Name: a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

Questo lavoro è finanziato dalla National Health e contributo al progetto Medical Research Council of Australia (1046203), Australian Research Consiglio futuro Fellowship (FT130100338).

Tutte le procedure sperimentali sono state condotte secondo il codice di pratica australiana per la cura e l'uso degli animali per fini scientifici, l'impostazione del National Health and Medical Research Council in Australia. Approvazione etica è stata ottenuta dal comitato di etica animale di Howard Florey Institute (approvazione numero 13-044-UM e 13-068-UM per ratti e topi, rispettivamente).
1. misurazione della pressione intraoculare in ratti coscienti
<ol><li>Impostare il tonometro ri...

<ol>
	<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage.">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li><li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects.">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li><li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats.">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).</li><li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells.">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li><li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres.">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li><li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres.">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li><li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid.">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li><li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye.">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li><li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse.">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li><li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma.">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li><li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+improvement+following+glaucoma+surgery:+a+case+report.">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).</li><li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma.">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li><li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma.">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ARVO+abstract+number+3696+-+B0043.">ARVO abstract number 3696 - B0043.</a> annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li><li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats.">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels.">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li><li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hypertension+is+not+protective+against+chronic+IOP+elevation+in+a+rodent+model.">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure.">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li><li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats.">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells:+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas.">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li><li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture.">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li><li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation.">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic &amp; Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li><li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice.">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).</li><li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy.">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).</li></ol>

La sutura di circumlimbal è un nuovo modello di ipertensione oculare cronica. Oltre agli studi da cui i risultati rappresentativi sono provenienza16,18, questo modello animale è stato utilizzato in una serie di recenti studi15,23,24,25 ,26. Confronto tra questi rapporti precedenti dimostra che il me...

Modelli animali forniscono che un'importante piattaforma per la ricerca del laboratorio di cellulare processi sottostanti patogenesi del glaucoma, nonché valutare potenziali interventi terapeutici. Diversi modelli viscoelastici sono stati sviluppati per produrre elevazione sostenuta pressione intraoculare (IOP), il più importante fattore di rischio per il glaucoma. Metodi che sono stati applicati per elevare la IOP includono: iniezione salina ipertonica in episcleral vene1, photocoagulation del laser del trabecolato2 o delle vene limbal3e l'iniezione intracameral di sostanze come fantasma rosso globuli4, microsfere5,6 e viscoelastico agenti7. Ogni approccio presenta vantaggi e limitazioni.
Un buon modello per il glaucoma dovrebbe imitare il processo di malattia, con la minima complicazione come opacities trauma, infiammazione e media. Queste complicazioni sono associate frequentemente con le procedure utilizzate per indurre l'altezza dello IOP e possono confondere l'interpretazione dei risultati. Ad esempio, paracentesi della camera anteriore, anche quando non vengono introdotte sostanze estranee, sono stato indicato per causare il trauma e l'infiammazione che non è rappresentativo di cambiamento glaucomatoso tipico8,9. Oltre all'importanza di evitare l'infiammazione, mantenere chiarezza ottica facilita in vivo imaging ed elettrofisiologia per monitorare la progressione della malattia. Anche se non è chiaro in che misura queste complicazioni possono interessare le indagini di malattia, può essere meglio evitare penetrante dell'occhio durante l'induzione del modello. L'approccio di sutura circumlimbal evita la penetrazione del globo e facilita in vivo valutazione longitudinale della struttura retinica e della funzione. Ancora più importante, questo modello si differenzia da quelle precedenti nella sua capacità di restituire IOP ai valori basali di rimozione della sutura quando richiesto. Normalizzazione di IOP può essere utile per studiare il cellulare e correlati molecolari del ganglio reversibile e irreversibile delle cellule ferita10,11,12,13,14.
Questo articolo si concentra sulla tecnica per l'induzione del modello. Caratterizzazione della lesione retinica indotta da questo modello nei ratti e nei topi può essere trovato più dettagliatamente altrove15,16,17,18,19.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:876px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">normal saline</td>
			<td style="width:219px;">Baxter International Inc</td>
			<td style="width:135px;">AHB1323</td>
			<td style="width:365px;">Maintain corneal hydration during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Orion Laboratories</td>
			<td style="width:135px;">27411, 80085</td>
			<td style="width:365px;">Disinfection of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Isoflurane 99.9%</td>
			<td style="width:219px;">Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td style="width:135px;">CAS 26675-46-7</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">ocular lubricant</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">1618611</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Needle holder (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">555419NT</td>
			<td style="width:365px;">To hold needle during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">CAS 5875-06-9</td>
			<td style="width:365px;">Topical ocular analgesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Scissors (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">501232</td>
			<td style="width:365px;">To cut excessive suture stump during ligation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Surgical drape</td>
			<td style="width:219px;">Vital Medical Supplies</td>
			<td style="width:135px;">GM29-612EE</td>
			<td style="width:365px;">Ensure sterile enviornment during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for rats (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">151109</td>
			<td style="width:365px;">8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for mice (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">160905</td>
			<td style="width:365px;">10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Tweezers (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">500342</td>
			<td style="width:365px;">Manipulate tissues during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">rebound tonometer</td>
			<td style="width:219px;">TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland</td>
			<td style="width:135px;">TV02</td>
			<td style="width:365px;">for intraocular pressure monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice

La sutura di circumlimbal è una tecnica per indurre glaucoma sperimentale nei roditori cronicamente elevando la pressione intraoculare (IOP), un ben noto fattore di rischio per il glaucoma. Questo protocollo dimostra una guida dettagliata su questa tecnica a lungo Evans ratti e topi C57BL/6. In anestesia generale, una "" sutura viene applicata sul conjunctiva, intorno all'equatore e dietro il limbus dell'occhio. Il collega occhio serve come controllo non trattato. Nel corso della durata del nostro studio, che era un periodo di 8 settimane per ratti e 12 settimane per i topi, IOP è rimanere elevato, come misurato regolarmente di tonometria di rimbalzo in animali coscienti senza anestesia topica. In entrambe le specie, gli occhi suturati ha mostrato le caratteristiche dell'elettroretinogramma costanti con disfunzione retinica interna preferenziale. Tomografia ottica di coerenza ha mostrato selettiva assottigliamento dello strato di fibre nervose retiniche. L'istologia della retina del ratto in sezione trasversale trovato ridotta densità delle cellule nello strato delle cellule del ganglio, ma nessun cambiamento in altri strati cellulari. Macchiatura delle retine di piatto-montato del mouse con un marker specifico di cellule del ganglio (trasformante) ha confermato la perdita delle cellule del ganglio. La sutura di circumlimbal è un semplice, minimamente invasiva e conveniente modo per indurre ipertensione oculare che porta alla lesione delle cellule del ganglio in topi e ratti.

I seguenti risultati in ratti18 e topi16 precedentemente sono stati segnalati e sono riassunti qui. La sutura circumlimbal ha prodotto un modello simile dell'altezza dello IOP nei ratti e nei topi (Figura 2). Una breve impennata IOP, fino a 58,1 ± 2.7 mmHg in ratti e 38,7 ± 2.2 mmHg nei topi, è stata trovata subito dopo la procedura di sutura. Nei ratti, IOP grandezza ridotta gradualmente nel tempo per essere...

Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Un modello del Glaucoma indotto da sutura Circumlimbal nei ratti e nei topi

Ipertensione oculare cronica è indotta applicando una sutura circumlimbal in ratti e topi, che conduce al deterioramento strutturale e funzionale delle cellule ganglionari retiniche coerente con il glaucoma.

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Questo approccio fornisce un modo riproducibile e minimamente invasivo per elevare IOP per lunghi periodi di tempo. Questo ci aiuterà a capire meglio il glaucoma. Un vantaggio di questa tecnica, è che l'elevazione IOP è facilmente reversibile, permettendo ai ricercatori di indagare le capacità degli occhi di riprendersi dall'elevazione cronica della pressione.Una dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale in quanto è difficile suturare e legare un nodo di tensione dalla sola lettura di un manoscritto. Per aiutare bene, si consiglia di uno nuovo a questa tecnica, praticare la sutura al microscopio. Inizia fasciando il topo sveglio in un pezzo di panno morbido per calmare l'animale.Tenere delicatamente il busto in una mano, con gli animali tornati appoggiati contro il petto degli investigatori, ed esporre la testa e il collo. Utilizzare l'altra mano per portare il tonometro di rimbalzo vicino all'occhio dei ratti, in modo che la punta della sonda interoculare sia a circa due o tre millimetri di distanza e perpendicolare all'apice corneale. Attendere alcuni secondi affinché il topo si calmi, quindi premere il pulsante di misurazione una volta.Osservare la parte superiore della sonda IOP colpire delicatamente l'apice corneale una volta e sentire il segnale acustico del tonometro a rimbalzo. Dopo uno o due secondi, ripetere la misurazione. Effettuare un totale di 10 misurazioni per ricavare un valore IOP medio per il punto di tempo.Reimpostare il tonometro dopo la quinta lettura. Una volta che si sta monitorando, misurare IOP nella stessa ora del giorno. E in condizioni di illuminazione di consistenza, per ridurre al minimo le variazioni dovute a un ciclo IOP.Coprire il roditore anestetizzato con un drappo chirurgico fenestrato sterile, esponendo l'occhio da suturare. Successivamente, dopo aver garantendo un piano chirurgico di anestesia, utilizzare 7-10 sutura di nylon per eseguire una sutura a corda della borsa sulla congiuntiva bulbare in tutto il mondo, tessendo il parallelo di sutura 7-10 e 2 millilitri posteriori al limbo. Fai attenzione a non penetrare nella sua sclera.Un'improvvisa dilatazione pupillare durante la procedura chirurgica indica che la sclera è stata probabilmente penetrata. Ancorare la sutura sulla congiuntiva dei ratti usando da cinque a sei punti di ancoraggio. Evitare la compressione diretta sulle principali vene episclerali infilando la sutura sotto la congiuntiva all'incrocio di queste vene.Fissare la borsa-corde sutura legando un nodo slip. Quindi legare un semplice nodo e tenerlo sciolto. Per evitare un picco IOP post-chirurgico eccessivamente elevato, avere un assistente misurare l'IOP.Se l'IOP è troppo alto, regolare lo slipknot rilasciando parzialmente la tensione su un'estremità della sutura. Dopo aver raggiunto l'IOP desiderato di 30-60 millimetri di mercurio, legare il secondo nodo mantenendo una forza di trazione continua all'estremità di quella sutura. Dopo che il secondo nodo è stato stretto, tagliare le estremità della sutura per ridurre al minimo qualsiasi sensazione di corpo estraneo.Monitorare l'animale durante il recupero dall'anestesia generale. Quando si lavora con i topi, posizionare una sutura di nylon 10-0 a un millimetro posteriore al limbo. Utilizzate da quattro a cinque punti di ancoraggio per ancorare la sutura sulla congiuntiva del mouse.Quindi fissare la borsa-stringa sutura legando uno slipknot. Dopo aver legato un semplice nodo e tenerlo sciolto, misurare l'IOP con l'aiuto di un assistente. Per sostenere l'IOP e la visione a lungo termine, è importante assicurarsi che il nodo sia abbastanza stretto quando si fissa la sutura a corda della borsa.Qui dimostriamo come legare un nodo significativo su un occhio modello, al fine di generare abbastanza tensione. Una volta raggiunto l'IOP desiderato, legare il secondo nodo, mantenendo una forza di trazione continua su quell'estremità della sutura. In questo grafico i singoli occhi ipertesi oculari sono rappresentati da simboli rossi e controllano gli occhi da simboli grigi.La sutura circumlimbale ha aumentato la pressione intraoculare per 8 settimane nei ratti. IOP è rimasto invariato negli occhi di controllo contralaterali. La risposta positiva alla soglia scotopica, riflette la salute delle cellule gangliari retiniche, ed è risultato essere ridotto negli occhi ipertesi oculari indicati dalla linea rossa;rispetto agli occhi di controllo indicati dalla linea nera.C'è stata anche una piccola riduzione dell'onda ERG a e b, che probabilmente rifletterà una lieve disfunzione dei recettori fotografici e delle cellule bipolari, rispettivamente. Il deficit maggiore, tuttavia, è stato riscontrato nella risposta positiva alla soglia scotopica. Conferma della disfunzione preferenziale delle cellule gangliari a seguito dell'elevazione lieve e cronica dell'IOP.Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di stringere lo slipknot con un'adeguata compressione verso l'interno. La ragione più comune per cui IOP non riesce ad aumentare a lungo termine è che il nodo si allenta nel tempo. Seguendo questa procedura, tutte le modifiche come la rimozione della sutura, per normalizzare la pressione intraoculare, possono essere eseguite per rispondere a domande aggiuntive come se le cellule gangliari regolari possono recuperare dall'elevazione IOP sustain.E quali sono i meccanismi che comportano questa ripresa?

Research

JoVE Journal

Medicine

The Spared Nerve Injury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

The Spared Nerve Injury SNI Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

Risparmiato il Nerve pregiudizio (SNI) Modello di Allodinia meccanica indotta nei topi

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared ...

Ricerca

Medicina

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Stress Test cardiaca indotta da dobutamina e monitorato da cateterizzazione cardiaca nei topi

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Resezione del nervo tibiale - Un modello standardizzato per Denervation indotta scheletrico atrofia muscolare nei topi

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimental Glaucoma indotta da iniezione oculare di microsfere magnetiche

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Photothrombosis-indotta ischemia focale come un modello di lesioni del midollo spinale nei topi

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

Un magnetica microperla occlusione modello per indurre ipertensione oculare-Dependent Glaucoma nei topi

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma inducono Procedura in un<em&gt; In Vivo</em&gt; Modello di ratto e tutto il montaggio Retina Preparazione

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

La terapia rigenerativa da Suprachoroidal cella autoinnesto nella degenerazione maculare senile secca: Report preliminare In Vivo

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Un modello di effusione pleurica in ratti mediante instillazione intratracheale di poliacrilato/nanosilice

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Modello di trapianto aortico cervicale murine utilizzando una tecnica di manette non sutura modificata

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...