Name: generation of knock-out primary and expanded human nk cells using cas9 ribonucleoproteins
Uploaded: 2018-06-14T15:00:00
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हम पांडुलिपि संपादन में अपनी तरह की मदद के लिए ब्रायन Tullius स्वीकार करते हैं ।

स्वस्थ दाता buffy कोट केंद्रीय ओहियो क्षेत्र अमेरिकी रेड क्रॉस से स्रोत सामग्री के रूप में प्राप्त किए गए । इस शोध के लिए तय किया गया कि राष्ट्रव्यापी बच्चों के अस्पताल की संस्थागत समीक्षा बोर्ड द्वारा अ?...

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	<li>Guven, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+transfer+into+primary+human+natural+killer+cells+by+retroviral+transduction.">Efficient gene transfer into primary human natural killer cells by retroviral transduction.</a> Experimental Hematology. 33 (11), 1320-1328 (2005).</li><li>Alici, E., Sutlu, T., Sirac Dilber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retroviral+gene+transfer+into+primary+human+natural+killer+cells.">Retroviral gene transfer into primary human natural killer cells.</a> Methods in Molecular Biology. 508, 127-137 (2009).</li><li>Carlsten, M., Childs, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Manipulation+of+NK+Cells+for+Cancer+Immunotherapy:+Techniques+and+Clinical+Implications.">Genetic Manipulation of NK Cells for Cancer Immunotherapy: Techniques and Clinical Implications.</a> Frontiers in Immunology. 6, 266 (2015).</li><li>Mehta, R. S., Rezvani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Antigen+Receptor+Expressing+Natural+Killer+Cells+for+the+Immunotherapy+of+Cancer.">Chimeric Antigen Receptor Expressing Natural Killer Cells for the Immunotherapy of Cancer.</a> Frontiers in Immunology. 283, 9 (2018).</li><li>Zuris, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cationic+lipid-mediated+delivery+of+proteins+enables+efficient+protein-based+genome+editing+in+vitro+and+in+vivo.">Cationic lipid-mediated delivery of proteins enables efficient protein-based genome editing in vitro and in vivo.</a> Nature Biotechnology. 33 (1), 73-80 (2015).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+delivery+of+genome-editing+proteins+using+bioreducible+lipid+nanoparticles.">Efficient delivery of genome-editing proteins using bioreducible lipid nanoparticles.</a> PNAS. 113 (11), 2868-2873 (2016).</li><li>Liang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+DNA-free+genome+editing+of+bread+wheat+using+CRISPR/Cas9+ribonucleoprotein+complexes.">Efficient DNA-free genome editing of bread wheat using CRISPR/Cas9 ribonucleoprotein complexes.</a> Nature Communications. 8, 14261 (2017).</li><li>DeWitt, M. A., Corn, J. E., Carroll, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+editing+via+delivery+of+Cas9+ribonucleoprotein.">Genome editing via delivery of Cas9 ribonucleoprotein.</a> Methods. , 9-15 (2017).</li><li>Rezvani, K., Rouce, R., Liu, E., Shpall, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+Natural+Killer+Cells+for+Cancer+Immunotherapy.">Engineering Natural Killer Cells for Cancer Immunotherapy.</a> Molecular Therapy. 25 (8), 1769-1781 (2017).</li><li>Sutlu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+intracellular+antiviral+defense+mechanisms+augments+lentiviral+transduction+of+human+natural+killer+cells:+implications+for+gene+therapy.">Inhibition of intracellular antiviral defense mechanisms augments lentiviral transduction of human natural killer cells: implications for gene therapy.</a> Human Gene Therapy. 23 (10), 1090-1100 (2012).</li><li>Viel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta+inhibits+the+activation+and+functions+of+NK+cells+by+repressing+the+mTOR+pathway.">TGF-beta inhibits the activation and functions of NK cells by repressing the mTOR pathway.</a> Science Signaling. 9 (415), (2016).</li><li>Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., Lee, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion,+purification,+and+functional+assessment+of+human+peripheral+blood+NK+cells.">Expansion, purification, and functional assessment of human peripheral blood NK cells.</a> JoVE. (48), (2011).</li><li>Lee, D. A., Verneris, M. R., Campana, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition,+preparation,+and+functional+assessment+of+human+NK+cells+for+adoptive+immunotherapy.">Acquisition, preparation, and functional assessment of human NK cells for adoptive immunotherapy.</a> Methods in Molecular Biology. , 61-77 (2010).</li><li>Vouillot, L., Thelie, A., Pollet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+T7E1+and+surveyor+mismatch+cleavage+assays+to+detect+mutations+triggered+by+engineered+nucleases.">Comparison of T7E1 and surveyor mismatch cleavage assays to detect mutations triggered by engineered nucleases.</a> G3. 5 (3), 407-415 (2015).</li><li>Eyquem, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+a+CAR+to+the+TRAC+locus+with+CRISPR/Cas9+enhances+tumour+rejection.">Targeting a CAR to the TRAC locus with CRISPR/Cas9 enhances tumour rejection.</a> Nature. 543 (7643), 113-117 (2017).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+highly+efficient+mammalian+cell+engineering+via+Cas9+protein+transfection.">Rapid and highly efficient mammalian cell engineering via Cas9 protein transfection.</a> Journal of Biotechnology. 208, 44-53 (2015).</li><li>Kim, S., Kim, D., Cho, S. W., Kim, J., Kim, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+RNA-guided+genome+editing+in+human+cells+via+delivery+of+purified+Cas9+ribonucleoproteins.">Highly efficient RNA-guided genome editing in human cells via delivery of purified Cas9 ribonucleoproteins.</a> Genome Research. 24 (6), 1012-1019 (2014).</li><li>Chmielecki, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+Profiling+of+a+Large+Set+of+Diverse+Pediatric+Cancers+Identifies+Known+and+Novel+Mutations+across+Tumor+Spectra.">Genomic Profiling of a Large Set of Diverse Pediatric Cancers Identifies Known and Novel Mutations across Tumor Spectra.</a> Cancer Research. 77 (2), 509-519 (2017).</li><li>Schultz, L. M., Majzner, R., Davis, K. L., Mackall, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+immunotherapy+for+pediatric+solid+tumors.">New developments in immunotherapy for pediatric solid tumors.</a> Current Opinion in Pediatrics. 30 (1), 30-39 (2018).</li></ol>

NK कोशिकाओं के डीएनए पर निर्भर संशोधन4,9को चुनौती दी गई है । हम, इसलिए, सीधे एक कृत्रिम रूप से पेश ribonucleoprotein (RNPs) जटिल और प्राथमिक और विस्तारित NK कोशिकाओं8में शुद्ध प्रोटीन के रूप ?...

कैंसर immunotherapy हाल के वर्षों में उन्नत किया गया है । आनुवंशिक रूप से संशोधित chimeric प्रतिजन रिसेप्टर (कार) टी कोशिकाओं को सफलतापूर्वक कैंसर immunotherapy में तैनात इंजीनियर प्रतिरक्षा कोशिकाओं का एक उत्कृष्ट उदाहरण हैं । इन कोशिकाओं को हाल ही में CD19 के खिलाफ उपचार के लिए एफडीए द्वारा अनुमोदित किया गया + बी सेल द्रोह, लेकिन सफलता अभी तक कुछ लक्षित एंटीजन असर रोगों तक ही सीमित किया गया है, और इस तरह के सीमित प्रतिजनी प्रदर्शनों को लक्षित कर रहे है प्रतिरक्षा से बचने की विफलता के लिए प्रवण है । इसके अलावा, कार टी कोशिकाओं क्योंकि भ्रष्टाचार के जोखिम की ऑटोलॉगस टी कोशिकाओं के उपयोग पर ध्यान केंद्रित किया गया है बनाम मेजबान allogeneic टी कोशिकाओं की वजह से रोग । इसके विपरीत, NK कोशिकाओं को एक प्रतिजन-स्वतंत्र तरीके से ट्यूमर लक्ष्यों को मारने में सक्षम है और GvHD कारण नहीं है, जो उंहें कैंसर immunotherapy6,7,8,9के लिए एक अच्छा उंमीदवार बनाता है ।
CRISPR/Cas9 प्रौद्योगिकी इंजीनियरिंग प्रतिरक्षा कोशिकाओं में हाल ही में इस्तेमाल किया गया है, लेकिन आनुवंशिक रूप से plasmids के साथ NK कोशिकाओं reprogramming हमेशा चुनौतीपूर्ण रहा है । यह एक डीएनए निर्भर तरीके में transgene प्रसव में कठिनाइयों के कारण किया गया है जैसे lentiviral और retroviral पर्याप्त प्रक्रिया के कारण transduction-संबद्ध NK सेल apoptosis और आनुवंशिक रूप से इंजीनियर NK कोशिकाओं के सीमित उत्पादन4 , 9.
कई जंमजात प्रतिरक्षा कोशिकाओं रोगज़नक़ के लिए रिसेप्टर्स के उच्च स्तर एक्सप्रेस ऐसे Retinoic एसिड के रूप में आणविक पैटर्न -inducible जीन मैं (रिग-मैं), जो विदेशी डीएनए की बढ़ मांयता सक्षम करें । इन रास्ते के दमन NK कोशिकाओं में उच्च transduction क्षमता सक्षम है जब आनुवंशिक संशोधन10के लिए डीएनए आधारित तरीकों का उपयोग कर ।
हम यहां का वर्णन एक डीएनए मुक्त जीनोम संपादन का उपयोग करने के लिए विधि प्राथमिक और विस्तारित मानव NK Cas9 ribonucleoprotein परिसरों का उपयोग कोशिकाओं (Cas9/RNPs) । Cas9/RNPs तीन घटकों से बना है, रिकॉमबिनेंट Cas9 प्रोटीन एक जटिल crRNA और tracerRNA के शामिल सिंथेटिक एकल गाइड आरएनए के साथ जटिल । ये Cas9/RNPs कार्यात्मक परिसरों के रूप में उनकी सुपुर्दगी के कारण विदेशी डीएनए-निर्भर दृष्टिकोणों की तुलना में उच्च दक्षता के साथ जीनोमिक लक्ष्यों को सट करने में सक्षम हैं । साथ ही, Cas9/RNPs की कोशिकाओं से तीव्र निकासी apoptosis की प्रेरण जैसे बंद लक्ष्य प्रभाव को कम कर सकते हैं । इस प्रकार, वे दस्तक-बहिष्कार उत्पंन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, या दस्तक-ins जब मुताबिक़ पुनर्संयोजन6,7के लिए डीएनए के साथ संयुक्त । हमें पता चला कि Cas9/RNPs के electroporation एक आसान और अपेक्षाकृत कुशल तरीका है कि NK कोशिकाओं में आनुवंशिक संशोधन की पिछले बाधाओं पर काबू पाना है ।
TGFβ एक प्रमुख immunosuppressive cytokine है, जो NK कोशिकाओं के सक्रियण और कार्यों को बाधित करता है । यह सुझाव दिया गया है कि TGFβ मार्ग लक्ष्यीकरण प्रतिरक्षा कोशिका कार्यों को बढ़ा सकते हैं । हम TGBR2 ectodomain जो11TGFβ बांध क्षेत्र एंकोडिंग लक्षित। प्रतिनिधि परिणाम इस जीन के mRNA अभिव्यक्ति के स्तर में एक महत्वपूर्ण कमी दिखाने के लिए और आगे प्रदर्शित करता है कि संशोधित NK कोशिकाओं TGFβ के लिए प्रतिरोधी हो । इसके अतिरिक्त, संशोधित कक्ष व्यवहार्यता और प्रफलन क्षमता बनाए रखते हैं, क्योंकि वे विकिरणित फीडर कोशिकाओं का उपयोग करके पोस्ट-electroporation का विस्तार करने में सक्षम होते हैं। इसलिए, निम्न विधि किसी भी आगे नैदानिक या अनुसंधान प्रयोजनों के लिए NK कोशिकाओं के लिए आनुवंशिक रूप से हेरफेर करने के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>RosetteSep&#8482; Human NK Cell Enrichment Cocktail</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>15065</td>
			<td>The RosetteSep&#8482; Human NK Cell Enrichment Cocktail is designed to isolate NK cells from whole blood by negative selection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque&#174; PLUS</td>
			<td>GE Healthcare - Life Sciences</td>
			<td>17-1440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 tracrRNA</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1072532</td>
			<td>TracrRNA that contains proprietary chemical modifications conferring increased nuclease resistance. Hybridizes to crRNA to activate the Cas9 enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 crRNA</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>Synthetically produced as Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 crRNA, based on the sequence of designed gRNA targeting the gene of intrest</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; Genome Editing Detection Kit</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1075931</td>
			<td>Each kit contains T7EI endonuclease, T7EI reaction buffer, and T7EI assay controls.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum&#174; Taq DNA Polymerase High Fidelity</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11304-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4D-Nucleofector&#8482; System</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>AAF-1002B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human recombinant IL-2 Protein</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>65483-0116-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P3 Primary Cell 4D-Nucleofector&#8482; X Kit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>V4XP-3032</td>
			<td>Contains pmaxGFP&#8482; Vector, Nucleofector&#8482; Solution, Supplement, 16-well Nucleocuvette&#8482; Strips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-targeting: Custom siRNA, Standard 0.05 2mol ON-TARGETplus</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>CTM-360019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; S.p. Cas9 Nuclease 3NLS</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1074181</td>
			<td>Cas9 Nuclease</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNeasy&#174; Blood &#38; Tissue Handbook</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>69504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcein AM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C3099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF&#946;</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>580706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; CRISPR-Cas9 Control Kit, Human</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1072554</td>
			<td>Includes tracrRNA, HPRT positive control crRNA, negative control crRNA#1, HPRT Primer Mix, and Nuclease-Free Duplex Buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IDTE pH 7.5 (1X TE Solution)</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>11-01-02-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alt-R&#174; Cas9 Electroporation Enhancer</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>1075915</td>
			<td>Cas9 Electroporation Enhancer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of knock-out primary and expanded human nk cells using cas9 ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 टेक्नोलॉजी कई सेल प्रकारों में जीनोम इंजीनियरिंग को तेज कर रही है, लेकिन अभी तक, जीन डिलिवरी और स्थिर जीन संशोधन प्राथमिक NK कोशिकाओं में चुनौतीपूर्ण रहा है । उदाहरण के लिए, lentiviral या retroviral transduction का उपयोग करते हुए transgene डिलीवरी पर्याप्त प्रक्रिया-संबद्ध NK सेल NK के कारण आनुवंशिक रूप से इंजीनियर apoptosis कक्षों की एक सीमित उपज में हुई । हम यहां मानव प्राथमिक और विस्तारित NK Cas9 ribonucleoprotein परिसरों (Cas9/RNPs) का उपयोग कर कोशिकाओं के जीनोम संपादन के लिए एक डीएनए मुक्त विधि का वर्णन । इस विधि NK कोशिकाओं में TGFBR2 और HPRT1 जीन के कुशल नॉकआउट की अनुमति दी । RT-पीसीआर डेटा जीन अभिव्यक्ति के स्तर में एक महत्वपूर्ण कमी से पता चला है, और एक प्रतिनिधि सेल उत्पाद की एक cytotoxicity परख का सुझाव दिया है कि RNP संशोधित NK कोशिकाओं TGFβ के लिए कम संवेदनशील बन गया । आनुवंशिक रूप से संशोधित कोशिकाओं विकिरणित mbIL21-एक्सप्रेस फीडर कोशिकाओं के साथ उत्तेजना द्वारा पोस्ट-electroporation विस्तार किया जा सकता है ।

Electroporation दक्षता
Cas9/RNPs के electroporation का अनुकूलन करने के लिए, हम GFP कोशिकाओं में सिरना गैर लक्ष्यीकरण प्लाज्मिड और डीएनए NK के transduction के साथ 16 विभिंन कार्यक्रमों का परीक्षण किया । प्र?...

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Generation of Knock-out Primary and Expanded Human NK Cells Using Cas9 Ribonucleoproteins

यहां, हम आनुवंशिक रूप से संशोधित करने के लिए एक प्रोटोकॉल वर्तमान प्राथमिक या विस्तारित मानव प्राकृतिक हत्यारा (NK) कोशिकाओं का उपयोग Cas9 Ribonucleoproteins (Cas9/RNPs) । इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके, हम मानव NK वृद्धि कारक-बी रिसेप्टर 2 (TGFBR2) और hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) को बदलने के लिए कमी कोशिकाओं उत्पन्न.

Cas9 Ribonucleoproteins का उपयोग करके नॉक-आउट प्राथमिक और विस्तारित मानव NK कोशिकाओं का निर्माण

CRISPR/Cas9 technology is accelerating genome engineering in many cell types, but so far, gene delivery and stable gene modification have been challenging ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

विस्तार, शोधन, और मानव परिधीय रक्त एन.के. कोशिकाओं के कार्यात्मक मूल्यांकन

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

Generation of Organotypic Raft Cultures from Primary Human Keratinocytes

प्राथमिक मानव keratinocytes के से Organotypic बेड़ा संस्कृति का सृजन

The development of organotypic epithelial raft cultures has provided researchers with an efficient in vitro system that faithfully recapitulates ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

प्राथमिक मानव भोले और स्मृति टी कोशिकाओं से प्रेरित विनियामक टी कोशिकाओं की पीढ़ी

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

प्राथमिक मानव टी कोशिकाओं की piggyBac Transposon सिस्टम संशोधन

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Generation of Human Alloantigen-specific T Cells from Peripheral Blood

परिधीय रक्त से मानव Alloantigen विशेष टी कोशिकाओं की पीढ़ी

The study of human T lymphocyte biology often involves examination of responses to activating ligands. T cells recognize and respond to processed peptide ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

अमर छाँटे बी कोशिकाओं से पुनः संयोजक मानव आईजीजी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का सृजन

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Human Monocyte-derived Dendritic Cells from Whole Blood

पूरे रक्त से मानव monocyte व्युत्पन्न वृक्ष के समान कोशिकाओं की पीढ़ी

Dendritic cells (DCs) recognize foreign structures of different pathogens, such as viruses, bacteria, and fungi, via a variety of pattern recognition ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran Murine और मानव प्राथमिक NK कोशिकाओं की Lentiviral Transduction क्षमता को बढ़ाता है

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Small RNA Transfection in Primary Human Th17 Cells by Next Generation Electroporation

अगली पीढ़ी Electroporation द्वारा प्राथमिक मानव Th17 कोशिकाओं में छोटे आरएनए अभिकर्मक

CD4+ T cells can differentiate into several subsets of effector T helper cells depending on the surrounding cytokine milieu. Th17 cells can be generated ...

A Flow Cytometry-Based Cytotoxicity Assay for the Assessment of Human NK Cell Activity

एक प्रवाह Cytometry-आधारित Cytotoxicity परख मानव एन सेल गतिविधि के मूल्यांकन के लिए

Within the innate immune system, effector lymphocytes known as natural killer (NK) cells play an essential role in host defense against aberrant cells, ...