Name: employing pressurized hot water extraction (phwe) to explore natural products chemistry in the undergraduate laboratory
Uploaded: 2018-11-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Employing Pressurized Hot Water Extraction PHWE to Explore Natural Products Chemistry in the Undergraduate Laboratory at JoVE.com

Yazarlar Doğal Bilimler - kimya, Tazmanya Üniversitesi ve kimya okul, University of Sydney mali destek için kabul. B.J.D. ve J.J. Avustralya hükümeti araştırma eğitim programı bursu için teşekkür ederiz.

Not: Tüm yordamları bir duman mahallede gerçekleştirilmesini tavsiye edilir. Öğrenciler her zaman uygun kişisel koruyucu ekipman laboratuvarda giymek zorunda ve her reaktif ile ilişkili güvenlik bilgi formları (SDS) kullanmadan önce istişare gerekir.
1. PHWE karanfil: yalıtım eugenol ve acetyleugenol
<ol><li>Eugenol ve acetyleugenol çekme--dan karanfil
	<ol>
<li>Kaba zemin karanfil (12,5 g) 250 mL kabı içinde yerleştirin.</li>
		<li>Kum (12...

<ol>
	<li>Newman, D. J., Cragg, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+Products+as+Sources+of+New+Drugs+from+1981+to+2014.">Natural Products as Sources of New Drugs from 1981 to 2014.</a> Journal of Natural Products. 79, 629-661 (2016).</li><li>Barnes, E. C., Kumar, R., Davis, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+isolated+natural+products+as+scaffolds+for+the+generation+of+chemically+diverse+screening+libraries+for+drug+discovery.">The use of isolated natural products as scaffolds for the generation of chemically diverse screening libraries for drug discovery.</a> Natural Product Reports. 33, 372-381 (2016).</li><li>DeCorte, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underexplored+Opportunities+for+Natural+Products+in+Drug+Discovery.">Underexplored Opportunities for Natural Products in Drug Discovery.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 59, 9295-9304 (2016).</li><li>Bucar, F., Wube, A., Schmid, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+product+isolation+-+how+to+get+from+biological+material+to+pure+compounds.">Natural product isolation - how to get from biological material to pure compounds.</a> Natural Product Reports. 30, 525-545 (2013).</li><li>Sticher, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+product+isolation.">Natural product isolation.</a> Natural Product Reports. 25, 517-554 (2008).</li><li>Just, J., Deans, B. J., Olivier, W. J., Paull, B., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+Method+for+the+Rapid+Extraction+of+Natural+Products:+Efficient+Isolation+of+Shikimic+Acid+from+Star+Anise.">New Method for the Rapid Extraction of Natural Products: Efficient Isolation of Shikimic Acid from Star Anise.</a> Organic Letters. 17, 2428-2430 (2015).</li><li>Caprioli, G., Cortese, M., Cristalli, G., Maggi, F., Odello, L., Ricciutelli, M., Sagratini, G., Sirocchi, V., Tomassoni, G., Vittori, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+espresso+machine+parameters+through+the+analysis+of+coffee+odorants+by+HS-SPME-GC/MS.">Optimization of espresso machine parameters through the analysis of coffee odorants by HS-SPME-GC/MS.</a> Food Chemistry. 135, 1127-1133 (2012).</li><li>Just, J., Jordan, T. B., Paull, B., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+isolation+of+polygodial+from+Tasmannia+lanceolata:+a+viable+scaffold+for+synthesis.">Practical isolation of polygodial from Tasmannia lanceolata: a viable scaffold for synthesis.</a> Organic Biomolecular Chemistry. 13, 11200-11207 (2015).</li><li>Just, J., Bunton, G. L., Deans, B. J., Murray, N. L., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+Eugenol+from+Cloves+Using+an+Unmodified+Household+Espresso+Machine:+An+Alternative+to+Traditional+Steam+Distillation.">Extraction of Eugenol from Cloves Using an Unmodified Household Espresso Machine: An Alternative to Traditional Steam Distillation.</a> Journal of Chemical Education. 93, 213-216 (2016).</li><li>Deans, B. J., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+Isolation+of+Asperuloside+from+Coprosma+quadrifida+via+Rapid+Pressurised+Hot+Water+Extraction.">Practical Isolation of Asperuloside from Coprosma quadrifida via Rapid Pressurised Hot Water Extraction.</a> Australian Journal of Chemistry. 69, 1219-1222 (2016).</li><li>Deans, B. J., Just, J., Chetri, J., Burt, L. K., Smith, J. N., Kilah, N. L., de Salas, M., Gueven, N., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressurized+Hot+Water+Extraction+as+a+Viable+Bioprospecting+Tool:+Isolation+of+Coumarin+Natural+Products+from+Previously+Unexamined+Correa+(Rutaceae).">Pressurized Hot Water Extraction as a Viable Bioprospecting Tool: Isolation of Coumarin Natural Products from Previously Unexamined Correa (Rutaceae).</a> ChemistrySelect. 2, 2439-2443 (2017).</li><li>Deans, B. J., Olivier, W. J., Girbino, D., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+carboxylic+acid-containing+diterpenoids+from+Dodonaea+viscosa+via+pressurised+hot+water+extraction.">Extraction of carboxylic acid-containing diterpenoids from Dodonaea viscosa via pressurised hot water extraction.</a> Fitoterapia. 126, 65-68 (2018).</li><li>Deans, B. J., Kilah, N. L., Jordan, G. J., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arbutin+Derivatives+Isolated+from+Ancient+Proteaceae:+Potential+Phytochemical+Markers+Present+in+Bellendena,+Cenarrhenes+and+Persoonia+Genera.">Arbutin Derivatives Isolated from Ancient Proteaceae: Potential Phytochemical Markers Present in Bellendena, Cenarrhenes and Persoonia Genera.</a> Journal of Natural Products. 81, 1241-1251 (2018).</li><li>Deans, B. J., Tedone, L., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phytochemical+profile+of+the+rare,+ancient+clone+Lomatia+tasmanica+and+comparison+to+other+endemic+Tasmanian+species+L.+tinctoria+and+L.+polymorpha.">Phytochemical profile of the rare, ancient clone Lomatia tasmanica and comparison to other endemic Tasmanian species L. tinctoria and L. polymorpha.</a> Phytochemistry. 153, 74-78 (2018).</li><li>Deans, B. J., Skierka, B., Karagiannakis, B. W., Vuong, D., Lacey, E., Smith, J. A., Bissember, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Siliquapyranone:+a+Tannic+Acid+Tetrahydropyran-2-one+Isolated+from+the+Leaves+of+Carob+(Ceratonia+siliqua)+by+Pressurised+Hot+Water+Extraction.">Siliquapyranone: a Tannic Acid Tetrahydropyran-2-one Isolated from the Leaves of Carob (Ceratonia siliqua) by Pressurised Hot Water Extraction.</a> Australian Journal of Chemistry. 71, (2018).</li><li>Olivier, W. J., Kilah, N. L., Horne, J., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ent-Labdane+Diterpenoids+from+Dodonaea+viscosa.">ent-Labdane Diterpenoids from Dodonaea viscosa.</a> Journal of Natural Products. 79, 3117-3126 (2016).</li><li>Rihak, K. J., Bissember, A. C., Smith, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polygodial:+A+viable+natural+product+scaffold+for+the+rapid+synthesis+of+novel+polycyclic+pyrrole+and+pyrrolidine+derivatives.">Polygodial: A viable natural product scaffold for the rapid synthesis of novel polycyclic pyrrole and pyrrolidine derivatives.</a> Tetrahedron. 74, 1167-1174 (2018).</li><li>Ntamila, M. S., Hassanali, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+Oil+of+Clove+and+Separation+of+Eugenol+and+Acetyl+Eugenol.">Isolation of Oil of Clove and Separation of Eugenol and Acetyl Eugenol.</a> Journal of Chemical Education. 53, 263 (1976).</li><li>Still, W. C., Kahn, M., Mitra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+chromatographic+technique+for+preparative+separations+with+moderate+resolution.">Rapid chromatographic technique for preparative separations with moderate resolution.</a> Journal of Organic Chemistry. , 2923-2925 (1978).</li></ol>

Eugenol karanfil gelen buhar damıtma tarafından izole klasik yordamı Sydney Üniversitesi ara kimya laboratuvar programı'nın parçası onlarca yıl olmuştur ama PHWE metodoloji (Şekil 1) 2016 yılında istihdam için modernize. 9 , 18 bu sayı bir yarar sağladı. İlk olarak, ev espresso makineleri laboratuvar ortamında hemen kullanan hayran ve geleneksel bir bilimsel çalışma etkisi için klasik olmayan, alternatif bir y?...

Yalıtım ve doğal ürünler tanımlaması bilimsel topluluk ve toplum için temel öneme sahip daha genel olarak vardır. 1 Bioprospecting, arama, doğadaki değerli organik moleküller için vazgeçilmez bir süreç keşif potansiyel terapötik ajanlar ve yeni ilaç yol olarak kalır. 1981-2014 ~ %75-in tüm onaylı küçük molekül ilaç ilaçlar doğal ürünler, doğal ürün kaynaklı veya doğal ürün esinlenen, tahmin edilmektedir. 1 Ayrıca, doğal ürünler çok büyük yapısal ve kimyasal çeşitlilik sahip. Bu nedenle, onlar da doğrudan organik sentez veya kiral ligandlar ve katalizörler geliştirilmesi kullanılabilir değerli kimyasal iskele temsil eder. 2 , 3
Geleneksel olarak, nispeten zaman yoğun yordamlar maserasyon, Soxhlet ayıklama ve buhar damıtma gibi bitkilerden sekonder metabolitler yalıtım odaklı araştırma dayanak olmuştur. 4 hızlandırılmış solvent ekstraksiyon, dahil olmak üzere daha modern ayıklama teknikleri ayıklama kez azaltmak ve daha yeşil protokollerin oluşturulması üzerinde odaklanmıştır. 4 , 5 2015 yılında, orijinal bir basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) yöntemi bildirildi. 6 shikimic asit hızlı ve özellikle verimli çekme--dan Yıldız anason kolaylaştırmak için bir değiştirilmemiş ev espresso makinesi bu tekniği istihdam. Espresso Makineleri özel olarak tasarlanmış ve organik moleküllerin uygun şekilde çekilmiş kahve çekirdekleri çıkarmak için tasarlanmış. Bu, bu aletleri ısı su kadar 96 ° c sıcaklık ve basınç genellikle 9 çubuğunun elde etmek için. 7 bu düşünce bu espresso makineleri verimli bir şekilde doğal ürünler bitki materyali aralığından ayıklamak için kullanılması gereken belki de şaşırtıcı değildir.
Karasal bitki türleri çeşitli içeren sonraki çalışmalar verimli bir şekilde doğal ürünler nispeten geniş polarite aralığında ayıklamak için bu PHWE teknik kapasitesini göstermiştir. 6 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 Ayrıca, biraz duyarlı fonksiyonel gruplar içeren bileşikler aldehitler, epoksitler, glikosidler ve epimerizable stereogenic gibi potansiyel olarak merkezleri tarafından ayıklama işlemi genellikle etkilenmemiş idi. Bu teknik daha geleneksel yöntemleri göre tamamlayıcı niteliği de göstermiştir. 12 , 16 bu PHWE yöntemi de çok gram miktarları roman doğal ürün türev hazırlamak için kullanılan doğal ürünlerin ve karmaşık molekül sentezi daha genel olarak izole etmek için istihdam edilmiştir. 8 , 11 , 17
Bu yeni PHWE yöntemi lisans laboratuvarda dahil edilebilir bir yararlı öğretim aracı olarak hizmet verebilir olduğunu tespit edilmiştir. Bu öncelikle bu tekniğin kez lisans laboratuvar deneyleri ile ilişkili zaman kısıtlamaları ile uyumsuz geleneksel çıkarma yöntemleri göre hızlı doğa türetilmiştir. Sonuç olarak, bu teknik eugenol çekme--dan karanfil buhar-damıtma Tazmanya Üniversitesi, istihdam odaklı geleneksel lisans kimya laboratuvar deneyi üstlenilmekle. 9 , 18 o zamandan beri bu deney varyasyonları diğer üniversiteler ve şimdi özellikleri Sydney Üniversitesi lisans kimya laboratuvar programında karanfil PHWE üzerinde odaklanan değiştirilmiş bir deney tarafından benimsenmiştir (Infra vide ).
Pratiklik ve eğitim amaçlı bu yeni PHWE yaklaşım istihdam fizibilite göstermek için iki protokol bu çalışmanın bir parçası sunulur. Bu raporun ilk bölümünde bir deney PHWE eugenol ve Sydney Üniversitesi (Şekil 1) ikinci sınıf lisans laboratuvar programı'nın parçası olan acetyleugenol dan karanfil üzerinde vurgular. Bu deney öğrenciler için doğal ürünler Kimya temel pratik becerilerini geliştirirken tanıtmak için hizmet vermektedir. Bir deney üzerinde PHWE Correa reflexa Tazmanya Üniversitesi (Şekil 2) adlı üç yıllık lisans laboratuvar programı'nın parçası olan Avustralya endemik bitki türlerinin özellikleri ikinci bölüm. Bu deney doğal ürünler bioprospecting taklit ve çekirdek laboratuvar teknikleri güçlendirmek üzere tasarlanmıştır. 11

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1069px;" width="1070">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">espresso machines</td>
			<td style="width:167px;">Breville/Sunbeam</td>
			<td style="width:520px;">Breville espresso machine model 800ES / Sunbeam EM3820 Caf&#233; Espresso II</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">rotary evporators</td>
			<td style="width:167px;">Buchi and Heidolph</td>
			<td style="width:520px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">cloves (plant material)</td>
			<td>Dijon Food Pty Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Cloves must be ground in a food processor for students.</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Correa reflexa (plant material)</td>
			<td>sample obtained in Tasmania</td>
			<td>Sample collected from mature shrubs in the Thomas Crawford Reserve at the University of Tasmania</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">sand</td>
			<td style="width:167px;">Ajax</td>
			<td style="width:520px;">1199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">ethanol</td>
			<td>Redoc Chemicals</td>
			<td>E95 F3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">hexanes</td>
			<td>Ajax</td>
			<td>251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">magnesium sulfate</td>
			<td>Ajax</td>
			<td>1548</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">diethyl ether</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1009215000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">silica on aluminium TLC plates</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1055540001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">eugenol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1069620100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">eugenyl acetate</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>W246905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">acetone</td>
			<td>Redox Chemicals</td>
			<td>Aceton13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">cyclohexane</td>
			<td>ChemSupply</td>
			<td>CA019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">silica gel 60</td>
			<td>Trajan</td>
			<td>5134312</td>
			<td style="width:167px;">40 - 63um (230-400mesh)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Congo red paper</td>
			<td>ChemSupply</td>
			<td>IS070-100S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">32% hydrochloric acid</td>
			<td>Ajax</td>
			<td>256</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

employing pressurized hot water extraction (phwe) to explore natural products chemistry in the undergraduate laboratory

Doğal ürünler araştırma kolaylaştırmak için bir değiştirilmemiş ev espresso makinesi kullanan bir son zamanlarda geliştirilen basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) yöntemini de uygulamaları bir etkili öğretim aracı olarak buldu. Özellikle, bu teknik yönleri doğal ürünler Kimya Laboratuvarı ile ikinci ve üçüncü sınıf lisans öğrencileri takdim etmek için kullanmıştı. Bu raporda, iki deney sunulmaktadır: eugenol ve karanfil ve seselin ve (+) PHWE acetyleugenol PHWE-epoxysuberosin--dan Avustralya endemik bitki türleri Correa reflexa. Bu deneylerde PHWE istihdam ederek eugenol ve acetyleugenol, zenginleştirilmiş ham karanfil özü, 4-%9 w/w karanfil üzerinden ikinci yıl lisans ve seselin ve (+) tarafından elde edildi-epoxysuberosin ilâ 1.1 g/g ve % 0,9 w/w verimleri izole C. reflexa üçüncü sınıf öğrencileri tarafından. Eski egzersiz ikinci etkinliği destekli-istemi öğretim yöntemleri benzetimini yapmak için bir çaba özellikli iken çıkarma ve ayırma teknikleri, giriş sağlayan geleneksel buhar damıtma deneyi için bir yedek olarak geliştirilmiştir doğal ürünler bioprospecting. Bu öncelikle bu PHWE teknik kez lisans laboratuvar deneyleri ile ilişkili zaman kısıtlamaları ile uyumsuz geleneksel çıkarma yöntemleri göre hızlı doğa türetilmiştir. Bu hızlı ve pratik PHWE Yöntem verimli bir şekilde bitki türleri bir dizi organik moleküllerin çeşitli sınıflar yalıtmak için kullanılabilir. Bu teknik daha geleneksel yöntemleri göre tamamlayıcı niteliği de daha önce kanıtlanmıştır.

Karanfil PHWE. Sıvı-sıvı ekstraksiyon adımı gerçekleştirmek çalışırken, öğrenciler (tuzlu su ilavesi genellikle etkili değildi) emülsiyonlar kez karşılaştı. Bu aşamada öğrencilerin eugenol ve acetyleugenol ayrılması eluent kompozisyon etkilerini araştırdı iken ayıran hunide durmak karışım izin verin TLC tarafından emredildi. Bu o hekzan ya heptane ya da sıvı-sıvı ekstraksiyon adımda diklorometan ile yedek olabilir unutulmamalıdır. ...

Watch this Scientific Journal Video about Employing Pressurized Hot Water Extraction PHWE to Explore Natural Products Chemistry in the Undergraduate Laboratory at JoVE.com

Employing Pressurized Hot Water Extraction PHWE to Explore Natural Products Chemistry in the Undergraduate Laboratory

Burada, biz doğal ürünler Kimya Laboratuvarı lisans tanıtmak bir değiştirilmemiş ev espresso makinesi kullanan bir basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) yöntemini kullanır. İki deney sunulmaktadır: PHWE eugenol ve karanfil ve PHWE seselin ve (+) acetyleugenol-epoxysuberosin--dan Avustralya bitki Correa reflexa.

Basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) doğal ürünler Kimya Lisans Laboratuvarı keşfetmek için istihdam

A recently developed pressurized hot water extraction (PHWE) method which utilizes an unmodified household espresso machine to facilitate natural products ...

Bu teknik izolasyon kimyasında doğal ürün çıkarma için doğal olarak pratik ve verimli bir strateji temsil eder. Ve biz yararlı ve ücretsiz çıkarma aracı olduğunu düşünüyorum. Bu hızlı bir akış süreci olduğundan, ekstresi sadece kısa bir süre için ısıtılır ve genellikle arınma karmaşık inatçı bitki pigmentleri çıkarma en aza indirilir.Bu tekniğin, doğada değerli moleküllerin aranmasını kolaylaştırarak tıbbi kimyanın yanı sıra kemoterapi taksonomik örneklemesini de mümkün kıldığı düşünülerek, tıbbi kimyaya uygun olduğunu düşünüyoruz. Çıkarma adımlarında örnek hazırlama nın görsel olarak en etkili şekilde açıklanması önemli. Bu aynı zamanda çıkarma nın basitliğini ve lisans laboratuarı ortamında uygun kullanımını da pekiştirir.250 mililitrelik bir kabın içine 12,5 gram kaba öğütülmüş karanfil yerleştirin. Kum 12,5 gram ekleyin ve iyice karıştırın. Sonra, bir portafilter toplamak ve tüm karanfil ve kum karışımı ile sepet yük.Sıvının akmasını engelleyecek şekilde çok fazla sıkıştırmamak için numuneyi hafifçe sıkıştırmak için bir kurcalama kullanın. Portafilter'i espresso makinesine yükleyin ve altına 250 mililitrelik açık bir beher yerleştirin. Su tankına suda yüzde 30 etanol içeren bir çözelti ekleyin.Espresso makinesini kullanarak, özü 100 mililitre toplamak. Portafilter damlama bitirmek ve daha sonra espresso makinesinden çıkarın. Portafilter karanfil öğütür kaldırmak ve katı bir atık kabına atmak için bir spatula kullanın.Lavaboda musluk suyu ile kalan katıları durulayın. Karanfil özlerini içeren kabı buz banyosuna aktarın ve sıcaklık en az 30 dereceye kadar soğumaya bırakın. Bir duman başlık içinde, 250 mililitre ayırıcı huni içine soğutulmuş özü dökün.Heksan 30 mililitre ekleyin ve hafifçe sallayarak karıştırın. Ayırıcı huniyi, retort standına takılan bir halka kelepçesine yerleştirin ve sulu ve organik katmanların ayrılmasını bekleyin. Katmanların ayrılması 10 dakika kadar sürebilir, bu nedenle beklerken TLC'lerin solvent optimizasyonunu yapmanızı öneririz.250 mililitrelik kabın içine sulu tabakayı geri toplayın. Ürünü içeren organik katmanı temiz 250 mililitrelik konik bir şişeye aktarın. Sonra ayırıcı huni içine sulu yüz paketi dökün.Sulu tabakayı heksane ile iki kez daha ayıklayın. Her seferinde 30 mililitre heksane kullanıyor. Her ekstraksiyon sonra aynı 250 mililitre konik şişe içine organik katmanları birleştirin.Üçüncü sıvı ekstraksiyon sonra ayırıcı huni içine kombine organik ekstresi dökün. 100 mililitre su ekleyerek ve şiddetle sallayarak organik özü yıkayın. Temiz bir 250 mililitre konik şişe içine organik tabaka toplamak.Sonra magnezyum sülfat ve girdap ekleyerek kurulayın. Kurutulmuş karışımı, cam bir hunide bulunan yivli filtre kağıdından yuvarlak alt şişeye süzün. Bir döner evaporatör kullanarak, toplanan filtrat çözücü buharlaşır.Sonra ortaya çıkan yağ içeren şişe tartın. Ekstresi içeren ham eugenol içeren yuvarlak alt şişeye 10 mililitre heksane ekleyin. Elde edilen çözeltiyi 250 mililitrelik ayırıcı huniye dökün.Heksane 10 mililitre ile yuvarlak alt şişe durulayın ve ayırıcı huni bu ekleyin. Sıvı sıvı ekstraksiyon yoluyla üç molar sulu sodyum hidroksit ile iki kez heksan çözeltisi ayıklayın. Her ekstraksiyon için 25 mililitre sodyum hidroksit kullanmak.Her çıkarma sulu katmanları toplamak ve 250 mililitrekonik şişe bunları birleştirmek. 50 mililitrelik konik bir şişede organik tabaka toplamak. Sonra şişeye magnezyum sülfat ekleyerek ve girdap tarafından kurulayın.Çözeltiyi, cam bir hunide bulunan yivli filtre kağıdından önceden tartılan 100 mililitrelik yuvarlak alt şişeye süzün. Katı kalıntısını atın ve çözücüyu çıkarmak için döner buharlaştırıcı kullanın. Bu şimdi bir üst tava dengesi üzerinde ortaya çıkan yağ içeren yuvarlak alt şişe tartmak sonra.Sonraki yer bir buz suyu banyosu içine kombine sulu katmanları içeren konik şişe. Beyaz bir emülsiyon oluşana kadar yavaş yavaş hidroklorik asit 10 molar çözeltisi eklerken şişe girdap. Asitliğini test etmek için bu çözeltinin bir damlasını Kongo kırmızı kağıdına aktarmak için bir pipet kullanın.Kağıt maviye dönmeli. Bu transferden sonra sütlü sulu emülsiyon 250 mililitre ayıran şişeye. Emülsiyon oda sıcaklığında olduğundan emin olun ve daha sonra ekstraksiyon başına 30 mililitre heksane kullanarak iki kez sıvı sıvı ekstraksiyon gerçekleştirmek.Temiz bir 100 mililitre konik şişe içine iki heksane özleri birleştirin. Çözeltiyi kurutmak için magnezyum sülfat ekleyin. Çözeltiyi, cam bir hunide bulunan yivli filtre kağıdından önceden tartılmış 100 mililitrelik yuvarlak alt şişeye süzün.Sonra çözücü kaldırmak için bir döner evaporatör kullanın. Bu şimdi bir üst tava dengesi üzerinde ortaya çıkan yağ içeren yuvarlak alt şişe tartmak sonra. Bir elektrikli baharat öğütücü kullanarak 20 ila 30 saniye correa reflexa yaprakları 10 gram öğütmek.Zemin tesisi malzemesini 250 mililitrelik bir kabına aktarın. Kaba kum yaklaşık iki gram ekleyin. Kum ve bitki malzemeyi karıştırın ve sonra bir portafilter sepetine aktarın.Çok fazla sıkıştırmamak için numuneyi hafifçe sıkıştırmak için bir kurcalamak kullanın. Espresso makine tankına suya yaklaşık 300 mililitre yüzde 35 etanol ekleyin. Portafilter'i espresso makinesine yükleyin ve altına 250 mililitrelik bir kabı yerleştirin.Sonra ekstresi yaklaşık 100 mililitre toplamak. Yaklaşık bir dakika bekleyin sonra ekstre başka bir 100 mililitre toplamak. Soğuması için bu karışımı bir buz banyosuna aktarın.Etanol buharlaştırmak için 40 santigrat derece bir su banyosu sıcaklığı ile bir döner buharlaştırıcı kullanın. Sonraki bir seperatory huni için sulu özü aktarın. Ekstraksiyon başına 50 mililitre etil asetat kullanarak etil asetat ile çözeltiyi iki kez ayıklayın.Organik özleri birleştirin. Magnezyum sülfat ekleyin ve çözeltiyi kurutmak için şişe girdap. Sonra çözelti filtre ve ham özü elde etmek için bir döner buharlaştırıcı kullanmak için ortalanmış bir cam huni kullanın.Bu işlemde öğrencilere aseton ve sikloheksan TLC çözücü oranı ayrılır ve saf eugenol ve asetil-ögenol standartları ile sağlanır. TLC analizi yapılır ve solvent bileşiminin tutma faktörü üzerindeki etkileri göz önünde bulundurulmaktadır. Optimum çözücü bileşimlerinin tipik olarak yüzde beş ila 20 aseton sikloheksane arasında değiştiği görülmektedir.0,1 ile 0,2 arasında delta tutma faktörü ile. İki büyük organik molekülün farklı asit bazlı özellikleri daha sonra sıvı sıvı ekstraksiyon uyarak onları ayırmak için yararlanılır. Tipik olarak eugenol ham ekstresin yüzde 45-65 oranında bir verimde izole edilirken, asetil-ögenol yüzde 5 ila 10 oranında izole edildi.Öğrenciler daha sonra, sıvı sıvı çıkarmalarının başarısını, özlerini TLC ile saf referans örnekleriyle karşılaştırarak belirlemek için optimize edilmiş eluant'ı kullanmaktadırlar. İleri düzey öğrenciler daha sonra izole edilmiş ham petrollerinin yarısını flaş sütun kromatografisine tabi tmaktadırlar. Eugenol'ün asetil-eugenol'den tamamen ayrılması yakın tutma faktörleri nedeniyle nadiren elde edilirken, saf eugenol içeren birkaç fraksiyon genellikle toplanır.Bu işlemden sonra, izole bileşikler ile karakterize nükleer manyetik rezonans spektroskopisi ve gaz kromatografisi kütle spektrometresi gibi yöntemler yapılabilir. Unutmayın, sıcak sıvılar, nispeten yüksek basınçlar ve aşındırıcı sıvılar ile çalışmak tehlikeli olabilir, bu nedenle kişisel koruyucu ekipman takma gibi önlemler alınmalıdır.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Employing Pressurized Hot Water Extraction (PHWE) to Explore Natural Products Chemistry in the Undergraduate Laboratory

Hot Biological Catalysis: Isothermal Titration Calorimetry to Characterize Enzymatic Reactions

Sıcak Biyolojik kataliz: İzotermal Titrasyon Kalorimetre enzimatik reaksiyonların Characterize

Isothermal titration calorimetry (ITC) is a well-described technique that measures the heat released or absorbed during a chemical reaction, using it as ...

Chemical Gardens as Flow-through Reactors Simulating Natural Hydrothermal Systems

Kimyasal Bahçeleri olarak Reaktörler Taklit Doğal Hidrotermal Sistemler Akış

Here we report experimental simulations of hydrothermal chimney growth using injection chemical garden methods. The versatility of this type of experiment ...

Water in Oil Emulsions: A New System for Assembling Water-soluble Chlorophyll-binding Proteins with Hydrophobic Pigments

Petrol Emülsiyonlar Su: Hidrofobik Pigmentler ile Suda çözünür Klorofil bağlayıcı Proteinler Montaj için Yeni Bir Sistem

Chlorophylls (Chls) and bacteriochlorophylls (BChls) are the primary cofactors that carry out photosynthetic light harvesting and electron transport. ...

A Direct, Early Stage Guanidinylation Protocol for the Synthesis of Complex Aminoguanidine-containing Natural Products

Karmaşık Aminoguanidine içeren Doğal Ürünler Sentezi için bir Direct, Erken Evre Guanidinylation Protokolü

The guanidine functional group, displayed most prominently in the amino acid arginine, one of the fundamental building blocks of life, is an important ...

In Situ Characterization of Hydrated Proteins in Water by SALVI and ToF-SIMS

In Situ Characterization of Hydrated Proteins in Water by SALVI and ToF-SIMS

SALVI ve TOF-SIMS tarafından Su Sönmüş Proteinlerin In Situ Karakterizasyonu içinde

This work demonstrates in situ characterization of protein biomolecules in the aqueous solution using the System for Analysis at the Liquid Vacuum ...

Synthesis of Protein Bioconjugates via Cysteine-maleimide Chemistry

Synthesis of Protein Bioconjugates via Cysteine-maleimide Chemistry

Protein Bioconjugatlar sentezi<em&gt; yoluyla</em&gt; Sistein-maleimid Kimya

The chemical linking or bioconjugation of proteins to fluorescent dyes, drugs, polymers and other proteins has a broad range of applications, such as the ...

Laboratory Production of Biofuels and Biochemicals from a Rapeseed Oil through Catalytic Cracking Conversion

Katalitik Kırma Dönüşüm aracılığıyla Kanola Yağı gelen Biyoyakıt ve Biochemicals laboratuvar üretimi

The work is based on a reported study which investigates the processability of canola oil (bio-feed) in the presence of bitumen-derived heavy gas oil ...

Synthesis of a Water-soluble Metal&#8211;Organic Complex Array

Synthesis of a Water-soluble MetalÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œOrganic Complex Array

suda çözünür bir metal-organik kompleks dizi sentezi

We demonstrate a method for the synthesis of a water-soluble multimetallic peptidic array containing a predetermined sequence of metal centers such as ...

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

Uygulama ve tahribatsız 19F saat-alan NMR tekniği metodolojisi Flor içeren ilaç ürünleri içeriğindeki ölçmek için

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the ...

In Situ Characterization of Boehmite Particles in Water Using Liquid SEM

In Situ Characterization of Boehmite Particles in Water Using Liquid SEM

Situ Su sıvı SEM kullanarak Boehmite parçacıklar karakterizasyonu

In situ imaging and elemental analysis of boehmite (AlOOH) particles in water is realized using the System for Analysis at the Liquid Vacuum Interface ...