Name: a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

Este trabajo es financiado por la subvención del proyecto Consejo de investigación médica de Australia (1046203), beca de futuro de Consejo de investigación australiano (FT130100338) y nacional de salud.

Todos los procedimientos experimentales se llevaron a cabo según el código australiano de prácticas para el cuidado y uso de animales para fines científicos, establecido por la salud nacional y el Consejo de investigación médica en Australia. Se obtuvo aprobación ética del Comité de ética Animal Howard Florey Institute (aprobación número 13-044-UM y 13-068-UM para ratas y ratones, respectivamente).
1. medición de la presión intraocular en ratas conscientes
<ol><li>Ajuste el ton...

<ol>
	<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage.">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li><li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects.">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li><li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats.">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).</li><li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells.">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li><li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres.">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li><li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres.">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li><li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid.">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li><li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye.">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li><li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse.">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li><li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma.">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li><li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+improvement+following+glaucoma+surgery:+a+case+report.">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).</li><li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma.">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li><li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma.">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ARVO+abstract+number+3696+-+B0043.">ARVO abstract number 3696 - B0043.</a> annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li><li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats.">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels.">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li><li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hypertension+is+not+protective+against+chronic+IOP+elevation+in+a+rodent+model.">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure.">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li><li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats.">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells:+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas.">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li><li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture.">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li><li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation.">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic &amp; Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li><li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice.">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).</li><li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy.">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).</li></ol>

La sutura de circumlimbal es un nuevo modelo de la hipertensión ocular crónica. Además de los estudios de que los resultados representativos son con16,18, este modelo animal se ha utilizado en una serie de recientes estudios15,23,24,25 ,26. Comparación a través de estos informes anteriores demues...

Los modelos animales proporcionan que una importante plataforma para la investigación del laboratorio de celular procesos de patogénesis subyacente de glaucoma, así como para evaluar las intervenciones terapéuticas potenciales. Varios modelos inducibles se han desarrollado para producir la elevación sostenida de la presión intraocular (PIO), el más importante factor de riesgo para el glaucoma. Los métodos que se han aplicado para elevar IOP incluyen: inyección de solución salina hipertónica en episcleral venas1, fotocoagulación con láser de la malla trabecular2 o de la venas limbal3y la inyección intracameral de sustancias tales como Ghost roja glóbulos4, microbeads5,6 y viscoelástico agentes7. Cada enfoque tiene sus ventajas y limitaciones.
Un buen modelo para el glaucoma debe imitar el proceso de la enfermedad, con mínima complicación como opacities trauma, inflamación y los medios de comunicación. Estas complicaciones están frecuentemente asociadas con los procedimientos utilizados para inducir la elevación del IOP y pueden confundir la interpretación de los resultados. Por ejemplo, paracentesis de cámara anterior, incluso cuando no se introducen sustancias extrañas, ha demostrado causar trauma e inflamación que no es representativa de cambio glaucomatoso típico8,9. Además de la importancia de evitar la inflamación, mantener la claridad óptica facilita en vivo imagen y electrofisiología para monitorear la progresión de la enfermedad. Aunque no está claro hasta qué punto estas complicaciones pueden afectar las investigaciones de la enfermedad, puede ser mejor evitar penetrar el ojo durante la inducción del modelo. El enfoque de sutura circumlimbal evita la penetración del globo y facilita en vivo evaluación longitudinal de la estructura retiniana y función. Más importante aún, este modelo difiere de los anteriores en su capacidad para volver IOP a valores basales por retiro de la sutura cuando sea necesario. Normalización de la PIO puede ser útil para el estudio celular y moleculares correlativos de ganglio reversible e irreversible de la célula lesión10,11,12,13,14.
Este artículo se centra en la técnica para la inducción del modelo. Caracterización de la lesión retiniana inducida por este modelo en ratas y ratones se puede encontrar en mayor detalle en otra parte15,16,17,18,19.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:876px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">normal saline</td>
			<td style="width:219px;">Baxter International Inc</td>
			<td style="width:135px;">AHB1323</td>
			<td style="width:365px;">Maintain corneal hydration during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Orion Laboratories</td>
			<td style="width:135px;">27411, 80085</td>
			<td style="width:365px;">Disinfection of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Isoflurane 99.9%</td>
			<td style="width:219px;">Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td style="width:135px;">CAS 26675-46-7</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">ocular lubricant</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">1618611</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Needle holder (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">555419NT</td>
			<td style="width:365px;">To hold needle during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">CAS 5875-06-9</td>
			<td style="width:365px;">Topical ocular analgesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Scissors (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">501232</td>
			<td style="width:365px;">To cut excessive suture stump during ligation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Surgical drape</td>
			<td style="width:219px;">Vital Medical Supplies</td>
			<td style="width:135px;">GM29-612EE</td>
			<td style="width:365px;">Ensure sterile enviornment during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for rats (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">151109</td>
			<td style="width:365px;">8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for mice (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">160905</td>
			<td style="width:365px;">10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Tweezers (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">500342</td>
			<td style="width:365px;">Manipulate tissues during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">rebound tonometer</td>
			<td style="width:219px;">TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland</td>
			<td style="width:135px;">TV02</td>
			<td style="width:365px;">for intraocular pressure monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice

La sutura de circumlimbal es una técnica para inducir glaucoma experimental en roedores crónico elevando la presión intraocular (IOP), un conocido factor de riesgo para el glaucoma. Este protocolo muestra a una guía paso a paso sobre esta técnica en largo Evans ratas y ratones C57BL/6. Bajo anestesia general, se aplica una sutura en "jareta" en la conjuntiva, alrededor del Ecuador y por detrás del limbo del ojo. El ojo compañero sirve como un control no tratado. A lo largo de nuestro estudio, que fue un período de 8 semanas para ratas y 12 semanas para los ratones, IOP seguía elevada, regularmente medido por tonometría de rebote en animales conscientes sin anestesia tópica. En ambas especies, los ojos suturados demostraron electroretinograma características constantes con la disfunción retiniana interna preferencial. Tomografía de coherencia óptica demostró la reducción selectiva de la capa de fibra nerviosa retiniana. Histología de la retina de la rata en sección encontró reducido densidad celular en la capa de células ganglionares, pero ningún cambio en otras capas celulares. La coloración de las retinas de ratón montado en plano con un marcador específico de la célula del ganglio (RBPMS) confirmó la pérdida de células ganglionares. La sutura de circumlimbal es un simple, mínimamente invasiva y rentable manera de inducir hipertensión ocular que conduce a la lesión de la célula del ganglio en ratas y ratones.

Los siguientes resultados en ratas ratones y18 16 se han divulgado previamente y se resumen aquí. La sutura de circumlimbal produce un patrón similar de la elevación del IOP en ratas y ratones (figura 2). Un breve aumento IOP, hasta 58.1 ± 2,7 mmHg en ratas y 38,7 ± 2.2 mmHg en ratones, se encontró inmediatamente después del procedimiento de sutura. En ratas, magnitud IOP reduce gradualmente con el tiempo...

Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Un modelo de Glaucoma inducido por sutura de Circumlimbal en ratas y ratones

La hipertensión ocular crónica se induce mediante la aplicación de una sutura de circumlimbal en ratas y ratones, llevando al deterioro funcional y estructural de las células ganglionares de la retina compatibles con glaucoma.

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Este enfoque proporciona una forma reproducible y mínimamente invasiva de elevar la PIO durante largos períodos de tiempo. Esto nos ayudará a entender mejor el glaucoma. Una ventaja de esta técnica, es que la elevación de la PIO es fácilmente reversible, permitiendo a los investigadores investigar las capacidades de los ojos para recuperarse de la elevación de la presión crónica.Una demostración visual de este método es fundamental ya que suturar y atar un nudo de tensión es difícil de aprender leyendo un manuscrito solo. Para ayudar bien, recomendamos que uno nuevo en esta técnica, practique la sutura bajo microscopio. Comience por envoldir a la rata despierta en un pedazo de tela suave para calmar al animal.Sostenga suavemente el torso en una mano, con los animales apoyando contra el pecho de los investigadores, y exponga la cabeza y el cuello. Utilice la otra mano para llevar el tonómetro de rebote cerca del ojo de las ratas, de modo que la punta de la sonda interocular esté aproximadamente de dos a tres milímetros de distancia, y perpendicular al ápice corneal. Espere unos segundos hasta que la rata se calme y, a continuación, presione el botón de medición una vez.Observe que la parte superior de la sonda IOP golpeó suavemente el ápice corneal una vez y escuche el pitido del tonómetro de rebote. Después de uno o dos segundos, repita la medición. Realice un total de 10 mediciones para obtener un valor de PIO promedio para el punto de tiempo.Restablezca el tonómetro después de la quinta lectura. Una vez que esté monitoreando, mida la PIO a la misma hora del día. Y bajo condiciones de iluminación de consistencia, para minimizar la variación debido a un ciclo de IOP.Cubra el roedor anestesiado con una cortina quirúrgica fenestrada estéril, exponiendo el ojo a suturar. A continuación, después de asegurar un plano quirúrgico de la anestesia, utilice 7-10 sutura de nylon para realizar una sutura de cuerda de bolso en la conjuntiva bulbar en todo el mundo, tejiendo el paralelo de sutura 7-10 y 2 mililitros posteriores al limbo. Tenga cuidado de no penetrar su esclerótica.Una dilatación pupilar repentina durante el procedimiento quirúrgico indica que es probable que se haya penetrado la esclerótica. Anclar la sutura en la conjuntiva de las ratas usando cinco a seis puntos de anclaje. Evite la compresión directa en las venas episclerales principales enhebrando la sutura debajo de la conjuntiva en el cruce de estas venas.Fije la sutura de las cuerdas de la bolsa atando un nudo deslizante. A continuación, ate un nudo simple y mantenerlo suelto. Para evitar un pico de PIO postquirúrgico excesivamente alto, pida a un asistente que mida la PIO.Si se encuentra que el IOP es demasiado alto, ajuste el slipknot liberando parcialmente la tensión en un extremo de la sutura. Después de que se alcance el IOP deseado de 30 a 60 milímetros de mercurio, ate el segundo nudo mientras mantiene una fuerza de tracción continua en el extremo de esa sutura. Después de apretar el segundo nudo, recortar los extremos de la sutura para minimizar cualquier sensación de cuerpo extraño.Controlar al animal durante la recuperación de la anestesia general. Cuando trabaje con ratones, coloque una sutura de nylon 10-0 en un milímetro posterior al limbo. Utilice de cuatro a cinco puntos de anclaje para anclar la sutura en la conjuntiva del ratón.A continuación, apriete la sutura de la cuerda de la bolsa atando un slipknot. Después de atar un nudo simple y mantenerlo suelto, mida el IOP con la ayuda de un asistente. Para mantener la IOP y la visión a largo plazo, es importante asegurarse de que el nudo esté lo suficientemente apretado al sujetar la sutura de cuerda de bolso.Aquí demostramos cómo atar un nudo significativo en un ojo modelo, con el fin de generar suficiente tensión. Después de alcanzar el IOP deseado, ate el segundo nudo, manteniendo una fuerza de tracción continua en ese extremo de la sutura. En este gráfico los ojos hipertensos oculares individuales están representados por símbolos rojos, y controlan los ojos por símbolos grises.La sutura circunlimbal elevó la presión intraocular durante 8 semanas en ratas. La PIO se mantuvo sin cambios en los ojos de control contralaterales. La respuesta positiva del umbral escotópico, refleja la salud de las células ganglionares de la retina, y se encontró que se reduce en los ojos hipertensos oculares indicados por la línea roja;en relación con los ojos de control indicados por la línea negra.También hubo una pequeña reducción del ERG a y la onda b, que es probable que refleje una leve disfunción de los receptores fotográficos y las células bipolares, respectivamente. Sin embargo, el mayor déficit se encontró en la respuesta positiva del umbral escotópico. Confirmando la disfunción de células ganglionares preferenciales después de la elevación leve y crónica de la PIO.Al intentar este procedimiento, es importante recordar apretar el slipknot con una compresión interna adecuada. La razón más común por la que la PIO no puede aumentar a largo plazo, es que el nudo se afloja con el tiempo. Después de este procedimiento, todas las modificaciones como la eliminación de sutura, para normalizar la presión intraocular, se pueden realizar para responder preguntas adicionales como si las células ganglionares regulares pueden recuperarse de la elevación de la PIO de sustain.¿Y cuáles son los mecanismos que implican esta recuperación?

Research

JoVE Journal

Medicine

The Spared Nerve Injury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

The Spared Nerve Injury SNI Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

La lesión del nervio Salvados (SNI) Modelo de alodinia mecánica inducida en ratones

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared ...

Investigación

Medicina

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Prueba de esfuerzo cardíaco inducida por dobutamina y supervisado por cateterismo cardíaco en ratones

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Transección del nervio tibial - Un modelo normalizado para la atrofia del músculo esquelético denervación inducida en ratones

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimental glaucoma inducido por inyección ocular de microesferas magnéticas

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Photothrombosis inducida por isquemia focal como un modelo de lesión de médula espinal en ratones

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

A Magnetic Microbead Oclusión Modelo para inducir hipertensión ocular dependiente de glaucoma en ratones

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma de inducir en un Procedimiento<em&gt; En Vivo</em&gt; Modelo de rata y Todo el montaje-Retina Preparación

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Terapia regenerativa por autoinjerto Suprachoroidal célula en Degeneración Macular seca relacionada con la edad: informe preliminar en Vivo

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Un modelo de derrame Pleural en ratas por la instilación intratraqueal de poliacrilato/Nanosílice

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Modelo de trasplante de aórtica cervical murino utilizando una técnica de manguito no sutura modificada

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...