Name: quantification of hypopigmentation activity in vitro
Uploaded: 2019-03-06T12:30:00
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이 작품은 한국 연구소의 계획과 기술 음식, 농업 및 임업 (IPET) 농업, 음식, 및 농촌 업무 (MAFRA 투자 농업-한국 기술 개발 프로그램을 통해에 대 한 평가 의해 지원 되었다 ) (116159-02-2-WT011) BK21 플러스, 고려 대학교 생명 공학 및 생명 과학의 학교.

1. 매체, 화합물, 및 시 약의 준비
<ol><li>B16F10 성장 전체 매체를 준비 합니다. 보충 Dulbecco의 10% 태아 둔감 한 혈 청 (FBS)와 1% 페니실린/스 (해충)이 글의 중간 (DMEM) 수정.<ol>
<li>완전 한 매체의 500 mL을 FBS와 1 패 멸 균된 유리병에 해충의 5 mL 50 mL와 Dulbecco의 수정된이 글의 중간 (DMEM)의 445 mL를 혼합 한다. 부드럽게 혼합 후 새로운 소독된 유리 병을 4 ° c.에 다음 저장소 0.2 µ m 병 상위 필터를 통해 매체 ...

<ol>
	<li>Bonaventure, J., Domingues, M. J., Larue, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+controlling+the+migration+of+melanocytes+and+melanoma+cells.">Cellular and molecular mechanisms controlling the migration of melanocytes and melanoma cells.</a> Pigment Cell &amp; Melanoma Research. 26 (3), 316-325 (2013).</li><li>Brenner, M., Hearing, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+protective+role+of+melanin+against+UV+damage+in+human+skin.">The protective role of melanin against UV damage in human skin.</a> Photochemistry and Photobiology. 84 (3), 539-549 (2008).</li><li>Galvan, I., Solano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanin+chemistry+and+the+ecology+of+stress.">Melanin chemistry and the ecology of stress.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 88 (3), 352-355 (2015).</li><li>Burger, P., Landreau, A., Azoulay, S., Michel, T., Fernandez, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+whitening+cosmetics:+Feedback+and+challenges+in+the+development+of+natural+skin+lighteners.">Skin whitening cosmetics: Feedback and challenges in the development of natural skin lighteners.</a> Cosmetics. 3 (4), 36 (2016).</li><li>Cooksey, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+the+indirect+formation+of+the+catecholic+intermediate+substrate+responsible+for+the+autoactivation+kinetics+of+tyrosinase.">Evidence of the indirect formation of the catecholic intermediate substrate responsible for the autoactivation kinetics of tyrosinase.</a> Journal of Biological Chemistry. 272 (42), 26226-26235 (1997).</li><li>Ando, H., Kondoh, H., Ichihashi, M., Hearing, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Approaches+to+identify+inhibitors+of+melanin+biosynthesis+via+the+quality+control+of+tyrosinase.">Approaches to identify inhibitors of melanin biosynthesis via the quality control of tyrosinase.</a> Journal of Investigative Dermatology. 127 (4), 751-761 (2007).</li><li>Gillbro, J. M., Olsson, M. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Momilactione+B+inhibits+protein+kinase+A+signaling+and+reduces+tyrosinase-related+proteins+1+and+2+expression+in+melanocytes.">Momilactione B inhibits protein kinase A signaling and reduces tyrosinase-related proteins 1 and 2 expression in melanocytes.</a> Biotechnology Letters. 34 (5), 805-812 (2012).</li><li>Jun, H. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+inhibition+of+&#947;-oryzanol+on+cellular+melanogenesis:+inhibition+of+tyrosinase+activity+and+reduction+of+melanogenic+gene+expression+by+a+protein+kinase+a-dependent+mechanism.">Dual inhibition of &#947;-oryzanol on cellular melanogenesis: inhibition of tyrosinase activity and reduction of melanogenic gene expression by a protein kinase a-dependent mechanism.</a> Journal of Natural Products. 75 (10), 1706-1711 (2012).</li><li>Choi, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+isoflavone+puerarin+and+its+glycosides+on+melanogenesis+in+B16+melanocytes.">Effects of the isoflavone puerarin and its glycosides on melanogenesis in B16 melanocytes.</a> European Food Research and Technology. 231 (1), 75-83 (2010).</li><li>Cho, B. R., Jun, H. J., Thach, T. T., Wu, C., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Betaine+reduces+cellular+melanin+content+via+suppression+of+microphthalmia-associated+transcription+factor+in+B16-F1+murine+melanocytes.">Betaine reduces cellular melanin content via suppression of microphthalmia-associated transcription factor in B16-F1 murine melanocytes.</a> Food Science and Biotechnology. 26 (5), 1391-1397 (2017).</li><li>Overwijk, W. W., Restifo, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B16+as+a+mouse+model+for+human+melanoma.">B16 as a mouse model for human melanoma.</a> Current Protocols in Immunology. , (2001).</li><li>Virador, V. M., Kobayashi, N., Matsunaga, J., Hearing, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+protocol+for+assessing+regulators+of+pigmentation.">A standardized protocol for assessing regulators of pigmentation.</a> Analytical Biochemistry. 270 (2), 207-219 (1999).</li><li>D'Mello, S. A. N., Finlay, G. J., Baguley, B. C., Askarian-Amiri, M. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+histochemical+method+for+a+simultaneous+staining+of+melanin+and+collagen+fibers.">A novel histochemical method for a simultaneous staining of melanin and collagen fibers.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 59 (3), 270-277 (2011).</li></ol>

우리는 교양된 melanocytes을 사용 하 여 테스트의 hypopigmentation 활동을 평가 하기 위한 프로토콜을 제시. 대표 결과 알 부 틴, 저해 tyrosinase 활동 및 셀룰러 멜 라 닌 콘텐츠 tyrosinase 억제 물의 hypopigmentation 효과를 보여주었다. 이러한 메서드는 안티 melanogenic 활동 연구에 널리 사용 됩니다. 이 분석 실험을 사용 하 여, 또한 성공적으로 확인 했습니다 melanogenesis B16F10 세포에 억제 효과 과거에는 여러 가?...

멜 라 닌은 생리학, 병리학, 피부, 눈, 뇌1등 여러 장기의 독성에 중요 한 역할을 한다. 멜 라 닌의 주요 기능 사진 심사 및 생 화 확 적인 효과가 있습니다. 멜 라 닌 근처-적외선과 보이는 빛으로 자외선 (UV) 방사선, 짧은 파장의 빛;에서 증가 흡수 속도와 흡수 따라서, 멜 라 닌 가시광선 이나 자외선 방사선2로 인 한 손상 으로부터 조직을 보호 합니다. 멜 라 닌은 항 산화 및 금속과 다른 독성 화학 물질;에 대 한 선호도 따라서, 그것은 산화 화학 스트레스3에서 조직을 보호할 수 있습니다. 그러나, 멜 라 닌의 과도 한 생산 피부 문제를 발생합니다.
피부와 홍 채에 있는 melanin의 품질과 수량은 아이리스와 피부 색깔의 가장 중요 한 결정 요인. 개인은 다른 피부 색깔 기본 설정; 있을 수 있습니다. 다른 더 가벼운 피부 색깔을 선호 하는 동안 일부 검게 그을린된 피부를 선호 합니다. 이러한 소비자 프로 파일에 따라 hypopigmentation 화장품 선호 피부 색상4에 대 한 개별 시장을 만족 시키기 위해 개발 되었습니다. 따라서, hypopigmentation 및 안티 melanogenic 활동의 연구 모두 과학적으로 그리고 실제적으로 중요 하다.
Melanogenesis는 멜 라 닌 생 합성 효소 및 자발적인 화학 반응을 melanocytes에 일련의 복잡 한 프로세스입니다. 한 melanocyte 약 36 keratinocytes 둘러싸여 있으며 melanocytes 이웃 keratinocytes 그들의 제품을 배포 하는 멜 라 닌 합성 공장. 피부에 멜 라 닌을 생산 하 고 melanocytes의 melanosomal 구획에 저장 dendrites 통해 표 피에에서 인접 keratinocytes에 수송 된다.
L-티로신 melanogenesis 및 효소 tyrosinase 초기 기판 catalyzes L-티로신 그리고 dopaquinone로 3, 4-dihydroxyphenylalanine (DOPA)으로 변환 하는 두 개의 연속 반응을 제공 합니다. 이러한 반응 속도 제한 단계 melanogenesis5,6에 있습니다. 따라서, hypopigmentation 활동 세포 tyrosinase 활동을 직접 평가 하 여 먼저 측정할 수 있습니다. 이렇게 하려면 melanocyte 추출 tyrosinase를 포함 하는 인 큐베이 팅 DOPA와 및 dopaquinone 샘플에서 475에 분 광 광도 법으로 측정 될 수 있다 nm. 값은 샘플, 및 컨트롤에 비해 적은 dopaquinone 형성에 hypopigmentation 활동 결과와 물질의 단백질 농도 의해 정규화 됩니다.
둘째, hypopigmentation 활동 교양된 melanocytes에 멜 라 닌을 직접 측정 하 여 측정할 수 있습니다. 시험 체와 세포 치료, 후 멜 라 닌 알칼리 조건 하에서 추출 되 고 멜 라 닌 콘텐츠 400 분 광 광도 법으로 정량 nm. Hypopigmentation 에이전트 컨트롤7보다 더 낮은 melanin 내용을 발생 합니다.
마지막으로, hypopigmentation 활동 폰 타나-마 송 melanin 얼룩 및 후속 이미지 분석 하 여 측정할 수 있습니다. 폰 타나-마 송 얼룩에 멜 라 닌과 립을 보이는 검은 금속 상태로 암모니아-실버 질산염을 줄일 하 고 미세한 이미지 셀의 검정 영역은 멜 라 닌의 양을 나타내며.
Hypopigmentation 에이전트 보통 제공 일관 되 고 비교 결과이 세 가지 방법으로는 물질의 활동 올바른지 확인 합니다. 또는, 그것은 주요 유전자와 단백질 melanogenesis hypopigmentation 활동을 조사 하는 시험 물질에 대 한 응답에서에 식을 측정 하기 유용할 수 있습니다. Tyrosinase, 뿐만 아니라 tyrosinase 관련 (TRP-1) 단백질과 dopachrome tautomerase (TRP-2) melanogenesis8에 중요 한 효소는. 녹음 방송 요인 microphthalmia 관련 된 전사 요소 (MITF) melanogenesis는 유전자/단백질 식 레벨의 정량화에 마스터 레 귤 레이 터 또는 발기인 활동 분석 결과 hypopigmentation 활동을 평가 하기 위해 사용할 수 있습니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>3,4-Dihydroxy-l-phenylalanine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium hydroxide solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#320145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arbutin</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>#10960</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SH30243.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SH30084.03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin</td>
			<td>Yakuri Pure Chemicals</td>
			<td>#16223</td>
			<td>37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold chloride</td>
			<td>American MasterTech</td>
			<td>AHG0226</td>
			<td>0.10%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>Samchun chemical</td>
			<td>H0255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Bio basic Canada Inc.</td>
			<td>PB0440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#60218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>#3817-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Duksan pure chemicals</td>
			<td>#81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>655104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear fast red</td>
			<td>Merck</td>
			<td>100121</td>
			<td>Nuclear fast red 0.1% in 5% aluminum sulfate.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin and streptomycin solution</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver nitrate</td>
			<td>Duksan Pure Chemicals</td>
			<td>#900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic (Na2HPO4)</td>
			<td>J.T. Baker</td>
			<td>#3817-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic (Na2HPO4)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium thiosulfate pentahydrate</td>
			<td>Duksan Pure Chemicals</td>
			<td>#2163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris(hydroxymethyl)aminomethane</td>
			<td>Bio Basic Canada</td>
			<td>TB0196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Union Carbide</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyrosinase from mushroom</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T3824</td>
			<td>25 KU</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of hypopigmentation activity in vitro

이 연구는 생체 외에서 hypopigmentation 활동의 정량화에 대 한 실험실 방법을 선물 한다. Melanocytes에 주요 안료 멜 라 닌은 여러 세포와 환경 요인에 대 한 응답에서 합성 됩니다. 멜 라 닌 자외선 손상 으로부터 피부 세포를 보호 하지만, 또한 생물 및 생 화 확 적인 기능을가지고. 과도 한 생산 또는 축적 melanocytes에 멜 라 닌의 주 근 깨, 검 버섯, melasma, 사마귀 등 피부 문제를 일으킬 수 있습니다. 따라서, hypopigmentation 에이전트 melanogenesis 제어 임상 또는 화장품 요구와 개인에서 중요 하다. 멜 라 닌은 주로 외부 영향 melanogenesis 라는 복잡 한 생 화 확 적인 과정에 내재 성 요인, 호르몬, 염증, 나이, 등 자외선 빛 노출 melanocytes melanosomes에 합성 됩니다. 우리는 화학 물질 또는 melanocytes에 자연 물질의 hypopigmentation 활동을 결정 하는 세 가지 방법을 설명: 1) 셀룰러 tyrosinase 활동 및 2) 멜 라 닌 콘텐츠 및 이미지 3) 얼룩과 측량 셀룰러 멜 라 닌의 측정 분석입니다.
Melanogenesis에서 tyrosinase L-티로신 그리고 dopaquinone로 3, 4-dihydroxyphenylalanine (l 아미노산의 일종)으로 변환 하는 속도 제한 단계 catalyzes. 따라서 tyrosinase의 저해는 기본 hypopigmentation 메커니즘입니다. 교양된 melanocytes에 tyrosinase 활동 기판으로 아미노산의 일종을 추가 하 고 dopaquinone 생산 분 광 광도 법으로 측정 하 여 측정할 수 있습니다. Melanogenesis 또한 멜 라 닌 콘텐츠를 측정 하 여 측정할 수 있습니다. 포함 하는 멜 라 닌 세포 일부는 NaOH와 함께 추출 되 고 멜 라 닌 spectrophotometrically 계량. 마지막으로, 멜 라 닌 콘텐츠 폰 타나-마 송 멜 라 닌의 얼룩이 다음 이미지 분석에 의해 측정할 수 있습니다. 이러한 생체 외 분석 실험의 결과 항상 복제 될 수 없다 인간의 피부에, 비록 이러한 메서드는 널리 특히 잠재적인 hypopigmentation 활동을 식별 하는 초기 단계로 melanogenesis 연구에 사용. 이 방법 또한 melanocyte 활동, 성장과 분화를 평가 하기 위해 사용할 수 있습니다. 세 가지 다른 방법으로 일관 된 결과 효과의 유효성을 확인합니다.

알 부 틴, 안티-melanogenic의 hypopigmentation 활동에 대 한 대표적인 결과 화합물, B16F10 melanocytes 다음과 같습니다. 그림 1A 는 그 알 부 틴은 크게 차량 처리 제어에 비해 세포 tyrosinase 활동 억제를 보여 줍니다. 마찬가지로, 알 부 틴과 자극된 세포의 멜 라 닌 콘텐츠 컨트롤 (그림 1B)에 비해 감소 크게 되었다. 셀 폰 타나-마 송 얼룩과 ?...

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Quantification of Hypopigmentation Activity In Vitro

체 외 화학 물질의 hypopigmentation 활동을 평가 하기 위한 세 가지 실험 방법 설명: 1) 셀룰러 tyrosinase 활동과 2) 멜 라 닌 콘텐츠, 및 3) 멜 라 닌 세포의 멜 라 닌 얼룩 및 이미지 분석에 의해 측정의 정량화.

생체 외에서 Hypopigmentation 활동의 정량화

This study presents laboratory methods for the quantification of hypopigmentation activity in vitro. Melanin, the major pigment in melanocytes, is ...

이 방법은 항 멜라노겐성 활동을 가진 기능성 화장품 및 피부제의 개발에 도움이 될 수 있다. 그것은 수행해야하고 결과를 신속하게 얻을 수있다. 또한, 이 방법은 연구자에게 유용할 수 있으며, 이들은 효과 나 화합물을 식별하거나 조사하거나 antimelanogenic 또는 프로멜라노겐성 활동을 조사하려는 사람들에게 유용할 수 있다.티로시나아제 활성을 측정하기 위해 B16-F10 멜라니시드제를 세포 배양 인큐베이터에서 24시간 동안 완전한 배지에서 24웰 플레이트 농도의 웰당 5배 10~4번째 세포로 시드하는 것으로 시작한다. 다음 날, 갓 준비된 테스트 화합물 및 억제제 또는 음의 제어로 보충된 DMEM으로 각 우물의 상체를 교체하고 플레이트를 인큐베이터로 72시간 동안 반납한다. 치료가 끝나면 우물을 두 번 헹구고 300 마이크로리터의 차가운 PBs를 잘 헹구고 접시를 얼음 위에 놓습니다.다음으로 셀 스크레이퍼를 사용하여 각 웰에 300 마이크로리터의 용해 버퍼를 추가하여 5분 후에 셀 용액을 수집합니다. 결과 세포 입자 현탁액을 개별 1.5 밀리리터 미세 원심분리기 튜브로 전달합니다. 그리고 세포 간 티로시나아제를 방출하기 위해 얼음에 14, 500 rpm에서 2 초 동안 3 번 용해.원심분리에 의해 세포 파편을 펠렛하고 얼음에 개별 1.5 밀리리터 원심분리기 튜브에 슈퍼 네이션을 전송합니다. 명확한 96 개의 잘 폴리스티렌 마이크로 플레이트의 개별 우물에 각 수퍼티의 70 마이크로 리터를 할당하고 140 개의 미세 리터의 티로시나제 기판 용액을 각 수퍼 나탄에 추가합니다. 접시를 부드럽게 흔들어 잘 내용을 혼합합니다.그런 다음 접시를 섭씨 37도에서 2시간 동안 배양합니다. 그리고 마이크로 플레이트 판독기에서 475 나노미터에서 티로시나제 활성을 측정합니다. 치료된 세포의 리세이트를 수집한 후 세포의 멜라닌 함량을 측정하기 위해 입증하였다.원심분리로 용액을 수집하고 수퍼네이션을 새로운 튜브로 옮긴다. 각 펠릿에 일반 수산화 나트륨 300마이크로리터를 섭씨 60도에서 1시간 배양합니다. 이어서 용존 셀 현탁액의 원심분리.그런 다음 슈퍼나티의 200 마이크로리터를 96웰 플레이트의 각 웰에 옮기합니다. 그리고 400 나노미터 파장에서 마이크로 플레이트 판독기의 멜라닌 함량을 측정합니다. 폰타나-마슨 스테닝의 경우, 300 마이크로리터의 콜드 PBs로 처리된 세포를 두 번 세척하고 섭씨 4도에서 1시간 동안 10%의 미공식적으로 200마이크로리터로 세포를 고정합니다.증류수로 두꺼운 세포를 헹구고 58~68도의 마이크로리터 200개를 각 우물에 암모니아칼 실버 작업 용액을 추가합니다. 섭씨 37도에서 1시간 동안 배양하거나 세포가 황갈색이 될 때까지. 증류수로 얼룩진 세포를 헹구고 실온에서 0.1%의 금염화물로 2분 배양합니다.금 염화물 처리 된 세포를 증류수로 헹구고 세포에 200 마이크로 리터의 나트륨 티오툴페이트 용액을 추가하십시오. 2 분 후에 세포를 다시 헹구십시오. 그리고 5 분 동안 잘 당 핵 고속 적색의 200 마이크로 리터로 세포를 레이블.그런 다음 빛 현미경으로 이미징하기 전에 수돗물로 얼룩진 세포를 씻으릅니다. 임계값 분석의 경우 이미지 J에서 이미지를 열고 이미지를 선택하고 이미지, 조정 및 색상 임계값을 선택합니다. 폰타나 매슨으로 염색된 영역을 측정하기 위해 밝기 매개변수 막대를 0으로 설정하고 모든 검은색 또는 갈색 스테인드 셀이 포함된 지점으로 밝기를 조정합니다.파티클 분석 및 분석을 선택하고 파티클 분석 창에서 요약 상자를 확인한 다음 확인을 클릭하여 결과의 요약을 얻고 데이터를 스프레드시트에 복사하고 붙여넣습니다. Arbutin 처리는 대조군 차량 처리 세포에 비해 세포 티로시나제 활성을 현저하게 억제합니다. 마찬가지로 Arbutin으로 자극된 세포의 멜라닌 함량은 대조군에 비해 현저히 감소된다.세포는 치료 단 사이에서 형태학적으로 유사하더라도, Arbutin는 대조군 처리된 세포에 비해 검은 색소의 면적을 감소시다. 이 방법은 복합 라이브러리를 사용하여 스크리닝하는 데 유용합니다. 신속하게 테스트할 샘플의 수백 이상이 있습니다.또한이 방법은 멜라노발생과 관련된 메커니즘을 조사하는 데사용할 수 있습니다. 생리 활성 후보 화합물이 확인 된 후, 생물학적 메커니즘 또는 상업적 응용 프로그램의 연구에 대한 자신의 증언.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

의 pH에 ​​의존 활동의 검출<em&gt; 대장균</em&gt; 보호자 HdeB<em&gt; 체외</em&gt; 및<em&gt; 생체</em

Bacteria are frequently exposed to environmental changes, such as alterations in pH, temperature, redox status, light exposure or mechanical force. Many ...

연구

생화학

Quantification of the Abundance and Charging Levels of Transfer RNAs in Escherichia coli

Quantification of the Abundance and Charging Levels of Transfer RNAs in Escherichia coli

풍부 하 고 대장균 에서 전송 RNAs의 레벨 충전의 정량화

Transfer RNA (tRNA) is an essential part of the translational machinery in any organism. tRNAs bind and transfer amino acids to the translating ribosome. ...

Genome-wide Quantification of Translation in Budding Yeast by Ribosome Profiling

리보솜을 프로 파일링 하 여 신진 효 모에 번역의 게놈 넓은 정량화

Translation of mRNA into proteins is a complex process involving several layers of regulation. It is often assumed that changes in mRNA transcription ...

Mapping Metabolism: Monitoring Lactate Dehydrogenase Activity Directly in Tissue

매핑 대사: 조직에서 직접 젖 산 효소 활동 모니터링

Mapping enzymatic activity in space and time is critical for understanding the molecular basis of cell behavior in normal tissue and disease. In situ ...

An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

TRNA Isopentenyl 전이 효소 활동을 감지 하는 체 외에서 분석 결과

N6-isopentenyladenosine RNA modifications are functionally diverse and highly conserved among prokaryotes and eukaryotes. One of the most highly conserved ...

Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

생체 외에서 교정 무료 단백질 호모-oligomerization 상업 계측 및 무료, 오픈 소스 밝기 분석 소프트웨어를 사용 하 여의 정량화

Number and brightness is a calibration-free fluorescence fluctuation spectroscopy (FFS) technique for detecting protein homo-oligomerization. It can be ...

Detection of Phospholipase C Activity in the Brain Homogenate from the Honeybee

꿀벌에서 두뇌 Homogenate에서 Phospholipase C 활동의 탐지

The honeybee is a model organism for evaluating complex behaviors and higher brain function, such as learning, memory, and division of labor. The mushroom ...

In Vitro Ubiquitination and Deubiquitination Assays of Nucleosomal Histones

체외 유비퀴틴화 및 뉴클레오소말 히스톤의 이중화 율법의 비퀴틴화 어설션

Ubiquitination is a post-translational modification that plays important roles in various signaling pathways and is notably involved in the coordination ...