Name: modeling tuberculosis in mycobacterium marinum infected adult zebrafish
Uploaded: 2018-10-08T14:00:00
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इस कार्य को फिनिश सांस्कृतिक फाउंडेशन (H.L.), हेरा क्षयरोग फाउंडेशन (H.L., एल.-M.V., M.M.H., म. प्र.), फाउंडेशन ऑफ फिनिश एंटी-क्षयरोग एसोसिएशन (Suomen Tuberkuloosin Vastustamisyhdistyksen säätiö) (H.L., M.M.H., म. प्र.), Sigrid jusélius फाउंडेशन (म. प्र.), एमिल Aaltonen फाउण्डेशन (M.M.H.), जेन एण्ड Aatos Erkko फाउण्डेशन (म. प्र.) और फिनलैंड की अकादमी (म. प्र.). लीना mäkinen, हैना-लीना Piippo और Jenna ilomäki उनकी तकनीकी सहायता के लिए स्वीकार कर रहे हैं. लेखक अपनी सेवा के लिए छेड़-छाड़ Zebrafish प्रयोगशाला मानते हैं.

फिनलैंड (ESAVI/8245/04.10.07/2015) में पशु प्रयोग बोर्ड द्वारा सभी zebrafish प्रयोगों को अनुमोदित किया गया है । विधि अधिनियम (497/2013) और फिनलैंड में वैज्ञानिक या शैक्षिक प्रयोजनों के लिए इस्तेमाल जानवरों के संरक्षण पर सरकार डि...

यहाँ हम एक qPCR आधारित अनुप्रयोग का वर्णन करने के लिए प्रयोगात्मक संक्रमित वयस्क zebrafish ऊतकों से निकाले डीएनए से माइक्रोबैक्टीरियल भार को मापने. इस आवेदन 16S-23S rRNA आंतरिक लिखित स्पेसर अनुक्रम४०के आसप?...

Zebrafish (ढाणियो rerio) जैव चिकित्सा अनुसंधान में एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया पशु मॉडल है और यह आम हड्डीवाला जीवविज्ञान के लिए एक स्वीकृत मॉडल है । zebrafish के कई क्षेत्रों के लिए अनुकूलित किया गया है अनुसंधान मॉडलिंग मानव रोगों और कैंसर से लेकर विकारों1 और हृदय रोग2 से संक्रमण और प्रतिरक्षा अध्ययन के कई बैक्टीरियल 3 और वायरल संक्रमण4 , 5. इसके अलावा, zebrafish भ्रूण के पूर्व utero विकास zebrafish6 और विषविज्ञान7,8में एक लोकप्रिय मॉडल बना दिया है ।
संक्रमण जीव विज्ञान सहित अनुसंधान के कई क्षेत्रों में, ऑप्टिकली पारदर्शी zebrafish लार्वा सामांयतः उपयोग किया जाता है । पहली प्रतिरक्षा कोशिकाओं 24 एच पोस्ट निषेचन (hpf), जब आदिम मैक्रोफेज9का पता चला रहे है के भीतर दिखाई देते हैं । न्यूट्रोफिल अगले प्रतिरक्षा कोशिकाओं को ३३ hpf10के आसपास प्रदर्शित कर रहे हैं । Zebrafish लार्वा संक्रमण की प्रारंभिक अवस्था और अनुकूल प्रतिरक्षा कोशिकाओं11के अभाव में जन्मजात उन्मुक्ति की भूमिका के अध्ययन के लिए इस प्रकार व्यवहार्य हैं । हालांकि, अपनी पूरी तरह कार्यात्मक अनुकूली प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ वयस्क zebrafish संक्रमण प्रयोगों के लिए जटिलता की एक अतिरिक्त परत प्रदान करता है । टी कोशिकाओं के आसपास का पता लगाया जा सकता है 3 दिन बाद निषेचन12, और बी कोशिकाओं को 4 सप्ताह के बाद निषेचन13कार्यात्मक एंटीबॉडी का उत्पादन कर रहे हैं । वयस्क zebrafish स्तनधारी सहज और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रणाली के सभी मुख्य समकक्षों है । मछली और मनुष्यों की प्रतिरक्षा प्रणाली के बीच मुख्य अंतर एंटीबॉडी isotypes में पाया जाता है और साथ ही लसीकावत् ऊतकों के शरीर रचना विज्ञान में । zebrafish केवल तीन एंटीबॉडी कक्षाएं14है, जबकि मनुष्य पांच15है । अस्थि मज्जा और लिम्फ नोड्स के अभाव में, मछली में प्राथमिक लसीकावत् अंगों गुर्दे और थाइमस16 और तिल्ली, गुर्दे और पेट माध्यमिक लसीकावत् अंगों17के रूप में सेवा कर रहे हैं । इन मतभेदों के बावजूद, अपनी जंमजात और अनुकूली कोशिकाओं के पूर्ण प्रतिरक्षा शस्त्रागार के साथ, वयस्क zebrafish एक उच्च लागू है, आसान करने के लिए उपयोग करते हैं, गैर स्तनधारी मॉडल मेजबान रोगज़नक़ बातचीत अध्ययन के लिए ।
zebrafish हाल ही में तपेदिक के अध्ययन के लिए एक व्यवहार्य मॉडल के रूप में स्थापित किया गया है18,19,20,21,22। तपेदिक माइकोबैक्टीरियम तपेदिककी वजह से एक हवाई रोग है । विश्व स्वास्थ्य संगठन के अनुसार, तपेदिक २०१६ में१.७ लाख लोगों की मृत्यु हुई और एक भी रोगज़नक़ दुनिया भर में23द्वारा मौत का प्रमुख कारण है । 24चूहों,25, खरगोशों26 और गैर मानव रहनुमाओं27 तपेदिक अनुसंधान में सबसे प्रसिद्ध पशु मॉडल हैं, लेकिन प्रत्येक अपनी सीमाओं का सामना । गैर एम तपेदिक संक्रमण के मानव रहनुमा मॉडल मानव रोग सबसे निकट जैसा दिखता है, लेकिन इस मॉडल का उपयोग कर गंभीर नैतिक विचारों के कारण सीमित है । अन्य पशु मॉडल रोग विकृति को प्रभावित करता है कि एम. तपेदिक की मेजबान विशिष्टता द्वारा रुकावट हैं । शायद मॉडलिंग तपेदिक में सबसे बड़ा मुद्दा मानव रोग में संक्रमण और रोग के परिणामों की व्यापक स्पेक्ट्रम है: तपेदिक एक बहुत ही विषम रोग से लेकर अव्यक्त, सक्रिय और सक्रिय संक्रमण के लिए प्रतिरक्षा है28 , जो पुन: पेश करने के लिए और मॉडल प्रयोग मुश्किल हो सकता है ।
माइकोबैक्टीरियम marinum M. तपेदिक के एक करीबी रिश्तेदार ८५% एमिनो एसिड पहचान29के साथ ~ ३,००० orthologous प्रोटीन के साथ है । M. marinum स्वाभाविक रूप से संक्रमित zebrafish उत्पादन granulomas, तपेदिक की पहचान, अपने आंतरिक अंगों में19,30. अन्य पशु मॉडलों के विपरीत तपेदिक अनुसंधान में इस्तेमाल किया, zebrafish कई वंश पैदा करता है, यह केवल एक सीमित स्थान की आवश्यकता है और महत्वपूर्ण बात, यह neurophysiologically है सबसे कम विकसित हड्डीवाला तपेदिक मॉडल उपलब्ध है । इसके अतिरिक्त, एम. marinum संक्रमण अव्यक्त संक्रमण का कारण बनता है, सक्रिय रोग या वयस्क zebrafish में माइक्रोबैक्टीरियल संक्रमण की भी नसबंदी बारीकी से मानव क्षय रोग के परिणामों के स्पेक्ट्रम की नकल उतार19, 31 , ३२. यहां, हम पेट गुहा में एम marinum इंजेक्शन द्वारा वयस्क zebrafish के प्रायोगिक तपेदिक मॉडल के लिए तरीकों का वर्णन और मात्रात्मक पीसीआर का उपयोग करने के लिए माइक्रोबैक्टीरियल भार और zebrafish से प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को मापने ऊतक के नमूने ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Mycobacterium marinum</td>
			<td>American Type Culture Collection</td>
			<td>ATCC 927</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrock 7H10 agar</td>
			<td>BD, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11799042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrock OADC enrichment</td>
			<td>BD, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11718173</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrock 7H9 medium</td>
			<td>BD, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11753473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Middlebrock ADC enrichment</td>
			<td>BD, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11718173</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 80</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G5516-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GENESYS20 Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline tablets (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4417-50TAB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol red</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3532</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G needle</td>
			<td>Henke Sass Wolf</td>
			<td>4710004020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Henke Sass Wolf</td>
			<td>4010.200V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Omnican 100 30G insulin needle</td>
			<td>Braun</td>
			<td>9151133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid ethyl ester (pH 7.0)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 ml homogenization tube</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>13119-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.8 mm ceramic beads</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>13114-325</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, ETAX Aa</td>
			<td>Altia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-propanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>278475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>VWR</td>
			<td>22711.290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guanidine thiocyanate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9277</td>
			<td>FW 118.2 g/mol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1613859</td>
			<td>FW 294.1 g/mol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris (free base)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>TRIS-RO</td>
			<td>FW 121.14 g/mol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRI reagent</td>
			<td>Molecular Research Center</td>
			<td>TR118</td>
			<td>Guanidine thiocyanate-phenol solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLyzer24 homogenizator</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonicator m08</td>
			<td>Finnsonic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SENSIFAST No-ROX SYBR, Green Master Mix</td>
			<td>Bioline</td>
			<td>BIO-98005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>qPCR 96-well plate</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>HSP9601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optically transparent film</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>MSB1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C1000 Thermal cycler with CFX96 real-time system</td>
			<td>BioRad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNase AWAY</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10666421</td>
			<td>decontamination reagent eliminating RNases</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>EN0525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reverse Transcription Master Mix</td>
			<td>Fluidigm</td>
			<td>100-6298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SsoFast Eva Green master mix</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>172-5211</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling tuberculosis in mycobacterium marinum infected adult zebrafish

माइकोबैक्टीरियम तपेदिक वर्तमान में घातक मानव रोगज़नक़ के कारण १,७००,००० मौतें और १०,४००,००० संक्रमण हर साल है । इस जीवाणु के लिए जोखिम एक निष्फल संक्रमण से एक सक्रिय रूप से प्रगति घातक रोग को लेकर मनुष्यों में एक व्यापक रोग स्पेक्ट्रम का कारण बनता है । सबसे सामांय रूप अव्यक्त तपेदिक है, जो स्पर्शोन्मुख है, लेकिन एक अचानक रोग में पुनः सक्रिय करने की क्षमता है । वयस्क zebrafish और उसके प्राकृतिक रोगज़नक़ माइकोबैक्टीरियम marinum हाल ही में तपेदिक के व्यापक रोग स्पेक्ट्रम का अध्ययन करने के लिए एक लागू मॉडल साबित हो गया है । महत्वपूर्ण बात, सहज विलंबता और reactivation के रूप में के रूप में अच्छी तरह से माइक्रोबैक्टीरियल संक्रमण के संदर्भ में अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं इस मॉडल में अध्ययन किया जा सकता है । इस अनुच्छेद में, हम वयस्क zebrafish के प्रयोगात्मक संक्रमण के लिए तरीकों का वर्णन, माइक्रोबैक्टीरियल भार की माप के लिए न्यूक्लिक एसिड की निकासी के लिए आंतरिक अंगों के संग्रह और मात्रात्मक पीसीआर द्वारा प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं की मेजबानी । घर में विकसित, एम marinum-विशिष्ट qPCR परख पारंपरिक चढ़ाना तरीकों की तुलना में अधिक संवेदनशील है क्योंकि यह भी गैर विभाजन, निष्क्रिय या हाल ही में मृत आइसोलेटों से डीएनए का पता लगाता है । के रूप में दोनों डीएनए और आरएनए एक ही व्यक्ति से निकाले जाते हैं, यह रोगग्रस्त राज्य के बीच संबंधों का अध्ययन करने के लिए संभव है, और मेजबान और रोगज़नक़ जीन-अभिव्यक्ति. तपेदिक के लिए वयस्क zebrafish मॉडल इस प्रकार एक अत्यधिक लागू, गैर स्तनधारी vivo प्रणाली में मेजबान रोगज़नक़ बातचीत का अध्ययन करने के रूप में प्रस्तुत करता है ।

प्राकृतिक मछली रोगज़नक़ माइकोबैक्टीरियम marinum zebrafish के आंतरिक अंगों को संक्रमित और19granulomas दिखाई histologically के साथ एक प्रणालीगत संक्रमण पैदा करता है । वयस्क zebrafish एक intraperitoneal इंजेक्शन द्वारा <e...

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Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

यहां, हम एक वयस्क अपने प्राकृतिक रोगज़नक़ माइकोबैक्टीरियम marinumका उपयोग कर zebrafish में मॉडल मानव तपेदिक के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । संक्रमित zebrafish के आंतरिक अंगों से निकाले गए डीएनए और आरएनए मछली में कुल माइक्रोबैक्टीरियल भार और qPCR के साथ मेजबान की प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को प्रकट करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।

मॉडलिंग तपेदिक में माइकोबैक्टीरियम marinum संक्रमित वयस्क Zebrafish

Mycobacterium tuberculosis is currently the deadliest human pathogen causing 1.7 million deaths and 10.4 million infections every year. Exposure to this ...

यह विधि तपेदिक के क्षेत्र में महत्वपूर्ण सवालों के जवाब देने में मदद कर सकती है जैसे कि अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं और इस बहुकार्यात्मक रोग के रोगजनकों की भूमिका क्या है। इस न्यूक्लिक एसिड बेस विधि का मुख्य लाभ यह है कि बैक्टीरियल लोड और जीन अभिव्यक्ति के स्तर दोनों को एक ही व्यक्ति से मापा जा सकता है। इस प्रक्रिया को शुरू करने के लिए, पाठ प्रोटोकॉल में उल्लिखित 7H10 प्लेट पर संस्कृति एम मैरिनम।एडीसी संवर्धन, पॉलीसॉर्बेट 80, और ग्लिसरोल युक्त 7H9 माध्यम के 10 मिलीलीटर को सेल कल्चर फ्लास्क में स्थानांतरित करें। फिर, एक बाँझ एक माइक्रोलिटर टीका लूप का उपयोग करने के लिए उपयुक्त रूप से M.marinum जीवाणु द्रव्यमान के एक पाशन को फ्लास्क में स्थानांतरित करें। टोपी ढीला छोड़ दें या एक फिल्टर टोपी का उपयोग करने के लिए तीन से चार दिनों के लिए मिलाते हुए बिना अंधेरे में 29 डिग्री सेल्सियस पर पर्याप्त गैस विनिमय और संस्कृति के लिए अनुमति देने के लिए जब तक OD600 के बारे में ०.७ तक पहुंचता है ।पाठ में उल्लिखित बैक्टीरिया को पतला और जारी रखें। संक्रमण के लिए बैक्टीरियल समाधान तैयार करना शुरू करने के लिए, संस्कृति के एक मिलीलीटर को एक ताजा ट्यूब में स्थानांतरित करें। तीन मिनट के लिए 10, 000 ग्राम पर सेंट्रलाइज।सुपरनेट निकालें और बाँझ पीबीएस के एक मिलीलीटर में गोली को फिर से खर्च करें। एक ट्रेसर के रूप में फिनोल लाल के मिलीलीटर प्रति 0.3 मिलीग्राम के साथ बाँझ पीबीएस का उपयोग करना, वांछित जीवाणु एकाग्रता तक पहुंचने के लिए निलंबन को पतला करें। इसके बाद, एक मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग धीरे-धीरे तीन बार 27 गेज सुई के माध्यम से निलंबन खींचने के लिए करें।प्रत्येक अलीकोट के लिए उपयोग करने से ठीक पहले इस चरण को करें। सबसे पहले, पैराफिन फिल्म के एक टुकड़े पर पतला जीवाणु समाधान की एक पांच माइक्रोलीटर बूंद पिपेट । फिर, बूंद को 30 गेज इंसुलिन सुई में खींचें।एक जंगली प्रकार की मछली होने के साथ इस प्रयोग के लिए पांच से आठ महीने पुरानी मछली का उपयोग करें और दूसरा एक चीर उत्परिवर्ती मछली जा रहा है । इन मछली वेंट्रल साइड को नम फोम प्लास्टिक के टुकड़े के स्लिट में रखें। 45 डिग्री कोण पर पेल्विक पंखों के बीच इंसुलिन सुई इंजेक्ट करें।सुई को ऊपर की ओर खोलते रहें ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि पूरा उद्घाटन पेट की गुहा के अंदर हो। इसके बाद धीरे-धीरे बैक्टीरियल सॉल्यूशन इंजेक्ट करें। इसके बाद, सावधानी से सुई को हटा दें और तुरंत मछली को ताजा टैंक के पानी से भरे रिकवरी टैंक में स्थानांतरित करें।7H10 प्लेटों पर हर 15 मिनट में उपयोग में बैक्टीरियल aliquot से नमूने ले लो । संक्रमण की खुराक को सत्यापित करने के लिए इन नमूनों को पांच दिनों के लिए 29 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। मछली की भलाई की नियमित रूप से जांचें, किसी भी मछली को संक्रमण के लक्षणों के साथ इच्छामृत्यु सुनिश्चित करने के लिए उन्हें 3-अमीनोबेन्जिक एसिड एथिल एस्टर के 0.02% से अधिक के साथ पानी में इनक्यूबेटिंग करके।मछली को इच्छामृत्यु के बाद, शाखाओस्टेगल किरणों के पीछे एक पिन डालें। मंच पर मछली हमले के लिए पूंछ के माध्यम से एक दूसरा पिन डालें। एक स्केलपेल का उपयोग करके, पूरे पेट की गुहा खोलें।फिर, दिल से शुरू होने वाले आंतरिक अंगों को इकट्ठा करने और एक ब्लॉक में सभी आंतरिक अंगों को अलग करने के लिए पूंछ की ओर रीढ़ के साथ काम करने के लिए एक छोटे चम्मच और तेज-समाप्त चिमटी का उपयोग करें। क्लॉका से आंत के जाल को अलग करने के लिए चिमटी का उपयोग करें और अंगों को आधा दर्जन 2.8 मिलीमीटर सिरेमिक मोतियों वाले 1.5 मिलीलीटर होमोजेनाइजेशन ट्यूब में स्थानांतरित करें। सैंपल को फ्रीज करने के लिए तुरंत ट्यूब को सूखी बर्फ पर रखें।नमूना को समरूप बनाने के लिए तैयार होने तक नकारात्मक 80 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। डीएनए और आरएनए निकालने के बाद, टेक्स्ट प्रोटोकॉल में उल्लिखित मात्रात्मक पीसीआर द्वारा माइकोबैक्टीरियल भार को मापें। इस अध्ययन में, वयस्क जेब्राफिश एक इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन द्वारा एम मैरिनम से संक्रमित हैं।एक उच्च संक्रमण खुराक एक प्रगतिशील बीमारी है जिसमें माइकोबैक्टीरियल लोड के बारे में ५,०,० बैक्टीरिया अंततः मछली की हत्या तक पहुंचने के लिए वृद्धि जारी है नेतृत्व करने के लिए देखा जाता है । दूसरी ओर एक कम खुराक प्रगतिशील, अव्यक्त, पुनः सक्रिय, और निष्फल संक्रमण के साथ मानव तपेदिक में देखा है कि इसी तरह एक रोग स्पेक्ट्रम के विकास की ओर जाता है । इस मामले में, लोड चार सप्ताह तक बढ़ता रहता है जिसके बाद अधिकांश मछली में बीमारी स्थिर स्थिति में पहुंच जाती है।इस डेटा से पता चलता है कि मछली को संक्रमित करने के लिए इस्तेमाल किया mycobacteria की प्रारंभिक संख्या संक्रमण के परिणाम के लिए एक महत्वपूर्ण निर्धारक है । चीर उत्परिवर्ती ज़ेब्राफ़िश को माइकोबैक्टीरिया के विकास को पर्याप्त रूप से सीमित करने में असमर्थ देखा जाता है जिससे उच्च बैक्टीरियल लोड होता है और रुग्णता में वृद्धि होती है। यह स्पष्ट रूप से माइकोबैक्टीरियल संक्रमण को नियंत्रित करने में अनुकूली प्रतिरक्षा के महत्व को दर्शाता है।इंटरल्यूकिन-4 का स्तर जंगली प्रकार समूह में काफी अधिक है जो यह खुलासा करता है कि इंटरल्यूकिन-4 की कुशल शुरूआत के लिए अनुकूली प्रतिक्रिया की आवश्यकता होती है, लेकिन माइकोबैक्टीरियल संक्रमण के बाद इंटरफेरॉन गामा की शुरुआत के लिए अपरिहार्य है। यह प्रोटोकॉल एक ही नमूने से डीएनए और आरएनए दोनों के संग्रह को सक्षम बनाता है जो मेजबान और बैक्टीरिया दोनों के जीन अभिव्यक्ति डेटा के साथ नमूने के माइकोबैक्टीरियल बोझ को जोड़ना संभव बनाता है। इस तकनीक को दवाओं या वैक्सीन उम्मीदवारों के प्रशासन के साथ जोड़ा जा सकता है ताकि माइकोबैक्टीरियल लोड और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं पर उनके प्रभाव का आकलन किया जा सके।इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, जैव सुरक्षा स्तर दो रोगजनक के साथ काम करते समय व्यक्तिगत सुरक्षा और अपशिष्ट निपटान के लिए स्थानीय दिशानिर्देशों का पालन करना याद रखना महत्वपूर्ण है। इस तकनीक से जेब्राफिश में निष्क्रिय माइकोबैक्टीरिया के साथ सक्रिय और अव्यक्त तपेदिक दोनों का अध्ययन करना संभव हो जाता है जो वीवो मॉडल में एक नैतिक गैर-स्तनधारी है।

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Modeling Tuberculosis in Mycobacterium marinum Infected Adult Zebrafish

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

नमूने की तैयारी<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em&gt; परमाणु चुंबकीय अनुनाद metabolomic अध्ययन के लिए अर्क

Mycobacterium tuberculosis is a major cause of mortality in human beings on a global scale. The emergence of both multi- (MDR) and extensively-(XDR) ...

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

के विकास माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग Biofilms

Mycobacterium tuberculosis, the etiologic agent of human tuberculosis, has an extraordinary ability to survive against environmental stresses including ...

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

प्राकृतिक ट्रांसमिशन पर क्षय रोग मलेरिया coinfection अध्ययन करने के लिए एक प्रयोगात्मक मॉडल माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग और प्लाज्मोडियम berghei</i

Coinfections naturally occur due to the geographic overlap of distinct types of pathogenic organisms. Concurrent infections most likely modulate the ...

Demonstrating a Multi-drug Resistant Mycobacterium tuberculosis Amplification Microarray

Demonstrating a Multi-drug Resistant Mycobacterium tuberculosis Amplification Microarray

एक बहु दवा प्रतिरोधी दिखाते<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em&gt; प्रवर्धन माइक्रोएरे

Simplifying microarray workflow is a necessary first step for creating MDR-TB microarray-based diagnostics that can be routinely used in lower-resource ...

Establishment and Optimization of a High Throughput Setup to Study Staphylococcus epidermidis and Mycobacterium marinum Infection as a Model for Drug Discovery

Establishment and Optimization of a High Throughput Setup to Study Staphylococcus epidermidis and Mycobacterium marinum Infection as a Model for Drug Discovery

स्थापना और अध्ययन करने के लिए एक उच्च throughput सेटअप का अनुकूलन<em&gt; Staphylococcus epidermidis</em&gt; और<em&gt; माइकोबैक्टीरियम marinum</em&gt; संक्रमण ड्रग डिस्कवरी के लिए एक मॉडल के रूप में

Zebrafish are becoming a valuable tool in the preclinical phase of drug discovery screenings as a whole animal model with high throughput screening ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Swimbladder इंजेक्शन द्वारा लार्वा zebrafish में mucosal कैंडिडिआसिस मॉडलिंग

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

पर कार्यात्मक अध्ययन के लिए एक 3 डी मानव फेफड़े के ऊतकों मॉडल<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em&gt; संक्रमण

Tuberculosis (TB) still holds a major threat to the health of people worldwide, and there is a need for cost-efficient but reliable models to help us ...

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

इमेजिंग रोगजनन और के मुताबिक गूढ़ रहस्य और<em&gt; माइकोबैक्टीरियम abscessus</em&gt; Zebrafish भ्रूण में

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as an infection model to study the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

इंट्रासेलुलर लक्ष्य निर्धारण इनहिबिटर्स की प्रभावकारिता और cytotoxicity स्क्रीनिंग के लिए सिस्टम<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em

Mycobacterium tuberculosis, the causative agent of tuberculosis (TB), is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. With the increased spread ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

एक उच्च throughput संगत परख Macrophage passaged के खिलाफ ड्रग प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...