Name: generation of knock-out primary and expanded human nk cells using cas9 ribonucleoproteins
Uploaded: 2018-06-14T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins at JoVE.com

ونعترف توليوس ريان لمساعدته الكريمة في تحرير المخطوطة.

وتم الحصول على المعاطف بافي المانحة صحية كمصدر المواد من "وسط ولاية أوهايو منطقة الصليب الأحمر الأمريكي". أن تكون البحوث إعفاء يحدده المؤسسية استعراض المجلس لجميع أنحاء البلاد مستشفى الأطفال هذا البحث.
1-الإنسان ناغورني-كاراباخ خلية تنقية والتوسع
<ol><li>عزل ببمكس من معطف باف...

<ol>
	<li>Guven, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+transfer+into+primary+human+natural+killer+cells+by+retroviral+transduction.">Efficient gene transfer into primary human natural killer cells by retroviral transduction.</a> Experimental Hematology. 33 (11), 1320-1328 (2005).</li><li>Alici, E., Sutlu, T., Sirac Dilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retroviral+gene+transfer+into+primary+human+natural+killer+cells.">Retroviral gene transfer into primary human natural killer cells.</a> Methods in Molecular Biology. 508, 127-137 (2009).</li><li>Carlsten, M., Childs, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Manipulation+of+NK+Cells+for+Cancer+Immunotherapy:+Techniques+and+Clinical+Implications.">Genetic Manipulation of NK Cells for Cancer Immunotherapy: Techniques and Clinical Implications.</a> Frontiers in Immunology. 6, 266 (2015).</li><li>Mehta, R. S., Rezvani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Antigen+Receptor+Expressing+Natural+Killer+Cells+for+the+Immunotherapy+of+Cancer.">Chimeric Antigen Receptor Expressing Natural Killer Cells for the Immunotherapy of Cancer.</a> Frontiers in Immunology. 283, 9 (2018).</li><li>Zuris, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cationic+lipid-mediated+delivery+of+proteins+enables+efficient+protein-based+genome+editing+in+vitro+and+in+vivo.">Cationic lipid-mediated delivery of proteins enables efficient protein-based genome editing in vitro and in vivo.</a> Nature Biotechnology. 33 (1), 73-80 (2015).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+delivery+of+genome-editing+proteins+using+bioreducible+lipid+nanoparticles.">Efficient delivery of genome-editing proteins using bioreducible lipid nanoparticles.</a> PNAS. 113 (11), 2868-2873 (2016).</li><li>Liang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+DNA-free+genome+editing+of+bread+wheat+using+CRISPR/Cas9+ribonucleoprotein+complexes.">Efficient DNA-free genome editing of bread wheat using CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein complexes.</a> Nature Communications. 8, 14261 (2017).</li><li>DeWitt, M. A., Corn, J. E., Carroll, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+editing+via+delivery+of+Cas9+ribonucleoprotein.">Genome editing via delivery of Cas9 ribonucleoprotein.</a> Methods. , 9-15 (2017).</li><li>Rezvani, K., Rouce, R., Liu, E., Shpall, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+Natural+Killer+Cells+for+Cancer+Immunotherapy.">Engineering Natural Killer Cells for Cancer Immunotherapy.</a> Molecular Therapy. 25 (8), 1769-1781 (2017).</li><li>Sutlu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+intracellular+antiviral+defense+mechanisms+augments+lentiviral+transduction+of+human+natural+killer+cells:+implications+for+gene+therapy.">Inhibition of intracellular antiviral defense mechanisms augments lentiviral transduction of human natural killer cells: implications for gene therapy.</a> Human Gene Therapy. 23 (10), 1090-1100 (2012).</li><li>Viel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta+inhibits+the+activation+and+functions+of+NK+cells+by+repressing+the+mTOR+pathway.">TGF-beta inhibits the activation and functions of NK cells by repressing the mTOR pathway.</a> Science Signaling. 9 (415), (2016).</li><li>Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., Lee, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion,+purification,+and+functional+assessment+of+human+peripheral+blood+NK+cells.">Expansion, purification, and functional assessment of human peripheral blood NK cells.</a> JoVE. (48), (2011).</li><li>Lee, D. A., Verneris, M. R., Campana, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition,+preparation,+and+functional+assessment+of+human+NK+cells+for+adoptive+immunotherapy.">Acquisition, preparation, and functional assessment of human NK cells for adoptive immunotherapy.</a> Methods in Molecular Biology. , 61-77 (2010).</li><li>Vouillot, L., Thelie, A., Pollet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+T7E1+and+surveyor+mismatch+cleavage+assays+to+detect+mutations+triggered+by+engineered+nucleases.">Comparison of T7E1 and surveyor mismatch cleavage assays to detect mutations triggered by engineered nucleases.</a> G3. 5 (3), 407-415 (2015).</li><li>Eyquem, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+a+CAR+to+the+TRAC+locus+with+CRISPR/Cas9+enhances+tumour+rejection.">Targeting a CAR to the TRAC locus with CRISPR/Cas9 enhances tumour rejection.</a> Nature. 543 (7643), 113-117 (2017).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+highly+efficient+mammalian+cell+engineering+via+Cas9+protein+transfection.">Rapid and highly efficient mammalian cell engineering via Cas9 protein transfection.</a> Journal of Biotechnology. 208, 44-53 (2015).</li><li>Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J., Kim, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+RNA-guided+genome+editing+in+human+cells+via+delivery+of+purified+Cas9+ribonucleoproteins.">Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins.</a> Genome Research. 24 (6), 1012-1019 (2014).</li><li>Chmielecki, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+Profiling+of+a+Large+Set+of+Diverse+Pediatric+Cancers+Identifies+Known+and+Novel+Mutations+across+Tumor+Spectra.">Genomic Profiling of a Large Set of Diverse Pediatric Cancers Identifies Known and Novel Mutations across Tumor Spectra.</a> Cancer Research. 77 (2), 509-519 (2017).</li><li>Schultz, L. M., Majzner, R., Davis, K. L., Mackall, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+immunotherapy+for+pediatric+solid+tumors.">New developments in immunotherapy for pediatric solid tumors.</a> Current Opinion in Pediatrics. 30 (1), 30-39 (2018).</li></ol>

وقد تم الطعن في التعديل تعتمد على الحمض النووي للخلايا ناغورني كاراباخ4،9. نحن، ولذلك، أدخلت مباشرة مجمع صناعي بريفورميد ribonucleoprotein (رنبس) والبروتين Cas9 كالبروتين المنقي الابتدائي وتوسيع نطاق الخلايا ناغورني كاراباخ8. هذا الأسلوب يسمح لنا بالقضا...

وقد طرحت المناعي السرطان في السنوات الأخيرة. خلايا تي مستقبلات (السيارات) مستضد تشيميريك المعدلة وراثيا مثال ممتاز لهندسة الخلايا المناعية بنجاح نشر في العلاج المناعي السرطان. هذه الخلايا وقد أقر مؤخرا إدارة الأغذية والعقاقير لعلاج ضد CD19 + B خلايا الأورام الخبيثة، ولكن النجاح كان محدودا للأمراض آخذة المستضدات استهدافها قليلة حتى الآن، وتستهدف هذه المراجع مستضدي محدودة عرضه للفشل بالهروب محصنة. وعلاوة على ذلك، تركزت على استخدام خلايا تي ذاتي خلايا "تي السيارة" بسبب خطر الفساد – مقابل – المضيف الأمراض الناجمة عن خلايا تي متمكنة. في المقابل، ناغورني كاراباخ الخلايا قادرة على قتل الورم الأهداف بطريقة مستقلة عن مستضد ولا تسبب GvHD، مما يجعلها مرشح جيد للسرطان المناعي6،7،،من89.
تكنولوجيا كريسبر/Cas9 وقد استخدمت مؤخرا في هندسة الخلايا المناعية، ولكن وراثيا إعادة برمجة الخلايا ناغورني كاراباخ مع البلازميدات كانت دائماً صعبة. وكان هذا بسبب صعوبات في إيصال التحوير بطريقة تعتمد الحمض النووي مثل توصيل لينتيفيرال والفيروسات التراجعية يسبب الكبيرة المرتبطة بالإجراء ناغورني كاراباخ الخلية المبرمج ومحدودية إنتاج الخلايا المحورة وراثيا في ناغورني كاراباخ4 , 9.
العديد من الخلايا المناعية الفطرية التعبير عن مستويات عالية من مستقبلات لأنماط الجزيئية المرتبطة بالعوامل الممرضة مثل جين إيندوسيبلي-حمض الريتينويك أنا (تلاعب-أنا)، التي تمكن من الاعتراف المتزايد بالدنا الأجنبي. ومكن قمع هذه المسارات أعلى كفاءة توصيل في ناغورني كاراباخ الخلايا عند استخدام الأساليب القائمة على الحمض النووي للتعديل الوراثي10.
يصف لنا هنا طريقة استخدام خالية من الحمض النووي الجينوم التحرير من الابتدائي وتوسيع ناغورني كاراباخ الخلايا البشرية استخدام مجمعات ريبونوكليوبروتين Cas9 (Cas9/رنبس). Cas9/رنبس يتكون من ثلاثة مكونات، المؤتلف Cas9 البروتين الرصاصية مع الاصطناعية واحد-دليل الحمض النووي الريبي يتألف كرنا الرصاصية وتراسيرنا. هذه Cas9/رنبس قادرون ناهضة أهداف الجينوم بكفاءة أعلى بالمقارنة مع النهج المعتمدة على الحمض النووي الأجنبي سبب إيصالها كالمجمعات الفنية. بالإضافة إلى ذلك، قد تقلل التخليص السريع من Cas9/رنبس من الخلايا آثار خارج الهدف مثل تنظيم دورات تعريفية للمبرمج. وهكذا، يمكن استخدامها لإنشاء طرق الرافضة، أو الوظائف الإضافية تدق عندما جنبا إلى جنب مع الحمض النووي جزئ مثلى6،7. لقد أظهرنا أن انهانسر Cas9/رنبس هو طريقة سهلة وفعالة نسبيا أن يتغلب على القيود السابقة للتعديل الوراثي في الخلايا ناغورني-كاراباخ.
TGFβ هو سيتوكين كآبته رئيسية، مما يحول دون تفعيل ووظائف خلايا ناغورني كاراباخ. يقترح أن الاستهداف في مسار TGFβ يمكن زيادة وظائف الخلايا المناعية. نحن استهدفت منطقة ترميز اكتودومين TGBR2 الذي يربط TGFβ11. نتائج تمثيلية تظهر انخفاضا كبيرا في مستوى التعبير مرناً لهذه الجينات وكذلك إثبات أن الخلايا ناغورني كاراباخ تعديل تصبح مقاومة ل TGFβ. وبالإضافة إلى ذلك، تحتفظ الخلايا المحورة البقاء وإمكانات التكاثري، كما أنها قادرة على أن تكون وظيفة-انهانسر الموسعة باستخدام الخلايا المغذية المشع. ولذلك، الأسلوب التالي نهجاً واعداً للتلاعب وراثيا ناغورني كاراباخ الخلايا لأي زيادة السريرية أو لأغراض البحث.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>RosetteSep&#8482; Human NK Cell Enrichment Cocktail</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>15065</td>
			<td>The RosetteSep&#8482; Human NK Cell Enrichment Cocktail is designed to isolate NK cells from whole blood by negative selection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque&#174; PLUS</td>
			<td>GE Healthcare - Life Sciences</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 tracrRNA</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1072532</td>
			<td>TracrRNA that contains proprietary chemical modifications conferring increased nuclease resistance. Hybridizes to crRNA to activate the Cas9 enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 crRNA</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>Synthetically produced as Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 crRNA, based on the sequence of designed gRNA targeting the gene of intrest</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; Genome Editing Detection Kit</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1075931</td>
			<td>Each kit contains T7EI endonuclease, T7EI reaction buffer, and T7EI assay controls.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum&#174; Taq DNA Polymerase High Fidelity</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11304-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4D-Nucleofector&#8482; System</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>AAF-1002B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human recombinant IL-2 Protein</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>65483-0116-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P3 Primary Cell 4D-Nucleofector&#8482; X Kit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>V4XP-3032</td>
			<td>Contains pmaxGFP&#8482; Vector, Nucleofector&#8482; Solution, Supplement, 16-well Nucleocuvette&#8482; Strips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-targeting: Custom siRNA, Standard 0.05 2mol ON-TARGETplus</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>CTM-360019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; S.p. Cas9 Nuclease 3NLS</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1074181</td>
			<td>Cas9 Nuclease</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNeasy&#174; Blood &#38; Tissue Handbook</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>69504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcein AM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C3099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF&#946;</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>580706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 Control Kit, Human</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1072554</td>
			<td>Includes tracrRNA, HPRT positive control crRNA, negative control crRNA#1, HPRT Primer Mix, and Nuclease-Free Duplex Buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IDTE pH 7.5 (1X TE Solution)</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>11-01-02-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; Cas9 Electroporation Enhancer</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1075915</td>
			<td>Cas9 Electroporation Enhancer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of knock-out primary and expanded human nk cells using cas9 ribonucleoproteins

تسارع التكنولوجيا كريسبر/Cas9 هندسة الجينوم في العديد من أنواع الخلايا، ولكن حتى الآن، إيصال الجينات وتعديل الجينات مستقرة تحديا في الخلايا الأولية من ناغورني-كاراباخ. على سبيل المثال، أدت إلى تسليم التحوير باستخدام توصيل لينتيفيرال أو الفيروسات التراجعية عائد محدود من الخلايا ناغورني كاراباخ المهندسة وراثيا بسبب ناغورني كاراباخ المرتبطة بالإجراء كبيرة الخلية المبرمج. ونحن هنا وصف أسلوب خال من الحمض النووي للتحرير الجينوم البشري خلايا ناغورني كاراباخ الأساسية وتوسيع نطاق استخدام مجمعات ريبونوكليوبروتين Cas9 (Cas9/رنبس). يسمح هذا الأسلوب كفاءة بالضربة القاضية TGFBR2 و HPRT1 الجينات في الخلايا ناغورني كاراباخ. RT-PCR البيانات أظهرت انخفاضا كبيرا في مستوى التعبير الجيني، واقترح الإنزيم سيتوتوكسيسيتي منتج خلية الممثل أن الخلايا المعدلة رنب ناغورني كاراباخ أصبح أقل حساسية ل TGFβ. يمكن أن تكون الخلايا المحورة وراثيا انهانسر وظيفة الموسعة بالتحفيز مع الإعراب عن mbIL21 المشع الخلايا المغذية.

الكفاءة انهانسر
لتحسين أمثلية انهانسر من Cas9/رنبس، اختبرنا 16 برامج مختلفة مع توصيل siRNA عدم استهداف بروتينات فلورية خضراء وبلازميد الحمض النووي داخل الخلايا ناغورني كاراباخ. التدفق الخلوي التحليل أظهر أن EN-138 بأعلى نسبة من الخلية ا?...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins at JoVE.com

Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

نقدم هنا، وضع بروتوكول لتعديل الخلايا الأساسي أو الموسع البشرية القاتلة الطبيعية (ناغورني كاراباخ) ريبونوكليوبروتينس Cas9 (Cas9/رنبس) باستخدام جينياً. باستخدام هذا البروتوكول، أنشأنا ناغورني كاراباخ الخلايا البشرية قاصرة تحويل مستقبلات عامل النمو – ب 2 (TGFBR2) هيبوكسانثيني فوسفوريبوسيلترانسفيراسي 1 (HPRT1).

جيل خلايا المغلوب الأساسية والموسعة ناغورني كاراباخ البشرية باستخدام ريبونوكليوبروتينس Cas9

CRISPR/Cas9 technology is accelerating genome engineering in many cell types, but so far, gene delivery and stable gene modification have been challenging ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

توسيع وتنقية ، والتقييم الوظيفي للخلايا الدم المحيطية الإنسان NK

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

Generation of Organotypic Raft Cultures from Primary Human Keratinocytes

جيل من الثقافات الطوافة عضوي النمط من الخلايا الكيراتينية الإنسان الأساسية

The development of organotypic epithelial raft cultures has provided researchers with an efficient in vitro system that faithfully recapitulates ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

جيل من الخلايا المستحثة تي التنظيمية من المرحلة الابتدائية الإنسان خلايا T ساذجة والذاكرة

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac تعديل النظام الأساسي للخلايا ينقول T الإنسان

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Generation of Human Alloantigen-specific T Cells from Peripheral Blood

توليد خلايا T الإنسان مستضد خيفي محددة من الدم المحيطي

The study of human T lymphocyte biology often involves examination of responses to activating ligands. T cells recognize and respond to processed peptide ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

الجيل المؤتلف الإنسان مفتش حيدة النسيلة من مخلد خلايا التصنيف B

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Human Monocyte-derived Dendritic Cells from Whole Blood

جيل من الوحيدات المستمدة الخلايا الجذعية البشرية من الدم الكامل

Dendritic cells (DCs) recognize foreign structures of different pathogens, such as viruses, bacteria, and fungi, via a variety of pattern recognition ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

ديكستران يعزز كفاءة توصيل لينتيفيرال الخلايا ناغورني كاراباخ الابتدائي مورين والبشرية

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Small RNA Transfection in Primary Human Th17 Cells by Next Generation Electroporation

الصغيرة RNA ترنسفكأيشن في الخلايا الأولية Th17 الإنسان من قبل الجيل القادم Electroporation لل

CD4+ T cells can differentiate into several subsets of effector T helper cells depending on the surrounding cytokine milieu. Th17 cells can be generated ...

A Flow Cytometry-Based Cytotoxicity Assay for the Assessment of Human NK Cell Activity

تحليل القائم على الخلوي سيتوتوكسيسيتي تدفق لتقييم نشاط الخلايا البشرية ناغورني-كاراباخ

Within the innate immune system, effector lymphocytes known as natural killer (NK) cells play an essential role in host defense against aberrant cells, ...