Name: mouse model of pressure ulcers after spinal cord injury
Uploaded: 2019-03-09T13:00:00
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この作品は、ニュージャージー脊髄研究 (CSCR15IRG010)、米国国防総省 (SC160029)、イェール大学部の外科大瀬研究助成プログラム委員会によって部分的に支持されました。倉庫ケック共同神経科学センター、ラトガース大学のテクニカル サポートからショーン o ' Leary に感謝いたします。

ラトガース大学機関動物ケアおよび使用委員会によって承認されたプロトコールに従ったすべての動物取扱および外科プロシージャを行った。マウスは、標準的な食事とアドリブの水を供給しました。
1. 手術と非手術器械の準備
<ol><li>オートクレーブの手術と非手術器械を滅菌します。</li>
	<li>70% エタノールで外科手術台をきれいにし、37 ° C に加熱パッドをウォーム ...

<ol>
	<li>Rappl, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+changes+in+tissues+denervated+by+spinal+cord+injury+tissues+and+possible+effects+on+wound+healing.">Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing.</a> International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).</li><li>Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+pressure+ulcer+research.">Animal models in pressure ulcer research.</a> The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).</li><li>Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanics+of+pressure+ulcer+in+body+tissues+interacting+with+external+forces+during+locomotion.">Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).</li><li>National Pressure Ulcer Advisory Panel. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , (2014).</li><li>Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+risk+factors+for+the+development+and+recurrence+of+pressure+ulcers+in+people+with+spinal+cord+injuries.">A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries.</a> Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).</li><li>Krause, J. 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C., Berthiaume, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+complete+spinal+cord+injury+on+healing+of+skin+ulcers+in+mouse+models.">Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models.</a> Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).</li><li>Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. 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本研究ではプロトコルでは、膿は SCI の創傷治癒への影響を評価するための新しい実験モデルについて説明します。皮膚の膿は、背側皮膚のひだは、上または SCI のサイトの設定の 2 つの 12 mm 径ディスク磁石の 12 h アプリケーション経由で誘導された.データは、SCI をマウスの皮膚創傷治癒を遅らせることを示します。重要なは、専用に SCI レベル上で作った傷として、SCI の神経レベルの下の...

圧力潰瘍 (膿) は、外傷性の科学1の主要な合併症です。膿は、皮膚および/または患者が座っているまたは1を横になっているときに、体重が集結している骨の出っぱりに通常発生する基になる組織にローカライズされた傷害です。皮膚、脂肪、および筋肉は、ローカライズされた虚血、組織の炎症、機械的損傷、壊死2,3の開発につながるこの一定の圧力にさらされています。
膿の開発は、圧力・せん断、期間、皮膚の水分と温度、傷害長寿、一般的な皮膚の衛生状態の大きさを含むいくつかのローカル要因の影響を受けます。一般的な物理的な条件、骨と筋組織形態と強度4、患者の年齢、血液対策、性別、婚姻状況、教育なども社会経済的要因などの役割を果たす全身的要因もあります。所得4,5。
予防と膿の治療科学における重要な課題のままです。SCI 患者は、おそらく弱い瘢痕組織と保護の感覚1の不足のための 60-85% の再出現率を症例の 30 〜 40% で膿を開発します。したがって、膿は SCI の患者の再入院につながるし、全体的なヘルスケア ・ システム5,6,7,8,9 (80% 以上 SCI 対のみ) 重要な財務負担をもたらす,10。
我々 の知る限りになかった研究の適切な動物モデルの欠乏のための PU の治癒過程における科学の影響を調査する実験制御の設定。ここでは、皮膚の PU の再現性と臨床的に関連するマウスのモデルを説明します。PU 発症とその後の癒しのダイナミクスを研究するほか、PU を防止または癒しの科学のコンテキストで PU を改善する潜在的な治療アプローチをテストする、このモデルを使用することができます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:840px;" width="840">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Magnets</td>
			<td style="width:303px;">Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO</td>
			<td style="width:116px;">CD14C</td>
			<td style="width:187px;">3800 G Magnetic force</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Mice standard diet</td>
			<td>PMI Nutrition International, Brentwood, MO</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td>Standard Food Pellet</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Isoflurane</td>
			<td>HENRY SCHEIN Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;">SKU 029405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">ImageJ</td>
			<td style="width:303px;">NIH, Bethesda, MD</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td>Image Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">BETADINE Surgical Scrub</td>
			<td>HENRY SCHEIN Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ophthalmic Ointment&#160;</td>
			<td>HENRY SCHEIN Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;">SKU 008897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NAIR-Hair Remover Lotion</td>
			<td style="width:303px;">Church &#38; Dwight Co., Inc. Princeton, NJ</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ELOXIJECT (meloxicam) Injection</td>
			<td>HENRY SCHEIN Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;">SKU 049755</td>
			<td>5 mg/mL, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cefazolin Sodium</td>
			<td>HENRY SCHEIN Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;">SKU 054846</td>
			<td>1 g, 10 mL bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Buprenorphine-SR&#160;</td>
			<td style="width:303px;">ZooPharm, Windsor, CO</td>
			<td style="width:116px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.9% Sodium Chloride Injection USP</td>
			<td style="width:303px;">BRAUN, Irvine, CA</td>
			<td style="width:116px;">S8004-5384</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Neutral Buffered Formalin&#160;</td>
			<td style="width:303px;">VWR, Radnor, PA</td>
			<td>16004-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">BALB/C Male Mouse</td>
			<td style="width:303px;">Charles River Lab., Wilmington, MA</td>
			<td style="width:116px;">28</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Sterile Cotton Tipped Applicator</td>
			<td style="width:303px;">Puritan, Guilford, ME</td>
			<td style="width:116px;">SKU#: 25-806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:235px;">Michel Suture Clips</td>
			<td style="width:303px;">Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA</td>
			<td style="width:116px;">12040-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Surgical Suture, U.S.P.</td>
			<td>Henry Schein Animal Health&#160;</td>
			<td style="width:116px;">101-2636</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse model of pressure ulcers after spinal cord injury

褥瘡 (膿) は一般的な外傷性脊髄損傷 (SCI) の合併症を衰弱させる、骨の出っぱりの周りの軟部組織に発生する傾向があります。しかし、ほとんど知られている SCI の動物モデルの制御の実験設定のコンテキストで創傷治癒への影響について。本研究では完全な科学のコンテキストで膿の単純な非侵襲的、再現性と臨床的に関連するマウス モデルに示します。成人男性マウス (Balb/c, 10 週齢) は、剃毛され、depilated。後脱毛 (24 h)、マウスは完全脊髄損傷 (T9 T10 椎) 続いて椎弓切除術を受けた。直後、マウスの背中の皮膚のひだは解除され次の日間、PU に開発した虚血領域を作成、次の 12 時間行われて 2 つの磁気ディスクの間に挟まれた。負傷者の領域は、3 日目後磁石アプリケーションによって組織の浮腫と表皮の消失を実証しました。膿は自発的に開発し、癒されます。癒し、ただし、SCI マウスより遅い比較傷が逆に科学のレベルの下に作成されたときは、非-SCI マウスを制御するため癒しの違い間みられなかった SCI とコントロールの非-SCI マウス理レベル上傷が作成されたときこのモデルは、皮膚 PU 開発と SCI もこのような傷を癒す治療法をテスト後の治癒過程のダイナミクスを検討する可能性がある便利なツールです。

このプロトコルは、の完全な科学は簡単に設定で PU を作成します (図 1に示されている) として、すべてマウスに完全な SCI 容認磁石非常によく (図 1 c、1 d、1 階、1 hの 12 h の元の位置に残って).すべてのマウスは、正常の組織 (図 1e, 1 g, 1i) の橋で区切られた 2 つの円形傷を開発しました。負傷の初期応答はマウ...

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Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

褥瘡脊髄損傷後のマウス ・ モデル

ここでは、脊髄損傷 (SCI) のマウスモデルで臨床的に関連する皮膚褥瘡 (膿) を誘導する単純な方法を説明します。このモデルは、SCI の患者の治癒の膿の異なる治療の画面に前臨床試験で使用できます。

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

この研究の全体的な目標は、動物モデルにおける圧迫潰瘍の発達と治癒のダイナミクスに及ぼす脊髄損傷の影響を調べることである。この技術の主な利点は、動物の動きを損なわない、そして非常に再現可能である。このモデルは創傷治癒の力学を研究し、SCI患者のための様々な治療戦略をテストするためのプラットホームを提供する。手順を開始する前に、テールピンチへの応答の欠如によって適切な麻酔を確認してください。電気クリッパーでドーサムの上に髪を剃ります。脱毛クリームを塗り、残りの髪を取り除くために3分間放置します。3分後、濡れたスクラブで脱毛クリームを取り除き、同様にドーサムを洗います。そして、彼らのケージに動物を返します。翌日、動物を麻酔し、眼科軟膏を角膜に塗布して、手術中の乾燥から目を保護する。次いで、ベタジンスクラブと70%エタノールで動物の皮膚をそれぞれ3回スクラブする。切開前に、25ゲージ針の注射器を使用して、鎮痛として切開部位の周りに0.125%ブピバカインの100マイクロリットルを注入する。T13 に対応するフローティング リブからカウントバックして、T8 から T12 を識別します。1〜1.5センチメートルの切開を作成した後、正中線に沿って、背部に、T8〜T12椎骨のレベルで、皮下脂肪組織をクリアして、脊髄筋肉にアクセスする。そして、両側の棘プロセスと層状を露出させるためにゆっくりとそれらを解剖します。過度の出血や脊髄への損傷を避けるために、この手順を非常に慎重に行うことは非常に重要です。T9~T10椎骨のラミニング術を行い、マイクロ解剖鉗子を用いて脊髄層を軽く剥がして脊髄を露出させる。鉗子を使用して、脊柱を固定し、T8で持ち上げて、脊髄湾曲を誇張します。その後、細かいはさみを使用して、T9とT10椎骨の間の脊髄を椎骨管の床まで切り離し、完全な切り抜きを確保します。外科顕微鏡下で完全な切除を観察した後、手術部位閉鎖前に脊髄にさらなる保護を提供するために、ラミネクトミー部位上に皮下脂肪の一部を適用する。最後に、傷を閉じ、麻痺筋と表面筋膜を縫合します。次に、縫合クリップを使用してスキンを閉じます。SCI手術の直後にベタジンと70%アルコールで動物の背中をスクラブします。脊髄損傷部位の下の圧力潰瘍の場合、25ゲージ針を使用して、仙椎の近くの背部皮膚の楕円に0.125%bupivacaine溶液の10マイクロリットルを注入し、ポイント0.5〜1センチメートル離れた。マウスの背面に皮膚をそっと持ち上げ、2枚の磁気ディスクの間に挟みます。マグネットアプリケーションの直後に、完全な意識が取り戻されるまで加熱パッドに置かれた単一のケージに動物を返します。12時間の磁石塗布後、イオブルランで動物を軽く麻酔し、磁石を取り除きます。創傷部位の写真を撮って、昼ゼロタイムポイントでの圧力潰瘍の初期出現を記録する。乾燥や汚れがないように、透明なドレッシングフィルムで傷口を覆います。手順に従って動物を一戸舎。手術直後に、動物に0.9%の生理食塩水を1ミリリットル注入し、鎮痛のためにブプレノルフィンSRを注入する。1日2回、膀胱の手動避難を行います。脊髄損傷手術の7日後に外科用クリップを取り外します。脊髄損傷および皮膚圧迫潰瘍誘導後の所望の時点で、安楽死させたマウスから負傷した皮膚サンプルを収集する。24時間10%ホルマリンで修正。24時間後に70%エタノールに移し、切り離すまで摂氏4度で保存します。この画像は、ポストマグネット除去の3日目までに対照動物の表皮の消失を示しています。矢印は、上皮裏地が薄くなる位置にある表皮創傷縁を示す。対照動物では、表皮は7日目までに再び現れる。SCIのレベルを下回って創傷を作成した場合、SCIマウスでは、有意に遅い移動が見られる。ここでは、この図は、コントロールマウスと比較して、SCIマウスにおける創傷治癒および閉鎖の遅さを示している。赤い矢印によって示される増殖細胞のマーカーであるKi67の免疫染色は、SCI群における増殖が少ないことを明らかにした。赤い矢印によって示される血管のマーカーであるCD31の染色は、SCI群の血管密度の低下を明らかにした。最後に、α平滑筋アクチンの免疫染色は、SCIマウスからの皮膚創傷におけるこのタンパク質の低レベルを明らかにした。この手順を試みている間、磁石を適切に配置して、無傷の皮膚によって分離された2つの円形の創傷を発症することを忘れないでください。これにより、創傷の発達と治癒の変動が減少します。脊髄損傷患者の皮膚圧迫潰瘍は、米国の医療システムに多大なコストを与える。この動物モデルは脊髄損傷患者の圧力潰瘍の治癒を助けるためにさまざまな治療戦略をテストするためのプラットホームを提供する。

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Impulsive Pressurization of Neuronal Cells for Traumatic Brain Injury Study

外傷性脳損傷の研究のための神経細胞のインパルス加

A novel impulsive cell pressurization experiment has been developed using a Kolsky bar device to investigate blast-induced traumatic brain injury (TBI). ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

のための周期的圧力のバイオリアクターの設計生体外で</em大動脈心臓弁の>研究

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

後期胚と新生児マウスの計測左心室圧

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Constant Pressure-controlled Extrusion Method for the Preparation of Nano-sized Lipid Vesicles

ナノサイズの脂質小胞の調製のための一定の圧力制御押出法

Liposomes are artificially prepared vesicles consisting of natural and synthetic phospholipids that are widely used as a cell membrane mimicking platform ...

Generation and Grafting of Tissue-engineered Vessels in a Mouse Model

マウスモデルにおける組織工学血管の生成とグラフト

The construction of vascular conduits is a fundamental strategy for surgical repair of damaged and injured vessels resulting from cardiovascular diseases. ...

Procedure for Decellularization of Rat Livers in an Oscillating-pressure Perfusion Device

振動圧力潅流装置内のラット肝臓の脱細胞化のための手順

Decellularization and recellularization of parenchymal organs may enable the generation of functional organs in vitro, and several protocols for rodent ...

Training Persons with Spinal Cord Injury to Ambulate Using a Powered Exoskeleton

パワードスーツを使用して歩行する脊髄損傷者のトレーニング

Powered exoskeletons have become available for overground ambulation in persons with paralyses due to spinal cord injury (SCI) who have intact upper ...

Ammonia Synthesis at Low Pressure

低圧でのアンモニア合成

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Antimicrobial Peptides Produced by Selective Pressure Incorporation of Non-canonical Amino Acids

非正規のアミノ酸類の選択的な圧力の取り込みによって生成される抗菌ペプチド

Nature has a variety of possibilities to create new protein functions by modifying the sequence of the individual amino acid building blocks. However, all ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

シードとマウス モデルにおける合成組織設計気管移植片の移植

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...

褥瘡脊髄損傷後のマウス ・ モデル

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