Name: a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

Detta arbete finansieras av nationella hälso- och medicinsk forskning rådet av Australien projektbidrag (1046203), Australiensisk forskning rådets framtida Fellowship (FT130100338).

Alla experimentella rutiner genomfördes enligt den australiska uppförandekod för skötsel och användning av djur för vetenskapliga ändamål, som av den nationella hälso- och medicinska forskningsrådet i Australien. Etik godkännande erhölls från Howard Florey Institute djur etikkommittén (godkännande nummer 13-044-UM och 13-068-UM för råttor och möss, respektive).
1. intraokulärt tryckmätning i medvetna råttor
<ol><li>Ställ in laboratorium rebound tonometern på inställni...

<ol>
	<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage.">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li><li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects.">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li><li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats.">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549 (2007).</li><li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells.">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li><li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres.">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li><li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres.">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li><li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid.">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li><li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye.">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li><li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse.">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li><li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma.">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li><li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+improvement+following+glaucoma+surgery:+a+case+report.">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162 (2014).</li><li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma.">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li><li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma.">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ARVO+abstract+number+3696+-+B0043.">ARVO abstract number 3696 - B0043.</a> annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li><li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats.">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels.">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41 (2017).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li><li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hypertension+is+not+protective+against+chronic+IOP+elevation+in+a+rodent+model.">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107 (2018).</li><li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina.">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li><li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure.">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li><li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats.">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells:+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas.">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li><li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture.">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li><li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation.">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic &amp; Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li><li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice.">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094 (2017).</li><li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy.">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035 (2016).</li></ol>

Circumlimbal suturen är en ny modell av kronisk okulär hypertension. Förutom studierna som de representativa resultat är inköpta16,18, har denna djurmodell utnyttjats i ett antal nyligen studier15,23,24,25 ,26. Jämförelse över dessa tidigare rapporter visar att metoden ger repeterbara resultat...

Djurmodeller ger en viktig plattform för laboratoriet utredning av cellulära processer underliggande glaukom patogenes, samt för att utvärdera potentiella terapeutiska interventioner. Flera inducerbara modeller har utvecklats för att producera ihållande intraokulärt tryck (IOP) höjd, den viktigaste riskfaktorn för glaukom. Metoder som har använts för att höja IOP inkluderar: hyperton saltlösning injektion i episklerala vener1, laser fotokoagulation av trabekelverket2 eller limbala vener3och intracameral injektion av ämnen som Ghost röda blodkroppar4, mikrokulor5,6 och viskoelastiska agenter7. Varje metod har sina fördelar och begränsningar.
En bra modell för glaukom bör efterlikna sjukdomen som är processaa, med minimal komplikation såsom trauma, inflammation och media opaciteter. Dessa komplikationer är ofta förknippade med de förfaranden som används för att framkalla IOP höjd och kan förvirra tolkning av resultat. Till exempel har paracentes av främre kammaren, även när främmande ämnen inte införs, visat sig orsaka trauma och inflammation som inte är representativt för typisk glaukomatös förändring8,9. Förutom vikten av att undvika inflammation, underlättar bibehålla optisk klarhet i vivo imaging och elektrofysiologi att övervaka sjukdomsprogression. Även om det är oklart i vilken utsträckning dessa komplikationer kan påverka sjukdomen utredningar, kan det vara bättre att undvika genomträngande ögat under modell induktion. Metoden circumlimbal suturen undviker penetration av världen och underlättar i vivo längsgående bedömning av näthinnans struktur och funktion. Viktigare, denna modell skiljer sig från föregående i dess förmåga att återgå IOP till utgångsvärdena genom avlägsnandet av suturen när det behövs. IOP normalisering kan vara användbara för att studera cellulära och molekylära korrelat till reversibla och irreversibla ganglion cell skada10,11,12,13,14.
Denna artikel fokuserar på tekniken för modell induktion. Karakterisering av skada inducerad av denna modell i råttor och möss kan hittas i större detalj någon annanstans15,16,17,18,19.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:876px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">normal saline</td>
			<td style="width:219px;">Baxter International Inc</td>
			<td style="width:135px;">AHB1323</td>
			<td style="width:365px;">Maintain corneal hydration during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Chlorhexadine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Orion Laboratories</td>
			<td style="width:135px;">27411, 80085</td>
			<td style="width:365px;">Disinfection of surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Isoflurane 99.9%</td>
			<td style="width:219px;">Abbott Australasia Pty Ltd</td>
			<td style="width:135px;">CAS 26675-46-7</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">ocular lubricant</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">1618611</td>
			<td style="width:365px;">Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Needle holder (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">555419NT</td>
			<td style="width:365px;">To hold needle during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Proxymetacaine 0.5%</td>
			<td style="width:219px;">Alcon Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:135px;">CAS 5875-06-9</td>
			<td style="width:365px;">Topical ocular analgesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Scissors (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">501232</td>
			<td style="width:365px;">To cut excessive suture stump during ligation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Surgical drape</td>
			<td style="width:219px;">Vital Medical Supplies</td>
			<td style="width:135px;">GM29-612EE</td>
			<td style="width:365px;">Ensure sterile enviornment during surgery</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for rats (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">151109</td>
			<td style="width:365px;">8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:157px;">Suture needle for mice (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">Ninbo medical needles</td>
			<td style="width:135px;">160905</td>
			<td style="width:365px;">10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">Tweezers (microsurgery)</td>
			<td style="width:219px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:135px;">500342</td>
			<td style="width:365px;">Manipulate tissues during ocular surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:157px;">rebound tonometer</td>
			<td style="width:219px;">TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland</td>
			<td style="width:135px;">TV02</td>
			<td style="width:365px;">for intraocular pressure monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of glaucoma induced by circumlimbal suture in rats and mice

Circumlimbal suturen är en teknik för att inducera experimentella glaukom på gnagare av kroniskt upphöja intraokulärt tryck (IOP), en välkänd riskfaktor för glaukom. Detta protokoll visar en steg för steg guide på denna teknik i lång Evans råttor och C57BL/6 möss. Under narkos tillämpas en ”handväska-sträng” sutur på bindhinnan, runt ekvatorn och bakom limbus av ögat. Det andra ögat fungerar som en obehandlad kontrollodling. Under vår studie, som var en period av 8 veckor för råttor och 12 veckor för möss, återstod IOP förhöjda, mätt regelbundet med rebound tonometri i medvetna djur utan lokal anestesi. Hos båda arterna, sys ögonen visade electroretinogram funktioner överensstämmer med förmånliga inre retinal dysfunktion. Optisk koherenstomografi visade selektiv gallring av lagrets retinal nerve fiber. Histologi av råtta näthinnan i tvärsnitt hittade minskade cell densiteten i ganglion cell-lagret, men ingen förändring i andra cellulära lager. Färgning av platt-monterad mus retinae med en ganglion cell specifik markör (RBPMS) bekräftade ganglion cellförlust. Circumlimbal suturen är en enkel, minimalt invasiva och kostnadseffektivt sätt att inducera okulär hypertension som leder till ganglion cell skada hos både råttor och möss.

Följande resultat i råttor18 och möss16 har rapporterats tidigare och sammanfattas här. Circumlimbal suturen produceras ett liknande mönster av IOP höjd hos råttor och möss (figur 2). En kort IOP spike, upp till 58,1 ± 2,7 mmHg hos råttor och 38,7 ± 2,2 mmHg hos möss, hittades omedelbart efter suturen ingreppet. Hos råttor, IOP magnitud gradvis minskas över tid för att vara 44 ± 6 mmHg och 32 ± ...

Watch this Scientific Journal Video about A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice at JoVE.com

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

En modell av glaukom inducerad av Circumlimbal sutur i råttor och möss

Kronisk okulär hypertension induceras genom att tillämpa en circumlimbal sutur i råttor och möss, leder till funktionella och strukturella försämring av de retinala ganglioncellerna överensstämmer med glaukom.

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

Detta tillvägagångssätt ger en reproducerbar och minimalt invasiva sätt att höja IOP under längre perioder. Detta kommer att hjälpa oss att bättre förstå glaukom. En fördel med denna teknik, är att IOP-höjningen är lätt reversibel, vilket gör det möjligt för forskare att undersöka ögonens förmåga att återhämta sig från kronisk tryckhöjd.En visuell demonstration av denna metod är kritisk som suturering och binda en spänning knut är svåra att lära av att läsa ett manuskript ensam. För att fin assistera, rekommenderar vi att en ny till denna teknik, praxis suturering under mikroskop. Börja med att linda den vakna råttan i en bit mjuk trasa för att lugna djuret.Håll försiktigt bålen i ena handen, med djuren tillbaka vilar mot utredarna bröstet, och exponera huvud och hals. Använd den andra handen för att få rebound tonometern nära råttorna ögat, så att spetsen av interokulär sond är ungefär två till tre millimeter bort, och vinkelrätt mot hornhinnans spets. Vänta några sekunder för råttan att lugna, tryck sedan på mätknappen en gång.Observera toppen av IOP-sonden försiktigt träffa hornhinnans apex en gång, och höra rebound tonometern pip. Efter en eller två sekunder, upprepa mätningen. Gör totalt 10 mätningar för att härleda ett genomsnittligt IOP-värde för tidspunkten.Återställ tonometern efter den femte avläsningen. När din är övervakning, mäta IOP i samma tid på dagen. Och under konsekvens ljusförhållanden, för att minimera variation på grund av en IOP cykel.Täck den sövda gnagaren med en steril fenestrated kirurgisk drapera, utsätta ögat för att sutureras. Därefter, efter att ha säkerställt ett kirurgiskt plan av anestesi, använd 7-10 nylon sutur för att utföra en handväska-string sutur på bulbar konjunktiva runt om i världen, genom vävning av 7-10 sutur parallellt och 2 milliliters posterior till limbus. Var noga med att inte tränga in i hans sclera.En plötslig pupillary dilation under det kirurgiska ingreppet indikerar sclera har sannolikt trängt in. Förankra suturen på råttornas konjunktiv med hjälp av fem till sex ankarpunkter. Undvik direkt kompression på de stora episcleral venerna genom att gänga suturen under konjunktivan vid korsningen av dessa vener.Fäst handväskan-strängar sutur genom att knyta en slip knut. Sedan knyta en enkel knut och hålla den lös. För att undvika en överdrivet hög postkirurgisk IOP-spik, ha en assistent mäta IOP.Om IOP-kortet befinns vara för högt, justera slipknot genom att delvis släppa spänningen på ena änden av suturen. Efter den önskade IOP på 30 till 60 millimeter kvicksilver uppnås, binda bort den andra knuten samtidigt som en kontinuerlig dragkraft på slutet av den suturen. Efter den andra knuten har skärpts, trimma ändarna av suturen för att minimera eventuella främmande kroppen sensation.Övervaka djuret under återhämtning från narkos. När du arbetar med möss, placera en 10-0 nylon sutur på en millimeter posteriort till limbus. Använd fyra till fem ankarpunkter för att förankra suturen på musens bindhinna.Fäst sedan handväskan-string sutur genom att binda en slipknot. Efter att ha bundit en enkel knut och hållit den lös, mät IOP med hjälp av en assistent. För att upprätthålla långsiktiga IOP och vision, det är viktigt att se till att knuten är tillräckligt snäv när du fäster handväskan-string sutur.Här visar vi hur man knyter en betydande knut på en modell öga, för att generera tillräckligt med spänning. Efter att önskad IOP har nåtts, binda av den andra knuten, samtidigt som en kontinuerlig dragkraft bibehålls på den änden av suturen. I denna graf enskilda okulär hypertensiva ögon representeras av röda symboler, och kontroll ögon av grå symboler.Den cirkumlimbal suturen höjde det intraokulära trycket i 8 veckor hos råttor. IOP förblev oförändrade i kontralateral kontroll ögon. Den positiva scotopic tröskelvärdet svar, återspeglar retinal ganglion cell hälsa, och konstaterades minskas i okulär hypertensive ögon anges av den röda linjen;i förhållande till kontrollen ögon anges av den svarta linjen.Det fanns också en liten minskning av ERG a och b-wave, som sannolikt kommer att återspegla en mild disfunktion av fotoreceptorer och bipolära celler, respektive. Det största underskottet konstaterades dock i den positiva scotopic tröskel svar. Bekräftar förmånliga ganglion cell disfunction efter den milda, kroniskA IOP höjd.Medan du försöker detta förfarande, är det viktigt att komma ihåg att dra åt slipknot med tillräcklig inåt komprimering. Den vanligaste orsaken till att IOP misslyckas med att stiga på lång sikt, är att knuten lossas med tiden. Efter detta förfarande, alla modifiering som sutur borttagning, att normalisera intraokulära tryck, kan utföras för att svara på ytterligare frågor som om vanliga ganglion celler kan återhämta sig från upprätthålla IOP höjd.Och vilka är de mekanismer som innebär denna återhämtning?

Research

JoVE Journal

Medicine

The Spared Nerve Injury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

The Spared Nerve Injury SNI Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

Den skonas Nerve Injury (SNI) Modell av inducerad mekanisk allodyni hos möss

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Hjärt stresstest inducerad av dobutamin och övervakas av hjärtkateterisering i möss

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Tibialnerven transection - en standardiserad modell för Denervation-inducerad skelettmuskelatrofi hos möss

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimentell Glaukom inducerad genom okulär Injektion av magnetiska mikrosfärer

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Photothrombosis-induced Focal Ischemia as a Model of Spinal Cord Injury in Mice

Photothrombosis-inducerad fokal ischemi som en modell av ryggmärgsskada hos möss

Spinal cord injury (SCI) is a devastating clinical condition causing permanent changes in sensorimotor and autonomic functions of the spinal cord (SC) ...

A Magnetic Microbead Occlusion Model to Induce Ocular Hypertension-Dependent Glaucoma in Mice

En magnetisk mikrokorn Ocklusion modell för att inducera okulär hypertension beroende Glaukom hos möss

The use of rodent models of glaucoma has been essential to understand the molecular mechanisms that underlie the pathophysiology of this multifactorial ...

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation

Glaukom framkallande ordningen i en<em&gt; In Vivo</em&gt; Råttmodell och Hela montering Retina Förberedelse

Glaucoma is a disease of the central nervous system affecting retinal ganglion cells (RGCs). RGC axons making up the optic nerve carry visual input to the ...

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Regenerativ behandling av Suprachoroidal Cell Autograft i torra åldersrelaterad makuladegeneration: preliminära In Vivo rapport

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

En pleurautgjutning modell hos råttor vid intratrakeal Instillation av polyakrylat/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Murina cervikal aorta transplantation modell med en modifierad icke-sutur manschetten teknik

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...