Name: a silver nanoparticle method for ameliorating biliary atresia syndrome in mice
Uploaded: 2018-10-13T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice at JoVE.com

AgNPs, здесь были подарок от C. м. Че в Отдел химии, Университет Гонконга. Эта работа финансировалась Фонд национального естественных наук Китая (№ 81600399) и науки и технологии проект Гуанчжоу (No.201707010014).

Все животные экспериментальные протоколы были одобрены институциональный уход животных и использование Комитета Sun Yat-Sen университета лабораторных животных центр (#IACUC-DB-16-0602).
1. Создание модели мыши Билиарной атрезией
<ol><li>Поддерживать беременных мышей BALB/c в определенн...

<ol>
	<li>Szavay, P. O., Leonhardt, J., Czechschmidt, G., Petersen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+reovirus+type+3+infection+in+an+established+murine+model+for+biliary+atresia.">The role of reovirus type 3 infection in an established murine model for biliary atresia.</a> European Journal of Pediatric Surgery. 12 (04), 248-250 (2002).</li><li>Coots, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rotavirus+infection+of+human+cholangiocytes+parallels+the+murine+model+of+biliary+atresia.">Rotavirus infection of human cholangiocytes parallels the murine model of biliary atresia.</a> Journal of Surgical Research. 177 (2), 275-281 (2012).</li><li>Shanmugam, N. P., Jayanthi, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+atresia+with+cytomegalovirus.">Biliary atresia with cytomegalovirus.</a> Indian Pediatrics. 49 (2), 157 (2012).</li><li>Mack, C. L., Feldman, A. G., Sokol, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clues+to+the+Etiology+of+Bile+Duct+Injuryin+Biliary+Atresia.">Clues to the Etiology of Bile Duct Injuryin Biliary Atresia.</a> Seminars in Liver Disease. 32, 307-316 (2012).</li><li>Muraji, T., Suskind, D. L., Irie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+atresia:+a+new+immunological+insight+into+etiopathogenesis.">Biliary atresia: a new immunological insight into etiopathogenesis.</a> Expert Review of Gastroenterology &amp; Hepatology. 3 (6), 599-606 (2009).</li><li>Sokol, R. J., Mack, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etiopathogenesis+of+Biliary+Artesia.">Etiopathogenesis of Biliary Artesia.</a> Seminars in Liver Disease. 21, 517-524 (2001).</li><li>Shivakumar, P., Sabla, G. E., Whitington, P., Chougnet, C. A., Bezerra, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+NK+cells+target+the+mouse+duct+epithelium+via+Nkg2d+and+drive+tissue-specific+injury+in+experimental+biliary+atresia.">Neonatal NK cells target the mouse duct epithelium via Nkg2d and drive tissue-specific injury in experimental biliary atresia.</a> Journal of Clinical Investigation. 119 (8), 2281-2290 (2009).</li><li>Mack, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligoclonal+expansions+of+CD4++and+CD8++T-cells+in+the+target+organ+of+patients+with+biliary+atresia.">Oligoclonal expansions of CD4+ and CD8+ T-cells in the target organ of patients with biliary atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 278-287 (2007).</li><li>Shivakumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effector+Role+of+Neonatal+Hepatic+CD8+++Lymphocytes+in+Epithelial+Injury+and+Autoimmunity+in+Experimental+Biliary+Atresia.">Effector Role of Neonatal Hepatic CD8 + Lymphocytes in Epithelial Injury and Autoimmunity in Experimental Biliary Atresia.</a> Gastroenterology. 133 (1), 268-277 (2007).</li><li>Saxena, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+Cells+Regulate+Natural+Killer+Cell+Activation+and+Epithelial+Injury+in+Experimental+Biliary+Atresia.">Dendritic Cells Regulate Natural Killer Cell Activation and Epithelial Injury in Experimental Biliary Atresia.</a> Science Translational Medicine. 3 (102), (2011).</li><li>Miethke, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-natal+paucity+of+regulatory+T+cells+and+control+of+NK+cell+activation+in+experimental+biliary+atresia.">Post-natal paucity of regulatory T cells and control of NK cell activation in experimental biliary atresia.</a> Journal of Hepatology. 52 (5), 718-726 (2010).</li><li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+delivery+of+silver+nanoparticles+promotes+wound+healing.">Topical delivery of silver nanoparticles promotes wound healing.</a> ChemMedChem. 2 (1), 129-136 (2010).</li><li>Lu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+inhibit+hepatitis+B+virus+replication.">Silver nanoparticles inhibit hepatitis B virus replication.</a> Antiviral Therapy. 13 (2), 253-262 (2008).</li><li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+A/Human/Hubei/3/2005+(H3N2)+influenza+virus+infection+by+silver+nanoparticles+in+vitro+and+in+vivo.">Inhibition of A/Human/Hubei/3/2005 (H3N2) influenza virus infection by silver nanoparticles in vitro and in vivo.</a> International Journal of Nanomedicine. 8 (Issue 1), 4103-4114 (2013).</li><li>Elechiguerra, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+silver+nanoparticles+with+HIV-1.">Interaction of silver nanoparticles with HIV-1.</a> Journal of Nanobiotechnology. 3 (1), 1-10 (2005).</li><li>Nallanthighal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+silver+nanoparticles+on+DNA+damage+and+DNA+repair+gene+expression+in+Ogg1-deficient+and+wild+type+mice.">Differential effects of silver nanoparticles on DNA damage and DNA repair gene expression in Ogg1-deficient and wild type mice.</a> Nanotoxicology. 11 (8), 1-16 (2017).</li><li>Wen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+toxicity+and+genotoxicity+of+silver+nanoparticle+in+rats.">Acute toxicity and genotoxicity of silver nanoparticle in rats.</a> PLoS One. 12 (9), e0185554 (2017).</li><li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticle+treatment+ameliorates+biliary+atresia+syndrome+in+rhesus+rotavirus+inoculated+mice.">Silver nanoparticle treatment ameliorates biliary atresia syndrome in rhesus rotavirus inoculated mice.</a> Nanomedicine. 13 (3), 1041-1050 (2017).</li><li>Arnold, M., Patton, J. T., McDonald, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing,+Storage,+and+Quantification+of+Rotaviruses.">Culturing, Storage, and Quantification of Rotaviruses.</a> Current Protocols in Microbiology. , (2009).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+mediate+differential+responses+in+keratinocytes+and+fibroblasts+during+skin+wound+healing.">Silver nanoparticles mediate differential responses in keratinocytes and fibroblasts during skin wound healing.</a> ChemMedChem. 5 (3), 468-475 (2010).</li><li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticles+promote+osteogenesis+of+mesenchymal+stem+cells+and+improve+bone+fracture+healing+in+osteogenesis+mechanism+mouse+model.">Silver nanoparticles promote osteogenesis of mesenchymal stem cells and improve bone fracture healing in osteogenesis mechanism mouse model.</a> Nanomedicine. 11 (8), 1949-1959 (2015).</li><li>Wu, J., Hou, S., Ren, D., Mather, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+properties+of+nanostructured+hydrogel+webs+containing+silver.">Antimicrobial properties of nanostructured hydrogel webs containing silver.</a> Biomacromolecules. 10 (9), 2686-2693 (2009).</li><li>Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotoxicity+and+molecular+response+of+silver+nanoparticle+(NP)-based+hydrogel.">Genotoxicity and molecular response of silver nanoparticle (NP)-based hydrogel.</a> Journal of Nanobiotechnology. 10 (1), 16 (2012).</li><li>Dobrzy&#324;ska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotoxicity+of+silver+and+titanium+dioxide+nanoparticles+in+bone+marrow+cells+of+rats+in+vivo.">Genotoxicity of silver and titanium dioxide nanoparticles in bone marrow cells of rats in vivo.</a> Toxicology. 315 (1), 86-91 (2014).</li><li>Mohamed, H. R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+TiO+2+nanoparticle-induced+genotoxicity+persistence+and+possible+chronic+gastritis-induction+in+mice.">Estimation of TiO 2 nanoparticle-induced genotoxicity persistence and possible chronic gastritis-induction in mice.</a> Food &amp; Chemical Toxicology. 83 (9), 76-83 (2015).</li></ol>

AgNPs обладают мощными антибактериальными свойствами широкого спектра и сильный проницаемость22; Кроме того они используются для производства целого ряда антибактериальных лекарственных препаратов23. Однако AgNPs может занять много времени, чтобы очистить после ?...

Ба является формой холестаза, характеризуется стойким желтухи и обладает высокой смертности в отсутствие трансплантации печени. Вирусные инфекции тесно связаны с патогенеза ба. Ротавирусной инфекции цитомегаловирус и реовирус предлагались как патогены в ба1,2,3. В неонатальный период ответ незрелой иммунной системы к вирусной инфекции приводит к иммунной регуляции против дополнительных - и внутрипеченочных желчных протоков, ведущих к апоптозу желчных эпителиальных клеток, воспалительных клеток инфильтрата в портале Площадь, внутрипеченочных и внепеченочных желчных протоков препятствие и, наконец, фиброз печени4,5,6.
Часто используемых животных модель BA исследований включает прививки новорожденным мышь с резус Ротавирусная (RRV). Мышь обычно развивается желтуха после 5-6 дней, показывая низкой массой тела и acholic стул. Роль иммунной реакции в процессе заболевания имеет решающее значение, особенно для естественных убийца клеток (НК); истощение этих клеток с антитела анти NKG2D значительно снижает Ба индуцированного повреждения7. Кроме того, другие клетки, включая CD4+ T-клеток, CD8+ T клетки, дендритные клетки и регулирования Т-клеток, все было показано играть роль в болезни8,9,10,11. Все данные свидетельствуют о незаменимый характер иммунной системы в ходе ба.
Наночастиц серебра (AgNPs) были продемонстрированы иметь благотворное влияние против некоторых инфекционных заболеваний, в том числе12 бактериальных инфекций и вирусных инфекций13,14,15. Однако кроме дерматологических использования, несколько исследований использовали AgNPs в клинического лечения, главным образом из-за их потенциальной токсичности. В экспериментов на животных исследователи изучили обычно эффективность AgNPs осуществляется через устные16 или17внутривенные методы. Однако другие исследователи изучили эффективность AgNPs осуществляется через инъекцию внутрибрюшинного (и.п.) у новорожденных мышей экспериментов, что простой и быстрый метод приводит к более прямое воздействие на печени и желчных протоков при снижение токсичности для других систем, таких как иммунной системы. AgNPs было показано, влияют на активность клеток NK18; Таким образом мы протестировали терапевтического эффекта AgNPs осуществляется через и.п. инъекции в мышиной модели ба.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BALB/c mouse</td>
			<td>Guangdong Medical Experimental Animal Center</td>
			<td>SYXK2017-0174</td>
			<td>Animal experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhesus rotavirus (RRV)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC&#160;VR-1739</td>
			<td>Establish biliary atresia mouse model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MA104 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC&#160;CRL-2378.1</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10569010</td>
			<td>Mammalian Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10099141</td>
			<td>Mammalian Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagen Type I</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>354236</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>OXOID</td>
			<td>BR0014G</td>
			<td>For washing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1310-73-2</td>
			<td>Adjust the PH value</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AgNP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Antibacterial 
			Note: The AgNps was a gift from Prof CM Che. in the Department of Chemistry, the University of Hong Kong.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with integrated needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>9161635S</td>
			<td>For medical use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15-mL Centrifuge Tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430791</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5-mL Microcentrifuge Tube</td>
			<td>GEB</td>
			<td>CT0200-B-N</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>ECLIPSE-Ci</td>
			<td>For laboratory use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting/Intravital microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ 1000</td>
			<td>For laboratory use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Mouse NKp46 FITC</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>11-3351</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Mouse CD4 PE-Cyanine5</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>15-0041</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monoclonal Mouse Anti-Human CD4</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>20001673</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-NKG2D</td>
			<td>RD</td>
			<td>MAB1547</td>
			<td>For research use only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSCanto Flow Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>FACS Canto Plus</td>
			<td>For laboratory use only</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a silver nanoparticle method for ameliorating biliary atresia syndrome in mice

Билиарной атрезией (BA) — это серьезный тип холангит с высокой смертности детей, которые до сих пор не полностью понимается этиологии. Вирусные инфекции могут быть одной из возможных причин. Типичная модель животных, используются для изучения Ба устанавливается путем прививки новорожденным мышь с ротавирусом резус. Было показано, что наночастицы серебра оказывают антибактериальное и противовирусное эффекты; в этом исследовании оценивается их функции в модели мыши ба. В настоящее время в ба экспериментов на животных, методы, используемые для улучшения симптомов Ба мышей, обычно симптоматическое лечение через продовольствия или других наркотиков. Целью данного исследования является продемонстрировать новый метод для улучшения Ба синдром у мышей, внутрибрюшинного введения наночастиц серебра и предоставить подробные методы для подготовки формулировка гель серебряных наночастиц. Этот метод прост и широко применимые и может использоваться для исследования механизма Ба, а также клиническое лечение. На основе Ба мыши модели, когда мышей выставки желтухи, подготовленный серебряных наночастиц Гель вводится внутрибрюшинно на поверхность Нижняя печени. Наблюдается состояние выживания, и изучаются биохимических показателей и гистопатология печени. Этот метод позволяет более интуитивное понимание создание модели Ба и Роман лечения ба.

На основе установленных Ба мыши модели, инфицированных новорожденных мышей вводили инъекции и.п. подготовленные смеси коллагена ССПС 2 x после экспонирования желтухи. Мыши выживания был проверен на ежедневно, и были проведены испытания функции печени, патологии печен?...

Watch this Scientific Journal Video about A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice at JoVE.com

A Silver Nanoparticle Method for Ameliorating Biliary Atresia Syndrome in Mice

Серебряных наночастиц метод для улучшения Билиарной атрезией синдром у мышей

Эта статья подробно описывает метод, основанный на наночастицы серебра для улучшения Билиарной атрезией синдром в экспериментальной Билиарной атрезией мыши модели. Четкое понимание процесса подготовки реагента и технику инъекций неонатальной мышь поможет ознакомить исследователей с метод, используемый в неонатальной мыши модель исследования.

Biliary atresia (BA) is a severe type of cholangitis with high mortality in children of which the etiology is still not fully understood. Viral infections ...

Эти методы могут помочь ответить на ключевые вопросы в желчных атрезии. Из BA мнения о болезни, патогенез и лечение. Основным преимуществом этого метода является то, что метод инъекций неонатальной мыши поможет исследователям ознакомиться с методом для других исследований модели неонатальной мыши.Последствия этого метода распространяются на терапию БА, как несколько наночастиц значение Хотя этот метод может обеспечить понимание лечения БА, он также может быть применен к другим системам, таким как неонатальные модели мыши патогенеза этого В целом в том, как это к этому методу будет, потому что небольшой размер неонатальных мышей может привести к созданию процесса инъекций. Чтобы установить желчный атрезия в модели мыши, загрузите ротовирус резуса в один миллилитр инсулиновый шприц, оснащенный иглой 29-го калибра, и интраперитонически доставите 1,2 раза от 10 до 5-го бляшка-формирующих единиц вируса в 20 микролитерах модифицированного орла Dulbecco Medium каждому новорожденному в течение 24 часов после рождения. Затем верните новорожденных к матери для ежедневного мониторинга и взвешивания.Когда неонатальные животные начинают проявлять признаки желтухи, загрузите один миллилитр шприц, оснащенный иглой 29-го калибра с 50 микролитров свежеприготовленного раствора коллагена наночастиц серебра на животное и используйте безымянный палец, чтобы нажать ногу одного желтухи животного косо над правым бедром. Медленно введите иглу под углом 15 градусов в брюшной полышко, и, достигнув поверхности нижнего края печени, введите смесь коллагена наночастиц серебра. Когда вся смесь была введена, медленно удалить иглу и позволить животному отдохнуть в течение десяти минут, чтобы коллаген затвердеть и предотвратить мать от лизать место инъекции.Затем вернуть мышей в свои клетки для ежедневного мониторинга. На девятый-двенадцать день после прививки стерилизовать верхнюю и нижнюю части живота 75%этанолом и обездвижить конечности инфицированной мыши. Откройте кожу, мышцы и брюшной полости вдоль средней линии к ксифоиду, и использовать стерильный ватный тампон, чтобы удалить желудочно-кишечного тракта, чтобы полностью подвергать диафрагмы.Вставьте иглу выгруженного одного миллилитров инсулина шприц в левый желудочек сердца, и медленно втягивать шприц поршень, чтобы получить максимальный объем крови. Передача крови в 1,5 миллилитровую трубку в течение 30 минут инкубации при комнатной температуре и гранулы красных кровяных телец центрифугации. Затем соберите сыворотку для более длительного анализа.Для экстрагепатической холангиографии используйте ватный тампон, чтобы полностью разоблачить печень, желчный пузырь и экстрагепатические желчные протоки. После фотографирования внешнего вида печени и желчных протоков под рассеченным микроскопом используйте офтальмологические типсы, чтобы аккуратно схватить дно желчного пузыря и медленно вставить иглу одного миллилитрового шприца, загруженного метиленовым синим раствором, в полость желчного пузыря. Хватая иглу типсами, медленно настоять 10-20 микролитров метиленового синего цвета.Когда краситель проходит через экстрагепатические желчные протоки в jejunum, получить другую фотографию ткани. Затем для гематоксилина и эозина окрашивания, урожай печени от каждого животного для ночной фиксации в 10%формалин. На следующее утро, вставлять образцы в парафин для секций, а затем де-воск регидратации с этанолом серии и гематоксилин и эозин окрашивания в соответствии со стандартными гистопатологических протоколов анализа.По сравнению с необработанными желчными мышами атрезии, наночастицы серебра обработанные животные демонстрируют снижение желтухи и поддерживать их нормальную массу тела. Уровни метаболизма билирубина и печеночной трансаминазы падают до нормальных значений контроля, предполагая, что наночастицы серебра значительно улучшают функцию печени. Экстрагепатическое холангиография с метиленовым синим окрашиванием подтверждает проходимость желчных протоков после лечения наночастицами серебра, а окрашивание H и E выявляет значительное снижение инфильтрации воспалительных клеток в области печеночных порталов мышей, обработанных наночастицами серебра по сравнению с контролем.Участок потока и метрический анализ показывают наличие значительно меньшего количества НК-клеток в печени наночастиц серебра обработанных животных по сравнению с необработанными резус ротавирус инфицированных мышей. Дальнейшее иммуногистохимическое окрашивание выявляет существенно уменьшенное выражение окрашивания маркера НК-клеток в порталной триаде наночастиц серебра обработанных мышей по сравнению с резус-ротавирусом инфицированных животных. При попытке этой процедуры, важно помнить, что практика даст наилучшие результаты.После этой процедуры, как методы, как спряжение наночастиц серебра к другим вещам могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы о деятельности поражений в лечении БА в мышиных моделях. является развитие. Этот метод предоставил способ для исследователей в области гастроэнтерологии к БА или других заболеваний, таких как холестаз в печени.Не забывайте, что работа с научно-исследовательским ротавирусом может быть чрезвычайно опасной, и, таким образом, такие меры предосторожности, как ношение соответствующего средства индивидуальной защиты, всегда должны приниматься при выполнении этой процедуры.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Использование изображений Биолюминесцентный по расследованию синергизм между Пневмококк И вируса гриппа А в младенческой Мыши

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

Генотипическая вывода ВИЧ-1 тропизм Использование Популяционные Секвенирование V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Using Luciferase to Image Bacterial Infections in Mice

Использование люциферазы в Изображение Бактериальные инфекции у мышей

Imaging is a valuable technique that can be used to monitor biological processes.  In particular, the presence of cancer cells, stem cells, specific ...

A Method for Labeling Vasculature in Embryonic Mice

Метод маркировки сосудистую в эмбриональных мышей

The establishment of a functional blood vessel network is an essential part of organogenesis, and is required for optimal organ function. For example, in ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

Комплексное 4D визуализация<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Инфекции у мышей

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Kupffer Cell Isolation for Nanoparticle Toxicity Testing

Купфер Выделение клеток для наночастиц токсичности тестирования

The large majority of in vitro nanotoxicological studies have used immortalized cell lines for their practicality. However, results from nanoparticle ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

Неинвазивным и технически неинтенсивное метод индукции и Фенотипирование экспериментальной бактериальной пневмонии у мышей

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

Индукция паралич и зрительной системы травмы в мышей, специфические клетки T нейромиелит Optica Аквапорин аутоантиген-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

A Method for the Measurement of Salivary Gland Function in Mice

Метод для измерения функции слюнной железы у мышей

Patients with Sj&#246;gren&#39;s syndrome, an autoimmune disease affecting the exocrine glands, develop salivary gland inflammation and have reduced ...

Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

Тромбоз глубоких вен, индуцированных застой в мышей, под контролем УЗИ высокой частоты

Venous thrombosis is a common condition affecting 1 - 2% of the population, with an annual incidence of 1 in 500. Venous thrombosis can lead to death ...