Name: a high-performance liquid chromatography measurement of kynurenine and kynurenic acid: relating biochemistry to cognition and sleep in rats
Uploaded: 2018-08-19T13:00:00
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El presente estudio fue financiado en parte por los institutos nacionales de salud (R01 NS102209) y una donación de la Clare E. Forbes Trust.

Los protocolos experimentales fueron aprobados por el Comité de uso y cuidado Animal institucional de la Universidad de Maryland y siguieron a guía los institutos nacionales de salud para el cuidado y uso de animales de laboratorio.
Nota: Se utilizaron ratas de Wistar macho adulto (250-350 g) en todos los experimentos. Distintas cohortes de animales fueron utilizados para el análisis bioquímico, experimentos conductuales y grabaciones de sueño-vigilia. Los animales fueron alojados en un c...

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	<li>Leklem, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+aspects+of+tryptophan+metabolism+in+humans+and+other+species:+a+review.">Quantitative aspects of tryptophan metabolism in humans and other species: a review.</a> The American Journal of Clinical Nutrition. 24 (6), 659-672 (1971).</li><li>Pocivavsek, A., Notarangelo, F. M., Wu, H. Q., Bruno, J. P., Schwarcz, R., Pletnikov, M. V., Waddington, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+as+Pharmacological+Targets+in+the+Treatment+of+Schizophrenia:+Focus+on+Kynurenic+Acid.">Astrocytes as Pharmacological Targets in the Treatment of Schizophrenia: Focus on Kynurenic Acid.</a> Modeling the Psychophathological Dimensions of Schizophrenia - From Molecules to Behavior. , 423-443 (2016).</li><li>Hilmas, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+brain+metabolite+kynurenic+acid+inhibits+alpha7+nicotinic+receptor+activity+and+increases+non-alpha7+nicotinic+receptor+expression:+physiopathological+implications.">The brain metabolite kynurenic acid inhibits alpha7 nicotinic receptor activity and increases non-alpha7 nicotinic receptor expression: physiopathological implications.</a> Journal of Neuroscience. 21 (19), 7463-7473 (2001).</li><li>Perkins, M. 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C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kynurenic+acid+is+a+potent+endogenous+aryl+hydrocarbon+receptor+ligand+that+synergistically+induces+interleukin-6+in+the+presence+of+inflammatory+signaling.">Kynurenic acid is a potent endogenous aryl hydrocarbon receptor ligand that synergistically induces interleukin-6 in the presence of inflammatory signaling.</a> Toxicological Sciences. 115 (1), 89-97 (2010).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kynurenic+acid+as+a+ligand+for+orphan+G+protein-coupled+receptor+GPR35.">Kynurenic acid as a ligand for orphan G protein-coupled receptor GPR35.</a> The Journal of Biological Chemistry. 281 (31), 22021-22028 (2006).</li><li>Alexander, K. S., Wu, H. Q., Schwarcz, R., Bruno, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+elevations+of+brain+kynurenic+acid+impair+cognitive+flexibility:+normalization+by+the+alpha7+positive+modulator+galantamine.">Acute elevations of brain kynurenic acid impair cognitive flexibility: normalization by the alpha7 positive modulator galantamine.</a> Psychopharmacology (Berlin). 220 (3), 627-637 (2012).</li><li>Chess, A. C., Landers, A. M., Bucci, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-kynurenine+treatment+alters+contextual+fear+conditioning+and+context+discrimination+but+not+cue-specific+fear+conditioning.">L-kynurenine treatment alters contextual fear conditioning and context discrimination but not cue-specific fear conditioning.</a> Behavioural Brain Research. 201 (2), 325-331 (2009).</li><li>Chess, A. C., Simoni, M. K., Alling, T. E., Bucci, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevations+of+endogenous+kynurenic+acid+produce+spatial+working+memory+deficits.">Elevations of endogenous kynurenic acid produce spatial working memory deficits.</a> Schizophrenia Bulletin. 33 (3), 797-804 (2007).</li><li>Pocivavsek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+in+endogenous+kynurenic+acid+control+hippocampal+glutamate+and+memory.">Fluctuations in endogenous kynurenic acid control hippocampal glutamate and memory.</a> Neuropsychopharmacology. 36 (11), 2357-2367 (2011).</li><li>Pocivavsek, A., Baratta, A. M., Mong, J. A., Viechweg, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Kynurenine+Challenge+Disrupts+Sleep-Wake+Architecture+and+Impairs+Contextual+Memory+in+Adult+Rats.">Acute Kynurenine Challenge Disrupts Sleep-Wake Architecture and Impairs Contextual Memory in Adult Rats.</a> Sleep. 40 (11), (2017).</li><li>Halassa, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytic+modulation+of+sleep+homeostasis+and+cognitive+consequences+of+sleep+loss.">Astrocytic modulation of sleep homeostasis and cognitive consequences of sleep loss.</a> Neuron. 61 (2), 213-219 (2009).</li><li>Erhardt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kynurenic+acid+levels+are+elevated+in+the+cerebrospinal+fluid+of+patients+with+schizophrenia.">Kynurenic acid levels are elevated in the cerebrospinal fluid of patients with schizophrenia.</a> Neuroscience Letters. 313 (1-2), 96-98 (2001).</li><li>Linderholm, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+levels+of+kynurenine+and+kynurenic+acid+in+the+CSF+of+patients+with+schizophrenia.">Increased levels of kynurenine and kynurenic acid in the CSF of patients with schizophrenia.</a> Schizophrenia Bulletin. 38 (3), 426-432 (2012).</li><li>Sathyasaikumar, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+kynurenine+pathway+metabolism+in+the+prefrontal+cortex+of+individuals+with+schizophrenia.">Impaired kynurenine pathway metabolism in the prefrontal cortex of individuals with schizophrenia.</a> Schizophrenia Bulletin. 37 (6), 1147-1156 (2011).</li><li>Schwarcz, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+cortical+kynurenate+content+in+schizophrenia.">Increased cortical kynurenate content in schizophrenia.</a> Biological Psychiatry. 50 (7), 521-530 (2001).</li><li>Pocivavsek, A., Rowland, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Neuroscience+Illuminates+Causal+Relationship+Between+Sleep+and+Memory:+Translating+to+Schizophrenia.">Basic Neuroscience Illuminates Causal Relationship Between Sleep and Memory: Translating to Schizophrenia.</a> Schizophrenia Bulletin. 44 (1), 7-14 (2018).</li><li>Shibata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorimetric+micro-determination+of+kynurenic+acid,+an+endogenous+blocker+of+neurotoxicity,+by+high-performance+liquid+chromatography.">Fluorimetric micro-determination of kynurenic acid, an endogenous blocker of neurotoxicity, by high-performance liquid chromatography.</a> Journal of Chromatography. 430 (2), 376-380 (1988).</li><li>Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+consolidation+during+sleep:+a+neurophysiological+perspective.">Memory consolidation during sleep: a neurophysiological perspective.</a> Journal of Sleep Research. 7, 17-23 (1998).</li><li>Graves, L. A., Heller, E. A., Pack, A. I., Abel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+selectively+impairs+memory+consolidation+for+contextual+fear+conditioning.">Sleep deprivation selectively impairs memory consolidation for contextual fear conditioning.</a> Learning &amp; Memory. 10 (3), 168-176 (2003).</li><li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tryptophan+circuit+in+fatigue:+From+blood+to+brain+and+cognition.">Tryptophan circuit in fatigue: From blood to brain and cognition.</a> Brain Research. 1675, 116-126 (2017).</li></ol>

Para una evaluación confiable de KYNA en el cerebro después de una administración periférica de la quinurenina, es fundamental combinar e interpretar experimentos bioquímicos y funcionales. Aquí, presentamos un protocolo detallado que permite a los usuarios nuevos para establecer métodos eficaces para la medición de la quinurenina de plasma y el cerebro KYNA de ratas. La medición de la quinurenina en plasma confirma la inyección precisa y la medición del metabolito KYNA confirma la síntesis de novo e...

El KP es responsable de degradar casi el 95% del aminoácido esencial triptófano1. En el cerebro mamífero, quinurenina en los astrocitos se metaboliza en la molécula pequeña neuroactivos KYNA principalmente por la enzima aminotransferasa (KAT) quinurenina II2. KYNA actúa como un antagonista en los receptores NMDA y α7nACh en el cerebro2,3,4, y también objetivos de señalización como el receptor de hidrocarburo de arilo (AHR) y la proteína G de receptores juntados receptor 35 (GPR35)5 ,6. En animales de experimentación, elevaciones en cerebro KYNA han demostrado para deteriorar su rendimiento cognitivo en una matriz de análisis conductual2,7,8,9,10 . Una hipótesis emergente sugiere que KYNA desempeña un papel integral en la modulación de las funciones cognitivas afectando sueño-vigilia comportamiento11, apoyando así aún más el papel de moléculas derivadas de astrositos en la modulación de la neurobiología del sueño y 12de la cognición.
Clínicamente, se han encontrado elevaciones en KYNA en líquido cefalorraquídeo y tejido fino del cerebro post mortem de pacientes con esquizofrenia13,14,15,16, un debilitante trastorno psiquiátrico caracterizado por debilitaciones cognoscitivas. Pacientes con esquizofrenia a menudo se ven afectados por trastornos del sueño que pueden exacerbar la enfermedad17. Entender el papel del metabolismo de KP y KYNA en la modulación de una relación entre el sueño y cognición, particularmente entre el aprendizaje y la memoria, puede conducir al desarrollo de nuevas terapias para el tratamiento de estos pobres resultados en la esquizofrenia y otros enfermedades psiquiátricas.
Un método confiable y consistente para la medición de metabolitos de KP es importante para garantizar que la investigación de distintas instituciones puede ser integrada en la comprensión científica de la biología de KP. En la actualidad, se describe la metodología para medir la quinurenina en plasma de rata y KYNA en el cerebro de la rata por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). El presente Protocolo, que hace uso de una detección fluorimétrica en presencia de Zn2 +, primero fue desarrollado por Shibata18 y más recientemente adaptado y optimizado para derivatize con acetato de zinc 500 mM como el reactivo de la columna, lo que permite la detección de endógeno, cantidad nanomolar de KYNA en el cerebro11.
Para estimular la producción endógena de KYNA de novo como se describe en el presente Protocolo, la quinurenina bioprecursor directa se inyecta por vía intraperitoneal (i.p.) en ratas. En combinación con evaluaciones bioquímicas para determinar el grado de producción de KYNA, los impactos de un quinurenina desafían la memoria dependiente del hipocampo (paradigma de evitación pasiva) y la arquitectura de sueño-vigilia (señales de EEG y EMG) es también investigar11. Una combinación de estas técnicas permite el estudio de los efectos bioquímicos y funcionales de un quinurenina reto en vivo en ratas.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Wistar rats</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td></td>
			<td>adult male, 250-350 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-kynurenine sulfate</td>
			<td>Sai Advantium</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ReproSil-Pur C18 column (4 x 150 mm)</td>
			<td>Dr. Maisch GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EZ Clips</td>
			<td>Stoelting Co.</td>
			<td>59022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting materials screws</td>
			<td>PlasticsOne</td>
			<td>00-96 X 1/16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonabsorbable Sutures</td>
			<td>MedRep Express</td>
			<td>699B</td>
			<td>CP Medical Monomid Black Nylon Sutures, 4-0, P-3, 18&#34;, BOX of 12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbable Sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J310H</td>
			<td>4-0 Coated Vicryl Violet 1X27&#39;&#39; SH-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental Cement</td>
			<td>Stoelting Co.</td>
			<td>51458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill Bit</td>
			<td>Stoelting Co.</td>
			<td>514551</td>
			<td>0.45 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alliance HPLC system</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E2695 separation module</td>
			<td>Waters</td>
			<td>176269503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2475 fluorescence detector</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186247500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>post-column reagent manager</td>
			<td>Waters</td>
			<td>725000556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenovo computer</td>
			<td>Waters</td>
			<td>668000249</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empower software</td>
			<td>Waters</td>
			<td>176706100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Passive avoidance box for rat</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra tall MDF sound attenuating cubicle</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-018MD</td>
			<td>Interior: 22&#34;W x 22&#34;H x 16&#34;D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Center channel modulator shuttle box chamber</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-010MC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel grid floor for rat</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-010MB-GF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Auto guillotine door</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-010B-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick disconnect shuttle grid floor harness for rat</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-010MB-QD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulus light, 1&#34; white lens, mounted on modular panel</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-221M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonalert module with volume control for rat chamber</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-223AM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SmartCtrl 8 input/16 output package</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>DIG-716P2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8 Channel IR control for shuttle boxes</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-253C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared source and dectector array strips</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-256</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tabletop interface cabinet, 120 V 60 Hz</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SG-6080C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual range constant current aversive stimulation module</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-410B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid state grid floor scrambler module</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual A/B shock control module</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>ENV-415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2&#39; 3-Pin mini-molex extension</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SG-216A-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10&#39; Shock output cable, DB-9 M/F</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SG-219G-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shuttle shock control cable 15&#39;, 6</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SG-219SA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small tabletop cabinet and power supply, 120 V 60 Hz</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SG-6080D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCI interface package</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>DIG-700P2-R2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shuttle box avoidance utility package</td>
			<td>MedAssociates</td>
			<td>SOF-700RA-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sleep-Wake Monitoring Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponehmah software</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>PNP-P3P-610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX2 8 Source Acquisition interface</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>PNM-P3P-MX204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dell computer, Optiplex 7020, Windows 7, 64 bit</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>271-0112-013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dell 19&#34; computer monitor</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>271-0113-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Receivers for plastic cages, 8x</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>272-6001-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cisco RV130 VPN router</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>RV130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrix 2.0</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>271-0119-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Network switch</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>SG200-08P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neuroscore software</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>271-0171-CFG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two biopotential channels transmitter, model TL11M2-F40-EET</td>
			<td>Data Sciences International (DSI)</td>
			<td>270-0134-001</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-performance liquid chromatography measurement of kynurenine and kynurenic acid: relating biochemistry to cognition and sleep in rats

La vía de la quinurenina (KP) de la degradación de triptófano ha sido implicada en trastornos psiquiátricos. Específicamente, el metabolito derivado de astrositos ácido quinurénico (KYNA), un antagonista en ambos N-metil-d-aspartato (NMDA) y α7 los receptores nicotínicos de la acetilcolina (α7nACh), se ha implicado en procesos cognitivos en la salud y la enfermedad. Como los niveles KYNA son elevados en los cerebros de pacientes con esquizofrenia, un mal funcionamiento en los receptores colinérgicos y glutamatérgicos se cree que la causal se relaciona con disfunción cognitiva, un dominio de base de la psicopatología de la enfermedad. KYNA puede jugar un papel patofisiológico importante en individuos con esquizofrenia. Es posible elevar el KYNA endógena en el cerebro de roedor por tratar a los animales con la quinurenina bioprecursor directa y estudios preclínicos en ratas han demostrado que elevaciones agudas en KYNA pueden afectar sus procesos de aprendizaje y la memoria. El protocolo actual describe este acercamiento experimental en detalle y combina a) un análisis bioquímico del nivel de quinurenina y cerebro formación KYNA (utilizando cromatografía líquida de alto rendimiento), b) comportamiento de prueba para probar la memoria contextual dependiente de hipocampo (paradigma de evitación pasiva) y c) una evaluación de comportamiento de sueño y vigilia [grabaciones telemétricas combinar señales de electromiografía (EMG) y Electroencefalografía (EEG)] en ratas. Tomados en conjunto, se estudia una relación entre el elevado KYNA, sueño y cognición, y este protocolo describe en detalle un enfoque experimental para comprender los resultados de la función de elevación de la quinurenina y KYNA formación en vivo en ratas. Resultados obtenidos a través de las variaciones de este protocolo pondrá a prueba la hipótesis que el KP y KYNA sirven papeles fundamentales en la modulación de sueño y cognición en Estados de salud y enfermedad.

Para validar el uso de una inyección intraperitoneal de quinurenina como método para elevar el cerebro KYNA, se realizó un análisis HPLC de tejido. Curvas estándar (figura 1) fueron construidas usando el software asociado y permite la cuantificación de las muestras de tejido. Cromatogramas representativos de quinurenina y KYNA se presentan en la figura 2. Quinurenina se observó en un tiempo de retención de 6 min y KYNA te...

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A High-performance Liquid Chromatography Measurement of Kynurenine and Kynurenic Acid: Relating Biochemistry to Cognition and Sleep in Rats

Una medida de la cromatografía líquida de alto rendimiento de quinurenina y ácido quinurénico: relacionados con la bioquímica cognición y sueño en ratas

Alteraciones en los metabolitos de quinurenina vía (KP) neuroactivos implicados en enfermedades psiquiátricas. Investigar los resultados funcionales de un alterado quinurenina vía metabolismo en vivo en los roedores puede ayudar a elucidar nuevos enfoques terapéuticos. El protocolo actual combina enfoques bioquímicos y de comportamiento para investigar el impacto de un desafío de quinurenina aguda en ratas.

The kynurenine pathway (KP) of tryptophan degradation has been implicated in psychiatric disorders. Specifically, the astrocyte-derived metabolite ...

Research

JoVE Journal

Behavior

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

El Grupo de Congruencia crossmodal como medio para obtener una medida del comportamiento objetivo de la Guía Caucho mano Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Investigación

Comportamiento

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Un procedimiento para estudiar el efecto de la prolongada restricción de alimentos en heroína Buscando en ratas abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Eye Tracking, Cortisol, and a Sleep vs. Wake Consolidation Delay: Combining Methods to Uncover an Interactive Effect of Sleep and Cortisol on Memory

Seguimiento de los ojos, el cortisol, y un sueño vs Wake Consolidación de retardo: Combinación de métodos para descubrir un efecto interactivo del sueño y cortisol en la memoria

Although rises in cortisol can benefit memory consolidation, as can sleep soon after encoding, there is currently a paucity of literature as to how these ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Un procedimiento para observar inducida Contexto-Renovación-pavloviano acondicionado Alcohol comportamiento de búsqueda en ratas

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Modulating Cognition Using Transcranial Direct Current Stimulation of the Cerebellum

Cognición modulante Usando transcraneal directa Estimulación actual del cerebelo

Numerous studies have emerged recently that demonstrate the possibility of modulating, and in some cases enhancing, cognitive processes by exciting brain ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

La Junta Agujero Modificado - Medición de Comportamiento, Cognición e interacción social en ratones y ratas

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms ECoGs and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

La manipulación de epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) y del sueño en ratas y ratones por acupuntura

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Un nuevo método para la inducción de un depresión-como comportamiento en ratas

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Noninvasive, High-throughput Determination of Sleep Duration in Rodents

Determinación no invasiva, de alto rendimiento de la duración del sueño en roedores

Traditionally, sleep is monitored by an electroencephalogram (EEG). EEG studies in rodents require surgical implantation of the electrodes followed by a ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

Un protocolo de preferencia de lugar condicionada para medir la incubación de antojo en ratas

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...