Name: a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

Dit werk wordt gefinancierd door nationale gezondheids- en medische onderzoek Raad van Australië projectsubsidie (1046203), Australisch onderzoek Raad toekomst Fellowship (FT130100338).

Alle experimentele procedures werden uitgevoerd volgens de Australische Code of Practice voor de zorg en het gebruik van dieren voor wetenschappelijke doeleinden, ingesteld door de National Health and Medical Research Council in Australië. Ethiek goedkeuring was verkregen van de Howard Florey Instituut dier ethische Commissie (goedkeuring nummer 13-044-UM en 13-068-UM voor ratten en muizen, respectievelijk).
1. de intraoculaire druk meting bij bewuste ratten
<ol><li>Het laboratorium rebound...

<ol>
	<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage.">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li><li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects.">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li><li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats.">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).</li><li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells.">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li><li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres.">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li><li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres.">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li><li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid.">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li><li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye.">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li><li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse.">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li><li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma.">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li><li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+improvement+following+glaucoma+surgery:+a+case+report.">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).</li><li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma.">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li><li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma.">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ARVO+abstract+number+3696+-+B0043.">ARVO abstract number 3696 - B0043.</a> annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li><li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats.">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels.">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li><li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hypertension+is+not+protective+against+chronic+IOP+elevation+in+a+rodent+model.">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure.">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li><li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats.">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells:+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas.">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li><li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture.">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li><li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation.">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic &amp; Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li><li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice.">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).</li><li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy.">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).</li></ol>

De circumlimbal hechtdraad is een nieuw model van chronische oculaire hypertensie. Naast de studies waaruit de representatieve resultaten afkomstig16,18 zijn, is deze diermodel gebruikt in een aantal recente studies15,23,24,25 ,26. Vergelijking over deze vorige verslagen blijkt dat de methode herhaalb...

Dierlijke modellen bieden dat een belangrijk platform voor laboratorium onderzoek van cellulaire processen onderliggende glaucoom pathogenese, evenals over het evalueren van potentiële therapeutische interventies. Verschillende afleidbare modellen zijn ontwikkeld voor het produceren van aanhoudende intraoculaire druk (IOP) hoogte, de belangrijkste risicofactor voor glaucoom. Methoden die zijn toegepast te verheffen IOP omvatten: hypertonic zoute injectie in episcleral1, photocoagulation van de laser van het trabecular gevlochten2 of van de limbal aderen3, en intracameral injectie van stoffen zoals veins Ghost rode bloedcellen4, microbeads5,6 en visco agenten7. Elke benadering heeft zijn voordelen en beperkingen.
Een goed model voor glaucoom moet het nabootsen van het ziekteproces, met minimale complicatie zoals trauma, ontsteking en media dekking. Deze complicaties worden vaak geassocieerd met de procedures die zijn gebruikt voor het opwekken van IOP hoogte en interpretatie van resultaten kunnen verwarren. Bijvoorbeeld, heeft paracentesis van de voorste kamer, zelfs wanneer vreemde stoffen worden niet ingevoerd, aangetoond dat veroorzaken trauma en ontsteking die niet representatief zijn voor de typische glaucomatous verandering8,9. Naast het belang van het vermijden van de ontsteking, vergemakkelijkt behoud van de optische helderheid in vivo imaging en electrofysiologie te controleren van de progressie van de ziekte. Hoewel het onduidelijk in hoeverre deze complicaties kunnen gevolgen hebben voor onderzoek van de ziekte, is het mogelijk beter om te voorkomen dat het oog doordringen tijdens model inductie. De circumlimbal hechtdraad aanpak vermijdt penetratie van de hele wereld en vergemakkelijkt in vivo longitudinale beoordeling van retinale structuur en functie. Nog belangrijker, verschilt dit model van voorgaande in zijn hoedanigheid van terugkomen IOP basislijnwaarden door verwijdering van de hechtdraad wanneer dit nodig is. IOP normalisatie kunnen nuttig zijn voor de studie van de cellulaire en moleculaire correlaten van omkeerbare en onomkeerbare ganglion cel letsel10,11,12,13,14.
Dit artikel richt zich op de techniek voor het model inductie. Karakterisering van retinale letsel veroorzaakt door dit model bij ratten en muizen vindt u elders uitvoeriger15,16,17,18,19.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:876px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">normal saline</td>
			<td style="width:219px;">Baxter International Inc</td>
			<td style="width:135px;">AHB1323</td>
			<td style="width:365px;">Maintain corneal hydration during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Orion Laboratories</td>
			<td style="width:135px;">27411, 80085</td>
			<td style="width:365px;">Disinfection of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Isoflurane 99.9%</td>
			<td style="width:219px;">Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td style="width:135px;">CAS 26675-46-7</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">ocular lubricant</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">1618611</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Needle holder (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">555419NT</td>
			<td style="width:365px;">To hold needle during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">CAS 5875-06-9</td>
			<td style="width:365px;">Topical ocular analgesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Scissors (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">501232</td>
			<td style="width:365px;">To cut excessive suture stump during ligation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Surgical drape</td>
			<td style="width:219px;">Vital Medical Supplies</td>
			<td style="width:135px;">GM29-612EE</td>
			<td style="width:365px;">Ensure sterile enviornment during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for rats (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">151109</td>
			<td style="width:365px;">8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for mice (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">160905</td>
			<td style="width:365px;">10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Tweezers (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">500342</td>
			<td style="width:365px;">Manipulate tissues during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">rebound tonometer</td>
			<td style="width:219px;">TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland</td>
			<td style="width:135px;">TV02</td>
			<td style="width:365px;">for intraocular pressure monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice

De circumlimbal hechtdraad is een techniek om experimentele glaucoom bij knaagdieren door chronisch verheffen intraoculaire druk (IOP), een bekende risicofactor voor glaucoom. Dit protocol toont een geleidelijke gids op deze techniek in C57BL/6 muizen en ratten van de lange Evans. Onder algemene verdoving, wordt een "tas-string" hechtdraad toegepast op het bindvlies, rond de evenaar en achter de limbus van het oog. De collega oog dient als een onbehandeld controlegewas. Gedurende de looptijd van onze studie, die een periode van 8 weken voor ratten en 12 weken voor muizen was, bleef IOP verhoogde, zoals regelmatig gemeten door rebound tonometry in bewuste dieren zonder topische verdoving. In beide soorten toonde de sutured ogen electroretinogram functies consistent met preferentiële innerlijke retinale dysfunctie. Optische coherentie tomografie toonde selectieve dunner worden van de retinale zenuw vezel laag. Histologie van het netvlies van de rat in doorsnede gevonden verminderd celdichtheid in de ganglion cellaag, maar geen verandering in de andere cellulaire lagen. Verkleuring van de flat gemonteerde muis retinae met een specifieke marker voor ganglion cel (RBPMS) bevestigd ganglion cel verlies. De circumlimbal hechtdraad is een eenvoudig, minimaal invasieve en rendabele manier voor het opwekken van oculaire hypertensie die tot de ganglion cel letsel bij zowel ratten en muizen leidt.

De volgende resultaten in ratten muizen en18 16 eerder gemeld en zijn hier samengevat. De circumlimbal hechtdraad geproduceerd een vergelijkbaar patroon IOP hoogte bij ratten en muizen (Figuur 2). Een korte piek van IOP, tot 58.1 ± 2,7 mmHg bij ratten en 38.7 ± 2.2 mmHg bij muizen, bleek onmiddellijk na de ingreep van de hechtdraad. Bij ratten, IOP omvang geleidelijk verminderd na verloop van tijd die 44 ± 6 ...

Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Een Model van glaucoom veroorzaakt door Circumlimbal hechtdraad bij ratten en muizen

Chronische oculaire hypertensie wordt geïnduceerd door het toepassen van een circumlimbal hechtdraad bij ratten en muizen, wat leidt tot functionele en structurele verslechtering van de retinale peesknoopcellen overeenstemming met glaucoom.

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Deze aanpak biedt een reproduceerbare en minimaal invasieve manier om IOP voor langere tijd te verheffen. Dit zal ons helpen glaucoom beter te begrijpen. Een voordeel van deze techniek is dat de IOP-verhoging gemakkelijk omkeerbaar is, waardoor onderzoekers de mogelijkheden van de ogen kunnen onderzoeken om te herstellen van chronische drukverhoging.Een visuele demonstratie van deze methode is van cruciaal belang als hechten en binden van een spanning knoop zijn moeilijk te leren van het lezen van een manuscript alleen. Om fijn te helpen, raden we aan dat een nieuwe aan deze techniek, de praktijk hechten onder microscoop. Begin met het inwisseren van de wakkere rat in een stuk zachte doek om het dier te kalmeren.Houd de romp voorzichtig in één hand, waarbij de dieren weer tegen de borst van de onderzoekers rusten en het hoofd en de nek blootleggen. Gebruik de andere hand om de rebound tonometer in de buurt van de ratten oog te brengen, zodat het puntje van de interoculaire sonde is ongeveer twee tot drie millimeter afstand, en loodrecht op de hoornvlies top. Wacht een paar seconden tot de rat kalmeert en druk vervolgens één keer op de meetknop.Let op de bovenkant van de IOP sonde zachtjes raakte de hoornvlies apex een keer, en hoor de rebound tonometer pieptoon. Herhaal na één of twee seconden de meting. Maak in totaal 10 metingen om een gemiddelde IOP-waarde af te leiden voor het tijdspunt.Reset de tonometer na de vijfde lezing. Zodra je monitoring, meet IOP in hetzelfde moment van de dag. En onder consistentie lichtomstandigheden, om variatie te minimaliseren als gevolg van een IOP-cyclus.Bedek het verdoofde knaagdier met een steriel fenestrated chirurgisch laken, waardoor het oog wordt gehecht. Vervolgens, na het waarborgen van een chirurgisch vlak van anesthesie, gebruik 7-10 nylon hechting om een portemonnee-string hechting uit te voeren op de bulbar conjunctiva over de hele wereld, door het weven van de 7-10 hechting parallel en 2 milliliter achterste aan de limbus. Zorg ervoor dat hij zijn sclera niet binnendringt.Een plotselinge pupille dilatatie tijdens de chirurgische ingreep geeft aan dat de sclera waarschijnlijk is doorgedrongen. Veranker de hechting op de ratten conjunctiva met behulp van vijf tot zes ankerpunten. Vermijd directe compressie op de belangrijkste episclerale aderen door het rijgen van de hechting onder het bindvlies bij de kruising van deze aderen.Maak de handtas-snaren hechting door het binden van een slip knoop. Bind dan een simpele knoop en houd hem los. Om een te hoge posto chirurgische IOP-piek te voorkomen, moet u de IOP meten met een assistent.Als de IOP te hoog blijkt te zijn, pas dan de slipknot aan door de spanning aan één uiteinde van de hechting gedeeltelijk los te laten. Nadat de gewenste IOP van 30 tot 60 millimeter kwik is bereikt, bind de tweede knoop af met behoud van een continue trekkracht aan het einde van die hechting. Nadat de tweede knoop is aangedraaid, trim de uiteinden van de hechting om een vreemd lichaamsgevoel te minimaliseren.Controleer het dier tijdens het herstel van algemene anesthesie. Bij het werken met muizen, plaats een 10-0 nylon hechting op een millimeter achterste aan de limbus. Gebruik vier tot vijf ankerpunten om de hechting op het bindvlies van de muis te verankeren.Maak vervolgens de handtas-string hechting vast door een slipknot te binden. Na het binden van een eenvoudige knoop en het houden van het los, meet de IOP met de hulp van een assistent. Om lange termijn IOP en visie te ondersteunen, is het belangrijk om ervoor te zorgen dat de knoop strak genoeg is bij het vastmaken van de portemonnee-string hechting.Hier laten we zien hoe je een significante knoop op een modeloog knopen, om genoeg spanning te genereren. Nadat de gewenste IOP is bereikt, bind de tweede knoop af, met behoud van een continue trekkracht aan dat uiteinde van de hechting. In deze grafiek worden individuele oculaire hypertensieve ogen weergegeven door rode symbolen en controleogen door grijze symbolen.De circumlimbal hechting verhoogde intraoculaire druk gedurende 8 weken bij ratten. IOP bleef onveranderd in contralaterale controleogen. De positieve scototop drempel respons, weerspiegelt retinale ganglion cel gezondheid, en bleek te worden verminderd in de oculaire hypertensieve ogen aangegeven door de rode lijn;ten opzichte van de controle ogen aangegeven door de zwarte lijn.Er was ook een kleine vermindering van de ERG a en b-golf, die waarschijnlijk een milde disfunctie van de foto receptoren en bipolaire cellen weerspiegelen, respectievelijk. Het grootste tekort werd echter gevonden in de positieve scototopdrempelrespons. Bevestiging van preferentiële ganglion cel disfunction na de milde, chronische IOP verhoging.Tijdens een poging tot deze procedure is het belangrijk om te onthouden om de slipknot aan te scherpen met voldoende innerlijke compressie. De meest voorkomende reden dat IOP niet te stijgen op de lange termijn, is dat de knoop wordt losgemaakt na verloop van tijd. Na deze procedure, alle wijziging zoals hechting verwijdering, om intraoculaire druk te normaliseren, kan worden uitgevoerd om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals of regelmatige ganglion cellen kunnen herstellen van sustain IOP verhoging.En wat zijn de mechanismen die dit herstel inhouden?

Research

JoVE Journal

Medicine

The Spared Nerve Injury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

The Spared Nerve Injury SNI Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

De Gespaard Nerve Injury (SNI) Model van Induced mechanische allodynie in Muizen

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Cardiac Stress Test geïnduceerd door dobutamine en bewaakt door hartkatheterisatie in Muizen

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Scheenbeen Nerve doorsnijding - Een gestandaardiseerd model voor denervatie-geïnduceerde Skeletal Muscle Atrofie in Muizen

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimentele Glaucoom geïnduceerd door oculaire injectie van Magnetic microsferen

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Photothrombosis-geïnduceerde focale ischemie als een model van Spinal Cord Injury in Muizen

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

Een Magnetic Microbead occlusie Model voor het induceren van oculaire hypertensie-Dependent Glaucoom in Muizen

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoom-inducerende Procedure in een<em&gt; In Vivo</em&gt; Rat Model en Whole-mount Retina Voorbereiding

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regeneratieve therapie door Suprachoroidal cel Autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp In Vivo verslag

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Een Model van de pleurale effusie bij ratten door intratracheale instillatietest van polyacrylaat/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Murine cervicaal aorta transplantatie model met behulp van een gemodificeerde niet-hecht manchet techniek

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...