Name: potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation
Uploaded: 2019-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

منح الدعم: مؤسسة de Projet de L 'جامعة نانت، ليه باجوز' à مانون، الدوري الفرنسي ضد السرطان اللجنة دي لوار-أتلانتيك، لجنة موربيهان دو، ولجنة دي فونديه، une ارتفع من أجل S.A.R.A.H ومارتن دي توال ولوس أنجليس الفرنسية Société de Lutte مكافحة ليه سرطانات et les leucémies الطفل et de شرور (سفسي). M.B. و J.F. معتمدة من قبل الرابطة La مكافحة السرطان. يشكر المؤلفون يوت-مرفق بونامي فرانسوا هيكل Fédérative البحوث. كما يشكر المؤلفون سوزين س. د. (Inserm، باريس) لتزويد الخلايا IMR5 والسيدة H. Estéphan لتقديم المساعدة التقنية لها.

الإسكان الحيوان والإجراءات التجريبية بموافقة "الحكومة الفرنسية" (اتفاقات #C44-278 و #APAFIS 03479.01). رعاية الحيوان وإجراءات أجريت تحت توجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63/الاتحاد الأوروبي والقانون الفرنسي #2013-118 لحماية الحيوانات المستخدمة لأغراض البحث العلمي.
1-تقييم 8B6 "المخدرات التفاعل بين" ?...

<ol>
	<li>Chou, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+basis,+experimental+design,+and+computerized+simulation+of+synergism+and+antagonism+in+drug+combination+studies.">Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies.</a> Pharmacological Reviews. 58 (3), 621-681 (2006).</li><li>Bayat Mokhtari, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+therapy+in+combating+cancer.">Combination therapy in combating cancer.</a> Oncotarget. 8 (23), 38022-38043 (2017).</li><li>Zahreddine, H., Borden, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+and+insights+into+drug+resistance+in+cancer.">Mechanisms and insights into drug resistance in cancer.</a> Frontiers in Pharmacology. 4, 28 (2013).</li><li>Martin, T. P., Baguley, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re:+"Postoperative+validation+of+bone-anchored+implants+in+the+single-sided+deafness+population."+Snapp+et+al.+Otol+Neurotol+2012:+33;291-6.">Re: "Postoperative validation of bone-anchored implants in the single-sided deafness population." Snapp et al. Otol Neurotol 2012: 33;291-6.</a> Otol Neurotol. 34 (4), 777-778 (2013).</li><li>Choi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitization+of+lung+cancer+cells+by+altered+dimerization+of+HSP27.">Sensitization of lung cancer cells by altered dimerization of HSP27.</a> Oncotarget. 8 (62), 105372-105382 (2017).</li><li>Weiner, L. M., Surana, R., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies:+versatile+platforms+for+cancer+immunotherapy.">Monoclonal antibodies: versatile platforms for cancer immunotherapy.</a> Nature Reviews Immunology. 10 (5), 317-327 (2010).</li><li>Mellor, J. D., Brown, M. P., Irving, H. R., Zalcberg, J. R., Dobrovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+review+of+the+role+of+Fc+gamma+receptor+polymorphisms+in+the+response+to+monoclonal+antibodies+in+cancer.">A critical review of the role of Fc gamma receptor polymorphisms in the response to monoclonal antibodies in cancer.</a> Journal of Hematology &amp; Oncology. 6, 1 (2013).</li><li>Kowalczyk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+GD2-specific+14G2a+monoclonal+antibody+induces+apoptosis+and+enhances+cytotoxicity+of+chemotherapeutic+drugs+in+IMR-32+human+neuroblastoma+cells.">The GD2-specific 14G2a monoclonal antibody induces apoptosis and enhances cytotoxicity of chemotherapeutic drugs in IMR-32 human neuroblastoma cells.</a> Cancer Letters. 281 (2), 171-182 (2009).</li><li>Retter, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+proapoptotic+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody+and+evaluation+of+its+therapeutic+effect+on+melanoma+and+small+cell+lung+carcinoma+xenografts.">Characterization of a proapoptotic antiganglioside GM2 monoclonal antibody and evaluation of its therapeutic effect on melanoma and small cell lung carcinoma xenografts.</a> Cancer Research. 65 (14), 6425-6434 (2005).</li><li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+induction+of+human+lung+cancer+cell+line+in+multicellular+heterospheroids+with+humanized+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody.">Apoptosis induction of human lung cancer cell line in multicellular heterospheroids with humanized antiganglioside GM2 monoclonal antibody.</a> Cancer Research. 59 (20), 5323-5330 (1999).</li><li>Cochonneau, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+cycle+arrest+and+apoptosis+induced+by+O-acetyl-GD2-specific+monoclonal+antibody+8B6+inhibits+tumor+growth+in+vitro+and+in+vivo.">Cell cycle arrest and apoptosis induced by O-acetyl-GD2-specific monoclonal antibody 8B6 inhibits tumor growth in vitro and in vivo.</a> Cancer Letters. 333 (2), 194-204 (2013).</li><li>Chou, T. C., Martin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CompuSyn for drug combinations: PC software and user&#8217;s guide: a computer program for quantitation of synergism and antagonism in drug combinations, and the determination of IC50 and ED50 and LD50 values. , (2005).</li><li>Alvarez-Rueda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monoclonal+antibody+to+O-acetyl-GD2+ganglioside+and+not+to+GD2+shows+potent+anti-tumor+activity+without+peripheral+nervous+system+cross-reactivity.">A monoclonal antibody to O-acetyl-GD2 ganglioside and not to GD2 shows potent anti-tumor activity without peripheral nervous system cross-reactivity.</a> PLoS One. 6 (9), e25220 (2011).</li><li>Faraj, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroblastoma+chemotherapy+can+be+augmented+by+immunotargeting+O-acetyl-GD2+tumor-associated+ganglioside.">Neuroblastoma chemotherapy can be augmented by immunotargeting O-acetyl-GD2 tumor-associated ganglioside.</a> Oncoimmunology. 7 (1), e1373232 (2017).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Ullman-Cullere, M. H., Foltz, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+condition+scoring:+a+rapid+and+accurate+method+for+assessing+health+status+in+mice.">Body condition scoring: a rapid and accurate method for assessing health status in mice.</a> Laboratory Animal Science. 49 (3), 319-323 (1999).</li><li>Teicher, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+for+in+vitro+and+in+vivo+synergy.">Assays for in vitro and in vivo synergy.</a> Methods in Molecular Medicine. 85, 297-321 (2003).</li><li>White, D. B., Slocum, H. K., Brun, Y., Wrzosek, C., Greco, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+nonlinear+mixture+response+surface+paradigm+for+the+study+of+synergism:+a+three+drug+example.">A new nonlinear mixture response surface paradigm for the study of synergism: a three drug example.</a> Current Drug Metabolism. 4 (5), 399-409 (2003).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+colorimetric+assay+for+cellular+growth+and+survival:+application+to+proliferation+and+cytotoxicity+assays.">Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.</a> Journal of Immunological Methods. 65 (1-2), 55-63 (1983).</li><li>Huyck, L., Ampe, C., Van Troys, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+XTT+cell+proliferation+assay+applied+to+cell+layers+embedded+in+three-dimensional+matrix.">The XTT cell proliferation assay applied to cell layers embedded in three-dimensional matrix.</a> Assay and Drug Development Technologies. 10 (4), 382-392 (2012).</li><li>Thompson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+of+topotecan+in+combination+with+vincristine+for+treatment+of+pediatric+solid+tumor+xenografts.">Synergy of topotecan in combination with vincristine for treatment of pediatric solid tumor xenografts.</a> Clinical Cancer Research. 5 (11), 3617-3631 (1999).</li><li>Tan, M., Fang, H. B., Tian, G. L., Houghton, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+design+and+sample+size+determination+for+testing+synergism+in+drug+combination+studies+based+on+uniform+measures.">Experimental design and sample size determination for testing synergism in drug combination studies based on uniform measures.</a> Statistic in Medicine. 22 (13), 2091-2100 (2003).</li><li>Tang, X. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+EPHB6,+EFNB2,+and+EFNB3+expressions+in+human+neuroblastoma.">Implications of EPHB6, EFNB2, and EFNB3 expressions in human neuroblastoma.</a> Proceding of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (20), 10936-10941 (2000).</li><li>Mehta, R. R., Graves, J. M., Hart, G. D., Shilkaitis, A., Das Gupta, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+metastasis+of+human+breast+carcinomas+with+Matrigel+in+athymic+mice.">Growth and metastasis of human breast carcinomas with Matrigel in athymic mice.</a> Breast Cancer Research and Treatment. 25 (1), 65-71 (1993).</li><li>Mullen, P., Ritchie, A., Langdon, S. P., Miller, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Matrigel+on+the+tumorigenicity+of+human+breast+and+ovarian+carcinoma+cell+lines.">Effect of Matrigel on the tumorigenicity of human breast and ovarian carcinoma cell lines.</a> International Journal of Cancer. 67 (6), 816-820 (1996).</li><li>Feng, C., Tang, S., Wang, J., Liu, Y., Yang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topotecan+plus+cyclophosphamide+as+maintenance+chemotherapy+for+children+with+high-risk+neuroblastoma+in+complete+remission:+short-term+curative+effects+and+toxicity.">Topotecan plus cyclophosphamide as maintenance chemotherapy for children with high-risk neuroblastoma in complete remission: short-term curative effects and toxicity.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 33 (8), 1107-1110 (2013).</li><li>Cheung, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganglioside+GD2+specific+monoclonal+antibody+3F8:+a+phase+I+study+in+patients+with+neuroblastoma+and+malignant+melanoma.">Ganglioside GD2 specific monoclonal antibody 3F8: a phase I study in patients with neuroblastoma and malignant melanoma.</a> Journal of Clininical Oncology. 5 (9), 1430-1440 (1987).</li><li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Dayde, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+burden+influences+exposure+and+response+to+rituximab:+pharmacokinetic-pharmacodynamic+modeling+using+a+syngeneic+bioluminescent+murine+model+expressing+human+CD20.">Tumor burden influences exposure and response to rituximab: pharmacokinetic-pharmacodynamic modeling using a syngeneic bioluminescent murine model expressing human CD20.</a> Blood. 113 (16), 3765-3772 (2009).</li><li>Racki, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD-scid+IL2rgamma(null)+mouse+model+of+human+skin+transplantation+and+allograft+rejection.">NOD-scid IL2rgamma(null) mouse model of human skin transplantation and allograft rejection.</a> Transplantation. 89 (5), 527-536 (2010).</li><li>Sherif, A., Winerdal, M., Winqvist, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Responses+to+Neoadjuvant+Chemotherapy+in+Muscle+Invasive+Bladder+Cancer.">Immune Responses to Neoadjuvant Chemotherapy in Muscle Invasive Bladder Cancer.</a> Bladder Cancer. 4 (1), 1-7 (2018).</li></ol>

للتنبؤ بتأثير التفاعلات المخدرات، يمكن استخدام ثلاثة أساليب: منهجية إيسوبولوجرام17و نموذج الخليط غير الخطية18والتركيبة فهرس1. تحليل مؤشر تركيبة هو الأكثر استخداماً لأن تطبيقه هو تبسيط بتوافر برنامج كمبيوتر سهلة الاستعمال. لهذا الغرض، نحن أولاً تتسم...

وكان النهج التقليدي في علاج عدد كبير من أنواع مختلفة من السرطان استناداً إلى الأحادي. حتى ولو أنه يزال يستخدم في كثير من الحالات، اجتمع هذا الأسلوب العديد من العوائق التي تؤدي إلى اختيار العلاجات المجمعة2. وخاصة الخلايا السرطانية أكثر عرضه لتطوير المقاومة عندما تعامل مع دواء واحد بحمل بديلة بقاء الآليات3، مما تسبب في تعطل العلاجية في مرضى4. وعلاوة على ذلك، هي المخدرات في الأحادي، وعادة ما تدار بجرعة عالية. هذه الحالة كثيرا ما ينتج عن حدوث الآثار الجانبية تعتمد على جرعة قوية يمكن لا تطاق وإجبار الأطباء بوقف العلاج2. لهذه الأسباب، الرابطة لجزيئات السرطان الآن يفضل الأحادي.
مزيج مثالي من المخدرات ستكون تلك التي تعمل في تضافر الجهود ضد الخلايا السرطانية، دون زيادة السمية ضد الخلايا الطبيعية. ويشير التآزر للتفاعل بين اثنين أو أكثر من المخدرات التي تنتج تأثير علاجي أكبر من مجموع كل العقاقير فردية تعمل بشكل منفصل. قد يؤدي مثل هذه التفاعلات في تعزيز الفعالية العلاجية السريرية2. يحد من مقاومة العلاج، ويزيد من فعالية، ويمكن أيضا تقليل سمية2. وفي الواقع، يمكن تخفيض الجرعة لكل دواء لتقليل آثارها الجانبية التي تستهدف مسارات مختلفة. وبالإضافة إلى ذلك، واحدة من الجزيئات يمكن أن تخدم أيضا كعامل توعية ضد الخلايا السرطانية. تأثير المخدرات الثانية وقد تتعزز في خلايا توعية وجرعات أقل يمكن استخدامها5.
يمكن أن تشمل العلاج بالجمع بين اثنين أو أكثر من المخدرات العلاج الكيميائي أو البيولوجي، مثل [مونوكلونل]6. هذه مابس تستهدف على وجه التحديد خلايا معربا عن خلية للمستضد سطحي للفائدة، وهي قادرة على قتل الخلايا السرطانية من خلال مسارات المناعية بما في ذلك تعتمد على جسم الخلية بوساطة سيتوتوكسيسيتي (ADCC)، بمشاركة الخلايا المناعية المستجيب 7، وتعتمد على تكملة سيتوتوكسيسيتي (CDC)6. أنها يمكن أن تعمل أيضا عبر إليه غير مناعية توسط المبرمج8،9،،من1011. في هذه الحالة، قد تقلد عملية موت الخلايا المبرمج توعية الخلايا السرطانية وتضعف وظيفتها وتزيد من فعالية العلاج الكيميائي المخدرات المرتبطة بها في جرعة أقل. على هذا النحو، تعتبر ماب بروابوبتوتيك مرشحا جيدا لتصميم نظم تركيبة مع الأدوية أنتينيوبلاستيك.
وقد وصف مختلف النماذج الرياضية لتقييم التآزر المخدرات؛ واحد منهم يستند إلى الجمع بين مؤشر الأسلوب1. هذا الأسلوب يستند إلى مبدأ الوسطية-تأثير وضعتها شو1. معادلة تأثير متوسط يرتبط بجرعة المخدرات وأثر المخدرات على النحو التالي.
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq1.jpg">
وهنا هي د جرعة المخدرات؛ مارك ألماني هو تأثير متوسط الجرعة؛ اتحاد كرة القدم هو الكسر تتأثر الجرعة؛ m هو إس الذي يدل على شكل الأرض تأثير الجرعة1. متوسط-تأثير الجرعة يستخدم لحساب الجرعة Dx من الدواء الذي يمنع أو يقتل "x" في المئة من الخلايا. ثم يتم حساب قيمة CI لتقييم تأثير المواد المضافة للجمع بين المخدرات، على النحو التالي1.
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq2.jpg" style="font-size: 14px;">
قيمة CI 1 يشير إلى تأثير المواد مضافة وقيمة CI < 1 يشير إلى تأثير تآزري، بينما قيمة CI > 1 يشير إلى العداء1. تطبيق هذا الأسلوب هو زيادة تيسير توافر برنامج كمبيوتر، كومبوسين، الذي يحدد التآزر والعداء في كل جرعة أو مستويات تأثير محاكاة تلقائياً12.
مجموعتنا الخاصة 8B6 ماب س-أسيتيل-GD2 جانجليوسيدي (OAcGD2) نيوروبلاستوما مستضد13 وكذلك أظهرت أن هذا ماب قادرة على الحث على موت الخلايا مع سمات المبرمج11. لاختبار ما إذا كان يمكن توعية ماب 8B6 نيوروبلاستوما الخلايا توبوتيكان وكيل أنتينيوبلاستيك، نحن تكييف الأسلوب المذكورة أعلاه وضعتها شو1. أولاً، علينا أن نحدد الجرعة الفعالة 50 (ED50) قيم ماب 8B6 وتوبوتيكان. المقبل، تتعرض الخلايا نيوروبلاستوما مع نسب اكويبوتينت من المركبين استناداً إلى قيم50 اد لتحديد قيم CI باستخدام برامج المحاكاة المذكورة أعلاه. هذا الأسلوب يسمح لنا بإظهار التآزر بين ماب 8B6 وتوبوتيكان في المختبر. وبعد ذلك، يصف لنا بروتوكولا لمواصلة تقييم الفاعلية وسلامة هذا الجمع بين نظام في فيفو. يمكن بسهولة تطبيق هذا البروتوكول لتحديد ماب السرطان قوية وآمنة وتركيبات عوامل العلاج الكيميائي في الدراسات الإكلينيكية. ويرد تمثيل تخطيطي لهذه الدراسة في الشكل 1.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1389px;" width="1390">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Cell Proliferation kit (MTT)</td>
			<td style="width:161px;">Roche</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">CompuSyn software</td>
			<td style="width:161px;">ComboSyn</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Combosyn can be downloaded for free at http://www.combosyn.com</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">BIO-1556</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Fetal calf serum</td>
			<td style="width:161px;">Eurobio</td>
			<td style="width:132px;">CVFSVFF00-01</td>
			<td style="width:852px;">10% heat-inactivated fetal calf serum in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Firefox&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Mozilla Corporation</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Firefox can be downloaded for free at http://www.mozilla.org/en-US/firefox/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Heat lamp</td>
			<td style="width:161px;">Verre&#38;Quartz</td>
			<td style="width:132px;">4003/1R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Human neuroblastoma IMR-5 cell line</td>
			<td style="width:161px;">Accegen Biotechnology</td>
			<td style="width:132px;">ABC-TC0450</td>
			<td style="width:852px;">IMR-5 is a clone of the human neuroblastoma cell line IMR32 5459762. IMR-5 cells were generously provided by Dr. Santos Susin (U.872, Paris, France)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">25030-024</td>
			<td style="width:852px;">2 mM in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Lysis solution&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Roche&#160;</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">mAb 8B6</td>
			<td style="width:161px;">University of Nantes</td>
			<td style="width:132px;">N/A</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Matrigel</td>
			<td style="width:161px;">Corning</td>
			<td style="width:132px;">354248</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Multiskan FC</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific&#160;</td>
			<td style="width:132px;">N08625</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 21G 1 &#189;&#160;</td>
			<td style="width:161px;">BD Microlance</td>
			<td style="width:132px;">304432</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 25G 1</td>
			<td style="width:161px;">Terumo</td>
			<td style="width:132px;">NN-2525R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">NSG mice</td>
			<td style="width:161px;">Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:132px;">5557</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Nunc MicroWell 96-well microplates</td>
			<td style="width:161px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:132px;">167008</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS</td>
			<td style="width:161px;">VWR</td>
			<td style="width:132px;">L182-10</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS, 0,05% EDTA</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PC that runs windows 7</td>
			<td style="width:161px;">Microsoft</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Windows 7 can be purchased at http://www.microsoft.com/en-gb/software-download/windows7</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">15140-122</td>
			<td style="width:852px;">100 units/mL penicillin and 100 mg/mL streptomycin in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Reagent reservoir</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific</td>
			<td style="width:132px;">8094</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Rodent restrainer</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">TV-150-SM</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">31870-025</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Syringe 1 mL</td>
			<td style="width:161px;">Henke Sass Wolf</td>
			<td style="width:132px;">5010.200V0</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Topotecan</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:132px;">T2705</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation

التقوية مونوكلونل معادية (ماب) من وكلاء العلاج الكيميائي يشكل استراتيجية قيمة لتصميم العلاج فعالة وأكثر أماناً ضد السرطان. هنا نقدم بروتوكول لتحديد مجموعة رشيد في الخطوة الإكلينيكية. أولاً، يصف لنا تحليل يستند إلى الخلية لتقييم التآزر بين ماب السرطان والعقاقير السامة للخلايا، ويستخدم معادلة مؤشر تركيبة شو وتالالاي1. ويشمل هذا القياس لورم الخلية المخدرات-الأجسام المضادة-حساسية واستخدام مقايسة MTT، يليها تحليل الحاسوب الآلي لحساب قيم الفهرس (CI) الجمع بين. قيم CI < 1 تشير إلى التآزر بين مابس المختبرة ووكلاء السامة للخلايا1. للتأكد من صحة في المختبر النتائج التي توصل إليها في فيفو، يصف لنا كذلك وسيلة لتقييم فعالية نظام الجمع في نموذج ورم xenograft. في هذا النموذج، يؤخر النظام إلى حد كبير نمو الورم، مما يؤدي بقاء موسعة كبيرة بالمقارنة مع عامل واحد عناصر التحكم. الأهم من ذلك، والتجريب في فيفو يكشف أن نظام الجمع هو جيد التحمل. يسمح هذا البروتوكول للتقييم الفعال لتركيبات المخدرات السرطان في نماذج السريري وتحديد تركيبة عقلانية لتقييم في التجارب السريرية.

الممثل النتائج والأرقام التي يتم تكييفها مع إذن من الأعمال المنشورة في وقت سابق14.
تآزر يعزز مكافحة OAcGD2 ماب 8B6 "الآثار المثبطة توبوتيكان نيوروبلاستوما الخلية خط" النمو:
لإنشاء المخدر?...

Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation

ويصف هذا البروتوكول كيفية تقييم التآزر بين جسم السرطان والأدوية أنتينيوبلاستيك في نماذج السريرية باستخدام معادلة مؤشر الجمع بين تشو وتالالاي.

التقوية لكفاءة جسم السرطان بالعقاقير أنتينيوبلاستيك: الكشف عن التآزر جسم-المخدرات باستخدام معادلة الجمع بين مؤشر

Potentiation of hostile monoclonal antibodies (mAb) by chemotherapeutic agents constitutes a valuable strategy for designing effective and safer therapy ...

العلاج المناعي جنبا إلى جنب مع العلاج الكيميائي يمثل نهجا مبتكرا لتطوير العلاج الفعال في السرطان. وتتمثل الأهداف الرئيسية في تحقيق التآزر، والآثار العلاجية، والجرعة والحد من السمية، والتقليل من أو تأخير تحريض مقاومة الأدوية. ومع ذلك ، لأسباب عملية وأخلاقية ، فإنه ليس من الممكن تحديد التآزر في المرضى. وهكذا، قبل الجمع المباشر في التجارب السريرية، وينبغي إجراء الدراسات تركيبة برينيكابتور، في المختبر، و / أو في الحيوانات، من أجل الحصول على الأساس المنطقي للدراسات السريرية. وتستند طريقة بسيطة قوية للكمية التآزر بين المخدرات على الجمع بين معادلة مؤشر وضعتها شول شوان، كما هو موضح في هذا الفيديو. باستخدام هذه الطريقة، ومحاكاة المحوسبة، ونحن نبين هنا، التآزر بين الأجسام المضادة أحادية النسيلة 8B6، وهو محدد لO-أسيتيل-GD2 Antidlioside العصبية الأرومية والدواء العلاج الكيميائي توبوتيكان على خلايا الورم الأرومي العصبي. وباختصار، بعد تحديد الجرعة الفعالة 50 قيم لكل مركب في المنظمة البحرية الدولية البشرية، 5 خط الخلايا الأرومية العصبية، تم تنبيب هذه الخلايا بنسب عادلة من المركبين، وتم حساب قيم الفهرسة المركبة باستخدام المحاكاة الحاسوبية الآلية. وأكدنا بعد ذلك هذه النتائج في Vivo، في المنظمة البحرية الدولية، 5 ورم xenographed نموذج. لقد قمنا بـ نمو خلايا IMR-5 في قارورة T75 ، ولاحظناها تحت المجهر ، للتحقق من التقاء الخلايا. اسبيريت خلية المتوسطة من القارورة، وغسل مع 5 مل من برنامج تلفزيوني. إضافة 3 مل من 0.05٪ EDTA / برنامج تلفزيوني حل. إعادة القارورة إلى الحاضنة لمدة 3 دقائق. فحص خلية ثقافة تحت مجهر لخلية مفرزة. إضافة 10 مل من خلية كاملة المتوسطة إلى القارورة، ونقل تعليق الخلية إلى أنبوب مخروطي معقم، 15 مل. جهاز طرد مركزي لمدة خمس دقائق في 300 g.Count الخلايا باستخدام قياس الهيموسيت. إزالة وتجاهل ناظر. إعادة تعليق الخلايا في في متوسطة النمو الكامل.ضبط حجم متوسط للحصول على تركيز نهائي من 100، 000 الخلايا/mL.Seed 84 آبار، 96 لوحة ثقافة جيدا مع 10،000 خلية لكل منهما، وهو 100 ميكرولترات من تعليق الخلية. احتضان الخلايا لمدة 18 ساعة في خلية Incubator.Dilute الأجسام المضادة أحادية النسيلة في 500 ميكرولترات من كامل متوسط النمو للحصول على حل عمل الأجسام المضادة مع تركيز الأجسام المضادة أحادية النسيلة 240 ميكرو غرام لكل mL.perform 5 الأوهام التسلسلية ذات شقين كما هو مبين في البروتوكول. تمييع الدواء في 500 ميكرولترات من كامل متوسطة النمو للحصول على حل عمل المخدرات مع التركيز النهائي 120 نانومولار. تنفيذ 5، الأوهام التسلسلية ذات شقين كما هو مبين في البروتوكول. تمييع بنفس الطريقة الدواء بالإضافة إلى حلول الأجسام أحادية النسيلة. للوصول إلى التركيز النهائي، نقل 50 ميكرولترات من كل محلول دواء في الآبار المقابلة كما هو مبين في هذا التخطيط التجريبي. احتضان الخلايا لمدة 72 ساعة في الحاضنة. إضافة 10 ميكرولترات من محلول الكواشف MTT في كل بئر. احتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات. إضافة 100 ميكروليتر من محلول سيني في كل بئر باستخدام ماصة متعددة القنوات ومزيج دقيق عن طريق pipetting. احتضان في 37 درجة مئوية لمدة 4 ساعات في غرفة مرطبة. تخلص من الامتصاصات عند 570 و 620 نانومتر باستخدام مقياس طيفي. حساب صلاحية الخلية كما يلي. حساب القيم المتأثرة بالكسر باستخدام المعادلة التالية. تشغيل برنامج المحاكاة، انقر على زر التجربة الجديدة للحصول على النافذة الرئيسية. اكتب اسم التجربة. انقر فوق دواء واحد جديد. اكتب الاسم. اكتب الاختصار. اكتب وحدة تركيز المخدرات. أدخل البيانات 1 الجرعة وقيمة FA. اضغط Enter.Repeat هذه الخطوة حتى يتم إدخال كافة نقاط البيانات. انقر فوق Finished.اتبع نفس الخطوات لإدخال نقاط بيانات الأجسام المضادة أحادية النسيلة. انقر فوق دواء جديد Combo.Select المخدرات والأجسام المضادة أحادية النسيلة. حدد نسبة ثابتة.انقر فوق موافق. اكتب الاسم. اكتب الاختصار. اكتب نسبة الأجسام المضادة أحادية النسيلة المخدرات. أدخل البيانات 1 الجرعة. اضغط Enter.The البرنامج سوف تلقائيا حساب جرعات من الأجسام المضادة أحادية النسيلة 8B6 والتحرير والسرد. أدخل قيمة FA للبيانات 1.اضغط Enter.Repeat هذه الخطوة حتى يتم إدخال كافة نقاط البيانات. انقر فوق Finished.Then، انقر فوق إنشاء Report.Select المخدرات والأجسام المضادة أحادية النسيلة ثم انقر فوق موافق. حدد التحرير والسرد، ثم انقر فوق موافق. حدد الرأس وجدول CI وجدول الملخص، ثم انقر فوق موافق. اكتب اسم الملف والتحليل وانقر فوق حفظ لإنشاء التقرير. يتم فتح التقرير تلقائيًا في مستعرض الويب الافتراضي. ويتضمن التقرير قسماً لجدول موجز يتضمن العنوان والتاريخ والاسم النهائي وملاحظة الوصف والمعلمات m وMM وr والجرعة الفعالة 50 لأي عامل يستخدم كالمعالجة الأحادية أو في تركيبة، وجدول الفهرس المختلط لكل تركيبة عند الجرعة الفعالة 50 و75 و90 و95.A قيمة مؤشر تركيبة أقل من 1 يشير إلى التآزر. تشير القيمة التي تساوي إلى القيمة المضافة. تشير القيمة الأكبر من 1 إلى العداء. ذوبان غشاء مصفوفة الطابق السفلي بين عشية وضحاها عن طريق غمر القارورة في الجليد في 4 درجات C الثلاجة قبل الاستخدام. يجب أن تكون جميع ملابس الثقافة ، أو وسائل الإعلام القادمة على اتصال مع مقياس غشاء الطابق السفلي prechilled. حصاد IMR5 الثقافة. نقل الخلايا إلى أنبوب مخروطي 15 مل والطرد المركزي في 300 غرام لمدة 5 دقائق. تجاهل المُندفع. غسل الخلايا مع 15 مل الجليد البارد PBS مرتين. إعداد تعليق الخلية ل5 ملايين خلية لكل مل في الجليد البارد PBS. نقل تعليق الخلية إلى 1.5 مل microtube. قطب غشاء مصفوفة مصفوفة الطابق السفلي. إضافة 1 حجم من مضمشف مصفوفة الغشاء الطابق السفلي، مختلطة من الأنابيب للحصول على تعليق الخلية من 2.5 مليون خلية في mL.Keep تعليق الخلية على الجليد. حلق الجناح من حيث سيتم حقن. مزيج الخلايا ورسم بعناية تعليق الخلية في حقنة 1 مل شنت مع إبرة 21 ز. تحقق للتأكد من عدم وجود فقاعات الهواء في الحقنة. تطهير منطقة التطعيم من الفئران مع محلول مطهر. اضغط بلطف على جلد الماوس على الجناح بين الأصابع في موقع الحقن. أدخل الإبرة في الجلد بالضبط. لا تضع الإبرة في عمق الأنسجة لضمان الحقن تحت الجلد. حقن 100 ميكرولترات من تعليق الخلية IMR5 تحت الجلد. تدوير حقنة لمنع انتشار السائل وسحب الإبرة. مراقبة الفئران لوزن الجسم ونمو الورم. قياس طول وعرض الورم مع العيار. حساب حجم الورم باستخدام هذه الصيغة. بدء العلاج عندما تصل الأورام إلى حجم متوسط من 50 إلى 60 ملم

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

فلوري مثلي نموذج الفأر من سرطان البنكرياس

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

Anticancer Efficacy of Photodynamic Therapy with Lung Cancer-Targeted Nanoparticles

المضادة للسرطان فعالية من العلاج الضوئي مع النانوية المستهدفة السرطان والرئة

Photodynamic therapy (PDT) is a non-invasive and non-surgical method representing an attractive alternative choice for lung cancer treatment. ...

Two-dimensional Gel Electrophoresis Coupled with Mass Spectrometry Methods for an Analysis of Human Pituitary Adenoma Tissue Proteome

هلام ثنائي الأبعاد التفريد مقترنة بأساليب الطيف الكتلي لتحليل البروتين الأنسجة البشرية الورم الحميد الغدة النخامية

Human pituitary adenoma (PA) is a common tumor that occurs in the human pituitary gland in the hypothalamus-pituitary-targeted organ axis systems, and may ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

إيمونوفينوتيبينج من أورثوتوبيك هوموجرافت (سينجينيك) من الفيلق الابتدائي موريني البنكرياس الأقنية غدية بالتدفق الخلوي

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Preclinical Assessment of the Bioactivity of the Anticancer Coumarin OT48 by Spheroids, Colony Formation Assays, and Zebrafish Xenografts

التقييم السريري بيواكتيفيتي OT48 الكومارين السرطان الماغنيسيوم وفحوصات تشكيل مستعمرة، وتكثيفها الزرد

In vitro and in vivo pre-clinical screening of novel therapeutic agents are an essential tool in cancer drug discovery. Although human cancer cell lines ...

Assessment of Resistance to Tyrosine Kinase Inhibitors by an Interrogation of Signal Transduction Pathways by Antibody Arrays

تقييم للمقاومة إلى تيروزين كيناز مثبطات تجواب مسارات توصيل الإشارات بجسم صفائف

Cancer patients with an aberrant regulation of the protein phosphorylation networks are often treated with the tyrosine kinase inhibitors. Response rates ...

Detection of Protease Activity by Fluorescent Peptide Zymography

الكشف عن نشاط البروتياز الببتيد نيون زيموجرافي

The purpose of this method is to measure the proteolytic activity of complex biological samples. The samples are separated by molecular weight using ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

تميز المسوخ ذات الصلة بالأمراض من Kinases الأسرة سلاح الجو الملكي البريطاني باستخدام مجموعة من الأساليب العملية والممكنة

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Detection of Retrotransposition Activity of Hot LINE-1s by Long-Distance Inverse PCR

الكشف عن نشاط الرجعية من الخط الساخن-1S من قبل لمسافات طويلة معكوس PCR

Long interspersed nuclear elements 1 (LINE-1s) are the only family of mobile genetic elements in the human genome that can move autonomously. They do so ...

Oncogenic Gene Fusion Detection Using Anchored Multiplex Polymerase Chain Reaction Followed by Next Generation Sequencing

الكشف عن الانصهار الجيني الأنسيوجيني باستخدام تفاعل سلسلة بوليميراز متعددة المضاعفات متبوعاً بتسلسل الجيل التالي

Gene fusions frequently contribute to the oncogenic phenotype of many different types of cancer. Additionally, the presence of certain fusions in samples ...