Name: sa-&#946;-galactosidase-based screening assay for the identification of senotherapeutic drugs
Uploaded: 2019-06-28T14:30:00
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यह काम NIH अनुदान AG043376 (परियोजना 2 और कोर ए, पीडीआर द्वारा समर्थित किया गया था; परियोजना 1 और कोर बी, LJN) और AG056278 (परियोजना 3 और कोर ए, पीडीआर; और परियोजना 2, LJN) और ग्लेन फाउंडेशन (LJN) से एक अनुदान.

पशु उपयोग Scripps फ्लोरिडा संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था.
1. जीर्ण murine भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट (एमईएफ) की पीढ़ी - 12-15 दिन
<ol><li>जंगली प्रकार और Ercc1अलग -/- भ्रूण दिवस 13 (E13...

एसए-जेड-गल मूल रूप से Dimri एट अल द्वारा की खोज की सेलुलर senscence के लिए एक अच्छी तरह से परिभाषित biomarker है. (1995) यह दर्शाता है कि जीर्ण मानव फाइब्रोब्लास्ट्स ने एसए-जेड-गल की गतिविधि में वृद्धि की है जब पीएच 6<sup class="xref...

सेलुलर जीर्णता Leonard Hayflick और पॉल Moorhead, जो पता चला है कि सामान्य कोशिकाओं को संस्कृति1में proliferate करने के लिए एक सीमित क्षमता थी द्वारा पहली बार के लिए वर्णित किया गया था. पोषक तत्वों, वृद्धि कारकों और संपर्क अवरोध की कमी के बावजूद सेसेंट कोशिकाएंबढ़ने में विफल रहती हैं, लेकिन चयापचयी रूप से सक्रिय रहती हैं। इस घटना प्रतिकृति sensence के रूप में जाना जाता है और मुख्य रूप से telomere छोटा करने के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था, कम से कम मानव कोशिकाओं में3. आगे के अध्ययनों से पता चला है कि कोशिकाओं को भी अन्य उत्तेजनाओं के जवाब में जीर्णता से गुजरना करने के लिए प्रेरित किया जा सकता है, इस तरह के oncogenic तनाव के रूप में (oncogene प्रेरित जीर्णता, OIS), डीएनए क्षति, साइटोटॉक्सिक दवाओं, या विकिरण (तनाव प्रेरित जीर्णता, एसआईएस)4 , 5 , 6. डीएनए क्षति के जवाब में, टेलोमेयर क्षरण सहित, कोशिकाएं या तो सेनेसिस, अनियंत्रित कोशिका वृद्धि शुरू करें, या यदि क्षति की मरम्मत नहीं की जा सकती तो एपोप्टोसिस से गुजरना। इस मामले में, कोशिका जीर्णता फायदेमंद लगती है क्योंकि यह ट्यूमर दमनकारी तरीके से कार्य करतीहै 2। इसके विपरीत, डीएनए क्षति सहित सेलुलर क्षति के संचय के कारण उम्र बढ़ने के साथ जीर्णता बढ़ जाती है। चूंकि जीर्ण कोशिकाओं साइटोकिन्स, मेटलोप्रोटीनेस और विकास कारकों को स्रावित कर सकती है, जिसे जीर्णता-संबद्ध स्रावी फीनोटाइप (एसएएसपी) कहा जाता है, सेलुलर सेनेसी और एसएएसपी में यह आयु-निर्भर वृद्धि ऊतक होमोस्टेसिस में योगदान देती है और बाद में उम्र बढ़ने. इसके अलावा, जीर्णता बोझ में इस उम्र पर निर्भर वृद्धि चयापचय रोगों, तनाव संवेदनशीलता,progeria सिंड्रोम, और बिगड़ा चिकित्सा 7,8 प्रेरित करने के लिए जाना जाता है और भाग में, कई उम्र से संबंधित के लिए जिम्मेदार है रोग, जैसे एथेरोस्क्लेरोसिस, ऑस्टियोआर्थराइटिस, मांसपेशियों के अध: पतन, अल्सर गठन, और अल्जाइमर रोग9,10,11,12,13. जीर्ण कोशिकाओं को समाप्त करने से ऊतक रोग को रोकने या उसमें विलंब करने में मदद मिल सकती है और स्वास्थ्य विस्तार14. यह ट्रांसजेनिक माउस मॉडल में दिखाया गया है14,15,16 के रूप में अच्छी तरह के रूप में senolytic दवाओं और दवा संयोजन है कि दोनों दवा स्क्रीनिंग प्रयासों और bioinformatic विश्लेषण के माध्यम से की खोज की थी का उपयोग करके विशेष रूप से जीर्ण कोशिकाओं में विशेष रूप से प्रेरित पथ17,18,19,20,21,22. अधिक इष्टतम senothethetic दवाओं की पहचान, और अधिक प्रभावी ढंग से senescent सेल बोझ को कम करने में सक्षम, स्वस्थ उम्र बढ़ने के लिए चिकित्सीय दृष्टिकोण के विकास में एक महत्वपूर्ण अगला कदम है.
सेन्सेन्ट कोशिकाएं संस्कृति और विवो दोनों में विशिष्ट लक्षणीय और आण्विक विशेषताएं दर्शाती हैं। ये जीर्णता मार्कर या तो कारण या जीर्णता प्रेरण या इन कोशिकाओं में आणविक परिवर्तन का प्रतिफल का परिणाम हो सकता है. तथापि, विशेष रूप से जीर्ण कोशिकाओं में कोई एकल मार्कर नहीं पाया जाता है। वर्तमान में, जीर्णता-संबद्ध -galactosidase (एसए-जेड-गल) का पता लगाने के सबसे अच्छा विशेषता और स्थापित एकल सेल आधारित तरीकों में से एक है इन विट्रो में और विवो में जीर्णता को मापने के लिए. एसए-जेड-गल पीएच 4 में एक इष्टतम एंजाइमी गतिविधि के साथ एक लाइसोमल हाइड्रोलेस है। पीएच 6 पर इसकी गतिविधि को मापना संभव है क्योंकि जीर्ण कोशिकाएं लाइसोसोमल गतिविधि23,24में वृद्धि दर्शाती हैं . जीवित कोशिकाओं के लिए, बढ़ी हुई लाइसोसोमल पीएच धानी एच+-ATPase अवरोध करनेवाला Bafilomycin A1 या एंडोसोमल अम्लअवरोधक्लोक्विन25,26के साथ lysomal क्षारीकरण द्वारा प्राप्त की है। 5-Dodecanoylaminofluorescein Di-जेड-डी-गैलैक्टोपाइरानोसाइड (सी12FDG) जीवित कोशिकाओं में सब्सट्रेट के रूप में प्रयोग किया जाता है क्योंकि यह अपने 12 कार्बन lipophilic moiety25के कारण कोशिकाओं में cleaved उत्पाद बरकरार रखता है। महत्वपूर्ण बात यह है कि एसए-जेड-गल गतिविधि स्वयं जीर्ण कोशिकाओं में पहचाने गए किसी भी मार्ग से सीधे तौर पर जुड़ा हुआ नहीं है और यह जीर्णता को प्रेरित करने के लिए आवश्यक नहीं है। इस परख के साथ, जीर्ण कोशिकाओं विषम कोशिका आबादी और उम्र बढ़ने के ऊतकों में भी पहचाना जा सकता है, ऐसे बड़े व्यक्तियों से त्वचा बायोप्सी के रूप में. इसका उपयोग कोशिका जीर्णता और आयु 23 के बीच सहसंबंध को दिखाने के लिए भी किया गया है क्योंकि यह कई जीवों और स्थितियों में जीर्ण कोशिका का पता लगाने के लिए एक विश्वसनीय मार्करहै 27,28,29, 30| यहाँ, एक उच्च थ्रूपुट एसए-जेड-गल स्क्रीनिंग परख फ्लोरोसेंट सब्सट्रेट सी12FDG पर आधारित प्राथमिक माउस भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट्स (एमईएफ) का उपयोग कर मजबूत ऑक्सीडेटिव तनाव प्रेरित सेल सेनेसी का वर्णन किया गया है और इसके फायदे और नुकसान चर्चा कर रहे हैं. हालांकि इस परख विभिन्न प्रकार के सेल के साथ किया जा सकता है, Ercc1की कमी का उपयोग, डीएनए की मरम्मत बिगड़ा MEFs ऑक्सीडेटिव तनाव की स्थिति में जीर्णता के और अधिक तेजी से प्रेरण के लिए अनुमति देता है. चूहों में, डीएनए की मरम्मत endonuclease ERCC1-XPF की कम अभिव्यक्ति बिगड़ा डीएनए की मरम्मत का कारण बनता है, अंतर्जात डीएनए क्षति के त्वरित संचय, ऊंचा ROS, mitochondrial रोग, वृद्धि हुई जीर्ण सेल बोझ, स्टेम सेल समारोह की हानि और समय से पहले उम्र बढ़ने , प्राकृतिक उम्र के समान31,32. इसी प्रकार, Ercc1कमी MEFs संस्कृति17में और अधिक तेजी से जीर्णता से गुजरना . जीर्ण एमईएफ परख की एक महत्वपूर्ण विशेषता यह है कि प्रत्येक अच्छी तरह से जीर्ण और गैर संवेदनशील कोशिकाओं का एक मिश्रण है, जीर्ण सेल विशेष प्रभाव का स्पष्ट प्रदर्शन के लिए अनुमति देता है. हालांकि, हालांकि हम मानते हैं कि प्राथमिक कोशिकाओं में ऑक्सीडेटिव तनाव का उपयोग सेनेसेंटेंस प्रेरित करने के लिए अधिक शारीरिक है, इस परख भी सेल लाइनों के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है जहां संवेदनशीलता एटोपोसाइड या विकिरण जैसे डीएनए हानिकारक एजेंटों के साथ प्रेरित किया जाता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:928px;" width="928">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">DMEM&#160;</td>
			<td style="width:201px;">Corning</td>
			<td style="width:344px;">10-013-CV</td>
			<td style="width:167px;">medium</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ham&#39;s F10</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12390-035</td>
			<td style="width:167px;">medium</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">fetal bovine serum</td>
			<td>Tissue Culture Biologics</td>
			<td>101</td>
			<td style="width:167px;">serum</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1x non-essential amino acids</td>
			<td>Corning</td>
			<td>25-025-Cl</td>
			<td style="width:167px;">amino-acids</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">bafilomycin A1&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B1793</td>
			<td style="width:167px;">lysosomal inhibitor</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">C12FDG</td>
			<td>Setareh Biotech</td>
			<td>7188</td>
			<td style="width:167px;">b-Gal substrate</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Hoechst 33342&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>H1399</td>
			<td style="width:167px;">DNA intercalation agent</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">17DMAG</td>
			<td>Selleck Chemical LLC</td>
			<td>50843</td>
			<td style="width:167px;">HSP90 inhibitor</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">InCell6000 Cell Imaging System</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td></td>
			<td style="width:167px;">High Content Imaging System</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sa-&#946;-galactosidase-based screening assay for the identification of senotherapeutic drugs

कोशिका जीर्णता एक स्वस्थ जीवन को नकारात्मक रूप से प्रभावित करने के लिए जाना जाता उम्र बढ़ने की पहचान में से एक है. सेल संस्कृति में विशेष रूप से सेनेसेंट कोशिकाओं को मारने में सक्षम दवाएं, जिसे सेनोलिटिक्स कहा जाता है, विवो में जीर्ण सेल बोझ को कम कर सकती है और स्वास्थ्य विस्तार कर सकती है। Senolytics के कई वर्गों HSP90 inhibitors सहित तारीख करने के लिए पहचान की गई है, Bcl-2 परिवार inhibitors, piperlongumine, एक FOXO4 निरोधात्मक पेप्टाइड और Dasatinib के संयोजन / बढ़ी हुई लाइसोसोमल पीएच पर एसए-जेड-गल का पता लगाना जीर्ण कोशिकाओं का पता लगाने के लिए सबसे अच्छा विशेषता मार्करों में से एक है। एक डीएनए intercalating Hoechst डाई का उपयोग कर कुल सेल संख्या के निर्धारण के साथ संयोजन में फ्लोरोसेंट सब्सट्रेट सी12FDG का उपयोग कर senescence-associated -galactosidase (एसए-जेड-गल) गतिविधि के लाइव सेल माप एक डीएनए intercalating Hoechst डाई का उपयोग कर की संभावना को खोलता है सेनोथैरेपी दवाओं के लिए स्क्रीन जो या तो सेनेसेंट कोशिकाओं (सेनोलिटिक्स) की हत्या करके या एसए-जेड-गल और अन्य फीनोटाइप्स को दबाकर समग्र एसए-जेड-गल गतिविधि को कम करती है। एक उच्च सामग्री फ्लोरोसेंट छवि अधिग्रहण और विश्लेषण मंच का उपयोग एसए-जेड-गल, सेल आकारिकी और सेल नंबर पर प्रभाव के लिए दवा पुस्तकालयों के तेजी से, उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग के लिए अनुमति देता है।

एसए-जेड-गल गतिविधि का पता उन कोशिकाओं में लगाया जा सकता है जो प्रतिकृति थकावट, जीनोटॉक्सिक और ऑक्सीडेटिव तनाव से लेकर ऑनकोजीन सक्रियण23,25,38से विभिन्न तरी?...

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SA-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-Galactosidase-Based Screening Assay for the Identification of Senotherapeutic Drugs

सेलुलर जीर्णता पुरानी उम्र से संबंधित रोगों के विकास में महत्वपूर्ण कारक है। चिकित्सीय की पहचान है कि लक्षित जीर्ण कोशिकाओं स्वस्थ उम्र बढ़ने का विस्तार करने के लिए वादा दिखाते हैं. यहाँ, हम एक कोशिकाओं में सेनेसी संबद्ध - Galactosidase गतिविधि की माप के आधार पर senothethetics की पहचान के लिए स्क्रीन करने के लिए एक उपन्यास परख प्रस्तुत करते हैं.

एसए-जेड-गैलैक्टोसिडेस-आधारित स्क्रीनिंग सेनोथैरेपी ड्रग्स की पहचान के लिए परख

Cell senescence is one of the hallmarks of aging known to negatively influence a healthy lifespan. Drugs able to kill senescent cells specifically in cell ...

हम यहां पहली बार एक विधि है कि senotherapeutic यौगिकों कि उंर बढ़ने से संबंधित रोगों में फायदेमंद दिखाया गया है के लिए उच्च थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग की अनुमति देता है के लिए वर्णन । वास्तव में, इस सार में परीक्षण दवाओं के साथ कई नैदानिक परीक्षण वर्तमान में चल रहे हैं। इस तकनीक का मुख्य लाभ सेंसेंट कोशिकाओं में एसए-बीटा-गैलेक्टोसिडेस की अच्छी तरह से स्थापित पहचान का उपयोग करके दो प्रकार की सेनोथेरेप्यूटिक दवाओं, सेनोलिटिक्स और सेनोमोर्फिक्स के बीच अंतर करना है।यह तकनीक उपन्यास सेनोथेरेप्यूटिक यौगिकों के लिए एक महत्वपूर्ण स्क्रीनिंग उपकरण है। वास्तव में, इस स्क्रीन की मदद से पहचाने गए कई यौगिकों को विभिन्न हाई-प्रोफाइल प्रकाशनों में चित्रित किया गया है, और वर्तमान में नैदानिक परीक्षण में हैं। यह तकनीक बेहद बहुमुखी है, और कई उच्च थ्रूपुट स्क्रीन के लिए अनुकूलित की जा सकती है।वास्तव में, मल्टीप्लेक्स स्क्रीन के लिए यह संभव है, और यौगिकों के लिए स्क्रीन जो कई रास्तों में से एक के सक्रियण या अवरोध के माध्यम से सेनेसेंस को दबाते हैं। प्रत्येक भ्रूण को एक मिलीमीटर के टुकड़ों में कीमा बना लें और इसे कई बार ऊपर और नीचे पाइप करें। इसके बाद, प्रत्येक भ्रूण के ऊतकों में विकास माध्यम के 10 मिलीलीटर जोड़ें।उन्हें 10 सेंटीमीटर कल्चर डिश में प्लेट करें, और दो से तीन दिनों के लिए 3% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड में 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। और 10 मिनट के लिए 0.25% ट्राइप्सिन EDTA मिश्रण के साथ प्रत्येक भ्रूण के बाकी इनक्यूबेट। कोशिकाओं को ट्रिपसिनाइज करने के लिए, सबसे पहले, विकास माध्यम को ध्यान से हटा दें और कोशिकाओं को दो बार 1X पीबीएस के 10 मिलीलीटर के साथ धोएं।फिर, कोशिकाओं में 025 ट्राइप्सिन ईडीटीए समाधान के दो मिलीलीटर जोड़ें, और उन्हें दो से तीन मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। इसके बाद, यह सुनिश्चित करने के लिए माइक्रोस्कोप के नीचे कोशिकाओं का निरीक्षण करें कि कोशिकाएं सतह से अलग हैं। ट्राइप्सिन पाचन को समाप्त करने के लिए विकास माध्यम की समान मात्रा जोड़ें, और कोशिकाओं को शंकु नली में स्थानांतरित करें।फिर, तीन मिनट के लिए 200 बार जी पर कोशिकाओं को अपकेंद्रित्र करें। सुपरनेट को त्यागें, और कोशिकाओं को फिर से निलंबित करने के लिए नए विकास माध्यम जोड़ें। इसके बाद, कोशिकाओं की गणना करें और उन्हें अनुमानित सेल घनत्व पर नई प्लेटों में बीज दें।गैर-सेंसेसेंट उपर्ृष्ठता के लिए, पहले, एक-से-चार अनुपात में कन्फ्यूलेंडेंट कोशिकाओं को विभाजित करें। फिर 3% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड में ३७ डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं को इनक्यूबेट एक और मार्ग के लिए विस्तार करने के लिए । इसके बाद, कोशिका सेनेसेंस को प्रेरित करने के लिए, बीज एक से चार के अनुपात में एक पारित होने से संकुचित कोशिकाओं को विभाजित करें और उन्हें तीन दिनों के लिए 20% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर्यावरण में ३७ डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें ।एक उन्नत कल्टर सेल काउंटर सिस्टम के साथ सेलुलर सेनेसेंस की निगरानी करने के लिए, प्रत्येक ट्राइपसिनाइजेशन चरण के दौरान सेल व्यास और सेल की मात्रा में क्रमिक वृद्धि को मापें। बीटा-गल स्क्रीनिंग परख शुरू करने के लिए, बीज 5, 000 सेंसेंट कोशिकाओं या 3, 000 गैर-सेंसेंट कोशिकाओं को अच्छी तरह से 96 अच्छी तरह से प्लेटों में प्रति अच्छी तरह से। फिर, प्रत्येक अच्छी तरह से विकास माध्यम के १०० माइक्रोलीटर जोड़ें और ३७ डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं को इनक्यूबेट और 20% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड छह घंटे के लिए ।इसके बाद, एमईएफ कोशिकाओं में दवा कमजोर पड़ने और कोशिकाओं को 20% ऑक्सीजन और 24 से 48 घंटे के लिए 5% कार्बन डाइऑक्साइड में 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। इनक्यूबेशन के बाद, दवा समाधान को हटा दें और 1X पीबीएस के 100 माइक्रोलीटर के साथ कोशिकाओं को धोएं। lysosomal क्षारीयकरण को प्रेरित करने के लिए, 100 नैनोमोलर की अंतिम एकाग्रता पर ताजा सेल संस्कृति माध्यम में पतला, बाफिलोमाइसिन ए 1 समाधान के 90 माइक्रोलीटर के साथ प्री-ट्रीट कोशिकाओं।फिर, एक घंटे के लिए 20% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड के वातावरण में 37 डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं को इनक्यूबेट करें। एसए-बीटा-गल गतिविधि के फ्लोरेसेंस विश्लेषण के लिए, 100 माइक्रोमोलर की अंतिम एकाग्रता पर विकास माध्यम में पतला C12FDG का एक नया काम समाधान बनाएं। फिर, 10 माइक्रोमोलर की अंतिम एकाग्रता पर संस्कृति माध्यम के लिए काम कर रहे समाधान के 10 माइक्रोलीटर जोड़ें, और 20% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड में 37 डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं को दो घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।1X पीबीएस के 100 माइक्रोलीटर के साथ कोशिकाओं को धोएं। इसके बाद, दो माइक्रोग्राम प्रति मिलीलीटर की अंतिम एकाग्रता पर 100 माइक्रोग्राम प्रति मिलीलीटर होचस्ट 33342 डाई के दो माइक्रोलीटर जोड़ें। कोशिकाओं को 37 डिग्री सेल्सियस, 20% ऑक्सीजन और 5% कार्बन डाइऑक्साइड को 20 मिनट तक इनक्यूबेट करें।इनक्यूबेशन के बाद, मीडिया को हटा दें, ताजा विकास माध्यम के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें, और इमेजिंग के लिए आगे बढ़ें। इस अध्ययन में, एक उच्च सामग्री फ्लोरोसेंट छवि अधिग्रहण और विश्लेषण मंच जैसे 17-DMAG के रूप में सेनोलिटिक दवाओं की पहचान के लिए अनुमति दी है, कि मुरीन भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट सेल पांच पारित होने में सेंसेंट कोशिकाओं युक्त संस्कृतियों में समग्र एसए बीटा-लड़की गतिविधियों को कम । सेंसेंट और गैर-सेंसेंट कोशिकाओं के मिश्रण के सॉफ्टवेयर-जनित मात्रात्मक विश्लेषण सेंसेंट सेल-विशिष्ट प्रभावों के स्पष्ट प्रदर्शन के लिए अनुमति देते हैं, और बाफिलोमाइसिन ए द्वारा पृष्ठभूमि बीटा-गैलेक्टोसिडेस गतिविधि का उन्मूलन सुनिश्चित करें कि सभी आवश्यक कोशिका नियंत्रण शामिल हैं, विशेष रूप से अनुपचारित सेंसेंट कोशिकाओं और सेंसेंट कोशिकाओं को सकारात्मक नियंत्रण के साथ इलाज किया जाता है।इस निबंध में ऑक्सीडेटिव तनाव के तहत प्राथमिक कोशिकाओं के साथ काम करना शामिल है, जिससे भिन्नता हो सकती है जिसकी निगरानी की आवश्यकता है। यह प्रक्रिया सेनोथेरेप्यूटिक दवाओं का पता लगाने में पहला कदम है । स्क्रीनिंग परिणामों की पुष्टि करने के लिए अतिरिक्त सेल व्यवहार्यता और सेल सेंसेंट निबंध किए जाने की आवश्यकता है।इस निबंध का उपयोग करके कई नई सेनोलिटिक दवाओं का पता लगाया गया है, जिनमें पहली सेनोलिटिक दवा संयोजन डैटिनिब क्वेरसेटिन, हीट शॉक प्रोटीन 90 अवरोधक, बीसीएल-2 परिवार अवरोधक, और पॉलीफेनॉल फिसेटिन शामिल हैं।

Research

JoVE Journal

Biology

SA-&#946;-Galactosidase-Based Screening Assay for the Identification of Senotherapeutic Drugs

Identification and Analysis of Mouse Erythroid Progenitors using the CD71/TER119 Flow-cytometric Assay

पहचान और माउस Erythroid progenitors के विश्लेषण CD71/TER119 परख फ्लो - cytometric का उपयोग

The study of erythropoiesis aims to understand how red cells are formed from earlier hematopoietic and erythroid progenitors. Specifically, the rate of ...

Fluorescence-microscopy Screening and Next-generation Sequencing: Useful Tools for the Identification of Genes Involved in Organelle Integrity

प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी जांच और अगली पीढ़ी के अनुक्रमण: organelle वफ़ादारी में शामिल जीनों की पहचान के लिए उपयोगी उपकरण

This protocol describes a fluorescence microscope-based screening of Arabidopsis seedlings and describes how to map recessive mutations that alter the ...

A Fluorescent Screening Assay for Identifying Modulators of GIRK Channels

GIRK चैनल की Modulators की पहचान के लिए एक फ्लोरोसेंट जांच परख

G protein-gated inward rectifier K+ (GIRK) channels function as cellular mediators of a wide range of hormones and neurotransmitters and are expressed in ...

Identification of Post-translational Modifications of Plant Protein Complexes

संयंत्र प्रोटीन परिसरों के बाद translational संशोधनों की पहचान

Plants adapt quickly to changing environments due to elaborate perception and signaling systems. During pathogen attack, plants rapidly respond to ...

RNA Catalyst as a Reporter for Screening Drugs against RNA Editing in Trypanosomes

Trypanosomes में आरएनए संपादन के खिलाफ दवाओं स्क्रीनिंग के लिए एक पत्रकार के रूप में शाही सेना उत्प्रेरक

Substantial progress has been made in determining the mechanism of mitochondrial RNA editing in trypanosomes. Similarly, considerable progress has been ...

High-throughput Screening for Chemical Modulators of Post-transcriptionally Regulated Genes

पोस्ट-transcriptionally विनियमित जीन का रासायनिक Modulators के लिए उच्च throughput स्क्रीनिंग

Both transcriptional and post-transcriptional regulation have a profound impact on genes expression. However, commonly adopted cell-based screening assays ...

Identification of Kinase-substrate Pairs Using High Throughput Screening

उच्च Throughput स्क्रीनिंग का उपयोग किनेस-सब्सट्रेट जोड़े की पहचान


We have developed a screening platform to identify dedicated human protein kinases for phosphorylated substrates which can be used to elucidate novel ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for the Identification of Arabidopsis Protein-DNA Interactions In Vivo

Chromatin Immunoprecipitation Assay for the Identification of Arabidopsis Protein-DNA Interactions In Vivo

एराबिडोप्सिस प्रोटीन डीएनए बातचीत की पहचान के लिए chromatin immunoprecipitation परख<em&gt; Vivo</em

Intricate gene regulatory networks orchestrate biological processes and developmental transitions in plants. Selective transcriptional activation and ...

Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus

Identification of Novel Regulators of Plant Transpiration by Large-Scale Thermal Imaging Screening in Helianthus Annuus

हेलिएथस एन्युस में बड़े पैमाने पर थर्मल इमेजिंग स्क्रीनिंग द्वारा पौधों के वाष्पीकरण के उपन्यास नियामकों की पहचान

Plant adaptation to biotic and abiotic stresses is governed by a variety of factors, among which the regulation of stomatal aperture in response to water ...

In situ Hybridization for Sipunculus nudus Coelomic Fluid

In situ Hybridization for Sipunculus nudus Coelomic Fluid

सिपन्यूकुलस नुडस कोलोमिक फ्लूइड के लिए सीटू संकरण में

In situ hybridization (ISH) is a very informative technique to present cellular distribution patterns of specific genes (e.g., mRNA and ncRNA) in tissues. ...