Name: a high-throughput cre-lox activated viral membrane fusion assay to identify inhibitors of hiv-1 viral membrane fusion
Uploaded: 2018-08-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion at JoVE.com

Denna forskning stöds av bidrag NIH/NIAID AI112423 och NIH/NIGMS GM113885 till Benjamin K. Chen och NIH/NIAID K08-AI120806 till Talia H. Swartz. Vi vill tacka de Icahn School of Medicine vid Mount Sinai rektorns flöde flödescytometri CORE.

1. generering av Target cellinjer
Obs: Detta steg är valfritt. Om du använder en befintlig RG mål cell linje, börja på steg 2.
<ol><li>Cotransfect 70% konfluenta 10 cm tallrik 293T celler11 [i 10 mL Dulbeccos modifierade örnens medium (DMEM) med 10% fetalt bovint serum (FBS)] med pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-WPRE10 och pCL-10A112 (förpackning plasmid) i en 1:1 ratio (20 µg totalt) använda Kalciumbaserat trans...

<ol>
	<li>Esposito, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high+throughput+Cre-lox+activated+viral+membrane+fusion+assay+identifies+pharmacological+inhibitors+of+HIV+entry.">A high throughput Cre-lox activated viral membrane fusion assay identifies pharmacological inhibitors of HIV entry.</a> Virology. 490, 6-16 (2016).</li><li>Cavrois, M., De Noronha, C., Greene, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+and+specific+enzyme-based+assay+detecting+HIV-1+virion+fusion+in+primary+T+lymphocytes.">A sensitive and specific enzyme-based assay detecting HIV-1 virion fusion in primary T lymphocytes.</a> Nature Biotechnology. 20, 1151-1154 (2002).</li><li>Huerta, L., Lamoyi, E., Baez-Saldana, A., Larralde, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+immunodeficiency+virus+envelope-dependent+cell-cell+fusion:+a+quantitative+fluorescence+cytometric+assay.">Human immunodeficiency virus envelope-dependent cell-cell fusion: a quantitative fluorescence cytometric assay.</a> Cytometry. 47, 100-106 (2002).</li><li>Sakamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+an+HIV+cell-cell+fusion+assay+by+using+two+genetically+modified+HeLa+cell+lines+and+reporter+gene.">Establishment of an HIV cell-cell fusion assay by using two genetically modified HeLa cell lines and reporter gene.</a> Journal of Virological Methods. 114, 159-166 (2003).</li><li>Herschhorn, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inducible+cell-cell+fusion+system+with+integrated+ability+to+measure+the+efficiency+and+specificity+of+HIV-1+entry+inhibitors.">An inducible cell-cell fusion system with integrated ability to measure the efficiency and specificity of HIV-1 entry inhibitors.</a> PLoS One. 6, e26731 (2011).</li><li>Swartz, T. H., Esposito, A. M., Durham, N. D., Hartmann, B. M., Chen, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P2X-selective+purinergic+antagonists+are+strong+inhibitors+of+HIV-1+fusion+during+both+cell-to-cell+and+cell-free+infection.">P2X-selective purinergic antagonists are strong inhibitors of HIV-1 fusion during both cell-to-cell and cell-free infection.</a> Journal of Virology. 88, 11504-11515 (2014).</li><li>Marin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Throughput+HIV-Cell+Fusion+Assay+for+Discovery+of+Virus+Entry+Inhibitors.">High-Throughput HIV-Cell Fusion Assay for Discovery of Virus Entry Inhibitors.</a> Assay and Drug Development Technologies. 13, 155-166 (2015).</li><li>Giroud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+and+Functional+Profiling+of+Small-Molecule+HIV-1+Entry+and+Fusion+Inhibitors.">Screening and Functional Profiling of Small-Molecule HIV-1 Entry and Fusion Inhibitors.</a> Assay and Drug Development Technologies. 15, 53-63 (2017).</li><li>Hubner, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequence+of+human+immunodeficiency+virus+type+1+(HIV-1)+Gag+localization+and+oligomerization+monitored+with+live+confocal+imaging+of+a+replication-competent,+fluorescently+tagged+HIV-1.">Sequence of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Gag localization and oligomerization monitored with live confocal imaging of a replication-competent, fluorescently tagged HIV-1.</a> Journal of Virology. 81, 12596-12607 (2007).</li><li>Koo, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+gene+expression+in+primary+Lgr5+organoid+cultures.">Controlled gene expression in primary Lgr5 organoid cultures.</a> Nature Methods. 9, 81-83 (2011).</li><li>Pear, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+high-titer+helper-free+retroviruses+by+transient+transfection.">Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 90, 8392-8396 (1993).</li><li>Naviaux, R. K., Costanzi, E., Haas, M., Verma, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pCL+vector+system:+Rapid+production+of+helper-free,+high+titer,+recombinant+retroviruses.">The pCL vector system: Rapid production of helper-free, high titer, recombinant retroviruses.</a> Journal of Virology. 70, 5701-5705 (1996).</li><li>Kingston, R. E., Chen, C. A., Okayama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+Phosphate+Transfection.">Calcium Phosphate Transfection.</a> Current Protocols in Immunology. 10, 10-13 (2001).</li></ol>

Gag-iCre analysen har visat sig vara mycket användbar för screening läkemedelskandidater som kan hämma steget fusion av virusreplikation. När du utför denna analys, liknar viktigaste stegen för att få en bra signal mest viral infektion analyser. Ett första viktigt steg producerar höga titrar av god kvalitet-virus. Detta steg kräver att 293T cellerna är överförda ofta (minst 1 x varje 48 h) så de inte bli overconfluent och klumpar ihop. Dessutom kan det vara värt att experimentera med olika transfection me...

Behovet av nya antiretrovirala behandlingar har lett utvecklingen av hög genomströmning skärmar för hämmare av HIV-1 inträde. Gag-iCre reporter analysen är utvecklat för att identifiera hämmare av viral inträde vid fusion steg i en cell till cell infektion system genom att specifikt mäta viral membran fusion med värd cellmembranet1. Ett test utvecklades till skärmen för roman hämmare som agerat särskilt på de tidiga stadierna av HIV-1 infektion upp till punkten av viral membran fusion. En utmaning att mäta cell-cell infektion är att det inledande inokulatet innehåller infekterade givare celler och ininfected målceller, så mäta ny infektion är svårt att diskriminera från indatacellerna. Det idealiska systemet skulle omfatta ett heterologt genen markör som kan induceras av inledandet av ett mål cell infektion och är inte närvarande i cellen givare. En populär viral innehållet blanda assay baserat på en viral protein-enzym fusion, BlaM-Vpr, kan vara effektivt, men har begränsningar för hög genomströmning, cell-cell screening2. Denna analys innebär en beta-laktamas (BlaM) reporter gen som är fixerade till HIV-1 Vpr, förpackade i virioner och levereras till målceller vid viral membran fusion. Substratet CCF2-AM är laddad i cytoplasman i målceller och genomgår en fluorescens Skift vid klyvning. CCF2-AM substrat är dyrt och kan vara oöverkomliga för hög genomströmning skärmar. För att särskilja cellerna givare och mål, är det nödvändigt att färgämnet-etikett målgrupperna. Slutligen kräver protokollet flera wash och inkubation steg som kan vara betungande och dyrt när man testar ett stort antal föreningar.
Gag-iCre analysen utvecklades som en lösning på dessa frågor, att utveckla en high-throughput screening för hämmare av fusion i cell-till-cell överföring. Detta system kräver inte substrat som ska läsas in celler. Analysen kan också användas för cellfria studier och är anpassningsbar till andra virala fusion studier använder pseudo maskinskriven HIV-1 Gag-iCre viruspartiklar. HIV Env medierad cell cell fusion analyser kan mäta virus Env protein-medierad Cellfusion, men dessa inte använder riktiga viruspartiklar som HIV-1 Gag-iCre analysen gör3,4,5. Denna analys kan läsas med flöde flödescytometri eller fluorescence mikroskopi. Det har använts framgångsrikt till skärmen FDA biblioteket samt ett litet bibliotek av purinergic-hämmare1,6. Andra utredare har också identifierat purinergic-hämmare i HIV-1 fusion med hjälp av en anpassad och optimerad hög genomströmning fusion analysmetod som rapporterar överföring av virus-inkapslat beta-laktamas till cytoplasman7,8 .
Gag-iCre viruset har utformats med ett liknande förhållningssätt till Gag-iGFP virus, infoga Cre recombinase mellan matris och kapsid, flankerad av HIV-1 proteas platser9. Enzymet Cre görs som en föregångare som infogats i det Gag polyprotein som mognar när HIV-1 proteas aktiveras inom den begynnande virus partikeln. Cre leveransen är således beroende av distribution av innehållet i en proteas-aktiverat HIV-1 partikel i en målet cellen via en viral membran fusionsprocessen. Här finns två versioner av protokollet. Först använder en HIV-1 infekterade befolkning för att infektera målceller, för att studera direkt cell till cell överföring av HIV. Den andra versionen använder ett cell-fri virus för att studera en cellfria virusinfektion. Cell till cell överföring analysen tar 7 dagar att slutföra från dagen cellerna är tinade eller 5 dagar om cellerna redan tinats och anpassade. Cellfria infektion analysen kan utföras i 5 dagar om cellerna behöver tinas upp och 3 dagar om cellerna tinats och anpassade. Instruktioner ges också att generera en RG (röd-till-grön) målet cellen fodrar i den önska celltypen (om en redan existerande RG mål cell fodrar inte används) med hjälp av en plasmid skapad av Clevers Lab10. Det rekommenderas att lämpliga biosäkerhet försiktighetsåtgärder vidtas med virus och virus-uttryckande cellerna i denna analys. Vi bedriver smittsamma portion av denna analys i en BSL2 + vävnadsodling anläggning. När cellerna är fasta, kan de analyseras i standard flöde flödescytometri och mikroskopi.
Här beskriver vi tillämpningen av denna analys på skärmen för romanen ämnen som hämmar HIV-1 viral membran fusion (figur 1). Purinergic receptorer är pro-inflammatoriska mediatorer. Vårt laboratorium har visat att icke-selektiva hämmare av purinergic receptorer fungerar som hämmare av HIV-1 viral membran fusion6. Vi rapporterar att utnyttjandet av denna analys i hög genomströmning kan identifiera nya HIV-1 viral membran fusion-hämmare. Vi visar att en hämmare av klassen purinergic av receptorer representerar en ny klass av HIV-1 viral membran fusion-hämmare.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium (DMEM)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5546</td>
			<td>Media for 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>R0883</td>
			<td>Media for Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16140-071</td>
			<td>Serum for 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cosmic Calf Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30087.03</td>
			<td>Serum for Jurkat Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyclone Pennecillin Streptomycin solution</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>SV30010</td>
			<td>Penn/Strep used in both media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flasks</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3073</td>
			<td>Used for Culture of Jurkat Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10cm Tissue Culture Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430167</td>
			<td>Used for Culture of 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 Well Plates (tissue culture Treated)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3595</td>
			<td>Used for fusion assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyjet Transfection Reagent</td>
			<td>Signagen</td>
			<td>SL100688</td>
			<td>Used to transfect 293 Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8537-100ML</td>
			<td>Used in wash steps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyclone Trypsin Protease</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>SH30042.01</td>
			<td>For Trypsinization of 293 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amaxa Cell Line Nucleofector Kit V</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>VACA-1003</td>
			<td>For Nucleofection of Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque plus</td>
			<td>GE Healthcare Life sciences</td>
			<td>17144002</td>
			<td>For Nucleofection of Jurkats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipettes</td>
			<td>Fisher Brand</td>
			<td>13-678-11E</td>
			<td>For all tissue culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettor Tips</td>
			<td>Denville Scientific</td>
			<td>P3020-CPS</td>
			<td>For all tissue culture and liquid handling steps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex Syringe Filter (0.45 micron)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLHA033</td>
			<td>For filtration of virus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Slip Tip Sterile syringes</td>
			<td>BD Diagnostics</td>
			<td>309656</td>
			<td>For filtration of virus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amaxa Nucleofector</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>2b</td>
			<td>for Nucleofection of Jurkats (various models available)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Fortessa Flow Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td>for flow cytometry analyss of samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Culture Hood</td>
			<td>Various models</td>
			<td>Fortessa 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-W PRE</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>32702</td>
			<td>Koo BK et al. Controlled gene expression in primary Lgr5 organoid cultures. Nature Methods 9:81-83 (2011).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCL10a1</td>
			<td>Novus Bio</td>
			<td>NBP2-29542</td>
			<td>Naviaux, RK, Costanzi, E, Haas, M and Verma, I. The pCL vector system: Rapid production of helper-free, high titer, recombinant retroviruses. Journal of Virology 70: 5701-5705 (1996)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gag-iCre</td>
			<td>Benjamin Chen Lab</td>
			<td></td>
			<td>Esposito AM et al. A high throughput Cre-lox activated viral membrane fusion assay identifies pharmacological inhibitors of HIV entry. Virology 490:6-16 (2016).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-throughput cre-lox activated viral membrane fusion assay to identify inhibitors of hiv-1 viral membrane fusion

Denna analys är designad att särskilt rapportera om HIV-1 fusion via uttrycket av grönt fluorescerande protein (GFP) upptäckas av flöde flödescytometri eller fluorescence mikroskopi. En HIV-1-reporter virus (HIV-1 Gag-iCre) genereras genom att infoga Cre recombinase i HIV-1 genomet mellan matris och kapsid proteiner av den Gag polyprotein. Detta resulterar i en förpackning av Cre recombinase in viruspartiklar, som släpps sedan ut i en målcell linje stabilt uttrycker en Cre recombinase-aktiverat röd fluorescerande protein (RFP) till GFP switch kassett. I den basala staten uttrycker denna kassett RFP endast. Efter leverans av Cre recombinase in i målcellen, på RFP, flankerad av loxP platser, punktskatter, vilket resulterar i GFP uttryck. Denna analys kan användas för att testa någon hämmare av viral inträde (särskilt vid fusion steg) i cell-fri och cell-till-cell infektion system och har använts för att identifiera en klass purinergic-receptorantagonister som roman hämmare av HIV-1 viral membran fusion.

Oinfekterade RG Jurkat celler uppvisar en låg nivå av bakgrund GFP signal (0,3%) med en mycket stark RFP-signal (figur 2A, oinfekterade kolumn). Infektion med Gag-iCre orsakar en ökning av GFP signal (24,9%) medan förekomsten av HIV-1 fusion-hämmaren AMD3100 (20 µM) hämmar utvecklingen av denna signal, föra den ner till oinfekterade bakgrundsnivåerna (0,34%). När en hämmare av en efter fusion händelse såsom den omvända transkription-hämmaren AZ...

Watch this Scientific Journal Video about A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion at JoVE.com

A High-throughput Cre-Lox Activated Viral Membrane Fusion Assay to Identify Inhibitors of HIV-1 Viral Membrane Fusion

Vi beskriver en cell-baserad analys för att rapportera på HIV-1 fusion via uttrycket av grönt fluorescerande protein kan upptäckas av flöde flödescytometri eller fluorescence mikroskopi. Det kan användas för att testa hämmare av viral inträde (särskilt vid fusion steg) i cell-fri och cell-till-cell infektion system.

En hög genomströmning Cre-Lox aktiveras Viral membran Fusion analys för att identifiera hämmare av HIV-1 Viral membran Fusion

This assay is designed to specifically report on HIV-1 fusion via the expression of green fluorescent protein (GFP) detectable by flow cytometry or ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Med hjälp av en Pan-Viral microarray analys (Virochip) till skärm kliniska prover för virala patogener

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

Amplifying and Quantifying HIV-1 RNA in HIV Infected Individuals with Viral Loads Below the Limit of Detection by Standard Clinical Assays

Förstärka och kvantifiera HIV-1 RNA i hiv-infekterade individer med virusnivåer under gränsen för upptäckt med vanliga kliniska analyser

Amplifying viral genes and quantifying HIV-1 RNA in HIV-1 infected individuals with viral loads below the limit of detection by standard assays (below ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Att upprätta en flytande täckt kultur av polariserad Human luftvägsepitelceller Calu-3 celler för att studera svar värdcellen för luftvägspatogener<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

High-throughput Screening for Broad-spectrum Chemical Inhibitors of RNA Viruses

High-throughput screening för brett spektrum kemiska inhibitorer av RNA-virus

RNA viruses are responsible for major human diseases such as flu, bronchitis, dengue, Hepatitis C or measles. They also represent an emerging threat ...

Conformational Evaluation of HIV-1 Trimeric Envelope Glycoproteins Using a Cell-based ELISA Assay

Conformational Utvärdering av HIV-1 trimera Envelope Glycoproteins användning av en cellbaserad ELISA-analys

HIV-1 envelope glycoproteins (Env) mediate viral entry into target cells and are essential to the infectious cycle. Understanding how those glycoproteins ...

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis (NAME) Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis NAME Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

Nukleokapsid Annealing-medierad elektrofores (NAME) Analys Tillåter snabb identifiering av HIV-1 nukleokapsiden Hämmare

RNA or DNA folded in stable tridimensional folding are interesting targets in the development of antitumor or antiviral drugs. In the case of HIV-1, viral ...

Phage Phenomics: Physiological Approaches to Characterize Novel Viral Proteins

Fag Phenomics: Fysiologiska Approaches att karaktärisera Novel virusproteiner

Current investigations into phage-host interactions are dependent on extrapolating knowledge from (meta)genomes. Interestingly, 60 - 95% of all phage ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

Utvecklingen av lyofiliserad Loop-medie Isothermal amplifieringsreagenserna för detektion av<em&gt; Coxiella burnetii</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

Mätning influensaneuraminidas Inhibition Antikroppstitrar genom enzymkopplad lektin analys

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

Pinnurvalsmetoden för påvisande av humana Norovirus på ytor

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...