Name: use of hematopoietic stem cell transplantation to assess the origin of myelodysplastic syndrome
Uploaded: 2018-10-03T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome at JoVE.com

Bu eser Ulusal Kanser Enstitüsü Intramural araştırma programı tarafından desteklenmiştir (vermek numaraları ZIA SC 010378 ve M.Ö. 010983) Sağlık Ulusal Enstitüsü.

Bu makalede açıklanan hayvan yordamlar Bethesda hayvan bakım ve kullanım Komitesi, Ulusal Kanser Enstitüsü tarafından kabul edildi ve insana ilişkin bakım ve kullanım Laboratuvar hayvanlarının, halk sağlığı hizmet politikası içinde bulunan ilkelerine uygun Hayvan hakları yasası ve Care and Use of Laboratory Animals için kılavuz.
1. hücre hazırlık
<ol><li>Hasat kemik iliği çekirdekli hücre (BMNC)<ol>
<li>Sadece steril malzemeler kullanın. Bir Buhar Otoklav kullana...

<ol>
	<li>Corey, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes:+the+complexity+of+stem-cell+diseases.">Myelodysplastic syndromes: the complexity of stem-cell diseases.</a> Nature Reviews Cancer. 7 (2), 118-129 (2007).</li><li>Garcia-Manero, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes:+2015+Update+on+diagnosis,+risk-stratification+and+management.">Myelodysplastic syndromes: 2015 Update on diagnosis, risk-stratification and management.</a> American Journal of Hematology. 90 (9), 831-841 (2015).</li><li>Heaney, M. L., Golde, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplasia.">Myelodysplasia.</a> The New England Journal of Medicine. 340 (21), 1649-1660 (1999).</li><li>Nimer, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+syndromes.">Myelodysplastic syndromes.</a> Blood. 111 (10), 4841-4851 (2008).</li><li>Aul, C., Giagounidis, A., Germing, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiological+features+of+myelodysplastic+syndromes:+results+from+regional+cancer+surveys+and+hospital-based+statistics.">Epidemiological features of myelodysplastic syndromes: results from regional cancer surveys and hospital-based statistics.</a> International Journal of Hematology. 73 (4), 405-410 (2001).</li><li>Pedersen-Bjergaard, J., Christiansen, D. H., Desta, F., Andersen, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+genetic+pathways+and+cooperating+genetic+abnormalities+in+the+pathogenesis+of+therapy-related+myelodysplasia+and+acute+myeloid+leukemia.">Alternative genetic pathways and cooperating genetic abnormalities in the pathogenesis of therapy-related myelodysplasia and acute myeloid leukemia.</a> Leukemia. 20 (11), 1943-1949 (2006).</li><li>Uy, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+changes+in+the+clonal+structure+of+MDS+and+AML+in+response+to+epigenetic+therapy.">Dynamic changes in the clonal structure of MDS and AML in response to epigenetic therapy.</a> Leukemia. 31 (4), 872-881 (2017).</li><li>Gough, S. M., Slape, C. I., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NUP98+gene+fusions+and+hematopoietic+malignancies:+common+themes+and+new+biologic+insights.">NUP98 gene fusions and hematopoietic malignancies: common themes and new biologic insights.</a> Blood. 118 (24), 6247-6257 (2011).</li><li>Lin, Y. W., Slape, C., Zhang, Z., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NUP98-HOXD13+transgenic+mice+develop+a+highly+penetrant,+severe+myelodysplastic+syndrome+that+progresses+to+acute+leukemia.">NUP98-HOXD13 transgenic mice develop a highly penetrant, severe myelodysplastic syndrome that progresses to acute leukemia.</a> Blood. 106 (1), 287-295 (2005).</li><li>Block, M., Jacobson, L. O., Bethard, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preleukemic+acute+human+leukemia.">Preleukemic acute human leukemia.</a> Journal of the American Medical Association. 152 (11), 1018-1028 (1953).</li><li>Thanopoulou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+NOD/SCID-beta2+microglobulin+null+mice+with+multilineage+neoplastic+cells+from+patients+with+myelodysplastic+syndrome.">Engraftment of NOD/SCID-beta2 microglobulin null mice with multilineage neoplastic cells from patients with myelodysplastic syndrome.</a> Blood. 103 (11), 4285-4293 (2004).</li><li>Kerbauy, D. M., Lesnikov, V., Torok-Storb, B., Bryant, E., Deeg, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+distinct+clonal+MDS-derived+hematopoietic+precursors+in+NOD/SCID-beta2-microglobulin-deficient+mice+after+intramedullary+transplantation+of+hematopoietic+and+stromal+cells.">Engraftment of distinct clonal MDS-derived hematopoietic precursors in NOD/SCID-beta2-microglobulin-deficient mice after intramedullary transplantation of hematopoietic and stromal cells.</a> Blood. 104 (7), 2202-2203 (2004).</li><li>Benito, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID+mice+transplanted+with+marrow+from+patients+with+myelodysplastic+syndrome+(MDS)+show+long-term+propagation+of+normal+but+not+clonal+human+precursors.">NOD/SCID mice transplanted with marrow from patients with myelodysplastic syndrome (MDS) show long-term propagation of normal but not clonal human precursors.</a> Leukemia Research. 27 (5), 425-436 (2003).</li><li>Medyouf, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelodysplastic+cells+in+patients+reprogram+mesenchymal+stromal+cells+to+establish+a+transplantable+stem+cell+niche+disease+unit.">Myelodysplastic cells in patients reprogram mesenchymal stromal cells to establish a transplantable stem cell niche disease unit.</a> Cell Stem Cell. 14 (6), 824-837 (2014).</li><li>Chung, Y. J., Choi, C. W., Slape, C., Fry, T., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+a+myelodysplastic+syndrome+by+a+long-term+repopulating+hematopoietic+cell.">Transplantation of a myelodysplastic syndrome by a long-term repopulating hematopoietic cell.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (37), 14088-14093 (2008).</li><li>Pietras, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functionally+Distinct+Subsets+of+Lineage-Biased+Multipotent+Progenitors+Control+Blood+Production+in+Normal+and+Regenerative+Conditions.">Functionally Distinct Subsets of Lineage-Biased Multipotent Progenitors Control Blood Production in Normal and Regenerative Conditions.</a> Cell Stem Cell. 17 (1), 35-46 (2015).</li><li>Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injections+in+mice.">Retro-orbital injections in mice.</a> Lab Animal. 40 (5), 155-160 (2011).</li><li>Chung, Y. J., Fry, T. J., Aplan, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloablative+hematopoietic+stem+cell+transplantation+improves+survival+but+is+not+curative+in+a+pre-clinical+model+of+myelodysplastic+syndrome.">Myeloablative hematopoietic stem cell transplantation improves survival but is not curative in a pre-clinical model of myelodysplastic syndrome.</a> PLoS One. 12 (9), e0185219 (2017).</li></ol>

MDS bir klonal hematopoetik kök hücre bozukluğu olmasına rağmen MDS "kök" veya Başlatan hücreleri, değil henüz karakterize. Biz daha önce MDS transplantable kemik iliği NHD13 fareler HKHT, makrositer anemi, lökopeni, nötropeni ve morfolojik displazi15kanıtı ile karakterize tarafından kullanarak WT farelere olabilir gösterdi. Buna ek olarak, rekabetçi repopulation deneyleri NHD13 MDS kemik iliği hücrelerinden büyüme avantajı tespit edilmiştir. Birlikte ele alındığında, ...

Myelodisplastik sendrom (MDS) klonal kan bozuklukları etkisiz hematopoiesis, displazi morfolojik kanıtı ve akut miyeloid lösemi (AML)1,2 için dönüştürme için bir eğilimi ile karakterize olan çeşitli bir dizi temsil ,3,4. Etkisiz hematopoiesis bir olgunlaşma durması kemik iliği ve periferik kan cytopenias bir hiperhücre kemik iliği1,3rağmen sonuçlarında kabul edilmektedir. MDS insidansı değişik Amerika Birleşik Devletleri'nde her yıl 100.000 kişi başına 2-12 vaka olarak tahmin edilmektedir ve bu yaşlanma ABD nüfusunun3verilen anlamak için önemli bir koşulu yapma yaş ile MDS insidansı artar, 5. MDS vakalarının çoğu etiyoloji yok olsa da, bazı durumlarda MDS, benzen ve kanser kemoterapi6gibi maddeleri de dahil olmak üzere bilinen genotoksik acentelere maruz olduğu düşünülür.
MDS hastalar genellikle MDS hücreleri7' deki mutasyonlar elde etti. Nispeten nadir olsa da, MDS hasta sayısı NUP98, EVI1, RUNX1 ve MLL (http://cgap.nci.nih.gov/Chromosomes/Mitelman) gibi genleri içeren dengeli kromozomal translokasyonlar elde etti. Bizim Laboratuvar NUP98 gene8dahil kromozom translokasyonlar uzun zamandır devam eden bir ilgisi yok. Transgenik fareler bir NUP98-HOXD13 (NHD13) transgene Vav1 düzenleyici tarafından düzenlenmekte ve artırıcı unsurlar MDS, periferik kan cytopenias, morfolojik kanıt displazi ve AML9 için dönüştürme de dahil olmak üzere temel özellikleri listeler bu hızlı .
MDS 60 yıl10için tanınan ve bir klonal kök hücre bozukluk olarak kabul rağmen MDS hücreler kötü11engraft çünkü insan MDS hücre immünyetmezligi farelerde engraft çabaları büyük ölçüde başarısız sağlanmıştır, 12,13,14 ve fareler klinik hastalık geliştirmek değil. Hangi hematopoetik hücrelerin MDS iletebilir tanımlamak için bir çaba NHD13 modeli için açık ve tüm insan MDS, periferik kan cytopenias, dahil olmak üzere temel özelliklerini gösterdi bir hastalık varlık olarak MDS engraft gösterdi displazi, ve AML15' e dönüştürme. Bu raporda, biz bir çaba MDS başlatılıyor hücrelerini tanımlamak için yaklaşımlar daha da hematopoetik kök ve öncü hücreleri (HSPC), fractionate yanı sıra bu deneyler teknik ayrıntılarını mevcut.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>14 mL round bottom tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>10-527F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD45.2 antibody</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>1800-15</td>
			<td>LOT# A077-T044O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 mL Syringe</td>
			<td>Monoject</td>
			<td>8881513934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20-G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lineage Cocktail</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-090-858</td>
			<td>LOT# 5170418221</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Biotin antibodies</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-113-288</td>
			<td>LOT# 5171109046</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>Excelint</td>
			<td>26027</td>
			<td>Insulin Syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Lamp</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>E70001901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS machine</td>
			<td>Cytec</td>
			<td>FACScan</td>
			<td>2 lasers, 5 color detectors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS sorting instrument</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>MOFLO ASTRIOS</td>
			<td>5 lasers, 23 parameters, 6 population sorting simulteneously</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium Iodide</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>P3566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gamma Irradiator</td>
			<td>Best Theratronics</td>
			<td>Gammacell 40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube</td>
			<td>RAM scientific</td>
			<td>76011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recipient mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>B6-LY5.1/Cr, CD45.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NUP98-HOXD13 mice</td>
			<td>n/a</td>
			<td>C57Bl/6, CD45.2</td>
			<td>Colony maintained at NIH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL round bottom tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352058</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of hematopoietic stem cell transplantation to assess the origin of myelodysplastic syndrome

Myelodisplastik sendrom (MDS) etkisiz hematopoiesis, periferik kan cytopenias, displazi ve akut lösemi için dönüştürme için bir eğilimi tarafından tanımlanan hematopoetik kök hücre bozuklukları farklı bir grubuz. NUP98-HOXD13 (NHD13) transgenik farelerde periferik kan cytopenias, displazi ve akut lösemi için dönüşüm açısından insan MDS özetlemek. Biz daha önce MDS MDS ile genetik bir fareden vahşi tipi alıcılara MDS kemik iliği parçalanmayabilir hücreleri (BMNC) dikim tarafından aktarılabilir olduğunu gösterdi. Daha açık MDS hücre kökenli anlamak, yaklaşımlar belirli nakli için geliştirdiğimiz, immunophenotypically hematopoetik kümelerinden. Bu makalede, yalıtma ve hematopoetik kök ve progenitör hücre belirli nüfus nakli işlemi açıklanmaktadır. Ekimi nakli verimliliğini ve sebat donör MDS hücre değerlendirmek için yaklaşımları açıklar.

Biz çeşitli deneylerin sonuçlarını temsilcisi rakamlarını gösterir. Şekil 1 deney sıralama bir temsilcisi akış sitometresi gösterir. Normal hematopoetik farklılaşma sırasında hücreleri belirli bir hematopoetik soy kararlı olmak gibi onlar hücre yüzey işaretleyicileri lineage tanımlama elde etmek ve kendini yenileme için potansiyel kaybedersiniz. Bu nedenle, vahşi tipi fareler, kök hücre kendini yenileme soy-negatif BMNC için sını...

Watch this Scientific Journal Video about Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome at JoVE.com

Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome

Hematopoetik kök hücre transplantasyonu myelodisplastik sendromu kökeni değerlendirmek için kullanımı

Hematopoetik kök hücre transplantasyonu (HKHT) genetiği hematopoetik hücrelerin kötü huylu potansiyelini değerlendirmek için nasıl kullanılacağını açıklar. HKHT çeşitli malign hematopoetik hücrelerin vivo içinde değerlendirmek için hem de Roman terapiler değerlendirmek için büyük bir kohort myelodisplastik sendrom (MDS) veya lösemi ile farelerin üreten yararlıdır.

Myelodysplastic syndromes (MDS) are a diverse group of hematopoietic stem cell disorders that are defined by ineffective hematopoiesis, peripheral blood ...

Bu yöntem, malignite başlatan bir hücrenin karakterizasyonu hakkında malignite alanı yönteminde birkaç soruya cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, bu kanser kök hücrelerinin fonksiyonel analizi için bir temel sağlamasıdır. Bu tekniğin etkileri nerede miyelodisplastik sendromlar veya MDS tedavisi uzanır, bu hastalığın başlatıcı hücrelerin belirlenmesinde yardımcı olabilir gibi.Alıcıları evlat edinme transferine hazırlamak için, nakilden bir hafta önce, belirli bir patojensiz hayvan tesisinde yedi gün boyunca alıcı ANIMALS'ı con genic alıcısına litre başına 100 miligram siprofloksasin ile takviye steril su sağlar. Yedinci gün, eğitimli, sertifikalı sezyum 17 operatör dakikada toplam vücut gama ışınlama 70 centigrayS sunmak için sezyum kaynak aleti ayarlayın. 10 fareyi özel olarak tasarlanmış bir tutucuya yerleştirin.Tutucuyu ışınlama odasına takın, 13 dakikada 9 gri toplam vücut ışınlaması gerçekleştirin. Sonra hayvanları kafeslerine geri getirin. Ertesi sabah, sprey yüzde 70 etanol bütün bir iki ila altı güve eski C57 siyah altı fare ve ayak bileklerine leğen kemiği deri kaldırmak için makas kullanın.Femora ve tibiae kaldırmak için makas ile forceps kullanın. Kemiklerdeki kasları temiz bir şekilde kırpın. Tibiae için proksimal ve distal uçları kesin ve forseps ile bir tibia almak.Kemik iliği boşluğuna 27 gage iğneile donatılmış üç mililitrelik şırınga yerleştirin ve kemik iliğini 2.5 mililitrelik Hanks tamponlu serum veya HF2 ile takviye edilmiş 2.5 mililitrelik bir tüp içeren 14 mililitrelik yuvarlak alt tüpe boşaltın. Tüm ilik toplandığında, 20 gage iğne ucu ile doku birkaç kez aspire sayma için tek bir süspansiyon içine ilik kütlesi dağıtmak için. Akış ayıklama için kemik iliği çekirdekli hücreleri etiketlemek için, santrifüj asyon hücreleri toplamak ve hf2 konsantrasyonu 90 mikrolitre başına yedinci BMNC bir kez on pelet askıya.Daha sonra, 4 santigrat derece 20 dakikalık kuluçka için hücre süspansiyon için bir biyotinylated, anti-soy antikor kokteyl on mikrolitre ekleyin. Ardından üç mililitre PBS'de santrifüj yıkama. Tekrar yedinci hücrelere on kez on başına HF2 100 mikrolitre pelet askıya.İkinci olarak apc konjuge anti biotin antikor iki mikrolitre ile hücreleri etiket. Dört derece santigrat 20 minuets sonra, ışıktan korunan, taze PBS üç mililitre hücreleri yıkayın. HF2'deki peleti tekrar askıya alın ve buz üzerinde propidium iyodürünün mililitresine 0.2 mikrogram verin.Şimdi her dedektörün doğrusal aralığındaki tüm fotoçarpan tüpleri, dağılım ve floresan parametrelerini optimize etmek için lekesiz hücreleri kullanarak akış sitometri hücre ayırıcısını kalibre edin. Etiketlenmemiş, PI etiketli ve anti soy APC etiketli hücreler için 10.000 hücreden oluşan üç örnek edinin. Sıralamanın sonunda, sıralanmış hücrelerin saflığını ve canlılığını doğrulamak için her örnekten 1.000 hücreanaliz edin.Santrifüjdeki örnekleri aşağı çevirin. Daha sonra sayma için HF2 0,5 mililitre pelet askıya. Sıralanmış hücrelerin benimseyen transferi için, steril HF2'deki bir alıcı hayvandan beşinci vahşi tip BMNC'nin iki katı kadar 100 mikrolitre karıştırın.Alıcı hayvan başına bir mikro santrifüj tüp steril HF2 ilgi sıralanmış donör BMNC dördüncü 2-5 kat 100 mikrolitre ile. 200 mikrolitre hücre ile alıcı başına 28 gage ile donatılmış bir mililitreşşük şırınga yükleyin. Daha sonra, kuyruk damar genişlemesi neden bir ısı lambası altında alıcı fareler yerleştirin.Kuyruk damarı ile her öldürücü ışınlanmış alıcı hayvana hücre karışımları teslim. Kök hücre kendini yenileme soyu negatif yabani tip BMNC ile sınırlı olduğundan, soy negatif, düşük soy pozitif ve yüksek soy pozitif hücreler sıralanır ve her hücre popülasyonunun kendini yenileme kapasitesini belirlemek için yabani tip alıcılara nakledilir. MDS model hayvanlardan adoptively nakledilen donör trans genetik BMNC onların CD45.2 hücre yüzey marker ekspresyonu ile ex vivo ayırt edilebilir.Transgenik MDS donör hayvanlardan soy negatif BNMC veya sıralanmamış BMNC naklinden 16 hafta sonra, transgenik hücreler, öldürücü ışınlanmış alıcı hayvanların periferik kanda gözlenen CD45.2 pozitif donör hücrelerinin artan bir yüzdesi ile kanıtlanan vahşi tip hücrelerle rekabet eder. Burada transgenik MDS hücreleri ile nakledilen bir fareden lösemik dönüşüm hücreleri gösterilmiştir. Çok sayıda patlamalar ve olgunlaşmamış formları varlığı na dikkat edin.Prosedürü denerken, hücre ölümü veya fonksiyonel kayıp ile sonuçlanan hücreler üzerinde aşırı stres yerleştirebilirsiniz gibi, ex vivo manipülasyon süresini sınırlamak için hatırlamak önemlidir. Bu teknik, geliştirildikten sonra, genetik olarak tasarlanmış farelerde hastalığın kaynağını araştırmak için maligniteyi ortaya koymak için, alan programındaki araştırmacıların önünü açıyor.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Derivation of Retinal Pigment Epithelium Cells from Stem Cells

Kök Hücreleri Retina pigment epiteli hücrelerinin Verimli türetilmesi

No cure has been discovered for age-related macular degeneration  (AMD), the leading cause of vision loss in people over the age of 55. AMD is complex ...

An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

Etkin Bir Yöntem Dediferansiye Yağ Hücreleri Elde

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Competitive Transplants to Evaluate Hematopoietic Stem Cell Fitness

Rekabetçi Nakli Hematopoetik Kök Hücre Fitness değerlendirin

The gold standard definition of a hematopoietic stem cell (HSC) is a cell that when transferred into an irradiated recipient will have the ability to ...

Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection

Cardiotoxin Enjeksiyonu ile Akut İskelet Kası Regeneration indüksiyon

Skeletal muscle regeneration is a physiological process that occurs in adult skeletal muscles in response to injury or disease. Acute injury-induced ...

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

5-mC Nokta-Blot Testi Kondrosit Farklılaşmasımın DNA Metilasyon Seviyesinin Nicelendirilmesi<em&gt; In vitro</em

The dedifferentiation of hyaline chondrocytes into fibroblastic chondrocytes often accompanies monolayer expansion of chondrocytes in vitro. The global ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Vasküler Endotelyal Kök Hücrelerin Damar Oluşumunu Görselleştirmek İçin Yeni Bir Göğüs Göğsü Transplantasyon Tekniği

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Fare Malı İnsani Kemik İliği Mikro Çevrelerinin Biyomühendisliği ve Canlı Görüntüleme ile Görselleştirilmesi

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Detection of Residual Donor Erythroid Progenitor Cells after Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Patients with Hemoglobinopathies

Hematopoetik kök hücre transplantasyonu Hemoglobinopati olan hastalar için sonra kalan donör Erythroid progenitör hücre algılama

The presence of incomplete chimerism is noted in a large proportion of patients following bone marrow transplant for thalassemia major or sickle cell ...

Clonal Analysis of Embryonic Hematopoietic Stem Cell Precursors Using Single Cell Index Sorting Combined with Endothelial Cell Niche Co-culture

Embriyonik hematopoetik kök hücre öncüleri endotel hücre niş ortak kültürü ile kombine sıralama tek hücre dizini kullanarak klonal analizi

The ability to study hematopoietic stem cell (HSC) genesis during embryonic development has been limited by the rarity of HSC precursors in the early ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

Ultraviyole-C (UV-C) Hasarına Yanıt Olarak Birincil Fare Oküler Yüzey Hücrelerinde/Kök Hücrelerinde Oksidatif Hasarın Değerlendirilmesi

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...