Name: a silver nanoparticle method for ameliorating biliary atresia syndrome in mice
Uploaded: 2018-10-13T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice at JoVE.com

وكانت أجنبس المستخدمة هنا هدية من جيم تشي م. في قسم الكيمياء، جامعة هونغ كونغ. تم تمويل هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية (رقم 81600399) والعلوم والتكنولوجيا المشروع من قوانغتشو (No.201707010014).

جميع البروتوكولات التجريبية الحيوانية أقرتها لجنة استخدام صن يأت-صن الجامعة مختبر الحيوان مركز (#إياكوك-DB-16-0602) ورعاية الحيوان المؤسسية.
1-إنشاء نموذج الماوس الكبدية الصفراوية
<ol><li>الحفاظ على الحوامل بالب/ج الفئران في بيئة خالية من مسببات الأمراض محددة ضمن دورة الظلام/ضوء ?...

<ol>
	<li>Szavay, P. O., Leonhardt, J., Czechschmidt, G., Petersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+reovirus+type+3+infection+in+an+established+murine+model+for+biliary+atresia.">The role of reovirus type 3 infection in an established murine model for biliary atresia.</a> European Journal of Pediatric Surgery. 12 (04), 248-250 (2002).</li><li>Coots, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rotavirus+infection+of+human+cholangiocytes+parallels+the+murine+model+of+biliary+atresia.">Rotavirus infection of human cholangiocytes parallels the murine model of biliary atresia.</a> Journal of Surgical Research. 177 (2), 275-281 (2012).</li><li>Shanmugam, N. P., Jayanthi, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+atresia+with+cytomegalovirus.">Biliary atresia with cytomegalovirus.</a> Indian Pediatrics. 49 (2), 157 (2012).</li><li>Mack, C. L., Feldman, A. G., Sokol, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clues+to+the+Etiology+of+Bile+Duct+Injuryin+Biliary+Atresia.">Clues to the Etiology of Bile Duct Injuryin Biliary Atresia.</a> Seminars in Liver Disease. 32, 307-316 (2012).</li><li>Muraji, T., Suskind, D. L., Irie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+atresia:+a+new+immunological+insight+into+etiopathogenesis.">Biliary atresia: a new immunological insight into etiopathogenesis.</a> Expert Review of Gastroenterology &amp; Hepatology. 3 (6), 599-606 (2009).</li><li>Sokol, R. J., Mack, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etiopathogenesis+of+Biliary+Artesia.">Etiopathogenesis of Biliary Artesia.</a> Seminars in Liver Disease. 21, 517-524 (2001).</li><li>Shivakumar, P., Sabla, G. E., Whitington, P., Chougnet, C. A., Bezerra, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+NK+cells+target+the+mouse+duct+epithelium+via+Nkg2d+and+drive+tissue-specific+injury+in+experimental+biliary+atresia.">Neonatal NK cells target the mouse duct epithelium via Nkg2d and drive tissue-specific injury in experimental biliary atresia.</a> Journal of Clinical Investigation. 119 (8), 2281-2290 (2009).</li><li>Mack, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligoclonal+expansions+of+CD4++and+CD8++T-cells+in+the+target+organ+of+patients+with+biliary+atresia.">Oligoclonal expansions of CD4+ and CD8+ T-cells in the target organ of patients with biliary atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 278-287 (2007).</li><li>Shivakumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effector+Role+of+Neonatal+Hepatic+CD8+++Lymphocytes+in+Epithelial+Injury+and+Autoimmunity+in+Experimental+Biliary+Atresia.">Effector Role of Neonatal Hepatic CD8 + Lymphocytes in Epithelial Injury and Autoimmunity in Experimental Biliary Atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 268-277 (2007).</li><li>Saxena, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+Cells+Regulate+Natural+Killer+Cell+Activation+and+Epithelial+Injury+in+Experimental+Biliary+Atresia.">Dendritic Cells Regulate Natural Killer Cell Activation and Epithelial Injury in Experimental Biliary Atresia.</a> Science Translational Medicine. 3 (102), (2011).</li><li>Miethke, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-natal+paucity+of+regulatory+T+cells+and+control+of+NK+cell+activation+in+experimental+biliary+atresia.">Post-natal paucity of regulatory T cells and control of NK cell activation in experimental biliary atresia.</a> Journal of Hepatology. 52 (5), 718-726 (2010).</li><li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+delivery+of+silver+nanoparticles+promotes+wound+healing.">Topical delivery of silver nanoparticles promotes wound healing.</a> ChemMedChem. 2 (1), 129-136 (2010).</li><li>Lu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+inhibit+hepatitis+B+virus+replication.">Silver nanoparticles inhibit hepatitis B virus replication.</a> Antiviral Therapy. 13 (2), 253-262 (2008).</li><li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+A/Human/Hubei/3/2005+(H3N2)+influenza+virus+infection+by+silver+nanoparticles+in+vitro+and+in+vivo.">Inhibition of A/Human/Hubei/3/2005 (H3N2) influenza virus infection by silver nanoparticles in vitro and in vivo.</a> International Journal of Nanomedicine. 8 (Issue 1), 4103-4114 (2013).</li><li>Elechiguerra, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+silver+nanoparticles+with+HIV-1.">Interaction of silver nanoparticles with HIV-1.</a> Journal of Nanobiotechnology. 3 (1), 1-10 (2005).</li><li>Nallanthighal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+silver+nanoparticles+on+DNA+damage+and+DNA+repair+gene+expression+in+Ogg1-deficient+and+wild+type+mice.">Differential effects of silver nanoparticles on DNA damage and DNA repair gene expression in Ogg1-deficient and wild type mice.</a> Nanotoxicology. 11 (8), 1-16 (2017).</li><li>Wen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+toxicity+and+genotoxicity+of+silver+nanoparticle+in+rats.">Acute toxicity and genotoxicity of silver nanoparticle in rats.</a> PLoS One. 12 (9), e0185554 (2017).</li><li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticle+treatment+ameliorates+biliary+atresia+syndrome+in+rhesus+rotavirus+inoculated+mice.">Silver nanoparticle treatment ameliorates biliary atresia syndrome in rhesus rotavirus inoculated mice.</a> Nanomedicine. 13 (3), 1041-1050 (2017).</li><li>Arnold, M., Patton, J. T., McDonald, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing,+Storage,+and+Quantification+of+Rotaviruses.">Culturing, Storage, and Quantification of Rotaviruses.</a> Current Protocols in Microbiology. , (2009).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+mediate+differential+responses+in+keratinocytes+and+fibroblasts+during+skin+wound+healing.">Silver nanoparticles mediate differential responses in keratinocytes and fibroblasts during skin wound healing.</a> ChemMedChem. 5 (3), 468-475 (2010).</li><li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+promote+osteogenesis+of+mesenchymal+stem+cells+and+improve+bone+fracture+healing+in+osteogenesis+mechanism+mouse+model.">Silver nanoparticles promote osteogenesis of mesenchymal stem cells and improve bone fracture healing in osteogenesis mechanism mouse model.</a> Nanomedicine. 11 (8), 1949-1959 (2015).</li><li>Wu, J., Hou, S., Ren, D., Mather, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+properties+of+nanostructured+hydrogel+webs+containing+silver.">Antimicrobial properties of nanostructured hydrogel webs containing silver.</a> Biomacromolecules. 10 (9), 2686-2693 (2009).</li><li>Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotoxicity+and+molecular+response+of+silver+nanoparticle+(NP)-based+hydrogel.">Genotoxicity and molecular response of silver nanoparticle (NP)-based hydrogel.</a> Journal of Nanobiotechnology. 10 (1), 16 (2012).</li><li>Dobrzy&#324;ska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotoxicity+of+silver+and+titanium+dioxide+nanoparticles+in+bone+marrow+cells+of+rats+in+vivo.">Genotoxicity of silver and titanium dioxide nanoparticles in bone marrow cells of rats in vivo.</a> Toxicology. 315 (1), 86-91 (2014).</li><li>Mohamed, H. R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+TiO+2+nanoparticle-induced+genotoxicity+persistence+and+possible+chronic+gastritis-induction+in+mice.">Estimation of TiO 2 nanoparticle-induced genotoxicity persistence and possible chronic gastritis-induction in mice.</a> Food &amp; Chemical Toxicology. 83 (9), 76-83 (2015).</li></ol>

أجنبس يحمل خصائص مضادة للجراثيم واسعة الطيف قوية ونفاذيه قوية22؛ بالإضافة إلى ذلك، يتم استخدامها لإنتاج مجموعة من المنتجات المضادة للبكتيريا الطبية23. ومع ذلك، أجنبس يمكن أن يستغرق وقتاً طويلاً لمسح مرة واحدة أنها تتراكم في الأعضاء، واستمرار هذه قد تؤدي إلى تأثي?...

با شكل من ركود صفراوي تتسم باستمرار اليرقان وارتفاع معدل الوفيات في غياب زرع الكبد. الالتهابات الفيروسية ترتبط ارتباطاً وثيقا بالآلية المرضية لمكتبة الإسكندرية. الفيروس المضخم للخلايا، ريوفيروس، وفيروس روتا جميعا قد اقترحت كممرضات في مكتبة الإسكندرية1،،من23. خلال فترة الوليد، استجابة النظام المناعي غير ناضجة لالتهاب فيروسي يؤدي إلى التقلبات محصنة ضد القنوات الصفراوية إضافية-وأحيانا، مما يؤدي إلى استموات الخلايا الظهارية الصفراوية، تسلل الخلايا الملتهبة في المدخل المنطقة، وانسداد القناة الصفراوية أحياناً واكستراهيباتيك، وأخيراً، تليف الكبد4،،من56.
نموذج الحيوان استخداماً للدراسات با ينطوي على تلقيح ماوس الوليد بفيروس الروتا الريسوسي (RRV). عادة ما تضع الماوس اليرقان بعد 5-6 أيام، عرض على وزن جسم منخفض والبراز أتشوليك. ويتمثل دور الاستجابة المناعية في عملية المرض الحرجة، خاصة بالنسبة للخلايا (ناغورني كاراباخ) القاتل الطبيعية؛ استنفاد هذه الخلايا مع الأجسام المضادة NKG2D يقلل كثيرا من الأضرار التي يسببها با7. وعلاوة على ذلك، الخلايا الأخرى، بما في ذلك خلايا CD4+ تي خلايا CD8+ تي الخلايا والخلايا الجذعية والخلايا التائية التنظيمية، الجميع تبين أن تلعب أدواراً في المرض8،9،،من1011. كافة البيانات تشير إلى طبيعة الجهاز المناعي أثناء با لا غنى عنه.
جسيمات فضة نانوية (أجنبس) أثبتت أن تكون لها آثار مفيدة ضد بعض الأمراض المعدية، بما في ذلك12 من الإصابات البكتيرية والالتهابات الفيروسية13،،من1415. بيد عدا استخدام الأمراض الجلدية، ودراسات قليلة استخدمت أجنبس في علاج السريري، معظمهم بسبب سميتها المحتملة. في التجارب على الحيوانات، وقد درس الباحثون عموما فعالية أجنبس تدار عن طريق الفم16 أو17من طرق الحقن الوريدي. ومع ذلك، لا باحثين آخرين درسوا فعالية أجنبس تدار عن طريق حقنه داخل (القائمة) في الماوس الولدان والتجارب، الذي هو طريقة بسيطة وسريعة تؤدي إلى تأثير مباشر أكثر في الكبد والقناة الصفراوية أثناء تقليل السمية إلى أنظمة أخرى مثل نظام المناعة. أجنبس قد ثبت أن تؤثر على نشاط الخلية ناغورني كاراباخ18؛ ولذلك، نحن اختبار الآثار العلاجية من أجنبس تدار عن طريق الحقن القائمة في نموذج الماوس با.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BALB/c mouse</td>
			<td>Guangdong Medical Experimental Animal Center</td>
			<td>SYXK2017-0174</td>
			<td>Animal experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhesus rotavirus (RRV)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC&#160;VR-1739</td>
			<td>Establish biliary atresia mouse model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MA104 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC&#160;CRL-2378.1</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10569010</td>
			<td>Mammalian Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10099141</td>
			<td>Mammalian Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagen Type I</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>354236</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>OXOID</td>
			<td>BR0014G</td>
			<td>For washing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1310-73-2</td>
			<td>Adjust the PH value</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AgNP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Antibacterial 
			Note: The AgNps was a gift from Prof CM Che. in the Department of Chemistry, the University of Hong Kong.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with integrated needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>9161635S</td>
			<td>For medical use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15-mL Centrifuge Tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430791</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5-mL Microcentrifuge Tube</td>
			<td>GEB</td>
			<td>CT0200-B-N</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>ECLIPSE-Ci</td>
			<td>For laboratory use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting/Intravital microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ 1000</td>
			<td>For laboratory use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Mouse NKp46 FITC</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>11-3351</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Mouse CD4 PE-Cyanine5</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>15-0041</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monoclonal Mouse Anti-Human CD4</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>20001673</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-NKG2D</td>
			<td>RD</td>
			<td>MAB1547</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSCanto Flow Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>FACS Canto Plus</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a silver nanoparticle method for ameliorating biliary atresia syndrome in mice

الكبدية الصفراوية (BA) هو نوع شديد من التهاب الأوعية الصفراوية مع ارتفاع معدل الوفيات في الأطفال منها المسببات: هو لا تزال غير مفهومة تماما. الالتهابات الفيروسية قد يكون أحد الأسباب المحتملة. يحدد نموذج الحيوان النموذجية المستخدمة لدراسة درجة البكالوريوس تطعيم ماوس حديثي الولادة مع فيروس روتا الريسوسي. جسيمات فضة نانوية قد ثبت أن ممارسة تأثيرات مضادة للجراثيم والمضادة للفيروسات؛ يتم تقييم وظيفتها في طراز الماوس با في هذه الدراسة. حاليا، في التجارب على الحيوانات با، الأساليب المستخدمة لتحسين أعراض الفئران با الأعراض عموما علاجات تعطي عن طريق الأغذية أو الأدوية الأخرى. الهدف من هذه الدراسة هو إظهار أسلوب جديد لتخفيف متلازمة با في الفئران بحقن داخل جسيمات فضة نانوية وتوفير طرق مفصلة لإعداد صياغة جل نانوحبيبات الفضة. هذه الطريقة بسيطة وقابلة للتطبيق على نطاق واسع ويمكن استخدامها لإجراء بحوث إليه مكتبة الإسكندرية، وكذلك في العلاج السريري. استناداً إلى نموذج الماوس با، عند الفئران يحمل اليرقان، هلام نانوحبيبات الفضة استعداد يتم حقن إينترابيريتونيلي على سطح الكبد أقل. لوحظ في حالة البقاء على قيد الحياة، وهي دراسة المؤشرات البيوكيميائية والتشريح المرضى الكبد. يسمح هذا الأسلوب فهم أكثر بديهية لكلا إنشاء نموذج با ورواية با العلاج.

استناداً إلى نموذج الماوس با الراسخة، كانت تدار من الفئران حديثي الولادة المصابين حقنه القائمة في عنب استعداد خليط الكولاجين 2 x بعد العارضة اليرقان. تم التحقق من بقاء الماوس يوميا، وأجريت اختبارات وظائف الكبد وأمراض الكبد، والتدفق الخلوي. مقارنة بالفئران غير المعالجة ا...

Watch this Scientific Journal Video about A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice at JoVE.com

A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice

أسلوب نانوحبيبات الفضي للتخفيف من حدة المتلازمة الكبدية الصفراوية في الفئران

توضح هذه المقالة بالتفصيل أسلوب يقوم على جسيمات نانوية فضية لتخفيف المتلازمة الكبدية الصفراوية في طراز ماوس الكبدية الصفراوية تجريبية. سوف يساعد فهم راسخ لعملية إعداد كاشف وتقنية حقن الفأر الولدان تعريف الباحثين بالطريقة التي استخدمت في دراسات نموذجية الماوس الأطفال حديثي الولادة.

Biliary atresia (BA) is a severe type of cholangitis with high mortality in children of which the etiology is still not fully understood. Viral infections ...

يمكن أن تساعد هذه الطرق في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في اتريسيا الصفراوية. من وجهات النظر حول مكتبة الإسكندرية حول المرض، والأمراض والعلاج. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن تقنية حقن الماوس الوليدية ستساعد الباحثين على التعرف على طريقة دراسات نموذج فأر حديثي الولادة الأخرى.الآثار المترتبة على هذه التقنية تمتد نحو العلاج من مكتبة الإسكندرية كما الجسيمات النانوية العديدة ذات الأهمية على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة في علاج مكتبة الإسكندرية، فإنه يمكن أيضا أن تطبق على أنظمة أخرى مثل نماذج الماوس الوليدية من مسببات هذا عموما في الطريقة التي هذا إلى هذه الطريقة لأن صغر حجم الفئران حديثي الولادة يمكن أن يؤدي إلى بناء عملية الحقن. لإنشاء اتريسيا الصفراوية في نموذج الماوس، تحميل الفيروس الروفو ريسوس في حقنة الأنسولين ملليلتر واحد مجهزة بإبرة 29 قياس، وتسليم intraperitoneally 1.2 مرات 10 إلى وحدات تشكيل البلاك الخامسة من الفيروس في 20 ميكرولترات من دولبيككو معدل النسر المتوسط لكل حديثي الولادة في غضون 24 ساعة من الولادة. ثم ارجع الولدان إلى أمهن من أجل المراقبة و الوزن يومياً.عندما تبدأ الحيوانات حديثي الولادة في إظهار علامات اليرقان ، قم بتحميل حقنة ملليلتر واحدة مجهزة بإبرة من عيار 29 مع 50 ميكرولترات من محلول الكولاجين النانوي الفضي الطازج المعد لكل واستخدام إصبع الخاتم للضغط على ساق واحد مُجعد بشكل غير مباشر فوق الفخذ الأيمن. إدخال الإبرة ببطء في زاوية 15 درجة في الصفاق، وعند الوصول إلى سطح الحافة السفلى للكبد، وحقن خليط الكولاجين النانوي الفضة. عندما تم حقن كل من الخليط، وإزالة ببطء الإبرة والسماح للحيوان للراحة لمدة عشر دقائق للسماح للكولاجين لترسيخ ومنع الأم من لعق موقع الحقن.ثم ارجع الفئران إلى أقفاصها للمراقبة اليومية. في اليوم التاسع أو الثاني عشر بعد التطعيم ، تعقيم البطن العلوي والسفلى بنسبة 75٪ من الإيثانول ، وشل أطراف فأر مصاب. فتح الجلد والعضلات والصوانيب على طول خط الوسط إلى إكسيليفويد، واستخدام مسحة القطن العقيمة لإزالة الجهاز الهضمي لفضح الحجاب الحاجز بشكل كامل.أدخل إبرة حقنة الأنسولين المفرّغة ذات المليلتر في البطين الأيسر للقلب، ثم تراجع ببطء عن المكبس المحقّن للحصول على الحد الأقصى لحجم الدم. نقل الدم إلى أنبوب 1.5 ملليلتر لاحتضان لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة و بيليه خلايا الدم الحمراء عن طريق الطرد المركزي. ثم جمع المصل لتحليلها في وقت لاحق.بالنسبة للتصوير الشعاعي الشعاعي خارج الكبد، استخدم مسحة قطنية لفضح الكبد والمرارة والقنوات الصفراوية خارج الكبد بشكل كامل. بعد تصوير ظهور الكبد والقنوات الصفراوية تحت المجهر تشريح، واستخدام ملقط العيون لفهم بلطف الجزء السفلي من المرارة وإدراج ببطء إبرة حقنة ملليلتر واحدة محملة محلول الميثيلين الأزرق في تجويف المرارة. استيعاب الإبرة مع ملقط، وخز ببطء 10-20 ميكرولترات من الميثيلين الأزرق.عندما تمر الصبغة عبر القنوات الصفراوية خارج الجسم إلى jejunum ، الحصول على صورة أخرى للأنسجة. ثم للهماتوسلين ويوسين تلطيخ, حصاد الكبد من كل لتثبيت بين عشية وضحاها في 10٪ formalin. في صباح اليوم التالي، تضمين العينات في البارافين للتجزئة، تليها إزالة الصبح إعادة الترطيب مع سلسلة الإيثانول والهماوكسيلين وإيوسين تلطيخ وفقا لبروتوكولات التحليل الهستووباولوجي القياسية.بالمقارنة مع الفئران المرارة غير المعالجة، والحيوانات المعالجة بالجسيمات النانوية الفضة تظهر انخفاض اليرقان والحفاظ على وزن الجسم الطبيعي. مستويات الأيض البيليروبين والترساميناسي الكبدي انخفاض إلى قيم التحكم الطبيعية, مما يشير إلى أن الجسيمات النانوية الفضة تحسن بشكل كبير وظيفة الكبد. يؤكد التصوير الشعاعي خارج الكبدي مع تلوين الميثيلين الأزرق صبغة القناة الصفراوية بعد معالجة الفضة الجسيمات النانوية، وH & E تلطيخ يكشف عن انخفاض كبير في تسلل الخلايا الالتهابية في منطقة المدخل الكبدي من الفئران تعامل مع الجسيمات النانوية الفضة مقارنة مع الضوابط.يشير تحليل موقع التدفق والقياس إلى وجود خلايا NK أقل بكثير في كبد الحيوانات المعالجة للجسيمات النانوية الفضية مقارنة بالفئران المصابة بفيروس الرسوس الروتا غير المعالجة. مزيد من التلطيخ المناعي الكيميائي يكشف عن انخفاض كبير في التعبير عن علامة NK خلية تلطيخ في بوابة ثلاثية من الفئران المعالجة الفضة النانوية مقارنة مع الحيوانات المصابة فيروس الرسوس روتا. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن الممارسة سوف تعطي أفضل النتائج.بعد هذا الإجراء، كما يمكن تنفيذ أساليب مثل الاقتران الجسيمات النانوية الفضية إلى أشياء أخرى للإجابة على أسئلة إضافية حول نشاط الآفات في علاجات مكتبة الإسكندرية في نماذج الماوس. هو التنمية. هذه التقنية وفرت وسيلة للباحثين في مجال أمراض الجهاز الهضمي إلى BA أو أمراض أخرى مثل الثقوب في الكبد.لا ننسى أن العمل مع فيروس الروتا البحوث يمكن أن تكون خطرة للغاية، وبالتالي الاحتياطات مثل ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة ينبغي دائما اتخاذها عند تنفيذ هذا الإجراء.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

باستخدام التصوير Bioluminescent بالتحقيق في التآزر بين العقدية الرئوية والأنفلونزا من الفيروسات في الفئران الرضع

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

الاستدلال الوراثي من HIV - 1 Tropism باستخدام السكان على أساس تسلسل V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Using Luciferase to Image Bacterial Infections in Mice

Luciferase به لالتهابات جرثومية في صورة الفئران

Imaging is a valuable technique that can be used to monitor biological processes.  In particular, the presence of cancer cells, stem cells, specific ...

A Method for Labeling Vasculature in Embryonic Mice

A طريقة لوصفها الأوعية الدموية في الفئران الجنينية

The establishment of a functional blood vessel network is an essential part of organogenesis, and is required for optimal organ function. For example, in ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D التصوير تعدد الوسائط من<em&gt; الليمونية rodentium</em&gt; التهابات في الفئران

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Kupffer Cell Isolation for Nanoparticle Toxicity Testing

كوبفر عزل الخلايا للجسيمات متناهية الصغر سمية اختبار

The large majority of in vitro nanotoxicological studies have used immortalized cell lines for their practicality. However, results from nanoparticle ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

والطريقة غير الغازية ومن الناحية الفنية غير كثيفة للتحريض وPhenotyping التجريبية البكتيرية والالتهاب الرئوي في الفئران

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

التعريفي للشلل وإصابة النظام المرئي في الفئران التي تي الخلايا المحددة للبصري المياليني أقوابورين أوتوانتيجين-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

A Method for the Measurement of Salivary Gland Function in Mice

طريقة لقياس وظيفة الغدة اللعابية في الفئران

Patients with Sj&#246;gren&#39;s syndrome, an autoimmune disease affecting the exocrine glands, develop salivary gland inflammation and have reduced ...

Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

تجلط الوريد العميق الناجم عن ركود في الفئران التي يرصدها الموجات فوق الصوتية عالية التردد

Venous thrombosis is a common condition affecting 1 - 2% of the population, with an annual incidence of 1 in 500. Venous thrombosis can lead to death ...