Name: the unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice
Uploaded: 2018-10-24T13:30:00
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Les auteurs tiennent à remercier Gali Breuer pour son aide dans la production vidéo. Cette recherche a été financée par Israël Ministry of Science, Technology & espace (subvention no 313552), par l’Institut National de la psychobiologie en Israël (NIPI-208-16-17 b) et la Fondation de l’Université ouverte.

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par le Comité de l’utilisation de l’Academic College Tel-Aviv-Yaffo et d’institutionnels animalier.
1. les animaux
<ol><li>Utilisation pré adolescent (c.-à-d., 3 semaines) Institut du Cancer (IC) tel souris mâles.</li>
	<li>Alternez les souris à deux groupe de même taille stress (UCM vs naïve). Utilisez 15 souris par groupe de traitement (p. ex.: s’il y a 3 pharmacologique des groupes de traitement utili...

Dans la mesure où la DDM est une maladie très invalidante généralisée, que partiellement abordée par les options thérapeutiques actuelles, la recherche scientifique de meilleurs traitements demeure un problème urgent. Ainsi que des innovations techniques psychologiques, les pharmacothérapies supplémentaires sont nécessaires pour la grande partie des patients qui ne répondent pas aux médicaments existants. Méticuleuse des modèles animaux pour la dépression sont l’élément clé dans cette tâche. Ces mod...

Trouble dépressif majeur (TDM) est une maladie invalidante, qui a été indiquée comme la 11ème cause de la charge mondiale de la maladie1, avec une prévalence au cours des 11 – 16 %2,3. MDD a été associée à une déficience sévère sur des patients fonctionnement social et professionnel, diminue la qualité de vie, nombreux troubles mentaux et physiques et un risque accru de mortalité4,5,6 , 7. il y a plusieurs pharmacothérapies efficaces et des interventions psychologiques pour MDD ; Cependant, plus que le tiers des patients n’obtiennent pas remise avec les options thérapeutiques existantes8,9,10,11. Par conséquent, mieux cartographier la physiopathologie de la DDM et au développement de nouveaux médicaments sont toujours d’une importance capitale. Afin de répondre à ces besoins de modèles animaux de tâches scientifiquement validés pour être utilisé.
Un stress chronique légère imprévisible (UCM) est un paradigme de rongeur célèbre utilisé pour induire des comportements de type anxieux et dépressifs12,13,14,15. L’objectif principal de l’UCM est de générer des déficits comportementaux (par exemple, anhédonie et désespoir comportementale12,15) chez les souris et les rats et de promouvoir les projections pour les agents pharmacologiques thérapeutiques potentiels. La procédure a été introduite par Katz16 et par la suite développée par Willner17,18, ce qui donne des résultats comportements et neurobiologiques vastes souvenirs symptomatologie dépressive12. Il a été initialement conçu pour les rats et plus tard hébergé à souris13,19. Dans la procédure, animaux adolescents est exposés de façon chronique aux différents facteurs de stress de l’imprévisibles douces. Par la suite, les agents pharmacologiques sont administrés. Les indices comportements et biologiques sont obtenus à la fin du traitement. L’un des plus importants tests effectuées après l’UCM est le test de préférence de saccharose (SPT). Le SPT est basée sur la préférence innée des rongeurs pour la solution sucrée plutôt que de l’eau et est largement reconnu comme un modèle translationnel essentiel pour évaluer l’anhédonie12,18,20, 21 (qui est un symptôme de noyau en dépression humaine22,,23).
En entrant dans la quatrième décennie depuis son introduction, UCM a été appliquée sur des souris et des rats dans les innombrables études. La plupart de ces études employés UCM comme méthode pour induire des comportements de type dépressif12,13,21,24. Des études ont également employé le modèle pour générer anxiogène effets25,26,27,28,29. Préférences de saccharose et de saccharine sont les principaux tests utilisés pour évaluer l’anhédonie suite UCM12,18,30,31,32,33. Autres mesures de résultats notables qui sont hautement intégrés dans la littérature de l’UCM sont : la suspension arrière de test (TCT)28,34,35, test de la nage forcée (TVF)28,34 , 36 , 37 (les deux mesure stress adaptation/comportementale désespoir), le test de plein champ (OFT ; mesure du comportement exploratoire, anxiété-comme le comportement et l’activité locomotrice)25,28,38, l’élévation plus labyrinthe (EPM ; mesure comportement anxieux)25,39,40 et des tests supplémentaires, mesure des comportements de type dépressif, comportements de type anxiété, fonctionnement cognitif et comportement social12 . Administration chronique des antidépresseurs tricycliques (TCAS/ACAS ; l’imipramine35,41,42,43, désipramine18,44,45 ), les antidépresseurs tétracycliques (acce, maprotiline46,47,48de la miansérine), inhibiteurs de la recapture de la sérotonine (ISRS ; fluoxetine46,47,49 , escitalopram30,50, paroxetine51,,52), mélatonine43,49, agomélatine53, l’inhibiteur d’hydrolase (FAAH) amide d’acide gras URB59754 et plusieurs composés naturels30,37,50,55,56,57,58 ont été démontré pour inverser les symptômes induite par l’UCM dépressifs et anxieux-type. Dans l’ensemble, ces effets thérapeutiques n’ont pas été collectées par l’intermédiaire de traitements aigus12 (p. ex., paroxetine51,52, imipramine53,54,59 ,60, fluoxetine,53, agomélatine53, URB59754, brofaromine60).
Exposition de stress durant l’enfance et l’adolescence est un facteur de risque majeur pour la formation antérieure du TDM (parmi plusieurs autres troubles psychiatriques) à l’âge adulte61,62,63. L’axe de hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA) est un grand système neuroendocrinien réglementant la réponse bio-comportementales au stress64. Stress à long terme au cours des périodes sensibles sur le développement neurologique de l’enfance et l’adolescence altère l’équilibre de l’axe HPA. Il peut provoquer un état d’activation sympathique accrue, réactivité déséquilibrée et hypercortisolémie durables par le biais de l’état de repos ; rendant ainsi, les personnes vulnérables à la dépression ou les psychopathologies liées à l’anxiété65,66,67,,68. UCM adéquatement traduit cette pathogénie : souligner la demande au cours de la souris ' adolescence induit une susceptibilité à long terme de type dépressif. En outre, les déficits comportementaux induits par l’UCM, reposent sur des changements significatifs dans l’HPA axe fonctionnel (par exemple, en provoquant une diminution de facteur d’hippocampe neurotrophique dérivé du cerveau [BDNF ; une protéine très impliqué dans l’équilibre de l’HPA axe69,70]30, ou en altérant la régulation de la sécrétion de corticostérone le sang71,72), dans la similitude de la physiopathologie de l’être humain12, 50,73.
UCM a plusieurs fonctionnalités de consolidation comme un modèle pour la dépression : par exemple (i) la découverte de l’anhédonie (qui est considéré un endophénotype DDM23,,74) ; (ii) UCM permet d’apprécier la grande variété des comportements de type dépressifs tels que désespoir comportemental, comportement social réduit, détérioration de l’état de la fourrure et plus34; et (iii) chroniques (2-4 semaines), mais pas pointue, administration d’antidépresseurs après exposition de stress pourrait produire un effet thérapeutique prolongé parallèle à l’effet obtenu chez des patients humains par les mêmes agents30,75 ,,du7677.
Ces fonctionnalités renforcent la validité de l’UCM par rapport aux autres modèles animaux de dépression. Les TVF78 et le TST79 sont deux modèles qui sont utilisés pour induire ou d’évaluer le comportement dépressif. Comme modèles pour induire des comportements dépressifs-comme ils ont manques claires par rapport à l’UCM ; ils n’ont pas demander des changements de comportement à long terme et pourrait simplement refléter un ajustement d’un stress aigu plutôt que céder un durable dépressif comme manifestation76.
Un autre modèle animal de la dépression est le modèle social défaite. Contrairement à la FST et TCT ce modèle (comme UCM) exigent l’application d’un stress chronique (id est [c'est-à-dire] la soumission récurrente de l’animal social aversifs rencontres avec homologues dominantes)76,77 , 80 , 81 , 82. le principal avantage du modèle social défaite est qu’il emploie des stimuli sociaux comme facteurs de stress, ce qui traduit le rôle du stress psychosocial dans la pathogenèse de la dépression humaine. Semblable à l’UCM, le modèle social défaite suscite des comportements dépressifs ressemblant à long terme et des modifications neuro-endocrines. Encore une fois parallèle à l’UCM, les déficits sociaux induite par la défaite peuvent être renversées par l’intermédiaire de l’administration chronique, mais pas pointue, des antidépresseurs. Dans l’ensemble, il y a grand soutien pour l’utilisation d’UCM et défaite sociale comme appareils précliniques pour enquêter sur la physiopathologie de la dépression76,77,81,82 . Cependant, un manque à gagner important du modèle social défaite est qu’il ne pourrait s’appliquer sur les rongeurs mâles, comme les femmes ne présentent pas de comportement agressif suffisant vers l’autre83. Par contraste, l’UCM a été démontré pour produire plusieurs effets dépressifs sur les deux souris mâles et femelles34.
Un stress chronique légère prévisible (MCP) est un autre modèle de rongeur qui applique un régime d’exposition quotidienne de récurrent à retenue stress28,84,85,,du8687. Plusieurs études ont montré que PCMS augmenté des comportements de type anxiété28,87; Certes, il y a contradiction rapports capacité PCMS vis-àvis d’induire des comportements dépressifs ressemblant à long terme. Contrairement à l’UCM, MCP a produit des résultats moins satisfaisants, se référant à sa capacité d’induire un état semblable au andédonique28,84,86. Cela concorde avec la phénoménologie humaine, dans laquelle des facteurs de stress imprévisibles sont plus dommageables que prévisible ceux88.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Heating lamp</td>
			<td>Ikea</td>
			<td>AA-19025-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pillow</td>
			<td>Sachs</td>
			<td>EF-188B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice restrainer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable electronic balance (*.** g)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard rubber stopper, size 5</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>#5.5R</td>
			<td>To avoid spillage during SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight open drinking tube (2.5&#34;)</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>OT-100</td>
			<td>To avoid spillage during SPT (insert drinking tube into rubber stopper)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2% sucrose solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml conical centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For the SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-adolescent (approximately 20-days old) ICR outbred mice</td>
			<td>Envigo</td>
			<td>Hsd:ICR (CD-1)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice

Dépression est un état très répandu et débilitant, que partiellement traitée par pharmacothérapies actuelles. L’absence de réponse au traitement de nombreux patients invite la nécessité de développer de nouvelles alternatives thérapeutiques et de mieux comprendre l’étiologie de la maladie. Des modèles précliniques avec fond translationnelle sont rudimentaires pour cette tâche. Nous présentons ici un protocole pour la méthode de l’effort doux chronique imprévisible (UCM) chez la souris. Dans ce protocole, souris adolescents sont exposés de façon chronique à interchangeant des stresseurs douces imprévisibles. Ressemblant à la pathogenèse de la dépression chez les humains, exposition d’effort au cours de la période sensible de l’adolescence de souris provoque un phénotype de type dépressif évident à l’âge adulte. UCM peut être utilisé pour les examens préalables des antidépresseurs sur la variété des comportements de type dépressif et indices neuromoléculaire. Parmi les plus importants essais d’évaluation comportement dépressif chez les rongeurs est le test de préférence de saccharose (SPT), qui reflète l’anhédonie (symptôme de base de la dépression). Le SPT est également présenté dans le présent protocole. La capacité de l’UCM à induire l’anhédonie, fomentent des déficits comportementaux à long terme et permettre le renversement de ces déficits par l’intermédiaire de traitement chronique (mais pas aiguë) avec des antidépresseurs renforce la validité du protocole par rapport à d’autres protocoles animales pour induire des comportements de type dépressif.

Afin de corroborer l’efficacité de la procédure de l’UCM pour induire des déficits de type dépressif, une vérification de la manipulation a été réalisée. Souris ICR tel mâles ont été assignés au hasard à conditions de l’UCM ou naïve (4 semaines, tel que décrit dans le protocole 2.2). Par la suite, l’arborescence SPT (6 jours, tel que décrit dans le protocole n ° 4) a été administrée pour déterminer si la souris après avoir subi l’UCM a démontré des défi...

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The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Nous présentons ici le protocole d’effort doux chronique imprévisible chez les souris. Ce protocole induit un phénotype de type dépressif à long terme et permet d’évaluer l’efficacité des antidépresseurs putatifs en inversant les déficits de type dépressif comportementales et neuromoléculaire.

Le protocole d’effort doux chronique imprévisible pour induire l’anhédonie chez la souris

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Le principal avantage de cette technique est qu’elle traduit adéquatement les dispositifs neurobiologiques et comportementaux principaux impliqués dans la pathogénie, l’étiologie, et le traitement de la dépression. Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans la compréhension de la pathophysiologie de l’anxiété et la dépression et de promouvoir le développement de nouveaux traitements pharmacologiques. L’implication de cette technique s’étendent pour la thérapie de la dépression, parce qu’elle permet des criblages pour des antidépresseurs potentiels tout en ressemblant au cours prolongé de la remise évident dans les patients humains.Commencez par remplir les cages de la maison de sciure de bois fraîche et ajoutez un morceau de coton pour l’enrichissement. Abritez les animaux dans la cage d’accueil pendant une période d’acclamation d’une semaine et gardez un cycle clair/obscurité constant de 12 heures. Permettre à ad libitum l’accès au chow et à l’eau des rongeurs.Concevoir un régime de stresseur de quatre semaines dans lequel chacun des sept facteurs de stress est utilisé une fois par semaine, un jour différent chaque semaine. Après une semaine d’acclamation, lancez l’application des facteurs de stress sur les souris de quatre semaines dans la salle de l’UCMS. Pour le premier facteur de stress, placez les souris avec leurs homologues de la cage dans une cage vide.Remplissez la cage vide d’eau conservée à 24 plus ou moins un degré Celsius à une profondeur d’un centimètre, et gardez les souris dans la cage humide pendant quatre heures. Ensuite, transférez chaque souris dans une cage de séchage individuelle transitoire séparée avec une lampe thermique au-dessus, un coussin chauffant sous elle, et une literie de serviette en papier. Placez un thermomètre dans la cage transitoire pour vérifier que la température ne dépasse pas 37 degrés Celsius.Gardez chaque souris dans la cage transitoire jusqu’à ce qu’elle soit sèche et semble revigorée, puis retournez les souris dans la cage d’origine avec les mêmes homologues. Pour la sciure de bois amortie, une mauvaise eau a maintenu à 24 plus ou moins un degré Celsius dans la cage d’origine jusqu’à ce que la sciure soit modérément amortie. Après quatre heures, séchez les souris dans des cages transitoires.Placez ensuite les souris avec des homologues de la cage domestique dans une cage stérile avec de la sciure de bois fraîche. Pour le stresseur suivant, inclinez la cage à 45 degrés contre le mur pendant quatre heures. Pour Empty Cage, transférez les cinq souris ainsi que leurs homologues spécifiques de la cage à domicile dans une cage vide pendant quatre heures.Pour le cinquième facteur de stress, transférez des souris ainsi que leurs homologues spécifiques de la cage domestique vers une cage qui a été logée par un groupe différent de souris pendant une période d’au moins trois jours avant l’application du facteur de stress. Gardez les souris dans la cage inconnue pendant quatre heures. Pour le sixième facteur de stress, placez chaque souris séparément dans un restrainer de souris propre pendant quatre heures.Après cela, retourner les souris à la cage à la maison avec les mêmes homologues. Pour le dernier facteur de stress, transférez des souris dans leur cage d’origine avec leurs homologues spécifiques à la salle UCMS. Gardez la lumière allumée pendant 24 heures consécutives.Enfin, après l’application du facteur de stress, retournez les cages du groupe UCMS de la salle UCMS à la salle d’habitation. Pendant les quatre semaines d’exposition au stress, gardez le groupe naïf dans leurs cages situées dans la salle d’habitation. Le lendemain de l’arrêt du protocole UCMS, commencer l’administration d’agents pharmacologiques thérapeutiques putatifs.Après la phase de traitement, retirez chaque souris de la cage de la maison et placez-la individuellement dans une cage remplie de sciure de bois fraîche et d’un morceau de coton pour l’enrichissement. Ensuite, préparez deux bouteilles, l’une avec de l’eau distillée, et l’autre avec une solution de saccharose à 2%. Pesez les deux bouteilles et placez-les aux deux extrémités du couvercle de la cage et placez le chow des rongeurs entre les deux bouteilles pour permettre aux souris ad libitum d’accéder à la fois aux solutions et à la nourriture pendant une période de 24, 48, 72 ou 144 heures.Après 12 heures, ou une fois par jour si la durée du test dépasse 24 heures, peser les bouteilles pour estimer la consommation de chaque bouteille et changer la position des buses pour contrebalancer la possibilité que les résultats aient été confondus par préférence de position. Enfin, pesez les bouteilles chaque jour pour estimer la consommation de chaque bouteille. Le groupe d’UCMS a démontré la préférence diminuée de saccharose comparée au groupe naïf, suggérant que le protocole d’UCMS était efficace en induisant l’anhédonie.En outre, le groupe d’UCMS a démontré les niveaux hippocampal diminués de BDNF comparés au groupe naïf, suggérant que le protocole d’UCMS ait mené à la diminution des niveaux hippocampal de BDNF comme évident dans la dépression humaine. Les résultats ont indiqué que le groupe salin d’UCMS a démontré une diminution significative de la préférence de saccharose comparée au groupe salin naïf aussi bien que comparé à l’escitalopram d’UCMS et aux groupes de NHT d’UCMS, suggérant l’escitalopram et le NHT normalisés l’anhédonie UCMS-induite. En outre, le groupe salin d’UCMS a démontré les niveaux hippocampal diminués de BDNF comparés au groupe salin naïf aussi bien que comparé à l’escitalopram d’UCMS et aux groupes de NHT d’UCMS, suggérant que l’escitalopram et le NHT aient normalisé la réduction UCMS-induite des niveaux de BDNF dans l’hippocampe.Suite à cette procédure, d’autres méthodes comme le test de suspension de la queue, test de natation forcée, et élevé plus-labyrinthe peut être effectuée. Ces tests sont utilisés pour évaluer le désespoir comportemental ainsi que l’exploration et l’anxiété comme le comportement.

Research

JoVE Journal

Behavior

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