Name: the unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice
Uploaded: 2018-10-24T13:30:00
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Os autores gostaria de agradecer Gali Breuer pela sua assistência na produção vídeo. Esta pesquisa foi apoiada pela Israel Ministério da ciência, tecnologia & espaço (concessão n. º 313552), pelo Instituto Nacional de Psicobiologia em Israel (NIPEU-208-16-17b) e pela Fundação da Universidade aberta.

Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo Comitê de uso do acadêmico faculdade Tel-Aviv-Yaffo e institucional Cuidado Animal.
1. os animais
<ol><li>Uso pré-adolescente (ou seja, 3 semanas de idade) Instituto de câncer Research (ICR) consanguíneo ratos masculinos.</li>
	<li>Randomize ratos para dois grupos de igual tamanho stress (UCMS vs ingênuo). Use 15 ratos por grupo de tratamento (por exemplo: se existem 3 farmacológico tratamento grupos usam 90 ratos...

Na medida em que MDD é uma doença altamente debilitante generalizada, apenas parcialmente dirigida pelo atuais opções terapêuticas, a busca científica para melhores tratamentos ainda é um assunto urgente. Juntamente com as inovações em técnicas psicológicas, farmacoterapias adicionais são necessárias para a grande parte dos pacientes que não respondem às drogas existentes. Modelos animais meticulosos para a depressão são o elemento-chave nesta tarefa. Tais modelos seleções para antidepressivos inovador...

Transtorno depressivo maior (MDD) é uma condição debilitante, que tem sido indicada como a 11th causa da carga global de doença1, com uma prevalência de vida de 11 a 16%2,3. MDD tem sido associada com deficiências graves dos pacientes funcionamento social e ocupacional, diminuição de qualidade de vida, inúmeros transtornos mentais e físicos e risco aumentado para mortalidade4,5,6 , 7. existem diversas farmacoterapias eficazes e intervenções psicológicas para MDD; no entanto, mais do que o terço dos pacientes não alcançar remissão com o existente opções terapêuticas8,9,10,11. Portanto, é melhor mapeamento da fisiopatologia da MDD e desenvolvimento de novos medicamentos são ainda de maior importância. Para atender estas necessidades de modelos animais de tarefas cientificamente validadas para ser utilizado.
Estresse leve crônico imprevisível (UCMS) é um paradigma de roedor renomado usado para induzir comportamentos depressivos e ansiedade-como12,13,14,de15. O principal objectivo do UCMS é gerar déficits comportamentais (tais como anedonia e desespero comportamental12,15) em camundongos e ratos e promover sessões para potenciais terapêuticos agentes farmacológicos. O procedimento foi introduzido pela primeira vez por Katz16 e posteriormente desenvolvido por Willner participam17,18, produzindo resultados comportamentais e neurobiológicos vastos, relembrando a sintomatologia depressiva12. Foi inicialmente concebido para ratos e mais tarde acomodado para ratos13,19. No procedimento, adolescentes animais estão cronicamente expostos a diferentes estressores suaves imprevisíveis. Posteriormente, agentes farmacológicos são administrados. Índices comportamentais e biológicos são obtidos após o término do tratamento. Um dos mais proeminentes testes realizados seguindo UCMS é o teste de preferência de sacarose (SPT). O SPT é baseado em preferência inata dos roedores para a solução adoçada ao invés de água e é amplamente reconhecida como um modelo de translação essencial para avaliar anedonia12,18,20, 21 (que é um sintoma de núcleo em depressão humana22,.23).
Ao inserir a quarta década desde a sua introdução, UCMS foi aplicada em camundongos e ratos em estudos inumeráveis. A maioria destes estudos empregado UCMS como um método para induzir comportamentos depressivos, como12,13,21,24. Estudos também têm utilizado o modelo para gerar anxiogenic efeitos25,26,,27,28,29. Preferências de sacarose e sacarina são os principais exames utilizados para avaliar a anedonia UCMS12,18,30,31,32,33a seguir. Outras medidas de resultados notáveis que são altamente integradas de literatura UCMS são: a suspensão da cauda (TST)28,34,35de teste, teste de natação forçada (FST)28,34 , 36 , 37 (ambos medição stress enfrentamento/comportamental desespero), o teste de campo aberto (OFT; medindo o comportamento exploratório, comportamento de ansiedade e atividade locomotora)25,28,38, a elevada Além de labirinto (EPM; comportamento de ansiedade medição)25,39,40 e testes adicionais de medição comportamentos depressivos, como, comportamentos como ansiedade, funcionamento cognitivo e comportamento social12 . Administração crônica dos antidepressivos tricíclicos (TCAs; imipramina35,41,42,43, desipramina18,44,45 ), antidepressivos tetracíclicos (TeCAs; maprotilina46,47, Mianserina,48), inibidores seletivos da recaptação da serotonina (SSRIs; fluoxetine46,47,49 , escitalopram30,50,51,de paroxetina52), melatonina43,49, agomelatine53, o inibidor de hidrolase (FAAH) de amida de ácido graxo URB59754 e vários compostos naturais30,37,50,55,56,57,58 foram demonstrado para reverter os induzida por UCMS depressivo e ansiedade-como sintomas. Em geral, estes efeitos terapêuticos não foram obtidos através de tratamentos aguda12 (por exemplo, paroxetine51,52, imipramina53,54,59 ,,60, fluoxetine53, agomelatine53, URB59754, Brofaromina60).
Exposição de stress durante a infância e adolescência é um importante factor de risco para a formação anterior de MDD (entre vários outros transtornos psiquiátricos) na idade adulta61,,62,63. Eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) é um sistema neuroendócrino importante regulando a bio-comportamental resposta ao estresse de64. Stress a longo prazo durante os períodos sensíveis de desenvolvimento neurológico da infância e adolescência prejudica o equilíbrio do eixo HPA. Isso pode provocar um estado de maior ativação simpática, reatividade desequilibrada e hipercortisolemia duradoura através do estado de repouso; tornando assim, os indivíduos vulneráveis à depressão ou ansiedade relacionados a psicopatologias65,,66,67,68. UCMS traduz adequadamente esta patogenia: estresse aplicação durante os ratos ' adolescência induz uma susceptibilidade de depressivo, como a longo prazo. Além disso, os défices comportamentais induzidos por UCMS, é constituída por alterações significativas em HPA eixo funcional (por exemplo, causando uma redução no fator neurotrófico derivado do cérebro hipocampo [BDNF; uma proteína altamente envolvidos no equilíbrio do HPA eixo69,70]30, ou alterando a regulação da secreção de corticosterona para o sangue71,72), em semelhança com a fisiopatologia em seres humanos12, 50,73.
UCMS tem várias características tocam como um modelo para a depressão: por exemplo, (i) o levantamento de anedonia (que é considerado um endophenotype de MDD23,74); (ii) UCMS permite avaliar a grande variedade de comportamentos depressivos, como como desespero comportamental, comportamento social reduzido, deterioração no estado de pele e mais34; e (iii) Crônicas (2-4 semanas), mas não aguda, administração de antidepressivos seguinte exposição de estresse poderia produzir um efeito terapêutico prolongado paralelo ao efeito Obtido em pacientes humanos pelos mesmos agentes30,75 ,76,,77.
Estas características reforçam a validade das UCMS em comparação com outros modelos animais de depressão. O FST78 e o TST79 são dois modelos que são usados para induzir ou para avaliar o comportamento depressivo. Como modelos para induzir comportamentos depressivos, como eles têm claras deficiências em relação ao UCMS; Não solicitar alterações comportamentais a longo prazo e podem meramente refletem um ajustamento de estresse agudo em vez de produzir um durável depressiva, como manifestação de76.
Um modelo alternativo de animal da depressão é o modelo de derrota social. Ao contrário do FST e o TST este modelo (como UCMS) exigem a aplicação de estresse crônico (id est [ou seja], a recorrente sujeição do animal ao contrário social encontros com contrapartes dominantes)76,,77 , 80 , 81 , 82. a principal vantagem do modelo social derrota é que emprega estímulos sociais como estressores, refletindo o papel do estresse psicossocial na patogênese da depressão humana. Semelhante ao UCMS, o modelo social derrota provoca alterações neuroendócrinas e comportamentos de depressivo, como a longo prazo. Novo paralelo UCMS, os défices sociais induzida a derrota podem ser revertidos através da crônica, mas não aguda, a administração de antidepressivos. Em geral, há um grande apoio para a utilização de ambos UCMS e derrota social como aparelhos pre-clínicos para investigar a fisiopatologia da depressão76,77,81,82 . No entanto, um grande défice de modelo a derrota social é que ele só poderia ser aplicado em roedores do sexo masculinos, como as fêmeas não apresentam comportamento agressivo suficiente para os outros83. Por outro lado, estima, UCMS foi mostrado para produzir vários efeitos depressivos em ambos os ratos masculinos e femininos34.
Estresse leve crônico previsível (PCMS) é outro modelo de roedor que impõe um regime de exposição recorrente diária a retenção tensão28,84,85,86,87. Vários estudos têm mostrado que o PCMS maior ansiedade-como comportamentos28,87; embora, há contraditório relatórios capacidade PCMS vis-à-vis para induzir comportamentos de depressivo, como a longo prazo. Ao contrário de UCMS, PCMS produziu resultados menos satisfatórios, referindo-se a sua capacidade de induzir um estado pertubado28,84,86. Isto é consistente com a fenomenologia humana, em que imprevisível estressores são mais prejudiciais do que previsíveis os88.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Heating lamp</td>
			<td>Ikea</td>
			<td>AA-19025-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pillow</td>
			<td>Sachs</td>
			<td>EF-188B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice restrainer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable electronic balance (*.** g)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard rubber stopper, size 5</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>#5.5R</td>
			<td>To avoid spillage during SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight open drinking tube (2.5&#34;)</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>OT-100</td>
			<td>To avoid spillage during SPT (insert drinking tube into rubber stopper)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2% sucrose solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml conical centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For the SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-adolescent (approximately 20-days old) ICR outbred mice</td>
			<td>Envigo</td>
			<td>Hsd:ICR (CD-1)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice

Depressão é uma doença altamente prevalente e debilitante, apenas parcialmente dirigida pelo atuais farmacoterapias. A falta de resposta ao tratamento por muitos pacientes solicita a necessidade de desenvolver novas alternativas terapêuticas e para melhor compreender a etiologia da doença. Modelos pré-clínicos com translação méritos são rudimentares para esta tarefa. Aqui nós apresentamos um protocolo para o método de estresse suave crônico imprevisível (UCMS) em camundongos. Neste protocolo, ratos adolescentes estão cronicamente expostos a intercambiando imprevisíveis estressores suaves. Assemelhando-se a patogênese da depressão nos seres humanos, exposição de estresse durante o período sensível da adolescência ratos instiga um fenótipo depressiva, como evidente na idade adulta. UCMS pode ser usado para as sessões dos antidepressivos na variedade de comportamentos como depressiva e índices de neuromolecular. Entre os mais proeminentes testes para avaliar o comportamento depressivo nos roedores é o teste de preferência de sacarose (SPT), que reflecte a anedonia (sintoma de núcleo da depressão). O SPT será também apresentado no presente protocolo. A capacidade de UCMS para induzir anedonia, instigar os défices comportamentais a longo prazo e permitir a reversão destes défices através de tratamento crônico (mas não agudo) com antidepressivos reforça a validade do protocolo, em comparação com outros protocolos de animal para indução de comportamentos depressivos, como.

A fim de confirmar a eficácia do procedimento de indução depressiva, como déficits UCMS, realizou-se uma verificação de manipulação. Camundongos machos ICR consanguíneo foram aleatoriamente para condições UCMS ou ingênuo (4 semanas, conforme descrito no protocolo 2.2). Posteriormente, o SPT (6 dias, conforme descrito no protocolo 4) foi administrada para avaliar se os ratos depois de submetidos a UCMS demonstraram déficits hedônico. Pouco depois, os ratos foram sacrificados ...

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The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Aqui nós apresentamos o protocolo imprevisíveis stress leve crônica em ratos. Este protocolo induz um fenótipo de depressivo, como a longo prazo e permite avaliar a eficácia dos antidepressivos putativos em reverter os défices de depressiva como comportamentais e neuromolecular.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

A principal vantagem dessa técnica é que ela traduz adequadamente as principais características neurobiológicas e comportamentais implicadas na patogênese, etiologia e tratamento da depressão. Esse método pode ajudar a responder a perguntas-chave na compreensão da fisiopatologia da ansiedade e da depressão e promover o desenvolvimento de novos tratamentos farmacológicos. A implicação dessa técnica se estende para a terapia da depressão, pois permite a triagem de potenciais antidepressivos, assemelhando-se ao curso prolongado de remissão evidente em pacientes humanos.Comece enchendo gaiolas caseiras com serragem fresca, e adicione um pedaço de algodão de lã para enriquecimento. Abrigar animais na gaiola doméstica por um período de aclamação de uma semana, e manter um ciclo consistente de 12 horas de luz/escuridão. Permita o acesso ad libitum à comida de roedores e água.Projete um regime de estresse de quatro semanas em que cada um dos sete estressores é utilizado uma vez por semana, em um dia diferente a cada semana. Após uma semana de aclamação, inicie a aplicação dos estressores nos camundongos de quatro semanas de idade na sala da UCMS. Para o primeiro estressor, coloque os ratos junto com seus homólogos da gaiola em uma gaiola vazia.Encha a gaiola vazia com água mantida a 24 graus mais ou menos um Celsius a uma profundidade de um centímetro, e mantenha os ratos na gaiola molhada por quatro horas. Em seguida, transfira cada rato para uma gaiola de secagem individual separada com uma lâmpada de calor acima dele, uma almofada de aquecimento sob ele e a cama de papel toalha. Coloque um termômetro na gaiola transitória para verificar se a temperatura não ultrapassa 37 graus Celsius.Mantenha cada rato na gaiola transitória até que esteja seco e pareça revigorado, e depois devolva os ratos para a gaiola doméstica com as mesmas contrapartes. Para serragem umedecida, a água pobre manteve-se a 24 graus mais ou menos Celsius na gaiola doméstica até que a serragem seja moderadamente umedecida. Depois de quatro horas, seque os ratos em gaiolas transitórias.Em seguida, coloque os ratos com contrapartes de gaiola em uma gaiola estéril com serragem fresca. Para o próximo estressor, incline a gaiola a 45 graus contra a parede por quatro horas. Para Empty Cage, transfira todos os cinco ratos junto com seus colegas específicos da gaiola para uma gaiola vazia por quatro horas.Para o quinto estressor, transfira ratos junto com seus homólogos específicos da gaiola doméstica para uma gaiola que foi alojada por um grupo diferente de ratos por um período de pelo menos três dias antes da aplicação do estressor. Mantenha os ratos na jaula desconhecida por quatro horas. Para o sexto estressor, coloque cada rato separadamente em um conterrº de rato limpo por quatro horas.Depois disso, devolva ratos para a gaiola com as mesmas contrapartes. Para o último estressor, transfira ratos em sua gaiola doméstica com suas contrapartes específicas para a sala UCMS. Mantenha a luz acesa por 24 horas consecutivas.Finalmente, após a aplicação do estressor, devolva as gaiolas do grupo UCMS da sala UCMS para a sala de habitação. Durante as quatro semanas de exposição ao estresse, mantenha o grupo ingênuo em suas gaiolas de casa localizadas na sala de alojamento. No dia seguinte à cessação do protocolo UCMS, inicie a administração de agentes farmacológicos terapêuticos putativos.Após a fase de tratamento, remova cada rato da gaiola doméstica e coloque-o individualmente em uma gaiola cheia de serragem fresca e um pedaço de algodão para enriquecimento. Em seguida, prepare duas garrafas, uma com água destilada e outra com solução de 2%de sacarose. Pese as duas garrafas e coloque-as em ambas as extremidades da tampa da gaiola e coloque comida de roedor entre as duas garrafas para permitir aos ratos acesso a ratos ad libitum a soluções e alimentos por um período de 24, 48, 72 ou 144 horas.Após 12 horas, ou uma vez por dia, se a duração do teste exceder 24 horas, pese as garrafas para estimar o consumo de cada garrafa e troque as posições dos bicos para contrabalançar a possibilidade de que os resultados tenham sido confundidos pela preferência de posição. Por fim, pese as garrafas todos os dias para estimar o consumo de cada garrafa. O grupo UCMS demonstrou menor preferência por sacarose em relação ao grupo ingênuo, sugerindo que o protocolo UCMS foi eficaz na indução da anedonia.Além disso, o grupo UCMS demonstrou níveis de BDNF hipocampal reduzidos em comparação com o grupo ingênuo, sugerindo que o protocolo UCMS levou à diminuição dos níveis de BDNF hipocampal como evidente na depressão humana. Os resultados indicaram que o grupo salino ucms demonstrou uma diminuição significativa na preferência de sacarose em comparação com o grupo ingênuo salino, bem como em comparação com os grupos UCMS escitalopram e UCMS NHT, sugerindo que tanto o escitalopram quanto o NHT normalizaram a anedonia induzida pela UCMS. Além disso, o grupo salino UCMS demonstrou redução dos níveis de BDNF hipocampal em comparação com o grupo ingênuo de soro fisiológico, bem como em comparação com os grupos ucms escitalopram e ucms nht, sugerindo que tanto o escitalopram quanto o NHT normalizaram a redução induzida pelo UCMS nos níveis de BDNF no hipocampo.Após este procedimento, outros métodos como teste de suspensão de cauda, teste de natação forçado e elevação do plus-maze podem ser realizados. Esses testes são usados para avaliar o desespero comportamental, bem como exploratórios e ansiedade como comportamento.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Usando Social Stress Crônico ao Modelo depressão pós-parto em lactação Roedores

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Comportamento

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Mindfulness in Motion MIM: An Onsite Mindfulness Based Intervention MBI for Chronically High Stress Work Environments to Increase Resiliency and Work Engagement

Mindfulness in Motion (MIM): Uma Intervenção no local Mindfulness Based (MBI) para ambientes de trabalho cronicamente alto estresse para aumentar a resiliência e Trabalho Engagement

A pragmatic mindfulness intervention to benefit personnel working in chronically high-stress environments, delivered onsite during the workday, is timely ...

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