Name: potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation
Uploaded: 2019-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

부여 지원: Fondation 드 Projet 드 L '대학교 드 낭트, 레 Bagouz' 일품 마 농, 라 리그 죄수 르 암 위원회 회의 드 루아르-아 틀 랑 티크, 위원회 회의 뒤 모 르 비 앙, 및 위원회 회의 드 Vendée, 한 장미 S.A.R.A.H, 별미 드 마틴과 라 사회 프랑세즈 데 루 테 순이 레 부 어 암 외 레 leucémies 드 랑팡은 동부 표준시 드 L'adolescent (SFCE). M.B. 및 J.F. 라 리그 죄수 르 암에 의해 지원 됩니다. 저자는 UTE-시설 구조 Fédérative 드 검색 프랑수아 Bonamy의 감사합니다. 저자는 또한 그녀의 기술 지원 제공 하는 IMR5 세포에 대 한 박사 S. Suzin (Inserm, 파리)와 양 H. Estéphan 감사 합니다.

동물 주택 및 실험 절차 (계약 #C44-278와 #APAFIS 03479.01) 프랑스 정부에 의해 승인 되었다. 동물 보호 및 절차 #2013-118 과학적인 목적을 위해 사용 하는 동물의 보호에 지시문 EU 2010/63/EU 및 프랑스 법에서 실시 했다.
1. mAb 8B6 약물 상호 작용 사이 Topotecan 체 외에서 평가
<ol><li>96-잘 샘플 준비 주의: 기관의 건강과 안전 위원회를 참조 하 고 실험실 안전에 관련 ?...

<ol>
	<li>Chou, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+basis,+experimental+design,+and+computerized+simulation+of+synergism+and+antagonism+in+drug+combination+studies.">Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies.</a> Pharmacological Reviews. 58 (3), 621-681 (2006).</li><li>Bayat Mokhtari, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+therapy+in+combating+cancer.">Combination therapy in combating cancer.</a> Oncotarget. 8 (23), 38022-38043 (2017).</li><li>Zahreddine, H., Borden, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+and+insights+into+drug+resistance+in+cancer.">Mechanisms and insights into drug resistance in cancer.</a> Frontiers in Pharmacology. 4, 28 (2013).</li><li>Martin, T. P., Baguley, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re:+"Postoperative+validation+of+bone-anchored+implants+in+the+single-sided+deafness+population."+Snapp+et+al.+Otol+Neurotol+2012:+33;291-6.">Re: "Postoperative validation of bone-anchored implants in the single-sided deafness population." Snapp et al. Otol Neurotol 2012: 33;291-6.</a> Otol Neurotol. 34 (4), 777-778 (2013).</li><li>Choi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitization+of+lung+cancer+cells+by+altered+dimerization+of+HSP27.">Sensitization of lung cancer cells by altered dimerization of HSP27.</a> Oncotarget. 8 (62), 105372-105382 (2017).</li><li>Weiner, L. M., Surana, R., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies:+versatile+platforms+for+cancer+immunotherapy.">Monoclonal antibodies: versatile platforms for cancer immunotherapy.</a> Nature Reviews Immunology. 10 (5), 317-327 (2010).</li><li>Mellor, J. D., Brown, M. P., Irving, H. R., Zalcberg, J. R., Dobrovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+review+of+the+role+of+Fc+gamma+receptor+polymorphisms+in+the+response+to+monoclonal+antibodies+in+cancer.">A critical review of the role of Fc gamma receptor polymorphisms in the response to monoclonal antibodies in cancer.</a> Journal of Hematology &amp; Oncology. 6, 1 (2013).</li><li>Kowalczyk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+GD2-specific+14G2a+monoclonal+antibody+induces+apoptosis+and+enhances+cytotoxicity+of+chemotherapeutic+drugs+in+IMR-32+human+neuroblastoma+cells.">The GD2-specific 14G2a monoclonal antibody induces apoptosis and enhances cytotoxicity of chemotherapeutic drugs in IMR-32 human neuroblastoma cells.</a> Cancer Letters. 281 (2), 171-182 (2009).</li><li>Retter, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+proapoptotic+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody+and+evaluation+of+its+therapeutic+effect+on+melanoma+and+small+cell+lung+carcinoma+xenografts.">Characterization of a proapoptotic antiganglioside GM2 monoclonal antibody and evaluation of its therapeutic effect on melanoma and small cell lung carcinoma xenografts.</a> Cancer Research. 65 (14), 6425-6434 (2005).</li><li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+induction+of+human+lung+cancer+cell+line+in+multicellular+heterospheroids+with+humanized+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody.">Apoptosis induction of human lung cancer cell line in multicellular heterospheroids with humanized antiganglioside GM2 monoclonal antibody.</a> Cancer Research. 59 (20), 5323-5330 (1999).</li><li>Cochonneau, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+cycle+arrest+and+apoptosis+induced+by+O-acetyl-GD2-specific+monoclonal+antibody+8B6+inhibits+tumor+growth+in+vitro+and+in+vivo.">Cell cycle arrest and apoptosis induced by O-acetyl-GD2-specific monoclonal antibody 8B6 inhibits tumor growth in vitro and in vivo.</a> Cancer Letters. 333 (2), 194-204 (2013).</li><li>Chou, T. C., Martin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CompuSyn for drug combinations: PC software and user&#8217;s guide: a computer program for quantitation of synergism and antagonism in drug combinations, and the determination of IC50 and ED50 and LD50 values. , (2005).</li><li>Alvarez-Rueda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monoclonal+antibody+to+O-acetyl-GD2+ganglioside+and+not+to+GD2+shows+potent+anti-tumor+activity+without+peripheral+nervous+system+cross-reactivity.">A monoclonal antibody to O-acetyl-GD2 ganglioside and not to GD2 shows potent anti-tumor activity without peripheral nervous system cross-reactivity.</a> PLoS One. 6 (9), e25220 (2011).</li><li>Faraj, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroblastoma+chemotherapy+can+be+augmented+by+immunotargeting+O-acetyl-GD2+tumor-associated+ganglioside.">Neuroblastoma chemotherapy can be augmented by immunotargeting O-acetyl-GD2 tumor-associated ganglioside.</a> Oncoimmunology. 7 (1), e1373232 (2017).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Ullman-Cullere, M. H., Foltz, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+condition+scoring:+a+rapid+and+accurate+method+for+assessing+health+status+in+mice.">Body condition scoring: a rapid and accurate method for assessing health status in mice.</a> Laboratory Animal Science. 49 (3), 319-323 (1999).</li><li>Teicher, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+for+in+vitro+and+in+vivo+synergy.">Assays for in vitro and in vivo synergy.</a> Methods in Molecular Medicine. 85, 297-321 (2003).</li><li>White, D. B., Slocum, H. K., Brun, Y., Wrzosek, C., Greco, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+nonlinear+mixture+response+surface+paradigm+for+the+study+of+synergism:+a+three+drug+example.">A new nonlinear mixture response surface paradigm for the study of synergism: a three drug example.</a> Current Drug Metabolism. 4 (5), 399-409 (2003).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+colorimetric+assay+for+cellular+growth+and+survival:+application+to+proliferation+and+cytotoxicity+assays.">Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.</a> Journal of Immunological Methods. 65 (1-2), 55-63 (1983).</li><li>Huyck, L., Ampe, C., Van Troys, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+XTT+cell+proliferation+assay+applied+to+cell+layers+embedded+in+three-dimensional+matrix.">The XTT cell proliferation assay applied to cell layers embedded in three-dimensional matrix.</a> Assay and Drug Development Technologies. 10 (4), 382-392 (2012).</li><li>Thompson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+of+topotecan+in+combination+with+vincristine+for+treatment+of+pediatric+solid+tumor+xenografts.">Synergy of topotecan in combination with vincristine for treatment of pediatric solid tumor xenografts.</a> Clinical Cancer Research. 5 (11), 3617-3631 (1999).</li><li>Tan, M., Fang, H. B., Tian, G. L., Houghton, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+design+and+sample+size+determination+for+testing+synergism+in+drug+combination+studies+based+on+uniform+measures.">Experimental design and sample size determination for testing synergism in drug combination studies based on uniform measures.</a> Statistic in Medicine. 22 (13), 2091-2100 (2003).</li><li>Tang, X. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+EPHB6,+EFNB2,+and+EFNB3+expressions+in+human+neuroblastoma.">Implications of EPHB6, EFNB2, and EFNB3 expressions in human neuroblastoma.</a> Proceding of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (20), 10936-10941 (2000).</li><li>Mehta, R. R., Graves, J. M., Hart, G. D., Shilkaitis, A., Das Gupta, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+metastasis+of+human+breast+carcinomas+with+Matrigel+in+athymic+mice.">Growth and metastasis of human breast carcinomas with Matrigel in athymic mice.</a> Breast Cancer Research and Treatment. 25 (1), 65-71 (1993).</li><li>Mullen, P., Ritchie, A., Langdon, S. P., Miller, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Matrigel+on+the+tumorigenicity+of+human+breast+and+ovarian+carcinoma+cell+lines.">Effect of Matrigel on the tumorigenicity of human breast and ovarian carcinoma cell lines.</a> International Journal of Cancer. 67 (6), 816-820 (1996).</li><li>Feng, C., Tang, S., Wang, J., Liu, Y., Yang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topotecan+plus+cyclophosphamide+as+maintenance+chemotherapy+for+children+with+high-risk+neuroblastoma+in+complete+remission:+short-term+curative+effects+and+toxicity.">Topotecan plus cyclophosphamide as maintenance chemotherapy for children with high-risk neuroblastoma in complete remission: short-term curative effects and toxicity.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 33 (8), 1107-1110 (2013).</li><li>Cheung, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganglioside+GD2+specific+monoclonal+antibody+3F8:+a+phase+I+study+in+patients+with+neuroblastoma+and+malignant+melanoma.">Ganglioside GD2 specific monoclonal antibody 3F8: a phase I study in patients with neuroblastoma and malignant melanoma.</a> Journal of Clininical Oncology. 5 (9), 1430-1440 (1987).</li><li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Dayde, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+burden+influences+exposure+and+response+to+rituximab:+pharmacokinetic-pharmacodynamic+modeling+using+a+syngeneic+bioluminescent+murine+model+expressing+human+CD20.">Tumor burden influences exposure and response to rituximab: pharmacokinetic-pharmacodynamic modeling using a syngeneic bioluminescent murine model expressing human CD20.</a> Blood. 113 (16), 3765-3772 (2009).</li><li>Racki, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD-scid+IL2rgamma(null)+mouse+model+of+human+skin+transplantation+and+allograft+rejection.">NOD-scid IL2rgamma(null) mouse model of human skin transplantation and allograft rejection.</a> Transplantation. 89 (5), 527-536 (2010).</li><li>Sherif, A., Winerdal, M., Winqvist, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Responses+to+Neoadjuvant+Chemotherapy+in+Muscle+Invasive+Bladder+Cancer.">Immune Responses to Neoadjuvant Chemotherapy in Muscle Invasive Bladder Cancer.</a> Bladder Cancer. 4 (1), 1-7 (2018).</li></ol>

약물 상호 작용의 효과 예측, 세 가지 방법을 사용할 수 있습니다: isobologram 방법론17, 비선형 혼합 모형18그리고 조합 색인1. 결합 인덱스 분석은 그것의 응용 사용자 컴퓨터 프로그램의 가용성에 의해 간단 하 게 하기 때문에 가장 일반적으로 사용 됩니다. 이 위해 우리는 먼저 MTT 분석 결과19를 수행 하 여 단독으로 또는 조합?...

많은 암 종류의 치료에 접근 하는 기존의 방식은 monotherapy에 근거 했다. 경우에 그것은 여전히 많은 경우에 사용 하 고,이 방법이 결합된 요법2선택에 지도 하는 몇 가지 장애물을 만났다. 특히, 암 세포 개발 대안 생존 메커니즘3, 치료 실패 환자4결과 유도 하 여 단일 약물으로 치료 하면 저항을 더 따르게 됩니다. 또한, monotherapy에 약은 높은 복용량에서 관리 일반적으로. 이 상황을 자주 참을 수 의사 치료2중지를 강제로 수 있는 강한 복용량 의존 부작용의 발생에 발생 합니다. 이러한 이유로 항 암 분자의 협회는 지금 monotherapy 선호.
이상적인 약물 조합 정상 세포에 대 한 증가 독성 없이 종양 세포에 대 한 시너지에 행동 하는 그 것입니다. 성분 치료 효과 별도로 행동 하는 각 개별 약물의 합계 보다 큰 두 개 이상의 약물의 상호 작용을 말합니다. 이러한 상호 작용은 향상 된 임상 치료 효능2발생할 수 있습니다. 그것은 치료 저항을 제한, 효능, 증가 하 고 또한 독성2를 줄일 수 있습니다. 사실, 다른 경로 대상으로 그들의 부작용을 낮은 각 약물의 복용량을 줄일 수 있습니다. 또한, 분자의 하나 또한 암 세포에 대하여 sensitizing 요원으로 사용할 수 있습니다. 적은 복용량 사용된5수 그리고 두 번째 약물의 효과 민감하게 셀에 향상 될 수 있습니다.
결합된 치료는 화학요법 약물 및 생물 의약품, 단일 클론 항 체6등 두 개 이상 포함할 수 있습니다. 이러한 mAbs 특별히 대상으로 관심과 항 체 의존 세포 매개 세포 독성 (ADCC)를 포함 하 여 면역 경로 통해 종양 세포를 죽 일 수의 세포 표면 항 원 표출 세포 면역 효과 기 세포의 참여와 7, 그리고 보완 의존 세포 독성 (CDC)6. 그들은 또한 메커니즘을 통해 비 면역학 apoptosis8,9,,1011중재 역할 수 있습니다. 이 경우에, 프로그램 된 세포 죽음의 과정의 유도 고 수 있습니다 암 세포를 민감하게, 그들의 기능을 약하게 관련된 화학요법 약물 더 효과적인 낮은 복용량에. 이와 같이, proapoptotic mAb antineoplastic 약물 조합 식이요법을 디자인을 위한 좋은 후보자 이다.
다른 수학적 모델 마약 성분; 평가 설명 되었습니다. 그들 중 하나는 결합 인덱스 방법1을 기반으로 합니다. 이 방법은 추1에 의해 개발 된 중간값 효과 원리를 기반으로 합니다. 중간값 효과 방정식 상관 약 복용량 및 약물 효과 다음과 같이 한다.
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq1.jpg">
여기서, D 는 약 복용량; Dm 은 중간값 효과 복용량; Fa 는 분수; 복용량에 의해 영향을 m 복용량 효과 플롯1의 모양을 의미 하는 지 수입니다. 중간값 효과 복용량은 dx 를 억제 또는 셀의 "x" % 죽이고 약물의 복용량을 계산 하는 데 사용 됩니다. CI 값1을 다음과 같이 약물 조합의 첨가제 효과 평가 하기 위해 다음 계산 됩니다.
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq2.jpg" style="font-size: 14px;">
CI 값 1 나타냅니다 첨가제 효과 CI 값 < 1 >의 CI 값 하면서 시너지 효과 나타냅니다 1 적개심1나타냅니다. 이 방법의 응용 프로그램은 컴퓨터 프로그램, CompuSyn, 성분 및 모든 복용량에서 적개심 결정 하는의 가용성에 의해 촉진 추가 또는 효과 레벨 시뮬레이션 자동으로12.
우리의 그룹 오 틸 g d 2 ganglioside (OAcGD2) 신경 항 원13 mAb 8B6 특정 개발과이 mAb는 apoptosis11의 특성을 가진 세포 죽음을 유도 수 입증 했다. MAb 8B6 antineoplastic 요원 topotecan 신경 세포를 민감하게 할 수 있는지 여부를 테스트 하려면 우리는 위에서 언급 한 방법 추1에 의해 개발 된 적응. 첫째, 우리는 mAb 8B6 및 topotecan의 효과적인 복용량 50 (에 드50) 값을 결정합니다. 다음,에 드50 값에 따라 두 화합물의 equipotent 비율 신경 세포 위에서 언급 한 시뮬레이션 소프트웨어를 사용 하 여 CI 값을 결정 하기 위해 노출 됩니다. 이 방법은 mAb 8B6 및 topotecan 시험관사이 성분 설명 수 있습니다. 다음, 우리는 더이 조합은 처방에서 vivo에서의 안전과 효능을 평가 하기 위해 프로토콜을 설명 합니다. 이 프로토콜은 전 임상 연구에서 강력 하 고 안전한 항 암 mAb 및 화학요법 에이전트 조합 선택에 쉽게 적용할 수 있습니다. 이 연구의 도식 대표는 그림 1에 제공 됩니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1389px;" width="1390">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Cell Proliferation kit (MTT)</td>
			<td style="width:161px;">Roche</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">CompuSyn software</td>
			<td style="width:161px;">ComboSyn</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Combosyn can be downloaded for free at http://www.combosyn.com</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">BIO-1556</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Fetal calf serum</td>
			<td style="width:161px;">Eurobio</td>
			<td style="width:132px;">CVFSVFF00-01</td>
			<td style="width:852px;">10% heat-inactivated fetal calf serum in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Firefox&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Mozilla Corporation</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Firefox can be downloaded for free at http://www.mozilla.org/en-US/firefox/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Heat lamp</td>
			<td style="width:161px;">Verre&#38;Quartz</td>
			<td style="width:132px;">4003/1R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Human neuroblastoma IMR-5 cell line</td>
			<td style="width:161px;">Accegen Biotechnology</td>
			<td style="width:132px;">ABC-TC0450</td>
			<td style="width:852px;">IMR-5 is a clone of the human neuroblastoma cell line IMR32 5459762. IMR-5 cells were generously provided by Dr. Santos Susin (U.872, Paris, France)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">25030-024</td>
			<td style="width:852px;">2 mM in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Lysis solution&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Roche&#160;</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">mAb 8B6</td>
			<td style="width:161px;">University of Nantes</td>
			<td style="width:132px;">N/A</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Matrigel</td>
			<td style="width:161px;">Corning</td>
			<td style="width:132px;">354248</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Multiskan FC</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific&#160;</td>
			<td style="width:132px;">N08625</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 21G 1 &#189;&#160;</td>
			<td style="width:161px;">BD Microlance</td>
			<td style="width:132px;">304432</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 25G 1</td>
			<td style="width:161px;">Terumo</td>
			<td style="width:132px;">NN-2525R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">NSG mice</td>
			<td style="width:161px;">Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:132px;">5557</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Nunc MicroWell 96-well microplates</td>
			<td style="width:161px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:132px;">167008</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS</td>
			<td style="width:161px;">VWR</td>
			<td style="width:132px;">L182-10</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS, 0,05% EDTA</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PC that runs windows 7</td>
			<td style="width:161px;">Microsoft</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Windows 7 can be purchased at http://www.microsoft.com/en-gb/software-download/windows7</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">15140-122</td>
			<td style="width:852px;">100 units/mL penicillin and 100 mg/mL streptomycin in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Reagent reservoir</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific</td>
			<td style="width:132px;">8094</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Rodent restrainer</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">TV-150-SM</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">31870-025</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Syringe 1 mL</td>
			<td style="width:161px;">Henke Sass Wolf</td>
			<td style="width:132px;">5010.200V0</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Topotecan</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:132px;">T2705</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation

적대적 단일 클론 항 체 (mAb) 화학요법 에이전트에 의해 potentiation 암에 대 한 효과적이 고 안전한 치료 설계를 위한 중요 한 전략을 구성 합니다. 여기 우리는 전 임상 단계에서 합리적인 조합을 식별 하는 프로토콜을 제공 합니다. 첫째, 우리는 Chou와 Talalay1의 조합 인덱스 방정식을 사용 하 여 항 암 제 mAb 및 세포 독성 약물 사이 성분 평가 셀 기반 분석 결과 설명 합니다. 측정의 종양 세포 약물 및 항 체-감도 MTT 분석 결과, 다음 조합 색인 (CI) 값을 계산 하는 자동화 된 컴퓨터 분석을 사용 하 여 포함 됩니다. CI 값 < 1 성분 테스트 mAbs와 세포 독성 대리인1사이 나타냅니다. 생체 외에서 연구 결과 vivo에서승산이 더이 종이 식 종양 모델에서 조합 처방 효능을 평가 하는 방법을 설명 합니다. 이 모델에서 결합 된 처방 크게 종양의 성장, 단일 에이전트 컨트롤에 비해 상당한 확장된 생존에 어떤 결과 지연 합니다. 중요 한 것은, vivo에서 실험 보여 조합 식이요법 잘 용납입니다. 이 프로토콜에는 항 암 약물 조합 전 임상 모델에서의 효과적인 평가 임상 시험에서 평가 하는 합리적인 조합 식별 수 있습니다.

대표 결과 및 수치는 이전 게시 작업14허가 적응.
안티 OAcGD2 mAb 8B6 Synergistically 신경 세포 선 성장에 Topotecan의 억제 효과 향상:
하는 약물 및 항 체 농도 성분 topotecan 및 mAb 8B6, 약물 및 항 체 감도 MTT 분석 결과 사용 하 여 신경 세포가 먼저 측정 했다 인?...

Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation

이 프로토콜 Chou와 Talalay 조합 인덱스 방정식을 사용 하 여 항 암 항 체와 전 임상 모델에서 antineoplastic 마약 성분 평가 하는 방법을 설명 합니다.

Potentiation Antineoplastic 약물으로 항 암 항 체 효능: 조합 인덱스 방정식을 사용 하 여 항 체-마약 성분의 검출

Potentiation of hostile monoclonal antibodies (mAb) by chemotherapeutic agents constitutes a valuable strategy for designing effective and safer therapy ...

화학요법과 결합된 면역 요법은 암에 있는 능률적인 치료를 개발하는 혁신적인 접근을 나타냅니다. 주요 목표는 시너지 효과를 달성하는 것입니다, 치료 효과, 복용량 및 독성 감소, 최소화 하거나 약물 저항의 유도를 지연. 그러나, 실용적이고 윤리적인 이유로, 환자에서 시너지 효과를 결정하는 것은 불가능합니다. 따라서, 임상 시험에서 직접 조합하기 전에, Prenicaptor 조합 연구, 시험관 내 및/또는 동물에서, 임상 연구에 대한 근거를 얻기 위하여 실행되어야 한다. 약물 간의 시너지 효과를 정량화하기 위한 간단한 견고한 방법은 이 비디오에서 설명한 바와 같이 슈안 탈랄레가 개발한 조합 지수 방정식을 기반으로 합니다. 이 방법을 사용하여, 그리고 그것의 전산화 된 시뮬레이션, 우리는 여기에서 증거, 모노 클로노날 항체 8B6 사이의 시너지 효과, 이는 O-아세틸-GD2 강교 측 신경 모세포종 항원과 신경 모세포종 세포에 화학 요법 약물 Topotecan에 대한 특정. 간략하게, 인간 IMO에서 각 화합물의 유효 용량 50 값을 결정한 후, 5 신경모세포종 세포주, 이들 세포는 두 화합물의 공평한 비율로 삽관되었고, 조합 지수 값은 자동화된 컴퓨터 시뮬레이션을 사용하여 계산하였다. 우리는 다음으로 생체, IMO, 5 종양 xenographed 모형에서 이 결과를 확인했습니다. 우리는 T75 플라스크에서 IMR-5 세포를 성장, 현미경으로 그들을 관찰, 세포 합류를 확인. 플라스크에서 세포 배지를 아스피레이트하고 PBS 5mL로 세척합니다. 0.05%EDTA/PBS 솔루션3mL를 추가합니다. 플라스크를 인큐베이터에 3분간 반납합니다. 세포 분리를 위한 현미경의 밑에 세포 배양을 검사합니다. 플라스크에 완전한 셀 배지 10mL를 추가하고 세포 현탁액을 멸균, 15mL 원추형 튜브로 옮킨다. 혈청계를 사용하여 300 g.Count 세포에서 5분 동안 원심분리기. 상체를 제거하고 폐기합니다. 완전한 성장 배지에서 세포를 다시 일시 중단합니다.중간 부피를 조정하여 100, 000 세포/mL.Seed 84 우물, 96 개의 잘 배양 플레이트10, 000 세포, 즉 세포 현탁액의 100 마이크로리터입니다. 세포 인큐베이터에서 18시간 동안 세포를 배양합니다.완전한 성장 매체의 500 마이크로리터에 단일 클론 항체를 희석하여 mL당 240 마이크로 그램의 단일 클론 항체 농도를 가진 항체 작동 용액을 얻습니다.프로토콜에 표시된 바와 같이 5 개의 2 배 연속 망상을 수행합니다. 최종 농도 120 나노 몰러약물 작업 용액을 얻기 위해 완전한 성장 매체의 500 마이크로 리터에서 약물을 희석. 프로토콜에 표시된 대로 5배, 2배 의 직렬 망상을 수행합니다. 약물플러스 단클론 애니바디 솔루션과 동일한 방식으로 희석합니다. 최종 농도에 도달하려면 이 실험 레이아웃에 표시된 대로 각 약물 솔루션의 50 마이크로리터를 해당 우물에 전달합니다. 인큐베이터에서 72시간 동안 세포를 배양합니다. 각 웰에 10마이크로리터의 MTT 시약 솔루션을 추가합니다. 섭씨 37도에서 4시간 동안 배양하세요. 멀티채널 파이펫을 사용하여 100마이크로리터의 리신 용액을 각 웰에 넣고 파이펫팅으로 철저히 섞습니다. 가습실에서 섭씨 37도에서 4시간 동안 배양합니다. 분광광계를 사용하여 570 및 620 나노미터에서 흡수를 제거하십시오. 셀 생존 가능성을 다음과 같이 계산합니다. 다음 방정식을 사용하여 영향을 받는 값의 분수를 계산합니다. 시뮬레이션 소프트웨어를 실행하고 새 실험 버튼을 클릭하여 주 창을 가져옵니다. 실험 이름을 입력합니다. 새 단일 약물을 클릭합니다. 이름을 입력합니다. 약어를 입력합니다. 약물 농도 단위를 입력합니다. 데이터 1 용량 및 FA 값을 입력합니다. Enter.Repeat 이 단계를 모든 데이터 요소가 입력할 때까지 반복합니다. 완료를 클릭합니다.동일한 단계를 따라 단일 클론 항체 데이터 포인트를 입력합니다. 신약 콤보를 클릭합니다.약물 및 단일 클론 항체를 선택합니다. 상수 비율을 선택합니다.확인을 클릭합니다. 이름을 입력합니다. 약어를 입력합니다. 약물 단일 클론 항체 비율을 입력합니다. 데이터 1 용량을 입력합니다. Enter.이 프로그램은 자동으로 단일 클론 항체 8B6 및 콤보의 복용량을 계산합니다. 데이터 1 FA 값을 입력합니다.Enter.Repeat 이 단계를 모든 데이터 요소가 입력할 때까지 반복합니다. 완료.다음을 클릭, 보고서 생성을 클릭합니다.약물 및 단일 클론 항체를 선택 한 다음 확인을 클릭합니다. 콤보를 선택한 다음 확인을 클릭합니다. 헤더, CI 테이블 및 요약 테이블을 선택한 다음 확인을 클릭합니다. 파일 이름과 분석을 입력하고 저장을 클릭하여 보고서를 생성합니다. 보고서는 기본 웹 브라우저에서 자동으로 열립니다. 이 보고서에는 제목, 날짜, 최종 이름, 설명 주, m, Dm 및 r 파라미터, 단독 요법 또는 조합으로 사용되는 제제에 대한 유효 용량 50, 유효 용량 50, 유효 용량 50, 75, 90 및 95.A 조합 인덱스 값이 1 미만인 시너지 효과를 나타내는 요약 표 섹션이 포함되어 있습니다. 값은 첨가도를 나타냅니다. 값이 1보다 큰 값은 적대감을 나타냅니다. 사용 전에 4도 C 냉장고에 얼음에 유리병을 침수하여 하룻밤 지하 멤브레인 매트릭스를 해동하십시오. 지하 막 메트릭과 접촉하는 모든 문화 복 또는 미디어는 미리 냉각되어야 합니다. 문화 IMR5를 수확하십시오. 세포를 15mL 원문 관및 원심분리기로 5분 동안 300g으로 옮긴다. 상부체를 폐기합니다. 15mL 얼음 차가운 PBS로 셀을 두 번 세척하십시오. 얼음-차가운 PBS에서 mL당 5백만 개의 세포에 대한 세포 현탁액을 준비합니다. 세포 현탁액을 1.5 mL 마이크로튜브로 전송합니다. 회전 지하 막 매트릭스 유리병. mL.100만 세포의 세포 현탁액을 얻기 위해 파이펫팅에 혼합된 지하 막 매트릭스 시약 1부(셀 서스펜션)를 얼음 위에 보관한다. 주사가 수행 될 곳의 측면을 면도. 세포를 혼합하고 셀 서스펜션을 21g 바늘로 장착된 1mL 주사기에 조심스럽게 그립니다. 주사기에 기포가 없는지 확인하십시오. 방부제 용액으로 마우스의 접종 부위를 소독합니다. 주입 부위의 손가락 사이에 마우스 피부를 부드럽게 짜냅니다. 바늘을 스킨폴드에 정확히 삽입합니다. 피하 주사를 보장하기 위해 조직에 바늘을 깊숙이 두지 마십시오. IMR5 세포 현탁액의 100 마이크로리터를 피하로 주입하십시오. 주사기를 회전하여 액체 확산을 방지하고 바늘을 철회하십시오. 체중과 종양 성장을 위해 마우스를 모니터링하십시오. 구경으로 종양의 길이와 폭을 측정합니다. 이 수식을 사용하여 종양 부피를 계산합니다. 종양이 50~ 60mm의 평균 부피에 도달하면 치료를 시작하세요.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

췌장암의 형광 동소 이식 마우스 모델

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

연구

암 연구학

Anticancer Efficacy of Photodynamic Therapy with Lung Cancer-Targeted Nanoparticles

폐암 표적 나노 입자와 광 역학 치료의 항암 효능

Photodynamic therapy (PDT) is a non-invasive and non-surgical method representing an attractive alternative choice for lung cancer treatment. ...

Two-dimensional Gel Electrophoresis Coupled with Mass Spectrometry Methods for an Analysis of Human Pituitary Adenoma Tissue Proteome

2 차원 젤 전기 이동 법 질량 분석 방법으로 인간의 뇌 Adenoma 조직 프로테옴의 분석에 대 한 결합

Human pituitary adenoma (PA) is a common tumor that occurs in the human pituitary gland in the hypothalamus-pituitary-targeted organ axis systems, and may ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping Orthotopic Homograft (Syngeneic) Murine 기본 KPC 췌 장 Ductal 선 암의 Cytometry로의

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Preclinical Assessment of the Bioactivity of the Anticancer Coumarin OT48 by Spheroids, Colony Formation Assays, and Zebrafish Xenografts

Spheroids, 식민지 대형 분석 실험, 그리고 Zebrafish Xenografts 제 Coumarin OT48의 Bioactivity의 전 임상 평가

In vitro and in vivo pre-clinical screening of novel therapeutic agents are an essential tool in cancer drug discovery. Although human cancer cell lines ...

Assessment of Resistance to Tyrosine Kinase Inhibitors by an Interrogation of Signal Transduction Pathways by Antibody Arrays

항 체 배열에 의해 신호 변환 통로의 심문에 의해 Tyrosine Kinase 억제제에 평가

Cancer patients with an aberrant regulation of the protein phosphorylation networks are often treated with the tyrosine kinase inhibitors. Response rates ...

Detection of Protease Activity by Fluorescent Peptide Zymography

형광 성 펩 티 드 Zymography에 의해 프로 테아 제 활동의 탐지

The purpose of this method is to measure the proteolytic activity of complex biological samples. The samples are separated by molecular weight using ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

실용적이고 실행 가능한 방법 세트를 사용하여 RAF 패밀리 키나아제의 질병 관련 돌연변이 특성화

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Detection of Retrotransposition Activity of Hot LINE-1s by Long-Distance Inverse PCR

장거리 역PCR에 의한 핫 LINE-1의 역변도 활성 감지

Long interspersed nuclear elements 1 (LINE-1s) are the only family of mobile genetic elements in the human genome that can move autonomously. They do so ...

Oncogenic Gene Fusion Detection Using Anchored Multiplex Polymerase Chain Reaction Followed by Next Generation Sequencing

앵커드 멀티플렉스 폴리머라제 연쇄 반응을 이용한 종양발생 유전자 융합 검출 후 차세대 염기서열 분석

Gene fusions frequently contribute to the oncogenic phenotype of many different types of cancer. Additionally, the presence of certain fusions in samples ...