Name: measuring hypopharyngeal gland acinus size in honey bee (apis mellifera) workers
Uploaded: 2018-09-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee Apis mellifera Workers at JoVE.com

यह काम USDA-ARS (परियोजना संख्या: 2022-21000-017-00-डी) से आंतरिक कोष द्वारा समर्थित किया गया था । ARS/USDA एक समान अवसर नियोक्ता और प्रदाता है ।

1. नर्स श्रमिकों से Hypopharyngeal ग्रंथियों को विच्छेदन और धुंधला करना
<ol><li>एक छोटे (६० मिमी x 15 मिमी) या बड़े (१०० मिमी x 15 मिमी) ग्लास पेट्री डिश में शांत सेटिंग मोम पिघलने से एक मोम विच्छेदन प्लेट बनाओ । विच्छेदन के ?...

<ol>
	<li>Kulhanek, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+national+survey+of+managed+honey+bee+2015-2016+annual+colony+losses+in+the+USA.">A national survey of managed honey bee 2015-2016 annual colony losses in the USA.</a> Journal of Apicultural Research. 56 (4), 328-340 (2017).</li><li>Jacques, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pan-European+epidemiological+study+reveals+honey+bee+colony+survival+depends+on+beekeeper+education+and+disease+control.">A pan-European epidemiological study reveals honey bee colony survival depends on beekeeper education and disease control.</a> PLoS One. 12 (3), e0172591 (2017).</li><li>Zee, R. v. d., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+international+standardised+beekeeper+surveys+of+colony+losses+for+winter+2012-2013:+analysis+of+winter+loss+rates+and+mixed+effects+modelling+of+risk+factors+for+winter+loss.">Results of international standardised beekeeper surveys of colony losses for winter 2012-2013: analysis of winter loss rates and mixed effects modelling of risk factors for winter loss.</a> Journal of Apicultural Research. 53 (1), 19-34 (2014).</li><li>Decourtye, A., Mader, E., Desneux, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Landscape+enhancement+of+floral+resources+for+honey+bees+in+agro-ecosystems.">Landscape enhancement of floral resources for honey bees in agro-ecosystems.</a> Apidologie. 41 (3), 264-277 (2010).</li><li>Vaudo, A. D., Tooker, J. F., Grozinger, C. M., Patch, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+nutrition+and+floral+resource+restoration.">Bee nutrition and floral resource restoration.</a> Current Opinion in Insect Science. 10, 133-141 (2015).</li><li>Snodgrass, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anatomy of the Honey Bee. , (1984).</li><li>Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Biology of the Honey Bee. , (1987).</li><li>Johnson, B. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pollen+quality+of+fresh+and+1-year-old+single+pollen+diets+for+worker+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">Pollen quality of fresh and 1-year-old single pollen diets for worker honey bees (Apis mellifera L).</a> Apidologie. 31 (3), 387-409 (2000).</li><li>DeGrandi-Hoffman, G., Chen, Y., Huang, E., Huang, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+diet+on+protein+concentration,+hypopharyngeal+gland+development+and+virus+load+in+worker+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">The effect of diet on protein concentration, hypopharyngeal gland development and virus load in worker honey bees (Apis mellifera L).</a> Journal of Insect Physiology. 56 (9), 1184-1191 (2010).</li><li>Corby-Harris, V., Snyder, L., Meador, C., Ayotte, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey+bee+(Apis+mellifera)+nurses+do+not+consume+pollens+based+on+their+nutritional+quality.">Honey bee (Apis mellifera) nurses do not consume pollens based on their nutritional quality.</a> PLoS One. 13 (1), e0191050 (2018).</li><li>Corby-Harris, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional,+translational,+and+physiological+signatures+of+undernourished+honey+bees+(Apis+mellifera)+suggest+a+role+for+hormonal+factors+in+hypopharyngeal+gland+degradation.">Transcriptional, translational, and physiological signatures of undernourished honey bees (Apis mellifera) suggest a role for hormonal factors in hypopharyngeal gland degradation.</a> Journal of Insect Physiology. 85, 65-75 (2016).</li><li>Corby-Harris, V., Jones, B. M., Walton, A., Schwan, M. R., Anderson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+markers+of+sub-optimal+nutrition+in+developing+Apis+mellifera+nurse+workers.">Transcriptional markers of sub-optimal nutrition in developing Apis mellifera nurse workers.</a> BMC Genomics. 15, 134 (2014).</li><li>Sagili, R. R., Pankiw, T., Zhu-Salzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+soybean+trypsin+inhibitor+on+hypopharyngeal+gland+protein+content,+total+midgut+protease+activity+and+survival+of+the+honey+bee+(Apis+mellifera+L).">Effects of soybean trypsin inhibitor on hypopharyngeal gland protein content, total midgut protease activity and survival of the honey bee (Apis mellifera L).</a> Journal of Insect Physiology. 51 (9), 953-957 (2005).</li><li>Sagili, R. R., Pankiw, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+protein-constrained+brood+food+on+honey+bee+(Apis+mellifera+L.)+pollen+foraging+and+colony+growth.">Effects of protein-constrained brood food on honey bee (Apis mellifera L.) pollen foraging and colony growth.</a> Behavioral Ecology and Sociobiology. 61 (9), 1471-1478 (2007).</li><li>Hrassnigg, N., Crailsheim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptation+of+hypopharyngeal+gland+development+to+the+brood+status+of+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+colonies.">Adaptation of hypopharyngeal gland development to the brood status of honeybee (Apis mellifera L.) colonies.</a> Journal of Insect Physiology. 44 (10), 929-939 (1998).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9, 671 (2012).</li><li>Jack, C. J., Uppala, S. S., Lucas, H. M., Sagili, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+pollen+dilution+on+infection+of+Nosema+ceranae+in+honey+bees.">Effects of pollen dilution on infection of Nosema ceranae in honey bees.</a> Journal of Insect Physiology. 87, 12-19 (2016).</li><li>Crailsheim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+protein+balance+of+the+honey+bee+worker.">The protein balance of the honey bee worker.</a> Apidologie. 21, 417-429 (1990).</li></ol>

Hypopharyngeal ग्रंथि का आकार आहार में प्रोटीन और पराग की मात्रा के प्रति संवेदनशील है और युवा वयस्क मधुमक्खियों में पौष्टिकता का एक महत्वपूर्ण मार्कर है । यहां, हम काटना और इस ऊतक को मापने के लिए एक सस्ती और reproduci...

शहद मधुमक्खियों कृषि के लिए आवश्यक हैं, क्योंकि वे फसलों है कि मनुष्यों और जानवरों द्वारा भस्म कर रहे हैं की एक किस्म परागण । बहुत ध्यान कॉलोनी घाटे 30-40% के आसपास मंडराना के रूप में हनी मधुमक्खी की आबादी की गिरावट के लिए भुगतान किया गया है संयुक्त राज्य अमेरिका में1 और 10-यूरोप में 15%2,3। उच्च गुणवत्ता चारा के लिए कम उपयोग सहित कई कारकों, की संभावना एक साथ कार्य करने के लिए नकारात्मक प्रभाव शहद मधुमक्खी स्वास्थ्य । Monoculture, सूखा, टिकाऊ मधुमक्खी पालन प्रथाओं, और अंय कारकों विविधता और प्राकृतिक बृहदांत्र4,5के लिए उपलब्ध पराग की राशि में कमी । क्योंकि शहद मधुमक्खियों ने पराग से उनके आहार प्रोटीन और लिपिड के लगभग सभी प्राप्त, पराग के लिए उपयोग कम गंभीर रूप से व्यक्तिगत और कॉलोनी स्वास्थ्य सीमा कर सकते हैं ।
hypopharyngeal ग्रंथियों आंखों और मस्तिष्क6के बीच मधुमक्खी के सिर में स्थित स्रावी संरचनाओं रहे हैं । सामान्य परिस्थितियों में, विकासात्मक और कार्यात्मक पथ ग्रंथियों के दर्पण कि मधुमक्खी वे अंदर स्थित हैं उंर के लगभग 5-10 दिनों में, मधुमक्खी छत्ते में नर्सिंग व्यवहार करता है । इस एक ही समय में, hypopharyngeal ग्रंथियों अपने चोटी के आकार और स्रावी क्षमता तक पहुंचने, चिंता खाना या जेली के प्रमुख प्रोटीन अंश उत्पादन लार्वा और रानी के रूप में अन्य वयस्कों, विकसित करने के लिए खिलाया । इस चोटी के आकार में ग्रंथियों अंगूर का एक गुच्छा के समान है जहां प्रत्येक अंगूर एक असतत पालि acinus (बहुवचन: acini) के रूप में जाना जाता संरचना है । कार्यकर्ता मधुमक्खी उम्र के रूप में और छत्ते में विभिन्न कार्यों पर ले जाता है, hypopharyngeal ग्रंथियों हटना और अमृत7,8में नीचे शर्करा को तोड़ने की तरह, विभिन्न कार्यों पर लेते हैं । hypopharyngeal ग्रंथियों इसलिए मधुमक्खी की उंर और उनकी उंर से जुड़े कार्य के साथ संबंधित हैं ।
नर्स hypopharyngeal ग्रंथि का आकार उनके आहार9,10,11में मात्रा और प्रोटीन की गुणवत्ता के प्रति संवेदनशील है । जब नर्स मधुमक्खियों को अच्छी तरह से पाला जाता है, उनकी ग्रंथियों बड़े होते हैं । जबकि, ग्रंथियों छोटे है जब मधुमक्खी पराग से वंचित है, विशेष रूप से वयस्क विकास के पहले सप्ताह में । आदेश में एक नर्स मधुमक्खी के पोषण की स्थिति का निर्धारण करने के लिए, शोधकर्ताओं ने आम तौर पर hypopharyngeal ग्रंथियों को मापने, सीधे ग्रंथि acinus आकार को मापने के द्वारा या तो11,12,13,14 या प्रोटीन सामग्री15,16 या पूरे सिर जहां वे स्थित है के प्रोटीन सामग्री11 या ताजा वजन17 को मापने के द्वारा । प्रत्येक विधि अपने स्वयं के पेशेवरों और बुरा है । हम ग्रंथि acini को मापने से प्राप्त संकल्प पसंद करते हैं, हालांकि इस विधि दो प्रमुख तरीकों से चुनौतीपूर्ण हो सकता है । पहली चुनौती ग्रंथि को ठीक से पहचानने और काटना करने की है । दूसरा प्रत्येक acinus का एक सटीक उपाय प्राप्त कर रहा है. एक विच्छेदन प्रकाश माइक्रोस्कोप के तहत, ग्रंथियों स्पष्ट या दूधिया सफेद दिखाई देते हैं और acini की सीमाओं को परिभाषित करने के लिए मुश्किल हो सकता है । उपकरण होने बेहतर acini के किनारे को परिभाषित करने के लिए, और सही ग्रंथि माप प्राप्त करने की संभावना को बढ़ाने के लिए शहद मधुमक्खी पोषण का अध्ययन किसी के लिए फायदेमंद है ।
यहां, हम रुचि शोधकर्ताओं दिखाने के लिए कैसे काटना, दाग, छवि, और उपाय hypopharyngeal ग्रंथियों ताकि acinus आकार का सही माप प्राप्त किया जा सकता है । विधि हम वर्णन प्रदान करता है शोधकर्ताओं ने एक आसान, सटीक, और replicable विधि समय की एक अपेक्षाकृत कम अवधि में कई ग्रंथि माप प्राप्त करने के लिए एक बार प्रयोगकर्ता पर्याप्त अभ्यास किया है । एक आत्मविश्वास से सिर्फ एक घंटे में लगभग 10 व्यक्तियों की ग्रंथियों को मापने सकता है । हम दोनों विधि और इन माप प्राप्त करने के लिए आवश्यक सामग्री पर विवरण प्रदान करते हैं । नीचे उल्लिखित तरीकों में से सबसे महत्वपूर्ण पहलुओं उचित विच्छेदन और ग्रंथियों के दाग हैं । हालांकि हम बढ़ाया छवियों पर कब्जा और वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर के साथ acini उपाय, हम वर्तमान तरीकों को आसानी से अंय प्लेटफार्मों18के लिए अनुकूलित किया जा सकता है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cool setting wax</td>
			<td>Grobet USA</td>
			<td>21.450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass petri dish, small</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89000-310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass petri dish, large</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89000-314</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Max Wax Pen</td>
			<td>Eurotool</td>
			<td>PEN-520.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breakable razor blades</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pin vise</td>
			<td>BioQuip</td>
			<td>4845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2A-SA flat/rounded tip forceps</td>
			<td>Rubis/BioQuip</td>
			<td>4522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine point forceps</td>
			<td>Rubis/BioQuip</td>
			<td>4523</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5A-SA super fine point forceps</td>
			<td>Rubis/BioQuip</td>
			<td>4525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mm micro spring scissors</td>
			<td>BioQuip</td>
			<td>4715</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 mm micro spring Vannas scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Depression Slides, Single Cavity</td>
			<td>GSC International</td>
			<td>4-13057-DZ-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablets</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Giemsa stain, modified solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect pins</td>
			<td>ENTO SPHINX S.R.O.</td>
			<td>02.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Applications Suite measurement software</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>any measurement software, including free software, can be used</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring hypopharyngeal gland acinus size in honey bee (apis mellifera) workers

नर्स hypopharyngeal ग्रंथियों कार्यकर्ता और शाही जेली है कि लार्वा और क्वींस विकसित करने के लिए खिलाया जाता है के प्रोटीन अंश का उत्पादन । इन युग्मित ग्रंथियों कि मधुमक्खी के सिर में स्थित है अत्यधिक मात्रा और पराग और पराग विकल्प है कि नर्स मधुमक्खी की खपत की गुणवत्ता के प्रति संवेदनशील हैं । ग्रंथियों छोटे हो जब नर्सों की कमी आहार खिलाया जाता है और बड़े होते है जब वे पूरा आहार खिलाया जाता है । क्योंकि नर्स hypopharyngeal ग्रंथि आकार नर्स पोषण का एक मजबूत संकेतक है, यह आवश्यक है कि उन का अध्ययन शहद मधुमक्खी पोषण पता है कि इन ग्रंथियों को मापने के लिए । यहां, हम विच्छेदन, धुंधला, इमेजिंग के लिए विस्तृत तरीके प्रदान करते हैं, और नर्स मधुमक्खी hypopharyngeal ग्रंथियों को मापने । हम दाग और दाग ऊतक और डेटा है कि ग्रंथि के आकार पर पराग के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया की तुलना उपस्थित । इस विधि का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया है कैसे आहार प्रभावों hypopharyngeal ग्रंथि का आकार लेकिन छत्ता स्वास्थ्य में इन ग्रंथियों की भूमिका को समझने के लिए आगे का उपयोग किया है ।

Hypopharyngeal ग्रंथियों नर्स श्रमिकों से विच्छेदित और के साथ और 60 पर दाग के बिना visualized थे-80X आवर्धन (चित्रा 1) । दाग ऊतक में, यह उचित विपरीत खोजने के लिए पूरी तरह से ध्यान केंद्रित करने और acini के ?...

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Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee Apis mellifera Workers

शहद मधुमक्खी में Hypopharyngeal ग्रंथि Acinus आकार मापने (एपीआई अफ्रिकन) श्रमिकों

Hypopharyngeal ग्रंथि acinus आकार नर्स शहद मधुमक्खी के पोषण का एक मजबूत उपाय है । यहां, हम विच्छेदन, धुंधला, इमेजिंग, और मापने नर्स मधुमक्खी hypopharyngeal ग्रंथि acini के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं ।

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired ...

इस विधि शहद मधुमक्खी पोषण क्षेत्र में महत्वपूर्ण सवालों के जवाब में मदद कर सकते हैं, गरीब पोषण और हाइपोफेरेंगल ग्रंथि विकास और विकास के बीच की कड़ी के बारे में । इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि मधुमक्खी हाइपोफेरेंगल ग्रंथियों को आसानी से दाग, कल्पना और मापने के लिए इसका उपयोग कर सकते हैं। आम तौर पर, इस विधि के लिए नए व्यक्ति संघर्ष करेंगे क्योंकि हाइपोफेरेंगल ग्रंथियों का पता लगाना और दृश्य मार्गदर्शन के बिना विच्छेदन करना मुश्किल हो सकता है।प्रक्रिया शुरू करने से पहले, एक ग्लास पेट्री डिश में पिघला हुआ ठंडा सेटिंग मोम डालें। एक अच्छी तरह से तैयार Giemsa दाग के 20 माइक्रोलीटर जोड़ें, और एक माइक्रोस्कोप स्लाइड के एक आसन्न कुएं में खारा के ५० से १०० माइक्रोलीटर, प्रति नर्स कार्यकर्ता मधुमक्खी संसाधित किया जाएगा । जब मोम सेट किया है, 10 मिलीमीटर माइक्रो स्प्रिंग कैंची का उपयोग करने के लिए पहली मधुमक्खी से सिर को हटाने और संदंश का उपयोग करें, एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप, और एक मोम नक्काशी कलम के लिए सिर सामने की ओर एंबेड मोम विच्छेदन प्लेट में ।आंखों और मुंह में पिन डालें प्लेट के लिए सिर सुरक्षित करने के लिए, और एक पिन शिकंजा में तय एक तेज, तोड़ने वाला रेजर ब्लेड का उपयोग करने के लिए आंखों और चेहरे की थाली के प्रत्येक पक्ष पर मंडलियों के बीच एक दो से तीन मिलीमीटर चीरा बनाने के लिए । धीरे-धीरे चेहरे की प्लेट के नीचे माइक्रो कैंची चलाएं और एंटीना और मस्तिष्क के बीच चलने वाली एंटीना तंत्रिका को काट लें। ठीक संदंश का उपयोग करना, मुंह से चेहरे की प्लेट पकड़ो, और ठीक बिंदु संदंश और एक पिन के साथ मोम के लिए ऊतक चेहरा पक्ष नीचे पिन ।इसके बाद, सिर के खुले खंड पर पीबीएस के 20 माइक्रोलीटर पिपेट करें। हाइपोफेरींजियल ग्रंथियां मोती की एक स्ट्रिंग की तरह दिखती हैं और बरकरार होने पर मस्तिष्क के शीर्ष पर स्थित होती हैं। सुपर फाइन पॉइंट संदंश का उपयोग करके, माइक्रोस्कोपी स्लाइड पर गिमसा दाग में तत्काल विसर्जन के लिए ग्रंथियों में से एक को धीरे से फसल करें।पांच मिनट इनक्यूबेशन के बाद, ग्रंथि को उसी स्लाइड पर खारा के पूल में स्थानांतरित करें, ग्रंथि को सूक्ष्म कैंची के साथ माइक्रोस्कोप के नीचे छोटे टुकड़ों में काट लें। ग्रंथियों को मापने के लिए, प्रकाश माइक्रोस्कोप के लिए माप कार्यक्रम खोलें, और 10 गुना आवर्धन का चयन करें। स्लाइड को माइक्रोस्कोप स्टेज पर रखें और आंखों के टुकड़े के माध्यम से ग्रंथियों का मैन्युअल रूप से पता लगाएं।आवर्धन को 60 से 80 बार बढ़ाएं और नए आवर्धन पर ग्रंथियों के फोकस को मैन्युअल रूप से समायोजित करें। इसके अलावा मॉनिटर पर लाइव छवि पर ग्रंथियों का ध्यान समायोजित करें और छवि नाम और नमूना विवरण को छवि नाम बॉक्स में दर्ज करें। ग्रंथियों की छवि प्राप्त करने के लिए और विश्लेषण टैब के तहत, डिस्प्ले टैब के तहत एरिया टूल और अन-सेलेक्ट वैल्यू का चयन करने के लिए प्राप्त छवि पर क्लिक करें।यूनिट का भी चयन अन-चयनित किया जाएगा। अन्य सभी सेटिंग को डिफ़ॉल्ट करने के लिए सेट करें। असिनी को मापने के लिए, लगातार क्लिक करें या बाएं माउस बटन को पकड़ें, जबकि एक समय में एक असिनस परिधि का पता लगाना जितना संभव हो उतना ध्यान से।एक बार एक ही छवि से acini के सभी मापा गया है चुनें रिपोर्ट बनाएं, पुष्टि है कि उपयुक्त विकल्पों का चयन कर रहे हैं, और निर्यात पर क्लिक करें । फिर रिपोर्ट को उपयुक्त प्रारूप में सहेजें और उचित के रूप में कार्य क्षेत्र और सामग्रियों को साफ करें। अन दागदार ऊतकों में असिनी के उचित विपरीत और परिभाषित किनारों को ढूंढना मुश्किल है।दाग वाले हाइपोफेरींजियल ग्रंथियों में, दाग वाले ऊतक और सफेद पृष्ठभूमि के बीच बेहतर विपरीत के कारण असिनी के किनारे तेज होते हैं। हाइपोफेरींजियल ग्रंथियां मधुमक्खियों में समय के साथ बढ़ती हैं जिन्हें पराग के साथ मिश्रित शहद खिलाया जाता है, मधुमक्खियों की तुलना में जिन्हें अकेले शहद खिलाया जाता है। हाइपोफेरेंगल ग्रंथि का आकार भी प्रदान किए गए पराग के प्रकार के प्रति संवेदनशील है।उदाहरण के लिए, मधुमक्खियों रेगिस्तान या बादाम पराग खिलाया एक समकक्ष आकार की ग्रंथियों का प्रदर्शन, जबकि मधुमक्खियों खिलाया दक्षिण पराग आहार ग्रंथियों कि अकेले शहद से बड़े है मधुमक्खियों खिलाया प्रदर्शन, लेकिन मधुमक्खियों से ग्रंथियों से छोटे या तो बादाम या रेगिस्तान पराग खिलाया । इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, ग्रंथियों को ध्यान से विच्छेदन करना और उन्हें अधिक या कम दाग नहीं करना याद रखना महत्वपूर्ण है। मत भूलना कि Giemsa दाग के साथ काम करना खतरनाक हो सकता है और यह सावधानियां, जैसे दाग को आग की लपटों से दूर रखना, उचित निपटान का उपयोग करना, और दस्ताने और आंखों की सुरक्षा पहनना हमेशा इस प्रक्रिया को करते समय लिया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Environment

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Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

हनी बीस के लिए वीडियो ट्रैकिंग प्रोटोकॉल टू स्क्रीन डिस्ट्रेंट कैमिस्ट्रीज़

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

An Ultra-clean Multilayer Apparatus for Collecting Size Fractionated Marine Plankton and Suspended Particles

आकार Fractionated समुद्री प्लवक और निलंबित कणों का संग्रह करने के लिए एक अल्ट्रा साफ बहुपरत उपकरण

The distributions of many trace elements in the ocean are strongly associated with the growth, death, and re-mineralization of marine plankton and those ...

Experimental Study of the Relationship Between Particle Size and Methane Sorption Capacity in Shale

शेल में कण आकार और मीथेन Sorption क्षमता के बीच संबंधों का प्रायोगिक अध्ययन

The amount of adsorbed shale gas is a key parameter used in shale gas resource evaluation and target area selection, and it is also an important standard ...

Combined Size and Density Fractionation of Soils for Investigations of Organo-Mineral Interactions

संयुक्त आकार और Organo-खनिज बातचीत की जांच के लिए मिट्टी के घनत्व अंश

Combined size and density fractionation (CSDF) is a method used to physically separate soil into fractions differing in particle size and mineralogy. CSDF ...

Measuring the Shape and Size of Activated Sludge Particles Immobilized in Agar with an Open Source Software Pipeline

आकार और सक्रिय कीचड़ कणों के आकार को मापने के एक खुला स्रोत सॉफ्टवेयर पाइपलाइन के साथ आगर में मैटीरियल

Experimental bioreactors, such as those treating wastewater, contain particles whose size and shape are important parameters. For example, the size and ...