Name: use of hematopoietic stem cell transplantation to assess the origin of myelodysplastic syndrome
Uploaded: 2018-10-03T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome at JoVE.com

Questo lavoro è stato supportato dal programma di ricerca intramurale del National Cancer Institute, National Institutes of Health (concedere numeri ZIA SC 010378 e BC 010983).

Le procedure animale descritte in questo articolo sono state approvate dal National Cancer Institute a Bethesda Animal Care e Comitato di uso e sono conformi alle politiche contenute all'interno, la politica di servizio di sanità pubblica su cura umanitaria e uso di animali da laboratorio, il Animal Welfare Act e la guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio.
1. cella preparazione
<ol><li>Raccolta del midollo osseo cellule nucleate (BMNC)<ol>
<li>Utilizzare solo materiali steril...

<ol>
	<li>Corey, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes:+the+complexity+of+stem-cell+diseases.">Myelodysplastic syndromes: the complexity of stem-cell diseases.</a> Nature Reviews Cancer. 7 (2), 118-129 (2007).</li><li>Garcia-Manero, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes:+2015+Update+on+diagnosis,+risk-stratification+and+management.">Myelodysplastic syndromes: 2015 Update on diagnosis, risk-stratification and management.</a> American Journal of Hematology. 90 (9), 831-841 (2015).</li><li>Heaney, M. L., Golde, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplasia.">Myelodysplasia.</a> The New England Journal of Medicine. 340 (21), 1649-1660 (1999).</li><li>Nimer, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes.">Myelodysplastic syndromes.</a> Blood. 111 (10), 4841-4851 (2008).</li><li>Aul, C., Giagounidis, A., Germing, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiological+features+of+myelodysplastic+syndromes:+results+from+regional+cancer+surveys+and+hospital-based+statistics.">Epidemiological features of myelodysplastic syndromes: results from regional cancer surveys and hospital-based statistics.</a> International Journal of Hematology. 73 (4), 405-410 (2001).</li><li>Pedersen-Bjergaard, J., Christiansen, D. H., Desta, F., Andersen, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+genetic+pathways+and+cooperating+genetic+abnormalities+in+the+pathogenesis+of+therapy-related+myelodysplasia+and+acute+myeloid+leukemia.">Alternative genetic pathways and cooperating genetic abnormalities in the pathogenesis of therapy-related myelodysplasia and acute myeloid leukemia.</a> Leukemia. 20 (11), 1943-1949 (2006).</li><li>Uy, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+changes+in+the+clonal+structure+of+MDS+and+AML+in+response+to+epigenetic+therapy.">Dynamic changes in the clonal structure of MDS and AML in response to epigenetic therapy.</a> Leukemia. 31 (4), 872-881 (2017).</li><li>Gough, S. M., Slape, C. I., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NUP98+gene+fusions+and+hematopoietic+malignancies:+common+themes+and+new+biologic+insights.">NUP98 gene fusions and hematopoietic malignancies: common themes and new biologic insights.</a> Blood. 118 (24), 6247-6257 (2011).</li><li>Lin, Y. W., Slape, C., Zhang, Z., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NUP98-HOXD13+transgenic+mice+develop+a+highly+penetrant,+severe+myelodysplastic+syndrome+that+progresses+to+acute+leukemia.">NUP98-HOXD13 transgenic mice develop a highly penetrant, severe myelodysplastic syndrome that progresses to acute leukemia.</a> Blood. 106 (1), 287-295 (2005).</li><li>Block, M., Jacobson, L. O., Bethard, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preleukemic+acute+human+leukemia.">Preleukemic acute human leukemia.</a> Journal of the American Medical Association. 152 (11), 1018-1028 (1953).</li><li>Thanopoulou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+NOD/SCID-beta2+microglobulin+null+mice+with+multilineage+neoplastic+cells+from+patients+with+myelodysplastic+syndrome.">Engraftment of NOD/SCID-beta2 microglobulin null mice with multilineage neoplastic cells from patients with myelodysplastic syndrome.</a> Blood. 103 (11), 4285-4293 (2004).</li><li>Kerbauy, D. M., Lesnikov, V., Torok-Storb, B., Bryant, E., Deeg, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+distinct+clonal+MDS-derived+hematopoietic+precursors+in+NOD/SCID-beta2-microglobulin-deficient+mice+after+intramedullary+transplantation+of+hematopoietic+and+stromal+cells.">Engraftment of distinct clonal MDS-derived hematopoietic precursors in NOD/SCID-beta2-microglobulin-deficient mice after intramedullary transplantation of hematopoietic and stromal cells.</a> Blood. 104 (7), 2202-2203 (2004).</li><li>Benito, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID+mice+transplanted+with+marrow+from+patients+with+myelodysplastic+syndrome+(MDS)+show+long-term+propagation+of+normal+but+not+clonal+human+precursors.">NOD/SCID mice transplanted with marrow from patients with myelodysplastic syndrome (MDS) show long-term propagation of normal but not clonal human precursors.</a> Leukemia Research. 27 (5), 425-436 (2003).</li><li>Medyouf, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+cells+in+patients+reprogram+mesenchymal+stromal+cells+to+establish+a+transplantable+stem+cell+niche+disease+unit.">Myelodysplastic cells in patients reprogram mesenchymal stromal cells to establish a transplantable stem cell niche disease unit.</a> Cell Stem Cell. 14 (6), 824-837 (2014).</li><li>Chung, Y. J., Choi, C. W., Slape, C., Fry, T., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+a+myelodysplastic+syndrome+by+a+long-term+repopulating+hematopoietic+cell.">Transplantation of a myelodysplastic syndrome by a long-term repopulating hematopoietic cell.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (37), 14088-14093 (2008).</li><li>Pietras, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functionally+Distinct+Subsets+of+Lineage-Biased+Multipotent+Progenitors+Control+Blood+Production+in+Normal+and+Regenerative+Conditions.">Functionally Distinct Subsets of Lineage-Biased Multipotent Progenitors Control Blood Production in Normal and Regenerative Conditions.</a> Cell Stem Cell. 17 (1), 35-46 (2015).</li><li>Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injections+in+mice.">Retro-orbital injections in mice.</a> Lab Animal. 40 (5), 155-160 (2011).</li><li>Chung, Y. J., Fry, T. J., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloablative+hematopoietic+stem+cell+transplantation+improves+survival+but+is+not+curative+in+a+pre-clinical+model+of+myelodysplastic+syndrome.">Myeloablative hematopoietic stem cell transplantation improves survival but is not curative in a pre-clinical model of myelodysplastic syndrome.</a> PLoS One. 12 (9), e0185219 (2017).</li></ol>

Anche se MDS sono un disordine clonale di cellule staminali ematopoietiche, il MDS "gambo", o cellule di origine, non sono ancora state caratterizzate. Precedentemente abbiamo dimostrato che MDS possono essere transplantable ai topi WT usando il midollo osseo dai topi NHD13 di HSCT, caratterizzata da anemia macrocitica, leucopenia, neutropenia e prova morfologica della displasia15. Inoltre, analisi competitiva ripopolamento identificato un vantaggio di crescita delle cellule dal midollo osseo NHD1...

Le sindromi mielodisplastiche (MDS) rappresentano un gruppo eterogeneo di disordini clonali sangue caratterizzati da ematopoiesi inefficace, prova morfologica della displasia e una propensione per la trasformazione in leucemia mieloide acuta (AML)1,2 ,3,4. Ematopoiesi inefficace è riconosciuto come un arresto di maturazione nel midollo osseo e risultati nel sangue periferico citopenie nonostante un1,di midollo osseo ipercellulare3. L'incidenza di MDS è stato variamente stimato di 2-12 casi ogni 100.000 persone ogni anno negli Stati Uniti, e l'incidenza di MDS aumenta con l'età, rendendo questo una condizione importante per capire dato l'invecchiamento US popolazione3, 5. Anche se la maggior parte dei casi di MDS non hanno nessuna eziologia libera, alcuni casi di MDS sono probabilmente dovuto l'esposizione agli agenti genotossici noti, inclusi i solventi come benzene e cancro chemioterapia6.
Pazienti con sindromi mielodisplastiche hanno in genere acquisito mutazioni in cellule MDS7. Anche se relativamente raro, un numero di pazienti con sindromi mielodisplastiche hanno acquisito le traslocazioni cromosomiche bilanciate che coinvolgono geni quali NUP98, EVI1, RUNX1 e MLL (http://cgap.nci.nih.gov/Chromosomes/Mitelman). Il nostro laboratorio ha un interesse profondo traslocazioni cromosomiche, che coinvolgono il gene NUP988. Topi transgenici che esprimono un transgene NUP98-HOXD13 (NHD13) regolato dal promotore Vav1 e gli elementi enhancer di visualizzare tutte le caratteristiche chiave di MDS, compreso il sangue periferico citopenie, prova morfologica della displasia e la trasformazione di AML9 .
Sebbene MDS sono stati riconosciuti per oltre 60 anni10e sono considerati come un disordine clonale della cellula formativa, gli sforzi per attecchire cellula umana di MDS in topi immunodeficienti sono stati in gran parte infruttuosi, perché le cellule MDS integrano scarsamente11, 12,13,14 e i topi non sviluppano la malattia clinica. Nel tentativo di identificare quali cellule ematopoietiche possono trasmettere MDS, abbiamo girato per il modello di NHD13 e ha mostrato che noi potremmo interdigitate MDS come un'entità di malattia che ha mostrato tutti i segni cardinali di MDS umana, tra cui sangue periferico citopenie, displasia, e trasformazione da AML15. In questo rapporto, presentiamo i dettagli tecnici di questi esperimenti, nonché approcci ulteriormente frazionare ematopoietiche staminali e cellule del precursore (HSPC), nel tentativo di identificare cellule d'inizio di MDS.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>14 mL round bottom tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>10-527F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD45.2 antibody</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>1800-15</td>
			<td>LOT# A077-T044O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 mL Syringe</td>
			<td>Monoject</td>
			<td>8881513934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20-G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lineage Cocktail</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-090-858</td>
			<td>LOT# 5170418221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Biotin antibodies</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-113-288</td>
			<td>LOT# 5171109046</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>Excelint</td>
			<td>26027</td>
			<td>Insulin Syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Lamp</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>E70001901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS machine</td>
			<td>Cytec</td>
			<td>FACScan</td>
			<td>2 lasers, 5 color detectors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS sorting instrument</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>MOFLO ASTRIOS</td>
			<td>5 lasers, 23 parameters, 6 population sorting simulteneously</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium Iodide</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>P3566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gamma Irradiator</td>
			<td>Best Theratronics</td>
			<td>Gammacell 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube</td>
			<td>RAM scientific</td>
			<td>76011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recipient mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>B6-LY5.1/Cr, CD45.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NUP98-HOXD13 mice</td>
			<td>n/a</td>
			<td>C57Bl/6, CD45.2</td>
			<td>Colony maintained at NIH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL round bottom tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352058</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of hematopoietic stem cell transplantation to assess the origin of myelodysplastic syndrome

Sindromi mielodisplastiche (SMD) sono un gruppo eterogeneo di disordini di cellule staminali ematopoietiche che sono definiti da ematopoiesi inefficace, sangue periferico citopenie, displasia e una propensione per la trasformazione in leucemia acuta. Topi transgenici NUP98-HOXD13 (NHD13) ricapitolano MDS umano in termini di sangue periferico citopenie, displasia e trasformazione in leucemia acuta. Precedentemente abbiamo dimostrato che MDS può essere trasferito da un topo geneticamente ingegnerizzato con MDS ai destinatari di selvaggio-tipo di trapianto di cellule di midollo osseo nucleata MDS (BMNC). Più chiaramente capire la cella MDS di origine, abbiamo sviluppato approcci di trapiantare specifici, immunophenotypically definito sottoinsiemi ematopoietici. In questo articolo, descriviamo il processo di isolamento e di trapianto di specifiche popolazioni di staminali ematopoietiche e cellule progenitrici. A seguito di trapianto, descriviamo gli approcci per valutare l'efficacia del trapianto e la persistenza delle cellule MDS del donatore.

Vi mostriamo le figure rappresentative per risultati di molti esperimenti. La figura 1 Mostra un rappresentante flusso cytometry ordinamento esperimento. Durante il differenziamento ematopoietico normale, come le cellule diventano impegna un specifico lineage ematopoietico, acquisiscono lignaggio-definizione di indicatori di superficie delle cellule e perdere il potenziale di auto-rinnovamento. Pertanto, in topi wild-type, autorinnovamento delle cellule stami...

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Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome

Uso del trapianto di cellule staminali ematopoietiche per valutare l'origine della sindrome Myelodysplastic

Descriviamo l'uso del trapianto di cellule staminali ematopoietiche (HSCT) per valutare il potenziale maligno delle cellule emopoietiche geneticamente. HSCT è utile per valutare varie cellule ematopoietiche maligne in vivo , nonché generando un'ampia coorte di topi con sindromi mielodisplastiche (MDS) o leucemia per valutare nuove terapie.

Myelodysplastic syndromes (MDS) are a diverse group of hematopoietic stem cell disorders that are defined by ineffective hematopoiesis, peripheral blood ...

Questo metodo può aiutare a rispondere ad alcune domande nel campo del metodo di malignità sulla caratterizzazione di una cellula che inizia una malignità. Il principale vantaggio di questa tecnica è che fornisce una base per l'analisi funzionale di queste cellule staminali tumorali. Le implicazioni di questa tecnica si estendono dove la terapia delle sindromi mielodisplastiche o MDS, in quanto può aiutare nell'identificazione delle cellule che iniziano la malattia.Per preparare i destinatari al trasferimento adottivo, una settimana prima del trapianto fornire acqua sterile integrata con 100 milligrammi per litro di ciprofloxacina agli ANIMALI riceventi congeni per sette giorni in una struttura animale specifica e priva di agenti patogeni. Il settimo giorno, un operatore qualificato e certificato di cesio 17 ha impostato lo strumento sorgente di cesio per fornire 70 centigrays di irradiazione gamma corporea totale al minuto. Posizionare 10 topi in un supporto progettato su misura.Inserire il supporto nella camera dell'irradiatore, fornire 9 grigi di irradiazione totale del corpo in 13 minuti. Quindi riportare gli animali nelle loro gabbie. La mattina dopo, spruzzare il 70% di etanolo su un intero topo C57 nero da due a sei falena e usare le forbici per rimuovere la pelle dal bacino alle caviglie.Usa le flessidi con le forbici per rimuovere la femora e le tibiae. Tagliare in modo pulito i muscoli dalle ossa. Tagliare le estremità prossimali e distali per le tibiae e raccogliere una tibia con le forcep.Inserire una siringa da tre millilitri dotata di un ago da 27 gage nella cavità del midollo osseo e sciacquare il midollo osseo in un tubo inferiore rotondo da 14 millilitri contenente 2,5 millilitri di soluzione salina tamponata Hanks integrata con siero bovino fetale al 2% o HF2. Quando tutto il midollo è stato raccolto, aspirare il tessuto più volte attraverso la punta dell'ago da 20 gage per disperdere la massa del midollo in un'unica sospensione per il conteggio. Per etichettare le cellule nucleate del midollo osseo, o BMNC, per lo smistamento del flusso, raccogliere le cellule mediante centrifugazione e sospendere il pellet a una volta per dieci al settimo BMNC per 90 microlitri di concentrazione di HF2.Successivamente, aggiungere dieci microlitri di un cocktail anticorpale biotinilato e anti-lignaggio alla sospensione cellulare per un'incubazione di 20 minuti a 4 gradi Celsius. Seguito da un lavaggio centrifuga in tre millilitri di PBS. Sospendere di nuovo il pellet in 100 microlitri di HF2 per una per dieci fino alla settima cellule.Etichettare secondariamente le cellule con due microlitri di anticorpo anti biotina coniugato APC. Dopo 20 minuetti a quattro gradi Celsius, protetti dalla luce, lavare le cellule in tre millilitri di PBS fresco. Sospendere nuovamente il pellet in HF2 integrato con 0,2 microgrammi per millilitro di ioduro di propidio sul ghiaccio.Ora calibrate lo smistatore di celle di citometria a flusso utilizzando celle non macchiate per ottimizzare tutti i parametri di tubi fotomoltiplicatori, dispersione e fluorescenza all'interno dell'intervallo lineare di ogni rivelatore. Acquisire tre campioni di 10.000 celle per le celle etichettate APC senza etichetta, PI etichettate e anti-lignaggio. Alla fine dell'ordinamento, analizzare 1.000 celle da ogni campione per confermare la purezza e la vitalità delle celle ordinate.Spin giù i campioni nella centrifuga. Quindi sospendere di nuovo i pellet in 0,5 millilitri di HF2 per il conteggio. Per il trasferimento adottivo delle cellule selezionate, mescolare 100 microlitri di due volte il BMNC di tipo selvatico da un animale ricevente congene in HF2 sterile.Con 100 microlitri da due a cinque per dieci al quarto il donatore smistato BMNC di interesse per l'HF2 sterile in un tubo di micro centrifuga per animale ricevente. Caricare una siringa millilitro, dotata di un misuratore da 28 gage per ricevente con 200 microlitri di cellule. Quindi, posizionare i topi ricevente sotto una lampada termica per indurre la dilatazione della vena della coda.Consegnare le miscele cellulari a ciascun animale ricevente irradiato letale attraverso la vena della coda. Poiché l'autorinnovimento delle cellule staminali è limitato al lignaggio negativo BMNC di tipo selvatico, il lignaggio negativo, il basso lignaggio positivo e le cellule positive ad alta discendenza vengono ordinate e trapiantate in destinatari di tipo selvaggio per determinare la capacità di autori ricambio di ogni popolazione cellulare. Il BMNC trans genetico donatore trapiantato adottivamente da animali modello MDS può essere distinto ex vivo per la loro espressione marcatore di superficie cellulare CD45.2.Entro 16 settimane dal trapianto di BNMC negativo di lignaggio, o BMNC non di assortimento da animali donatori di MDS transgenici, le cellule transgeniche fuori competono con le cellule di tipo selvatico come evidenziato da una percentuale crescente di cellule donatrici positive CD45.2, osservate nel sangue periferico degli animali riceventi irradiati letale. Qui vengono mostrate cellule da una trasformazione leucemica da un topo trapiantato con cellule MDS transgeniche. Si noti la presenza di numerose esplosioni e forme immature.Durante il tentativo della procedura, è importante ricordare di limitare il tempo di manipolazione ex vivo, in quanto può posizionare stress indebito sulle cellule, con conseguente morte cellulare o perdita funzionale. Dopo lo sviluppo questa tecnica apre la strada ai ricercatori del programma sul campo, per mettere in malignità per esplorare la fonte della malattia nei topi geneticamente modificati.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Derivation of Retinal Pigment Epithelium Cells from Stem Cells

Derivazione efficiente di cellule retiniche epitelio pigmentato da cellule staminali

No cure has been discovered for age-related macular degeneration  (AMD), the leading cause of vision loss in people over the age of 55. AMD is complex ...

Ricerca

Biologia dello sviluppo

An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

Un metodo efficiente per ottenere cellule di grasso dedifferenziato

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Competitive Transplants to Evaluate Hematopoietic Stem Cell Fitness

Trapianti competitivi per valutare staminali ematopoietiche cellule Fitness

The gold standard definition of a hematopoietic stem cell (HSC) is a cell that when transferred into an irradiated recipient will have the ability to ...

Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection

Induzione di acuta muscolo scheletrico Rigenerazione da cardiotossina Injection

Skeletal muscle regeneration is a physiological process that occurs in adult skeletal muscles in response to injury or disease. Acute injury-induced ...

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

Un test a blot di 5 mc quantificando il livello di metilazione del DNA della dedifferentiation di condrociti<em&gt; In vitro</em

The dedifferentiation of hyaline chondrocytes into fibroblastic chondrocytes often accompanies monolayer expansion of chondrocytes in vitro. The global ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Una tecnica novel di trapianto di grassi del grasso mammario per visualizzare la generazione di vascelli delle cellule staminali endoteliali vascolari

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Bioingegneria dei microrganismi del midollo osseo umano nel mouse e la loro visualizzazione mediante imaging live

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Detection of Residual Donor Erythroid Progenitor Cells after Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Patients with Hemoglobinopathies

Rilevamento di cellule progenitrici eritroidi di donatore residua dopo trapianto di cellule staminali ematopoietiche per i pazienti con emoglobinopatie

The presence of incomplete chimerism is noted in a large proportion of patients following bone marrow transplant for thalassemia major or sickle cell ...

Clonal Analysis of Embryonic Hematopoietic Stem Cell Precursors Using Single Cell Index Sorting Combined with Endothelial Cell Niche Co-culture

Analisi clonale di cellule embrionali staminali ematopoietiche precursori utilizzando indice della singola cella ordinamento combinato con cellule endoteliali nicchia co-cultura

The ability to study hematopoietic stem cell (HSC) genesis during embryonic development has been limited by the rarity of HSC precursors in the early ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

Valutazione dei danni ossidativi nelle cellule primarie della superficie oculare del topo/cellule staminali in risposta ai danni ultravioletti-C (UV-C)

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...