלי פיוז'ן. המצע CCF2-אם הוא טעון לתוך הציטופלסמה של התאים היעד, עובר פלורסצנטיות משמרת על המחשוף. המצע CCF2-אם הוא יקר וניתן אוסרני עבור מסכי תפוקה גבוהה. על מנת להבחין בין תאי התורם ואת המטרה, יש צורך לצבוע תווית קהלי היעד. לבסוף, הפרוטוקול מחייב מספר שלבים רוחצים את הדגירה אשר יכול להיות מעיק ויקרות בעת בדיקת מספר רב של תרכובות.
וזמינותו איסור פרסום-iCre פותחה כפתרון לסוגיות הללו, לפתח הקרנת עבור מעכבי של פיוז'ן-לתא בשידור של תפוקה גבוהה. מערכת זו אינה דורשת מצע שיש לטעון לתוך התאים. וזמינותו יכול לשמש גם ללימודים ללא תאים, ניתנת להתאמה מחקרים אחרים פיוז'ן ויראלי באמצעות חלקיקי וירוס HIV-1 איסור פרסום-iCre מדומים מוקלד. HIV Env מתווכת תא-cell fusion מבחני יכול למדוד וירוס Env בתיווך חלבון תאי היתוך, אולם אלה אין להשתמש חלקיקי וירוס בפועל כמו וזמינותו HIV-1 איסור פרסום-iCre3,4,5. Assay הזה ניתן לקרוא עם מיקרוסקופ לזרום cytometry או קרינה פלואורסצנטית. זה שימש בהצלחה למסך את ספריית ה-FDA, כמו גם ספרייה קטנה של purinergic מעכבי1,6. חוקרים אחרים זיהו גם מעכבי purinergic ב- HIV-1 היתוך באמצעות וזמינותו של פיוז'ן תפוקה גבוהה המותאמים וממוטב מדווח על העברת וירוס-אנקפסולציה בטא לקטמאז לתוך הציטופלסמה7,8 .
הווירוס איסור פרסום-iCre תוכנן עם גישה דומה לנגיף איסור פרסום-iGFP, החדרת Cre recombinase בין מטריקס capsid, ולצדו אתרי פרוטאז HIV-19. האנזים Cre עשוי כמבשר מוכנס בתוך polyprotein איסור פרסום זה מבשיל פרוטאז HIV-1 מופעל בתוך החלקיק וירוס המתהווה. המשלוח Cre הוא, לפיכך, תלויה מסירת התכנים של חלקיק מופעל פרוטאז HIV-1 לתוך היעד התא באמצעות תהליך היתוך ממברנה ויראלי. שתי גרסאות של הפרוטוקול ניתנים כאן. הראשון משתמש אוכלוסיה נגוע ב- HIV-1 כדי להדביק את התאים היעד, ללמוד שידור ישיר-לתא של HIV. הגירסה השנייה משתמש וירוס ללא תא ללמוד זיהום ויראלי נטול תאים. וזמינותו שידור לתא מקבל 7 ימים להשלמת מהיום שהתאים הם הקרת, או 5 ימים אם התאים נמצאים כבר הקרת, passaged. וזמינותו תא ללא זיהום יכול להתבצע ב 5 ימים אם התאים צריכים להיות הקרת ו- 3 ימים, אם התאים נמצאים הקרת, passaged. ההוראות ניתנות גם לייצר קו של תא המטרה (אדום-כדי-ירוק) RG סוג התא הרצוי (אם אינו נמצא בשימוש קו תא היעד שישנו RG) באמצעות פלסמיד נוצר על ידי המעבדה Clevers10. מומלץ כי אמצעי אבטחה המתאים נלקחים עם הוירוס ולא התאים לבטא וירוס זה וזמינותו. אנו מבצעים של חלק זה וזמינותו במתקן תרביות רקמה BSL2 + זיהומיות. לאחר התאים קבועים, ניתן לנתח הם ב cytometry זרימה רגילה ומתקני מיקרוסקופ.
כאן נתאר את היישום של זה וזמינותו למסך עבור הרומן תרכובות זה לעכב פיוז'ן ממברנה נגיפי HIV-1 (איור 1). קולטנים Purinergic הם מתווכים פרו-דלקתיים. המעבדה שלנו הוכיחה כי מעכבי לא בררניים של קולטני purinergic לפעול כמו מעכבי של פיוז'ן ממברנה נגיפי HIV-16. . מדווחים כי הניצול של זה וזמינותו של תפוקה גבוהה יכול לזהות הרומן מעכבי פיוז'ן של קרום נגיפי HIV-1. נדגים כי מעכב של המחלקה purinergic של קולטני מייצג מחלקה הרומן של מעכבי פיוז'ן ממברנה נגיפי HIV-1.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium (DMEM)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5546</td>
			<td>Media for 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>R0883</td>
			<td>Media for Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16140-071</td>
			<td>Serum for 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cosmic Calf Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30087.03</td>
			<td>Serum for Jurkat Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyclone Pennecillin Streptomycin solution</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>SV30010</td>
			<td>Penn/Strep used in both media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flasks</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3073</td>
			<td>Used for Culture of Jurkat Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10cm Tissue Culture Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430167</td>
			<td>Used for Culture of 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 Well Plates (tissue culture Treated)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3595</td>
			<td>Used for fusion assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyjet Transfection Reagent</td>
			<td>Signagen</td>
			<td>SL100688</td>
			<td>Used to transfect 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8537-100ML</td>
			<td>Used in wash steps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyclone Trypsin Protease</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>SH30042.01</td>
			<td>For Trypsinization of 293 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amaxa Cell Line Nucleofector Kit V</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>VACA-1003</td>
			<td>For Nucleofection of Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque plus</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>17144002</td>
			<td>For Nucleofection of Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipettes</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>13-678-11E</td>
			<td>For all tissue culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor Tips</td>
			<td>Denville Scientific</td>
			<td>P3020-CPS</td>
			<td>For all tissue culture and liquid handling steps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex Syringe Filter (0.45 micron)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLHA033</td>
			<td>For filtration of virus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Slip Tip Sterile syringes</td>
			<td>BD Diagnostics</td>
			<td>309656</td>
			<td>For filtration of virus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amaxa Nucleofector</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>2b</td>
			<td>for Nucleofection of Jurkats (various models available)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Fortessa Flow Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td>for flow cytometry analyss of samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Culture Hood</td>
			<td>Various models</td>
			<td>Fortessa 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-W PRE</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>32702</td>
			<td>Koo BK et al. Controlled gene expression in primary Lgr5 organoid cultures. Nature Methods 9:81-83 (2011).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCL10a1</td>
			<td>Novus Bio</td>
			<td>NBP2-29542</td>
			<td>Naviaux, RK, Costanzi, E, Haas, M and Verma, I. The pCL vector system: Rapid production of helper-free, high titer, recombinant retroviruses. Journal of Virology 70: 5701-5705 (1996)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gag-iCre</td>
			<td>Benjamin Chen Lab</td>
			<td></td>
			<td>Esposito AM et al. A high throughput Cre-lox activated viral membrane fusion assay identifies pharmacological inhibitors of HIV entry. Virology 490:6-16 (2016).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-throughput cre-lox activated viral membrane fusion assay to identify inhibitors of hiv-1 viral membrane fusion

Assay זו נועדה במיוחד הדו ח על HIV-1 היתוך באמצעות הביטוי של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) לזיהוי על ידי מיקרוסקופ לזרום cytometry או קרינה פלואורסצנטית. וירוס כתב בלתי HIV-1 (HIV-1 iCre-איסור פרסום) נוצר על-ידי הוספת Cre recombinase לתוך הגנום HIV-1 בין המטריקס את החלבונים capsid של polyprotein איסור הפרסום. זה תוצאות באריזה Cre recombinase לתוך חלקיקי וירוס, אשר לאחר מכן שוחרר לתוך תא היעד קו stably לבטא Cre מופעל recombinase אדום פלואורסצנטי חלבון (RFP) בקלטות מתג ה-GFP. במצב הבזליים, הקלטת הזאת מבטאת רק RFP. בעקבות מסירת Cre recombinase לתוך תא היעד, RFP, ולצדו באתרים loxP, excises, והתוצאה היא ביטוי GFP. Assay זה יכול לשמש כדי לבדוק כל מעכבי נגיפי כניסה (במיוחד בשלב fusion) במערכות זיהום תא ולתא, נעשה שימוש כדי לזהות מחלקה של היריבים קולטן purinergic מעכבי הרומן של היתוך ממברנה נגיפי HIV-1.

נגוע RG Jurkat תאים להפגין רמה נמוכה של אות ה-GFP רקע (0.3%) עם אות RFP חזק מאד (איור 2 א, טור נגוע). הזיהום עם איסור פרסום-iCre גורמת לעלייה GFP אות (24.9%), תוך הנוכחות של החומר המדכא פיוז'ן של HIV-1 AMD3100 (20 מיקרומטר) מעכב ההתפתחות של האות הזה, ל רקע נגוע רמות (0.34%). כאשר מעכב של אירו...

Watch this Scientific Journal Video about A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion at JoVE.com

A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

אנו מתארים וזמינותו מבוססת תא לדווח על HIV-1 היתוך באמצעות הביטוי של חלבון פלואורסצנטי ירוק לזיהוי על ידי מיקרוסקופ לזרום cytometry או קרינה פלואורסצנטית. זה יכול לשמש כדי לבדוק את מעכבי נגיפי כניסה (במיוחד בשלב fusion) במערכות זיהום תא ולתא.

Cre-עצלן תפוקה גבוהה מופעל ממברנה ויראלי Assay פיוז'ן לזהות מעכבי של היתוך ממברנה נגיפי HIV-1

This assay is designed to specifically report on HIV-1 fusion via the expression of green fluorescent protein (GFP) detectable by flow cytometry or ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

באמצעות assay הפאן ויראלי microarray (Virochip) אל מסך דוגמאות קליניות עבור פתוגנים ויראליים

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

Amplifying and Quantifying HIV-1 RNA in HIV Infected Individuals with Viral Loads Below the Limit of Detection by Standard Clinical Assays

הגברה וכימות HIV-1 RNA אצל אנשים שנדבקו ב-HIV עם המון ויראלי מתחת לגבול של זיהוי על ידי מבחני קלינית רגילה

Amplifying viral genes and quantifying HIV-1 RNA in HIV-1 infected individuals with viral loads below the limit of detection by standard assays (below ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

הקמת תרבות הנוזלית מכוסית של Airway האנושי המקוטב-3 Calu תאי אפיתל ללמוד תגובת תא מארחת לפתוגנים נשימה<em&gt; במבחנה</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

High-throughput Screening for Broad-spectrum Chemical Inhibitors of RNA Viruses

הקרנת תפוקה גבוהה לספקטרום רחב כימיים מעכבי RNA וירוסים

RNA viruses are responsible for major human diseases such as flu, bronchitis, dengue, Hepatitis C or measles. They also represent an emerging threat ...

Conformational Evaluation of HIV-1 Trimeric Envelope Glycoproteins Using a Cell-based ELISA Assay

הערכת קונפורמציה של HIV-1 trimeric מעטפת גליקופרוטאינים שימוש ELISA Assay מבוסס Cell

HIV-1 envelope glycoproteins (Env) mediate viral entry into target cells and are essential to the infectious cycle. Understanding how those glycoproteins ...

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis (NAME) Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis NAME Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

חישול בתיווך Nucleocapsid אלקטרופורזה (NAME) Assay מאפשר זיהוי המהיר של HIV-1 Nucleocapsid המעכבים

RNA or DNA folded in stable tridimensional folding are interesting targets in the development of antitumor or antiviral drugs. In the case of HIV-1, viral ...

Phage Phenomics: Physiological Approaches to Characterize Novel Viral Proteins

Phenomics הפאג: גישות פיזיולוגיות לאפיין חלבונים חדשים ויראלי

Current investigations into phage-host interactions are dependent on extrapolating knowledge from (meta)genomes. Interestingly, 60 - 95% of all phage ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

התפתחות Lyophilized Loop בתיווך ריאגנטים הגברה איזו תרמים לצורך זיהוי של<em&gt; Burnetii Coxiella</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

מדידת טיטר נוגדנים עיכוב Neuraminidase שפעת ידי enzyme-linked Assay לקטינים

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

שיטת הדגימה ספוגית לצורך זיהוי של norovirus האדם על משטחים

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...