Name: potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation
Uploaded: 2019-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

Hibe desteği: Fondation de projesi de L 'Université de Nantes, les Bagouz' à Manon, La Ligue contre le kanser Comite de Loire-Atlantique, comité du Morbihan ve Comite de Vendée, une gül dökün S.A.R.A.H, L'Etoile de Martin ve la Société Française de Lutte contre les Kanser et les leucémies de L'Enfant et de L'adolescent (SFCE). M.B. ve J.F. La Ligue Contre Le kanser tarafından desteklenir. Yazarlar UTE tesisin yapısı Fédérative de Recherche François Bonamy, teşekkür ederim. Yazarlar onun teknik yardım almak için Ayrıca Dr. S. IMR5 hücreler sağlamak için Suzin (INSERM, Paris) ve Bayan H. Estéphan teşekkür ederiz.

Hayvan barınma ve deneysel bir işlem (anlaşmaları #C44-278 ve #APAFIS 03479.01) Fransız hükümeti tarafından kabul edildi. Hayvan bakımı ve yordamlar yönergesi AB 2010/63/AB ve Fransız hukuku altında #2013-118 bilimsel amaçlarla kullanılan hayvanların korunması üzerinde gerçekleştirilmiştir.
1. ilaç etkileşimi arasında mAb 8B6 ve Topotecan In Vitro değerlendirilmesi
<ol><li>96-şey numune hazırlama Dikkat: kurumun sağlık ve Güvenlik Ko...

<ol>
	<li>Chou, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theoretical+basis,+experimental+design,+and+computerized+simulation+of+synergism+and+antagonism+in+drug+combination+studies.">Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies.</a> Pharmacological Reviews. 58 (3), 621-681 (2006).</li><li>Bayat Mokhtari, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+therapy+in+combating+cancer.">Combination therapy in combating cancer.</a> Oncotarget. 8 (23), 38022-38043 (2017).</li><li>Zahreddine, H., Borden, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+and+insights+into+drug+resistance+in+cancer.">Mechanisms and insights into drug resistance in cancer.</a> Frontiers in Pharmacology. 4, 28 (2013).</li><li>Martin, T. P., Baguley, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re:+"Postoperative+validation+of+bone-anchored+implants+in+the+single-sided+deafness+population."+Snapp+et+al.+Otol+Neurotol+2012:+33;291-6.">Re: "Postoperative validation of bone-anchored implants in the single-sided deafness population." Snapp et al. Otol Neurotol 2012: 33;291-6.</a> Otol Neurotol. 34 (4), 777-778 (2013).</li><li>Choi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitization+of+lung+cancer+cells+by+altered+dimerization+of+HSP27.">Sensitization of lung cancer cells by altered dimerization of HSP27.</a> Oncotarget. 8 (62), 105372-105382 (2017).</li><li>Weiner, L. M., Surana, R., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies:+versatile+platforms+for+cancer+immunotherapy.">Monoclonal antibodies: versatile platforms for cancer immunotherapy.</a> Nature Reviews Immunology. 10 (5), 317-327 (2010).</li><li>Mellor, J. D., Brown, M. P., Irving, H. R., Zalcberg, J. R., Dobrovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+review+of+the+role+of+Fc+gamma+receptor+polymorphisms+in+the+response+to+monoclonal+antibodies+in+cancer.">A critical review of the role of Fc gamma receptor polymorphisms in the response to monoclonal antibodies in cancer.</a> Journal of Hematology &amp; Oncology. 6, 1 (2013).</li><li>Kowalczyk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+GD2-specific+14G2a+monoclonal+antibody+induces+apoptosis+and+enhances+cytotoxicity+of+chemotherapeutic+drugs+in+IMR-32+human+neuroblastoma+cells.">The GD2-specific 14G2a monoclonal antibody induces apoptosis and enhances cytotoxicity of chemotherapeutic drugs in IMR-32 human neuroblastoma cells.</a> Cancer Letters. 281 (2), 171-182 (2009).</li><li>Retter, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+proapoptotic+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody+and+evaluation+of+its+therapeutic+effect+on+melanoma+and+small+cell+lung+carcinoma+xenografts.">Characterization of a proapoptotic antiganglioside GM2 monoclonal antibody and evaluation of its therapeutic effect on melanoma and small cell lung carcinoma xenografts.</a> Cancer Research. 65 (14), 6425-6434 (2005).</li><li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+induction+of+human+lung+cancer+cell+line+in+multicellular+heterospheroids+with+humanized+antiganglioside+GM2+monoclonal+antibody.">Apoptosis induction of human lung cancer cell line in multicellular heterospheroids with humanized antiganglioside GM2 monoclonal antibody.</a> Cancer Research. 59 (20), 5323-5330 (1999).</li><li>Cochonneau, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+cycle+arrest+and+apoptosis+induced+by+O-acetyl-GD2-specific+monoclonal+antibody+8B6+inhibits+tumor+growth+in+vitro+and+in+vivo.">Cell cycle arrest and apoptosis induced by O-acetyl-GD2-specific monoclonal antibody 8B6 inhibits tumor growth in vitro and in vivo.</a> Cancer Letters. 333 (2), 194-204 (2013).</li><li>Chou, T. C., Martin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CompuSyn for drug combinations: PC software and user&#8217;s guide: a computer program for quantitation of synergism and antagonism in drug combinations, and the determination of IC50 and ED50 and LD50 values. , (2005).</li><li>Alvarez-Rueda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monoclonal+antibody+to+O-acetyl-GD2+ganglioside+and+not+to+GD2+shows+potent+anti-tumor+activity+without+peripheral+nervous+system+cross-reactivity.">A monoclonal antibody to O-acetyl-GD2 ganglioside and not to GD2 shows potent anti-tumor activity without peripheral nervous system cross-reactivity.</a> PLoS One. 6 (9), e25220 (2011).</li><li>Faraj, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroblastoma+chemotherapy+can+be+augmented+by+immunotargeting+O-acetyl-GD2+tumor-associated+ganglioside.">Neuroblastoma chemotherapy can be augmented by immunotargeting O-acetyl-GD2 tumor-associated ganglioside.</a> Oncoimmunology. 7 (1), e1373232 (2017).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Ullman-Cullere, M. H., Foltz, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+condition+scoring:+a+rapid+and+accurate+method+for+assessing+health+status+in+mice.">Body condition scoring: a rapid and accurate method for assessing health status in mice.</a> Laboratory Animal Science. 49 (3), 319-323 (1999).</li><li>Teicher, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+for+in+vitro+and+in+vivo+synergy.">Assays for in vitro and in vivo synergy.</a> Methods in Molecular Medicine. 85, 297-321 (2003).</li><li>White, D. B., Slocum, H. K., Brun, Y., Wrzosek, C., Greco, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+nonlinear+mixture+response+surface+paradigm+for+the+study+of+synergism:+a+three+drug+example.">A new nonlinear mixture response surface paradigm for the study of synergism: a three drug example.</a> Current Drug Metabolism. 4 (5), 399-409 (2003).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+colorimetric+assay+for+cellular+growth+and+survival:+application+to+proliferation+and+cytotoxicity+assays.">Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.</a> Journal of Immunological Methods. 65 (1-2), 55-63 (1983).</li><li>Huyck, L., Ampe, C., Van Troys, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+XTT+cell+proliferation+assay+applied+to+cell+layers+embedded+in+three-dimensional+matrix.">The XTT cell proliferation assay applied to cell layers embedded in three-dimensional matrix.</a> Assay and Drug Development Technologies. 10 (4), 382-392 (2012).</li><li>Thompson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+of+topotecan+in+combination+with+vincristine+for+treatment+of+pediatric+solid+tumor+xenografts.">Synergy of topotecan in combination with vincristine for treatment of pediatric solid tumor xenografts.</a> Clinical Cancer Research. 5 (11), 3617-3631 (1999).</li><li>Tan, M., Fang, H. B., Tian, G. L., Houghton, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+design+and+sample+size+determination+for+testing+synergism+in+drug+combination+studies+based+on+uniform+measures.">Experimental design and sample size determination for testing synergism in drug combination studies based on uniform measures.</a> Statistic in Medicine. 22 (13), 2091-2100 (2003).</li><li>Tang, X. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+EPHB6,+EFNB2,+and+EFNB3+expressions+in+human+neuroblastoma.">Implications of EPHB6, EFNB2, and EFNB3 expressions in human neuroblastoma.</a> Proceding of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (20), 10936-10941 (2000).</li><li>Mehta, R. R., Graves, J. M., Hart, G. D., Shilkaitis, A., Das Gupta, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+metastasis+of+human+breast+carcinomas+with+Matrigel+in+athymic+mice.">Growth and metastasis of human breast carcinomas with Matrigel in athymic mice.</a> Breast Cancer Research and Treatment. 25 (1), 65-71 (1993).</li><li>Mullen, P., Ritchie, A., Langdon, S. P., Miller, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Matrigel+on+the+tumorigenicity+of+human+breast+and+ovarian+carcinoma+cell+lines.">Effect of Matrigel on the tumorigenicity of human breast and ovarian carcinoma cell lines.</a> International Journal of Cancer. 67 (6), 816-820 (1996).</li><li>Feng, C., Tang, S., Wang, J., Liu, Y., Yang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topotecan+plus+cyclophosphamide+as+maintenance+chemotherapy+for+children+with+high-risk+neuroblastoma+in+complete+remission:+short-term+curative+effects+and+toxicity.">Topotecan plus cyclophosphamide as maintenance chemotherapy for children with high-risk neuroblastoma in complete remission: short-term curative effects and toxicity.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 33 (8), 1107-1110 (2013).</li><li>Cheung, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganglioside+GD2+specific+monoclonal+antibody+3F8:+a+phase+I+study+in+patients+with+neuroblastoma+and+malignant+melanoma.">Ganglioside GD2 specific monoclonal antibody 3F8: a phase I study in patients with neuroblastoma and malignant melanoma.</a> Journal of Clininical Oncology. 5 (9), 1430-1440 (1987).</li><li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Dayde, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+burden+influences+exposure+and+response+to+rituximab:+pharmacokinetic-pharmacodynamic+modeling+using+a+syngeneic+bioluminescent+murine+model+expressing+human+CD20.">Tumor burden influences exposure and response to rituximab: pharmacokinetic-pharmacodynamic modeling using a syngeneic bioluminescent murine model expressing human CD20.</a> Blood. 113 (16), 3765-3772 (2009).</li><li>Racki, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD-scid+IL2rgamma(null)+mouse+model+of+human+skin+transplantation+and+allograft+rejection.">NOD-scid IL2rgamma(null) mouse model of human skin transplantation and allograft rejection.</a> Transplantation. 89 (5), 527-536 (2010).</li><li>Sherif, A., Winerdal, M., Winqvist, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Responses+to+Neoadjuvant+Chemotherapy+in+Muscle+Invasive+Bladder+Cancer.">Immune Responses to Neoadjuvant Chemotherapy in Muscle Invasive Bladder Cancer.</a> Bladder Cancer. 4 (1), 1-7 (2018).</li></ol>

İlaç etkileşimleri etkisini tahmin etmek için üç yöntem kullanılabilir:1isobologram metodoloji17, doğrusal olmayan karışımı modeli18ve kasanın içindekiler. Uygulama kullanıcı dostu bilgisayar programı kullanılabilirlik tarafından Basitleştirilmiş kombinasyonu Dizin analiz en sık kullanılır. Bu amaçla, ilk doz-etki tepki bir ÇMT tahlil19gerçekleştirerek tek başına veya birlikte, kullanılan her ar...

Çok sayıda farklı kanser tedavisinde geleneksel yaklaşım üzerinde tedavinin dayanıyordu. Hala birçok durumda kullanılır olsa bile, bu yöntem kombine tedaviler2için gözle ilgili için önde gelen çeşitli engeller tanıştım. Özellikle, kanser hücrelerinin alternatif hayatta kalma mekanizmaları3hastalar4terapötik başarısızlıkla sonuçlanan, inducing tarafından tek bir ilaç ile tedavi ederken direnç geliştirmek daha yatkındır. Ayrıca, tedavinin içinde uyuşturucu genellikle yüksek bir doz idare. Bu durum genellikle dayanılmaz ve doktorlar tedavi2durdurmak için kuvvet güçlü doz bağımlı yan etkileri oluşumu içinde sonuçlanır. Bu nedenlerden dolayı antikanser molekülleri şimdi birliğidir tedavinin için tercih etti.
İdeal uyuşturucu kombinasyonları Bu sinerji tümör hücreleri, normal hücrelere karşı artan toksisite olmadan karşı hareket olacaktır. Synergism tedavi edici etkiye ayrı ayrı hareket her bireysel uyuşturucu toplamından daha büyük üreten iki veya daha fazla ilaç etkileşimi gösterir. Bu tür etkileşimler geliştirilmiş klinik tedavi etkinliğinin2' de neden olabilir. Tedavi direnci sınırlar, etkinliğini artırır ve ayrıca toksisite2azaltabilir. Aslında, her ilaç dozu farklı yollar hedefleyerek yan etkileri azaltmak için azaltılabilir. Buna ek olarak, bir moleküller de kanser hücrelerinin karşı duyarlılığı bir ajan olarak hizmet edebilir. İkinci ilacın etkisi duyarlilasmis hücreleri üzerinde gelişmiş ve daha az dozlarda kullanılan5olabilir.
Kombine tedavi iki veya daha fazla kemoterapötik ilaçlar ve/veya monoklonal antikorlar6gibi destekte içerebilir. Bu mAbs özellikle faiz ve immünolojik yollar dahil antikor bağımlı sitotoksisite (CCDA), hücre-aracılı ile tümör hücreleri öldürmek mümkün olan bir hücre yüzey antijeni ifade hücreleri hedef hücreleri bağışıklık efektör katılımı ile 7ve tamamlayıcı bağımlı sitotoksisite (CDC)6. Onlar da üzerinden apoptosis8,9,10,11tarafından aracılı immünolojik olmayan bir mekanizma hareket edebilir. Bu durumda, indüksiyon işleminin programlı hücre ölümü kanser hücrelerinin duyarlı, işlevlerine zayıflatmak ve ilişkili kemoterapötik ilaç daha düşük bir doz daha verimli hale getirmek. Bu nedenle, proapoptotic mAb kombinasyonu rejimlerinin antineoplastic ilaçlarla tasarlamak için iyi adaylar bulunmaktadır.
Uyuşturucu synergism değerlendirmek için farklı matematiksel modeller tarif var; Bunlardan biri üzerinde birlikte Dizin Yöntem1temel alır. Bu yöntem Chou1tarafından geliştirilen medyan-etkisi ilkesine dayanır. Medyan-etkisi denklem uyuşturucu doz ve uyuşturucu etkisi aşağıdaki gibi karşılıklı olarak ilişkilendirir.
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq1.jpg">
D ilaç doz işte; DM medyan-etkisi doz ise; SK doz tarafından etkilenen kesir olduğunu; m 1doz-etki arsa şeklini belirten bir üstür. Medyan-etkisi doz doz Dx engeller ya da "x" yüzde hücre öldürür bir ilacın hesaplamak için kullanılır. CI değer o zaman1aşağıdaki gibi uyuşturucu kombinasyon katkı etkisini değerlendirmek için hesaplanır.
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/58291/58291eq2.jpg" style="font-size: 14px;">
Bir katkı etkisi ve CI değeri 1 CI değeri gösterir < 1 CI değeri ise bir sinerjik etkisi gösterir > 1 husumet1gösterir. Bu yöntemin uygulama daha fazla bir bilgisayar programı, CompuSyn, synergism ve düşmanlık tüm dozda belirleyen kullanılabilirliğini tarafından yönetilir veya etkisi düzeylerini otomatik olarak12simüle.
Bizim grup mAb 8B6 özel O-asetil-GD2 gangliosid (OAcGD2) Nöroblastom antijen13 için geliştirilmiş ve daha fazla bu mAb hücre ölümü apoptozis11özniteliklerle ikna etmek mümkün olduğunu gösterdi. MAb 8B6 antineoplastic Ajan topotecan hücrelere Nöroblastom duyarlı olup olmadığını sınamak için yukarıda belirtilen yöntem Chou1tarafından geliştirilen uyarlanmış. İlk olarak, mAb 8B6 ve topotecan etkili doz 50 (ED50) değerlerini belirleriz. Daha sonra equipotent oranları ED50 değerlere göre iki bileşiklerin Nöroblastom hücrelerle yukarıda belirtilen simülasyon yazılımı kullanarak CI değerlerini belirlemek için sunulur. Bu yöntem synergism mAb 8B6 ve topotecan içinde vitroarasında göstermek için bize izin verir. Sonra biz daha fazla etki gücüne ve bu kombinasyon rejimi içinde vivogüvenliğini değerlendirmek için bir protokol tanımlamak. Bu iletişim kuralı, güçlü ve güvenli antikanser mAb ve kemoterapötik ajan kombinasyonuna preklinik çalışmalarda seçmek için kolayca uygulanabilir. Bu çalışmada şematik gösterimi Şekil 1' de verilmiştir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1389px;" width="1390">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Cell Proliferation kit (MTT)</td>
			<td style="width:161px;">Roche</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">CompuSyn software</td>
			<td style="width:161px;">ComboSyn</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Combosyn can be downloaded for free at http://www.combosyn.com</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">BIO-1556</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Fetal calf serum</td>
			<td style="width:161px;">Eurobio</td>
			<td style="width:132px;">CVFSVFF00-01</td>
			<td style="width:852px;">10% heat-inactivated fetal calf serum in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Firefox&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Mozilla Corporation</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Firefox can be downloaded for free at http://www.mozilla.org/en-US/firefox/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Heat lamp</td>
			<td style="width:161px;">Verre&#38;Quartz</td>
			<td style="width:132px;">4003/1R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Human neuroblastoma IMR-5 cell line</td>
			<td style="width:161px;">Accegen Biotechnology</td>
			<td style="width:132px;">ABC-TC0450</td>
			<td style="width:852px;">IMR-5 is a clone of the human neuroblastoma cell line IMR32 5459762. IMR-5 cells were generously provided by Dr. Santos Susin (U.872, Paris, France)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">25030-024</td>
			<td style="width:852px;">2 mM in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Lysis solution&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Roche&#160;</td>
			<td style="width:132px;">11-465-007-001</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">mAb 8B6</td>
			<td style="width:161px;">University of Nantes</td>
			<td style="width:132px;">N/A</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Matrigel</td>
			<td style="width:161px;">Corning</td>
			<td style="width:132px;">354248</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Multiskan FC</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific&#160;</td>
			<td style="width:132px;">N08625</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 21G 1 &#189;&#160;</td>
			<td style="width:161px;">BD Microlance</td>
			<td style="width:132px;">304432</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Needle 25G 1</td>
			<td style="width:161px;">Terumo</td>
			<td style="width:132px;">NN-2525R</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">NSG mice</td>
			<td style="width:161px;">Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:132px;">5557</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Nunc MicroWell 96-well microplates</td>
			<td style="width:161px;">Thermofisher</td>
			<td style="width:132px;">167008</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS</td>
			<td style="width:161px;">VWR</td>
			<td style="width:132px;">L182-10</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PBS, 0,05% EDTA</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">PC that runs windows 7</td>
			<td style="width:161px;">Microsoft</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:852px;">Windows 7 can be purchased at http://www.microsoft.com/en-gb/software-download/windows7</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">15140-122</td>
			<td style="width:852px;">100 units/mL penicillin and 100 mg/mL streptomycin in RPMI 1640</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:244px;">Reagent reservoir</td>
			<td style="width:161px;">Thermofischer Scientific</td>
			<td style="width:132px;">8094</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Rodent restrainer</td>
			<td style="width:161px;">Bioseb</td>
			<td style="width:132px;">TV-150-SM</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:161px;">Gibco</td>
			<td style="width:132px;">31870-025</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Syringe 1 mL</td>
			<td style="width:161px;">Henke Sass Wolf</td>
			<td style="width:132px;">5010.200V0</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Topotecan</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:132px;">T2705</td>
			<td style="width:852px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

potentiation of anticancer antibody efficacy by antineoplastic drugs: detection of antibody-drug synergism using the combination index equation

Düşman monoklonal antikor (mAb) kemoterapötik ajanlar tarafından kullanılmasının muhtemelen kansere karşı etkili ve daha güvenli tedavi tasarlamak için değerli bir strateji kabul ettiğiniz anlamına gelir. Burada preklinik adım da rasyonel bir arada tanımlamak için bir protokol sağlar. İlk olarak, Chou ve Talalay1kombinasyonu Dizin denklemi kullanır synergism antikanser mAb ve sitotoksik ilaçlar arasında değerlendirmek için bir hücre tabanlı tahlil açıklar. Bu ölçüm, tümör hücre uyuşturucu ve antikor-kombinasyon dizin (CI) değerlerini hesaplamak için bir otomatik bilgisayar Analizi tarafından takip bir ÇMT tahlil kullanarak duyarlılığı içerir. CI değerlerini < 1 belirtmek synergism test mAbs ve sitotoksik ajanlar1arasında. Vitro bulgular vivoteyit için daha fazla kombinasyon rejimi etkinliğini xenograft tümör modelindeki değerlendirmek için bir yöntem açıklar. Bu modelde, kombine rejimi önemli ölçüde önemli bir genişletilmiş hayatta kalma tek ajan denetimleri ile karşılaştırıldığında sonuç tümör büyüme geciktirir. Önemlisi, in vivo deneyler kombinasyon rejimi iyi tolere edilir ortaya koymaktadır. Bu iletişim kuralı preklinik modelleri kombinasyonlarda antikanser ilaç etkili değerlendirilmesi ve klinik deneylere değerlendirmek için rasyonel birleşimini tanımlaması sağlar.

Temsilcisi sonuçları ve rakamlar daha önce yayımlanmış çalışma14izinle adapte olmuşlardır.
Anti-OAcGD2 mAb 8B6 sinerjik inhibitör etkileri Topotecan Nöroblastom hücre satırı büyüme geliştirir:
İlaç ve synergism topotecan ve mAb 8B6, uyuşturucu ve insan IMR5 Nöroblastom hücreleri ilk olarak ölçüldü bir...

Watch this Scientific Journal Video about Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation at JoVE.com

Potentiation of Anticancer Antibody Efficacy by Antineoplastic Drugs: Detection of Antibody-drug Synergism Using the Combination Index Equation

Bu iletişim kuralı, antikanser bir antikor ve antineoplastic ilaçlar içinde Preklinik modelleri arasında synergism Chou ve Talalay birlikte Dizin denklemi kullanarak değerlendirmek açıklar.

Antikanser antikor etkinliğinin Antineoplastic uyuşturucu tarafından kullanılmasının muhtemelen: antikor-uyuşturucu Synergism kombinasyon Dizin denklem kullanılarak tespiti

Potentiation of hostile monoclonal antibodies (mAb) by chemotherapeutic agents constitutes a valuable strategy for designing effective and safer therapy ...

Kemoterapi ile birlikte immünoterapi kanserde etkili tedavi geliştirmek için yenilikçi bir yaklaşım temsil eder. Ana hedefleri sinerjik elde etmektir, terapötik etkileri, doz ve toksisite azaltma, ve en aza indirmek veya ilaç direnci indüksiyon geciktirmek için. Ancak, pratik ve etik nedenlerle, hastalarda sinerji belirlemek mümkün değildir. Bu nedenle, klinik çalışmalarda doğrudan kombinasyon öncesinde, Prenicaptor kombinasyon çalışmaları, in vitro, ve / veya hayvanlarda, klinik çalışmalar için mantığı elde etmek için yapılmalıdır. Uyuşturucular arasındaki sinerji ölçmek için basit bir sağlam yöntem, bu videoda gösterildiği gibi, Shouan Talale tarafından geliştirilen kombinasyon indeks denklemine dayanmaktadır. Bu yöntemi kullanarak, ve bilgisayarlı simülasyon, burada kanıt, Monoklonal Antikor arasındaki sinerji 8B6, Hangi O-Asetil-GD2 Ganglioside nöroblastom antijen ve nöroblastom hücreleri üzerinde kemoterapötik ilaç Topotecan için özeldir. Kısaca, insan IMO'daki her bir bileşiğin 50 değeri, 5 nöroblastom hücre hattının etkin dozu belirlendikten sonra, bu hücreler iki bileşiğin eşit oranları ile entübe edildi ve kombinasyon indeksi değerleri otomatik bilgisayar simülasyonu kullanılarak hesaplandı. Daha sonra bu sonuçları Vivo'da, Bir IMO,5 tümör knenograflı modelde doğruladık. IMR-5 hücrelerini Bir T75 şişesinde büyüttük, mikroskop altında gözlemledik, hücre birliğini kontrol etmek için. Şişeden hücre ortasını asperate, 5 mL PBS ile yıkayın. %0,05 EDTA/PBS çözeltisi 3 mL ekleyin. Şişeyi 3 dakika lığına kuvöze geri verin. Hücre ayırma için mikroskop altında hücre kültürünü inceleyin. Şişeye 10 mL'lik tam hücre lisi ekleyin ve hücre süspansiyonuna steril, 15 mL konik tüpe aktarın. Hemositometre kullanarak 300 g.Count hücrelerinde beş dakika santrifüj. Supernatant'ı çıkarın ve atın. Tam Büyüme Medium.Adjust 100, 000 hücreleri / mL.Seed 84 kuyu, 96 iyi kültür plaka 10, 000 hücreleri her, hücre süspansiyon 100 mikrolitre nihai konsantrasyon elde etmek için orta hacim ayarlayın hücreleri askıya alın. Hücre Incubator.Dilute monoklonal antikor içinde 18 saat boyunca inkübate hücreleri 500 mikrolitre Komple Büyüme Orta monoklonal antikor monoklonal bir çalışma çözümü elde etmek için bir monoklonal antikor konsantrasyonu ile bir antikor çalışma solüsyonu elde etmek için 240 mL.Perform 5 iki kat seri sanrılar protokolde belirtildiği gibi. Nihai konsantrasyon 120 nanomolar ile bir ilaç çalışma çözümü elde etmek için Komple Büyüme Orta 500 mikrolitre ilaç seyreltin. Protokolde belirtildiği gibi 5, iki kat seri sanrılar gerçekleştirin. İlacın artı monoklonal anibodies çözeltileri aynı şekilde seyreltin. Son konsantrasyona ulaşmak için, bu deneysel düzende gösterildiği gibi ilgili kuyularda her ilaç çözeltisinin 50 mikrolitre transfer. Hücreleri 72 saat kuluçkaya yatırın. Her kuyuya 10 mikrolitre MTT reaktif çözeltisi ekleyin. 4 saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yat. Çok kanallı pipet kullanarak her kuyuya 100 mikrolitre liken çözeltisi ekleyin ve pipetleme ile iyice karıştırın. Nemlendirilmiş bir odada 4 saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yat. Bir spektrofotometre kullanarak 570 ve 620 nanometre emiciler kurtulun. Hücrenin canlılığını aşağıdaki gibi hesaplayın. Aşağıdaki denklemi kullanarak etkilenen kesir değerlerini hesaplayın. Simülasyon yazılımı çalıştırın, ana pencereyi elde etmek için yeni deneme düğmesine tıklayın. Deneyin adını yazın. Yeni tek ilaç tıklayın. Adı yazın. Kısaltmayı yazın. İlaç toplama birimini yazın. Veri 1 doz ve FA değerini girin. Enter.Tüm veri noktaları girilene kadar bu adımı yineleyin' e basın. Bitti'yi tıklatın.Monoklonal antikor veri noktalarıgirmek için aynı adımları izleyin. Tıklayın Yeni İlaç Combo.Select ilaç ve monoklonal antikorlar. Sabit Oran'ı seçin.Tamam'ı tıklatın. Adı yazın. Kısaltmayı yazın. İlacın monoklonal antikor oranını yazın. Veri 1 doz girin. Enter.The program abasın otomatik olarak Monoklonal Antikor 8B6 ve açılan dozlarını hesaplar. Veri 1 FA değerini girin.Enter.Tüm veri noktaları girilene kadar bu adımı yineleyin' e basın. Tamamlandı.Sonra Raporu Oluştur'u tıklatın.İlaç ve monoklonal antikor seçin ve ardından Tamam'ı tıklatın. Combo'yu seçin ve ardından Tamam'ı tıklatın. Üstbilgi, CI Tablosu ve Özet Tablo'yu seçin ve ardından Tamam'ı tıklatın. Dosya adını ve çözümlemesi yazın ve raporu oluşturmak için kaydet'i tıklatın. Rapor, kişinin varsayılan web tarayıcısında otomatik olarak açılır. Rapor, başlık, tarih, son ad, açıklama notu, m, Dm ve r parametreleri, monoterapi veya kombinasyon olarak kullanılan ajan için etkili doz 50 ve etkili doz50, 75, 90 ve 95.A kombinasyon indeks değeri 1'den daha az olan kombinasyon indeks tablosunu içeren bir özet tablo bölümü içerir. Bir değer bir değere eşittir, katkıyı gösterir. 1'den büyük bir değer düşmanlığı gösterir. Kullanmadan önce 4 derece C buzdolabında buz şişebatırarak bir gecede çözülme bodrum membran matris. Tüm kültür giyim, ya da medya bodrum membran metrik ile temas eden önceden soğutulmuş olmalıdır. Hasat kültür IMR5. Hücreleri 15 mL konik tüpe ve santrifüje 300 g'da 5 dakika aktarın. Supernatant atın. Hücreleri 15 mL buz gibi PBS ile iki kez yıkayın. Buz gibi PBS'de mL başına 5 milyon hücre için bir hücre süspansiyonu hazırlayın. Hücre süspansiyonuna 1,5 mL mikrotüp aktarın. Döner bazik membran matris şişe. ML başına 2,5 milyon hücre hücre süspansiyon elde etmek için pipetleme ile karışık bodrum membran matris reaktifi 1 hacim ekleyin.Buz üzerinde hücre süspansiyon tutun. Enjeksiyonun yapılacağı yerin kanadını tıraş edin. Hücreleri karıştırın ve hücre süspansiyonuna 21 g iğneyle monte edilmiş 1 mL şırınganın içine dikkatlice çizin. Şırıngada hava kabarcığı olmadığından emin ol. Farelerin aşı alanını antiseptik bir solüsyonla dezenfekte edin. Yavaşça enjeksiyon yerinde parmakları arasında yan fare deri sıkmak. İğneyi tam olarak deri kıvrımına takın. Subkutan enjeksiyonu sigortalamak için iğneyi dokunun derinliklerine yerleştirmeyin. 100 mikrolitre IMR5 hücre süspansiyonuna deri altı enjekte edin. Sıvı yayılmasını önlemek için şırıngayı döndürün ve iğneyi geri çekin. Vücut ağırlığı ve tümör büyümesi için fareleri izleyin. Tümörün uzunluğunu ve genişliğini kalibre ile ölçün. Bu formülü kullanarak tümör hacmini hesaplayın. Tümörler ortalama 50-60 mm hacmine ulaştığında tedaviye başlayın

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

Pankreas Kanseri Floresan Ortotopik Fare Modeli

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

Anticancer Efficacy of Photodynamic Therapy with Lung Cancer-Targeted Nanoparticles

Akciğer Kanseri Hedefli Nanopartiküller ile Fotodinamik Tedavi antikanser Etkinliği

Photodynamic therapy (PDT) is a non-invasive and non-surgical method representing an attractive alternative choice for lung cancer treatment. ...

Two-dimensional Gel Electrophoresis Coupled with Mass Spectrometry Methods for an Analysis of Human Pituitary Adenoma Tissue Proteome

İnsan hipofiz adenom doku Proteom analizi için kütle spektrometresi yöntemleri ile birleştiğinde iki boyutlu Jel Elektroforez

Human pituitary adenoma (PA) is a common tumor that occurs in the human pituitary gland in the hypothalamus-pituitary-targeted organ axis systems, and may ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Orthotopic Homogref (Syngeneic) fare birincil KPC pankreas duktal adenokarsinom, akış sitometresi tarafından Immunophenotyping

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Preclinical Assessment of the Bioactivity of the Anticancer Coumarin OT48 by Spheroids, Colony Formation Assays, and Zebrafish Xenografts

Preklinik antikanser Coumarin OT48 pulcuklarının, koloni oluşumu deneyleri ve zebra balığı Xenografts Bioactivity değerlendirilmesi

In vitro and in vivo pre-clinical screening of novel therapeutic agents are an essential tool in cancer drug discovery. Although human cancer cell lines ...

Assessment of Resistance to Tyrosine Kinase Inhibitors by an Interrogation of Signal Transduction Pathways by Antibody Arrays

Direnç Tirozin kinaz inhibitörleri sinyal iletim yollarının antikor dizileri tarafından bir sorgulama tarafından değerlendirilmesi

Cancer patients with an aberrant regulation of the protein phosphorylation networks are often treated with the tyrosine kinase inhibitors. Response rates ...

Detection of Protease Activity by Fluorescent Peptide Zymography

Floresan peptid Zymography tarafından proteaz aktivitesinin algılama

The purpose of this method is to measure the proteolytic activity of complex biological samples. The samples are separated by molecular weight using ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

Bir dizi pratik ve uygulanabilir yöntem kullanarak RAF aile Kinazlarının hastalıkla ilgili mutantları karakterize etme

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Detection of Retrotransposition Activity of Hot LINE-1s by Long-Distance Inverse PCR

Uzun mesafe ters PCR tarafından sıcak hat-1s Retrotransposition aktivitesinin tespiti

Long interspersed nuclear elements 1 (LINE-1s) are the only family of mobile genetic elements in the human genome that can move autonomously. They do so ...

Oncogenic Gene Fusion Detection Using Anchored Multiplex Polymerase Chain Reaction Followed by Next Generation Sequencing

Yeni nesil sıralamanın ardından bağlantılı Multiplex polimeraz zincir reaksiyonu kullanılarak Onkojenik gen füzyon tespiti

Gene fusions frequently contribute to the oncogenic phenotype of many different types of cancer. Additionally, the presence of certain fusions in samples ...