Name: a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

Este trabalho é financiado pela National Health e Conselho de pesquisa médica da Austrália projeto grant (1046203), bolsa de futuro de Conselho de pesquisa australiano (FT130100338).

Todos os procedimentos experimentais foram realizados de acordo com o Australian código de práticas para o cuidado e o uso de animais para fins científicos, definida pelo Conselho de pesquisa médica e nacional de saúde na Austrália. Aprovação ética foi obtida do Comitê de ética Howard Florey Institute Animal (aprovação número 13-044-hum e 13-068-hum para ratos e ratos, respectivamente).
1. medição de pressão intra-ocular em ratos conscientes
<ol><li>Ajuste o tonometer de reb...

<ol>
	<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage.">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li><li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects.">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li><li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats.">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).</li><li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells.">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li><li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres.">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li><li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres.">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li><li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid.">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li><li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye.">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li><li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse.">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li><li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma.">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li><li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+improvement+following+glaucoma+surgery:+a+case+report.">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).</li><li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma.">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li><li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma.">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ARVO+abstract+number+3696+-+B0043.">ARVO abstract number 3696 - B0043.</a> annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li><li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats.">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels.">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li><li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hypertension+is+not+protective+against+chronic+IOP+elevation+in+a+rodent+model.">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure.">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li><li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats.">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells:+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas.">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li><li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture.">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li><li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation.">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic &amp; Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li><li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice.">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).</li><li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy.">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).</li></ol>

A sutura de circumlimbal é um novo modelo de hipertensão ocular crônica. Além dos estudos, do qual os resultados representativos são oriundos de16,18, este modelo animal tem sido utilizado em uma série de recentes estudos15,23,24,25 ,26. Comparação entre estes relatórios anteriores mostra que...

Modelos animais fornecem que uma plataforma importante para a investigação do laboratório de celular processos subjacentes patogênese de glaucoma, bem como avaliar possíveis intervenções terapêuticas. Foram desenvolvidos vários modelos inducible para produzir elevação sustentada da pressão intra-ocular (Pio), o mais importante fator de risco para o glaucoma. Métodos que foram aplicados para elevar o IOP incluem: injeção salina hipertônica no episcleral veias1, fotocoagulação laser da malha trabecular2 ou do estroma veias3e injeção intracameral de substâncias tais como fantasma vermelho glóbulos4, microbeads5,6 e viscoelástico agentes7. Cada abordagem tem suas vantagens e limitações.
Um bom modelo para o glaucoma deve imitar o processo da doença, com mínima complicação como trauma, inflamação e mídia opacidades. Estas complicações são frequentemente associadas com os procedimentos utilizados para induzir a elevação do IOP e podem confundir a interpretação dos resultados. Por exemplo, paracentese de câmara anterior, mesmo quando substâncias estranhas não são introduzidas, tem demonstrado causar trauma e inflamação que não é representativa de típica mudança glaucomatous8,9. A importância de evitar a inflamação, além de manter a claridade ótica facilita na vivo imaging e Eletrofisiologia para monitorar a progressão da doença. Embora não está claro em que medida estas complicações podem afetar as investigações de doença, pode ser melhor evitar penetrar o olho durante a indução de modelo. A abordagem de sutura circumlimbal evita a penetração do globo e facilita na vivo avaliação longitudinal da estrutura da retina e função. Mais importante, este modelo difere dos anteriores em sua capacidade de retornar o IOP para valores basais remoção da sutura quando necessário. Normalização de IOP pode ser útil para estudar o celular e moleculares correlações do gânglio reversível e irreversível celulares lesão10,11,12,13,14.
Este artigo centra-se na técnica de indução de modelo. Caracterização da lesão retiniana induzida por este modelo em ratos e camundongos pode ser encontrada em maior detalhe em outro lugar15,16,17,18,19.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:876px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">normal saline</td>
			<td style="width:219px;">Baxter International Inc</td>
			<td style="width:135px;">AHB1323</td>
			<td style="width:365px;">Maintain corneal hydration during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Orion Laboratories</td>
			<td style="width:135px;">27411, 80085</td>
			<td style="width:365px;">Disinfection of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Isoflurane 99.9%</td>
			<td style="width:219px;">Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td style="width:135px;">CAS 26675-46-7</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">ocular lubricant</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">1618611</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Needle holder (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">555419NT</td>
			<td style="width:365px;">To hold needle during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">CAS 5875-06-9</td>
			<td style="width:365px;">Topical ocular analgesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Scissors (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">501232</td>
			<td style="width:365px;">To cut excessive suture stump during ligation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Surgical drape</td>
			<td style="width:219px;">Vital Medical Supplies</td>
			<td style="width:135px;">GM29-612EE</td>
			<td style="width:365px;">Ensure sterile enviornment during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for rats (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">151109</td>
			<td style="width:365px;">8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for mice (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">160905</td>
			<td style="width:365px;">10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Tweezers (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">500342</td>
			<td style="width:365px;">Manipulate tissues during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">rebound tonometer</td>
			<td style="width:219px;">TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland</td>
			<td style="width:135px;">TV02</td>
			<td style="width:365px;">for intraocular pressure monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice

A sutura de circumlimbal é uma técnica para induzir o glaucoma experimental em roedores por cronicamente elevar a pressão intra-ocular (Pio), um conhecido fator de risco para o glaucoma. Este protocolo demonstra um guia passo a passo sobre essa técnica no longo Evans ratos e camundongos C57BL/6. Sob anestesia geral, uma "" sutura em bolsa é aplicada na conjuntiva, ao redor do Equador e para trás ao limbo do olho. O olho companheiro serve como um controle não tratado. Ao longo da duração do nosso estudo, que foi um período de 8 semanas para ratos e 12 semanas para ratos, IOP manteve-se elevado, medida regularmente pelo tonometria de rebote em animais conscientes sem anestesia tópica. Em ambas as espécies, os olhos suturados mostraram electroretinogram características consistentes com disfunção da retina interna preferencial. Tomografia de coerência óptica mostrou desbaste seletivo da camada retinal da fibra do nervo. Histologia da retina rato na secção encontrada reduzida densidade de células na camada de células ganglionares, mas nenhuma mudança nas outras camadas celulares. Coloração de retinae rato apartamento montado com um marcador específico de células ganglionares (RBPMS) confirmou a perda de células ganglionares. A sutura de circumlimbal é um simples, minimamente invasiva e econômica maneira de induzir hipertensão ocular que leva à lesão de células ganglionares em ratos e camundongos.

Os seguintes resultados em ratos18 e ratos16 foram anteriormente relatados e são resumidos aqui. A sutura circumlimbal produziu um padrão semelhante de elevação IOP em ratos e camundongos (Figura 2). Um breve spike IOP, até 58,1 ± 2,7 mmHg em ratos e 38,7 ± 2,2 mmHg em camundongos, verificou-se imediatamente após o procedimento de sutura. Em ratos, magnitude IOP gradualmente reduzida ao longo do tempo a ...

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A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Um modelo de Glaucoma induzido por sutura Circumlimbal em ratos e camundongos

Hipertensão ocular crônica é induzida pela aplicação de uma sutura de circumlimbal em ratos e camundongos, levando à deterioração funcional e estrutural das células ganglionares da retina consistentes com glaucoma.

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Esta abordagem fornece uma maneira reprodutível e minimamente invasiva de elevar o IOP por longos períodos de tempo. Isso nos ajudará a entender melhor o glaucoma. Uma vantagem dessa técnica é que a elevação do IOP é facilmente reversível, permitindo que os pesquisadores investiguem as habilidades dos olhos para se recuperar da elevação da pressão crônica.Uma demonstração visual deste método é fundamental, pois suturar e amarrar um nó de tensão são difíceis de aprender lendo um manuscrito sozinho. Para auxiliar bem, recomendamos que uma nova técnica, pratique a sutura sob microscópio. Comece esfregando o rato acordado em um pedaço de pano macio para acalmar o animal.Segure suavemente o tronco em uma mão, com os animais de volta apoiados contra o peito dos investigadores, e exponha a cabeça e o pescoço. Use a outra mão para trazer o tonômetro rebote perto do olho de rato, de modo que a ponta da sonda interocular esteja a aproximadamente dois a três milímetros de distância, e perpendicular ao ápice da córnea. Espere alguns segundos para o rato se acalmar, em seguida, pressione o botão de medição uma vez.Observe a parte superior da sonda IOP bata suavemente no ápice da córnea uma vez, e ouça o bipe do tonômetro rebote. Após um ou dois segundos, repita a medição. Faça um total de 10 medições para obter um valor IOP médio para o ponto de tempo.Reinicie o tonômetro após a quinta leitura. Uma vez que você esteja monitorando, meça IOP na mesma hora do dia. E em condições de iluminação de consistência, para minimizar a variação devido a um ciclo IOP.Cubra o roedor anestesiado com uma cortina cirúrgica estéril fenestrada, expondo o olho a ser suturado. Em seguida, depois de garantir um plano cirúrgico de anestesia, use 7-10 sutura de nylon para realizar uma sutura de bolsa-corda na conjuntiva bulbar ao redor do globo, tecendo a sutura 7-10 paralela e 2 mililitros posteriores ao limbus. Tome cuidado para não penetrar na esclera dele.Uma súbita dilatação pupilar durante o procedimento cirúrgico indica que a esclera provavelmente foi penetrada. Ancore a sutura nos ratos conjuntiva usando cinco a seis pontos de ancoragem. Evite a compressão direta nas principais veias epiesclerais, roscando a sutura sob a conjuntiva no cruzamento dessas veias.Aperte a sutura de cordas de bolsa amarrando um nó de deslizamento. Em seguida, amarre um nó simples e mantenha-o solto. Para evitar um pico de IOP pós-cirúrgico excessivamente alto, tenha um assistente medir o IOP.Se o IOP for considerado muito alto, ajuste o slipknot liberando parcialmente a tensão em uma extremidade da sutura. Após o IOP desejado de 30 a 60 milímetros de mercúrio é alcançado, amarre o segundo nó mantendo uma força de puxar contínua na extremidade dessa sutura. Após o segundo nó ser apertado, corte as extremidades da sutura para minimizar qualquer sensação de corpo estranho.Monitore o animal durante a recuperação da anestesia geral. Ao trabalhar com ratos, coloque uma sutura de nylon 10-0 em um milímetro posterior ao limbus. Use de quatro a cinco pontos de ancoragem para ancorar a sutura na conjuntiva do mouse.Em seguida, aperte a sutura de corda de bolsa amarrando um slipknot. Depois de amarrar um nó simples e mantê-lo solto, meça o IOP com a ajuda de um assistente. Para sustentar iOP e visão de longo prazo, é importante garantir que o nó esteja apertado o suficiente ao prender a sutura de corda da bolsa.Aqui demonstramos como amarrar um nó significativo em um olho modelo, a fim de gerar tensão suficiente. Após o IOP desejado ser alcançado, amarre o segundo nó, mantendo uma força de puxar contínua naquela extremidade da sutura. Neste gráfico, os olhos hipertensos oculares individuais são representados por símbolos vermelhos e controlam os olhos por símbolos cinzentos.A sutura circunlimbala aumentou a pressão intraocular por 8 semanas em ratos. O IOP permaneceu inalterado nos olhos de controle contralateral. A resposta positiva do limiar scotopic, reflete a saúde das células gânglios da retina, e foi encontrada reduzida nos olhos hipertensivos oculares indicados pela linha vermelha;em relação aos olhos de controle indicados pela linha preta.Houve também uma pequena redução do ERG a e b-wave, o que provavelmente refletirá uma leve disfunção dos receptores fotográficos e células bipolares, respectivamente. O maior déficit, no entanto, foi encontrado na resposta positiva do limiar escocópico. Confirmando a disfunção celular de gânglio preferencial após a leve elevação do IOP crônico.Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de apertar o slipknot com compressão interior adequada. A razão mais comum para que o IOP não suba a longo prazo, é que o nó se solta ao longo do tempo. Após este procedimento, todas as modificações como a remoção da sutura, para normalizar a pressão intraocular, podem ser realizadas para responder a perguntas adicionais, como se as células gânglios regulares podem se recuperar da elevação do IOP.E quais são os mecanismos que envolvem essa recuperação?

Research

JoVE Journal

Medicine

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Poupado da lesão do nervo Model (SNI) de alodinia mecânica induzida em camundongos

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Medicina

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e Monitorado por cateterismo cardíaco em ratos

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Secção do nervo tibial - um modelo padronizado para denervação induzida por atrofia muscular em ratos

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimental Glaucoma induzida pela injeção de microesferas magnéticas Ocular

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Fototrombose induzida por isquemia focal como um Modelo de Lesão Medular em Ratos

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

A Magnetic Microbead Oclusão Modelo para induzir Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma em Ratos

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma de indução de Procedimento em um<em&gt; In Vivo</em&gt; Modelo de Rato e Whole mount-Retina Preparação

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Terapia regenerativa pela célula Suprachoroidal Autograft em seco Degeneration Macular Age-related: relatório preliminar na Vivo

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Um modelo de derrame Pleural em ratos por instilação intratraqueal de poliacrilato/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Murine Modelo de Transplante de Aorta Cervical usando uma técnica de manguito não sutura modificada

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...