Name: measurement of ion concentration in the unstirred boundary layer with open patch-clamp pipette: implications in control of ion channels by fluid flow
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Ion Concentration in the Unstirred Boundary Layer with Open Patch-Clamp Pipette: Implications in Control of Ion Channels by Fluid Flow at JoVE.

Это исследование было поддержано пионер исследовательский центр программы (2011-0027921), основными программами исследований науки (2015R1C1A1A02036887 и СР 2016R1A2B4014795) через Национальный исследовательский фонд Кореи финансируется министерством науки, ИКТ & Будущее планирование и Грант Кореи медицинских технологий R и D проекта через Корея здравоохранения Институт развития индустрии (ХИДИ), финансируемая министерством здравоохранения и социального обеспечения, Республика Корея (HI15C1540).

Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами институциональных университета Конгук.
1. агарозы соли мосты между раствор для ванн и Ag/AgCl электродов ссылки
Примечание: Агарозы 3M KCl, соли мостов производится как ранее описанные<sup class="x...

<ol>
	<li>Gerhold, K. A., Schwartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ion+Channels+in+Endothelial+Responses+to+Fluid+Shear+Stress.">Ion Channels in Endothelial Responses to Fluid Shear Stress.</a> Physiology (Bethesda). 31 (5), 359-369 (2016).</li><li>Garcia-Roldan, J. L., Bevan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-induced+constriction+and+dilation+of+cerebral+resistance+arteries.">Flow-induced constriction and dilation of cerebral resistance arteries.</a> Circulation Research. 66, 1445-1448 (1990).</li><li>Langille, B. L., O&#8217;Donnell, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reductions+in+arterial+diameter+produced+by+chronic+decreases+in+blood+flow+are+endothelium-dependent.">Reductions in arterial diameter produced by chronic decreases in blood flow are endothelium-dependent.</a> Science. 231, 405-407 (1986).</li><li>Pohl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+of+endothelium+in+the+vasodilator+response+to+increased+flow+in+vivo.">Crucial role of endothelium in the vasodilator response to increased flow in vivo.</a> Hypertension. 8, 37-44 (1986).</li><li>Ranade, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+mechanically+activated+ion+channel,+is+required+for+vascular+development+in+mice.">a mechanically activated ion channel, is required for vascular development in mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111, 10347-10352 (2014).</li><li>Hoger, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+regulates+the+endothelial+Kir2.1+ion+channel.">Shear stress regulates the endothelial Kir2.1 ion channel.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (11), 7780-7785 (2002).</li><li>Mendoza, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV4-mediated+endothelial+Ca2++influx+and+vasodilation+in+response+to+shear+stress.">TRPV4-mediated endothelial Ca2+ influx and vasodilation in response to shear stress.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 298, H466-H476 (2010).</li><li>Brahler, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+deficit+of+SK3+and+IK1+channels+disrupts+the+endothelium-derived+hyperpolarizing+factor+vasodilator+pathway+and+causes+hypertension.">Genetic deficit of SK3 and IK1 channels disrupts the endothelium-derived hyperpolarizing factor vasodilator pathway and causes hypertension.</a> Circulation. 119, 2323-2332 (2009).</li><li>Lee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid+pressure+modulates+L-type+Ca2++channel+via+enhancement+of+Ca2+-induced+Ca2++release+in+rat+ventricular+myocytes.">Fluid pressure modulates L-type Ca2+ channel via enhancement of Ca2+-induced Ca2+ release in rat ventricular myocytes.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 294, C966-C976 (2008).</li><li>Kim, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid+flow+facilitates+inward+rectifier+K++current+by+convectively+restoring+[K+]+at+the+cell+membrane+surface.">Fluid flow facilitates inward rectifier K+ current by convectively restoring [K+] at the cell membrane surface.</a> Scientific Report. 6, 39585 (2016).</li><li>Park, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+fluid+flow+on+voltage-dependent+calcium+channels+in+rat+vascular+myocytes:+fluid+flow+as+a+shear+stress+and+a+source+of+artifacts+during+patch-clamp+studies.">Effects of fluid flow on voltage-dependent calcium channels in rat vascular myocytes: fluid flow as a shear stress and a source of artifacts during patch-clamp studies.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 358 (4), 1021-1027 (2007).</li><li>Barry, P. H., Hope, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroosmosis+in+membranes:+effects+of+unstirred+layers+and+transport+numbers.+I.+Theory.">Electroosmosis in membranes: effects of unstirred layers and transport numbers. I. Theory.</a> Biophysical Journal. 9 (5), 700-728 (1969).</li><li>Barry, P. H., Hope, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroosmosis+in+membranes:+effects+of+unstirred+layers+and+transport+numbers.+II.+Experimental.">Electroosmosis in membranes: effects of unstirred layers and transport numbers. II. Experimental.</a> Biophysical Journal. 9 (5), 729-757 (1969).</li><li>Barry, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+unstirred-layer+transport+number+equations+from+the+Nernst-Planck+flux+equations.">Derivation of unstirred-layer transport number equations from the Nernst-Planck flux equations.</a> Biophysical Journal. 74 (6), 2903-2905 (1998).</li><li>Barry, P. H., Diamond, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unstirred+layers+on+membrane+phenomena.">Effects of unstirred layers on membrane phenomena.</a> Physiological Reviews. 64 (3), 763-872 (1984).</li><li>Park, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caveolar+remodeling+is+a+critical+mechanotransduction+mechanism+of+the+stretch-induced+L-type+Ca2++channel+activation+in+vascular+myocytes.">Caveolar remodeling is a critical mechanotransduction mechanism of the stretch-induced L-type Ca2+ channel activation in vascular myocytes.</a> Pfl&#252;gers Archiv - European Journal of Physiology. 469 (5-6), 829-842 (2017).</li><li>. A procedure for the formation of agar salt bridges Available from: <a target="_blank" href="https://www.warneronline.com/pdf/whitepapers/agar_bridges.pdf">https://www.warneronline.com/pdf/whitepapers/agar_bridges.pdf</a> (2018)</li><li>Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+shear+stress+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Laboratory Investigation. 85 (1), 9-23 (2005).</li><li>Resnick, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid+shear+stress+and+the+vascular+endothelium:+for+better+and+for+worse.">Fluid shear stress and the vascular endothelium: for better and for worse.</a> Progress in Biophysics &amp; Molecular Biology. 81 (3), 177-199 (2003).</li></ol>

В этом исследовании мы продемонстрировали метод измерения реальной концентрации Cl– в unstirred слой, прилегающий к Ag/AgCl электродов ссылку путем определения перекрестка жидкости металл потенциал с открытым патч зажим пипетки, заполнены с высокой KCl концентрация. Изменение концентра?...

Потока жидкости — важные экологические подсказка, которая контролирует многие физиологические и патологические процессы, такие как жидкости потока индуцированной вазодилатацию и жидкости сдвига силы зависимых сосудистой реконструкции и развития1,2, 3,4,5. Хотя молекулярные механизмы биологической реакции на поперечной силы потока жидкости полностью не поняты, считается, что жидкости потока опосредованное регулирование ионного канала стробирования критически может способствовать жидкости потока индуцированной ответы5 , 6 , 7 , 8. Например, активации эндотелиальной внутрь выпрямителя Kir2.1 и Ca2 +-активированные K+ (KCa2.3, KCNN3) каналы после Ca2 + приток жидкости потока было предложено вносить жидкости поток индуцированной вазодилатация6,,78. Таким образом, многие каналы иона, особенно механически активированного или - тормозится каналов, были изучены с точки зрения потока жидкости/сдвига силу чувствительности с патч зажим техника6,9,10 , 11. Однако, в зависимости от экспериментальный протокол, выполненных во время фиксации записи, результаты и интерпретации данных о жидкости потока правила ионных каналов может быть ошибочным10,11.
Один источник жидкости потока индуцированной артефактов в патч зажим записи — от перекрестка потенциальных между теплоносителя и ссылка Ag/AgCl электродов11. Считается, что жидкость/металл стыке потенциальных между купания жидкости и Ag/AgCl электродов постоянно как концентрация Cl– купания жидкости остается неизменной, учитывая химической реакции между купания решения и Ag/AgCl электродов для:
AG + Cl–↔ AgCl + Электрон (e–) (уравнение 1)
Однако в случае, где в целом электрохимической реакции между купания решения и ссылка Ag/AgCl электродов (уравнение 1) выполняется слева направо, концентрация Cl– купания жидкости рядом с Ag/AgCl ссылки электрод (unstirred пограничный слой12,13,14,15) могут быть намного ниже, чем в основную часть купания решения, если достаточно конвекционный транспорт обеспечивается. Использование старых или неидеальной Ag/AgCl электродов с неадекватным хлорирования Ag может увеличить такой риск. Этот жидкости связанных с потоком артефакт на электрод сравнения, в самом деле, могут быть исключены, просто поместив обычных агарозы солевой мост между купания жидкости и ссылка электрода, так как артефакт основан на изменения в реальном Cl– концентрация рядом с Ag/AgCl электродов11. Протокол, представленный в настоящем исследовании описывает, как для предотвращения потенциальных изменений связанных с потоком соединения и измерять концентрации реальных ионов в unstirred пограничном слое.
После размещения агарозы KCl мост между купания жидкости и Ag/AgCl электрод сравнения, является другим важным фактором, который следует рассматривать: просто как ссылка Ag/AgCl электродов действует как электрод Cl– , ионные каналы также может функционировать как ионоселективного электрода. Ситуация unstirred пограничный слой между купания жидкости и Ag/AgCl электродов ссылка возникает во время движения ионов между внеклеточным и внутриклеточных решения через мембранных ионных каналов. Это означает, что необходимо с осторожностью подходить при интерпретации регулирование ионных каналов потока жидкости. Как указывалось в наших предыдущих исследования11, движение ионов через решения, в котором присутствует электрохимических градиент может происходить через три отдельных механизмов: диффузия, миграция и конвекции, где Диффузия это движение индуцированных градиент концентрации, миграция движение, движимый электрического градиента, и конвекции движения потока жидкости. Среди этих трех транспортных механизмов режим конвекции вносит наиболее движение ионов11 (> 1000 раз больше, чем диффузии или миграции под обычной фиксации параметров). Это формирует теоретические основы, почему Джанкшен потенциальных между купания жидкости и Ag/AgCl электродов ссылка может очень под различные статические и жидкости потока условия11.
Согласно гипотезе, предложенных выше, некоторые протекать эффекты потока жидкости на текущий ионного канала может быть выведено из конвективных восстановление реальных ионной концентрации рядом с входной канал на поверхности мембраны (unstirred пограничный слой) 10. В этом случае жидкости потока индуцированные эффекты у ионных токов канал просто возникли из электрохимических события, не от регулирования ионного канала стробирования. Аналогичная идея было ранее предложено Барри коллег12,13,14,и15 на основании строгих теоретических соображений и экспериментальных доказательств, также известный как unstirred слой или номер эффект транспорта. Если некоторые каналы иона имеют достаточно одного канала проводимости и достаточно долго открытым время предоставить достаточные транспортные ставки через каналы (транспорта быстрее в мембранных чем в поверхности unstirred мембраны), пограничный слой эффект может возникнуть . Таким образом конвекции зависимых транспорта может способствовать окончательной жидкости поток индуцированной льгот Ион текущих10,12,13,14,15.
В этом исследовании, мы подчеркиваем важность использования агар или агарозы соли мост во время учебы жидкости поток индуцированной регулирование ионных токов. Мы также предоставляют метод для измерения концентрации реальных ионов в unstirred пограничный слой, прилегающий к Ag/AgCl ссылка электрода и мембранных ионных каналов. Кроме того теоретические интерпретации жидкости модуляции потока индуцированной ионного канала токов (то есть конвекция гипотеза или unstirred слой транспорта номер эффект) могут предоставить ценную информацию для разработки и интерпретации исследований на сдвига силы регулирование ионных каналов. Согласно unstirred пограничного слоя транспорта номер эффект мы прогнозируем, что ионного канала токов через все виды мембранных ионных каналов может быть облегчено потока жидкости, независимо от их биологической чувствительности к поперечной силы потока жидкости, но только, если ионные каналы имеют достаточно одного канала проводимости и долго открытым. Высших плотностях тока ионного канала может увеличить эффект unstirred пограничного слоя на поверхности клеточной мембраны.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:784px;" width="783">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:239px;">RC-11 open bath chamber&#160;</td>
			<td style="width:229px;">Warner instruments, USA</td>
			<td style="width:149px;">W4 64-0307</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ag/AgCl electrode pellet</td>
			<td>World Precision Instruments, USA</td>
			<td>EP1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Agarose&#160;</td>
			<td>Sigma-aldrich, USA</td>
			<td>A9793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#160;Voltage-clamp amplifier&#160;</td>
			<td>HEKA, Germany</td>
			<td>EPC8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#160;Voltage-clamp amplifier&#160;</td>
			<td>Molecular Devices, USA</td>
			<td>Axopatch 200B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Liquid pump</td>
			<td>KNF Flodos, Switzerland</td>
			<td>FEM08</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of ion concentration in the unstirred boundary layer with open patch-clamp pipette: implications in control of ion channels by fluid flow

Потока жидкости является важной экологической стимул, который контролирует многие физиологические и патологические процессы, такие как жидкости потока индуцированной вазодилатации. Хотя молекулярные механизмы для биологической реакции в жидкости потока/поперечной силы полностью не поняты, жидкости потока опосредованное регулирование ионного канала стробирования может способствовать критически. Таким образом поток жидкости/сдвига силу чувствительности ионных каналов была изучена с помощью метода патча зажим. Однако в зависимости от экспериментальный протокол, результаты и интерпретации данных может быть ошибочным. Здесь мы представляем экспериментальные и теоретические доказательства для жидкости ошибки, связанные с потоком и предоставляют методы для оценки, предупреждения и исправления этих ошибок. Изменения в стыке потенциальных между Ag/AgCl электрод сравнения и жидкость для купания были измерены с открытым пипетки, заполнены с 3 M KCl. потока жидкости может затем сдвиг потенциал приблизительно 7 mV жидкости/металлические соединения. И наоборот измеряя напряжение сдвига, индуцированный поток жидкости, мы оценили концентрации ионов в unstirred пограничном слое. В статических условиях реальная ионная концентрации, прилегающих к Ag/AgCl ссылка электрода или ионного канала входе на поверхности клеточной мембраны может достигать как низко как примерно 30% в состояние потока. Размещение агарозы 3 M KCl мост между электродом жидкости и ссылка купание может предотвратить эту проблему потенциального перехода перекрестка. Однако эффект unstirred слоя, прилегающих к поверхности клеточной мембраны не может быть исправлена таким образом. Здесь мы предоставляем метод для измерения концентрации реальных ионов в unstirred пограничном слое с открытым патч зажим пипетку, подчеркивая важность использования агарозы соли мост во время учебы жидкости регулирования потока индуцированной ионных токов. Таким образом этот новый подход, который учитывает реальные концентрации ионов в unstirred пограничном слое, может оказаться полезным на экспериментальный дизайн и интерпретации данных, относящиеся к жидкости касательное напряжение регулирования ионных каналов .

Клеточных напряжени тока зависимых L-типа Ca2 + канал (LVDCC) токи были записаны в ферментативно дисперсной крыса брыжеечных артерий миоцитах, как описано11. Артериальной миоцитов были dialyzed Cs богатые пипеткой раствором под Нистатин перфорированных ...

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Ion Concentration in the Unstirred Boundary Layer with Open Patch-Clamp Pipette: Implications in Control of Ion Channels by Fluid Flow at JoVE.

Measurement of Ion Concentration in the Unstirred Boundary Layer with Open Patch-Clamp Pipette: Implications in Control of Ion Channels by Fluid Flow

Mechanosensitive ионные каналы часто изучаются с точки зрения потока жидкости/сдвига силу чувствительности с патч зажим записи. Однако в зависимости от экспериментальный протокол, итоги по жидкости потока правила ионных каналов может быть ошибочным. Здесь мы предлагаем методы для предотвращения и исправления таких ошибок с теоретической основы.

Измерение концентрации ионов в Unstirred пограничном слое с открытым патч зажим пипетки: последствия управления ионных каналов жидкости потока

Fluid flow is an important environmental stimulus that controls many physiological and pathological processes, such as fluid flow-induced vasodilation. ...

Это представление может помочь ответить на ключевые вопросы в электрофиофиозной сфере, такие как поток жидкости только в правилах ионных каналов. Основным преимуществом этого метода является то, что он может оценить фактическую концентрацию ионов в неутябленные пограничный слой поверхности мембраны для интерпретации данных, связанных с регулированием потока жидкости ионных каналов. Чтобы начать эту процедуру, согните облеготовку капиллярную трубку, чтобы сформировать форму U.Внутренний диаметр капилляра должен быть достаточно большим для снижения сопротивления серии при записи больших ионных течений. Затем растворите три грамма агарозы в 100 миллилитров трехмязыкного хлорида калия и поместите его на горячую пластину между 90 и 100 градусами цельсия. Затем загрузите мост хлоридом калия агарозой, погрузив стеклянный мост в раствор.Держите его на ночь при комнатной температуре для агарозы установить и затвердеть. На следующий день, тщательно выкопать агарозы хлорида калия загружен стеклянный мост из затвердевшей соли агарозы. Храните мост в широкошеей бутылке трехмяголого хлорида калия в холодильнике.В этой процедуре поместите контейнер, загруженный раствором для купания, над камерой зажима патча. Затем заполните патч-зажим камеры с купанием раствора путем всасывания трубки. Чтобы остановить поток жидкости, зарезать трубку со стороны контейнера, чтобы заблокировать поток жидкости.Затем зарезать трубку на стороне всасывания, чтобы остановить всасывание в то же время. Это стационарное состояние управления. Чтобы применить силу потока жидкости, откройте обе трубки на стороне контейнера и всасывания в то же время.До или после применения силы стрижки потока жидкости к клетке, рассчитать скорость потока в миллилитр в минуту путем измерения уменьшения объема жидкости в течение данного времени. Для измерения изменений в потенциале жидкометаллический стык, подготовить нормальный физиологически-солевой раствор для купальни и сравнить их при отсутствии и наличии хлоридного моста агара калия. Затем поместите в камеру пипетки с трехмяхалярным хлоридом калия, чтобы свести к минимуму потенциальный сдвиг между пипеткой и растворами для купания.Затем установите усилитель зажима напряжения в текущем режиме зажима. Сведет на нет первоначальный потенциал смещения, измерьте изменения напряжения, вызванные изменением скоростью потока. Чтобы убедиться, что изменения напряжения являются жидкометаллический перекресток потенциалов, пересмотреть влияние потока жидкости на потенциал соединения, используя мост агарозы соли между раствором ванны и эталонный электрод.По результатам изменений в потенциале жидкометаллический стык, нарисуйте функцию потенциальных взаимосвязей скорости потока и оцените насыщенную ценность потенциального сдвига соединения по скорости наджидкого потока. Затем измените концентрацию хлорида в купальной жидкости и нарисуйте связь потенциальной концентрации хлорида. Обратите внимание, что скорость жидкости должна быть постоянной и достаточно высокой, чтобы предотвратить снижение концентрации хлорида до уровня соседнего серебристо-серебряного хлорида эталонного электрода.Из двух кривых отношений оцените изменения концентрации хлорида в результате измеренного потенциального сдвига соединения. VDCC-L токи были зарегистрированы в энзиматически рассеянных крыс мезентерических артериальных миоцитов, с нистатином перфорированной записи патч-зажима. С мостом хлорида калия агарозы потенциал соединения между эталонным электродом и растворами для купания можно свести к минимуму, а поток жидкости самостоятельно увеличил напряжение VDCC-L.Однако, когда серебристо-серебряный хлорид эталонный электрод был непосредственно подключен к жидкости для купания, без моста хлорида калия агарозы, IV отношения в присутствии потока жидкости сместились вправо, по сравнению с течением VDCC-L в статическом состоянии. Вызванное потоком жидкости увеличение токов Керра 2.1, которые были зарегистрированы в клетках крысиного базофиличного лейкоза с мостом агарозы, может быть объяснено эффектом неуроченного слоя. После своего развития, эта техника проложила путь для исследователей в более электро-физиологии.Так что это для регуляции потока жидкости в течениях ионных каналов. С точки зрения электрохимических явлений, в неутябленом пограничном слое на поверхности клеточной мембраны.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Patch Clamp Recordings on Intact Dorsal Root Ganglia from Adult Rats

Патч зажим Recordings на неповрежденном спинальных ганглиях от взрослых крыс

Patch clamp studies from dorsal root ganglia (DRGs) neurons have increased our understanding of the peripheral nervous system. Currently, the majority of ...

Online Size-exclusion and Ion-exchange Chromatography on a SAXS Beamline

Интернет эксклюзионной и ионообменной хроматографии на МУРР пучкового

Biological small angle X-ray scattering (BioSAXS) is a powerful technique in molecular and structural biology used to determine solution structure, ...

Capturing the Interaction Kinetics of an Ion Channel Protein with Small Molecules by the Bio-layer Interferometry Assay

Захват кинетика взаимодействия ионного канала белка с малых молекул в Assay интерферометрии био слоя

The bio-layer interferometry (BLI) assay is a valuable tool for measuring protein-protein and protein-small molecule interactions. Here, we first describe ...

Characterization of Glycoproteins with the Immunoglobulin Fold by X-Ray Crystallography and Biophysical Techniques

Характеристика гликопротеины с складке иммуноглобулина рентгеноструктурного анализа и биофизических методов

Glycoproteins on the surface of cells play critical roles in cellular function, including signalling, adhesion and transport. On leukocytes, several of ...

Expression and Purification of Mammalian Bestrophin Ion Channels

Выражение и очистки от млекопитающих Bestrophin ионных каналов

The human genome encodes four bestrophin paralogs, namely BEST1, BEST2, BEST3, and BEST4. BEST1, encoded by the BEST1 gene, is a Ca2+-activated Cl- ...

Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization

Ion Exchange Chromatography IEX Coupled to Multi-angle Light Scattering MALS for Protein Separation and Characterization

Ионообменной хроматографии (IEX) в сочетании с мульти-угол рассеяния света (MALS) для разделения белков и характеристика

Ion-exchange chromatography with multi-angle light scattering (IEX-MALS) is a powerful method for protein separation and characterization. The combination ...

Interactions with and Membrane Permeabilization of Brain Mitochondria by Amyloid Fibrils

Взаимодействие с и Мембрана Пермябилизация митохондрий мозга амилоида Фибрилс

A growing body of evidence indicates that membrane permeabilization, including internal membranes such as mitochondria, is a common feature and primary ...

Preparation of High-Quality Fermented Fish Product

Приготовление высококачественного ферментированного рыбного продукта

This protocol provides a method for preparation of industrialized fermented fish product with sturgeon (Aquilaria sinensis) meat product. The procedures ...

Analysis of Neutral Lipid Synthesis in Saccharomyces cerevisiae by Metabolic Labeling and Thin Layer Chromatography

Analysis of Neutral Lipid Synthesis in Saccharomyces cerevisiae by Metabolic Labeling and Thin Layer Chromatography

Анализ синтеза нейтральных липидов в Saccharomyces cerevisiae методом метаболической маркировки и тонкослойной хроматографии

Neutral lipids (NLs) are a class of hydrophobic, chargeless biomolecules that play key roles in energy and lipid homeostasis. NLs are synthesized de ...

Uracil-DNA Glycosylase Assay by Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry Analysis

Анализ урацил-ДНК-гликозилазы с помощью матрицы лазерной десорбции/ионизации Масс-спектрометрии времени пролета

Uracil-DNA glycosylase (UDG) is a key component in the base excision repair pathway for the correction of uracil formed from hydrolytic deamination of ...