Name: analysis of epididymal protein synthesis and secretion
Uploaded: 2018-08-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

ويود المؤلفون الاعتراف بالصحة الوطنية والطبية أبحاث المجلس من أستراليا المشروع منحة APP1103176 لدعم هذا العمل.

وافق جميع الإجراءات التجريبية التي تنطوي على جمع الأنسجة الحيوانية جامعة نيوكاسل للعناية بالحيوان ولجنة الأخلاقيات.
1-الفلورة تلطيخ الفروع البربخيه جزءا لا يتجزأ من البارافين (الشكلان 1 و 2)
<ol><li>مباشرة بعد القتل الرحيم للفئران الكبار عن طريق استنشاق أول أكسيد الكربون2</s...

أدرجت هذه الدراسات استخدام الأنسجة في بوين البربخيه الثابتة التي تعرضت لتضمين البارافين والبروتوكولات القياسية تقطيع. الحل مثبت في بوين تضم خليط من فورمالدهايد وحمض البكريك وحمض الخليك، مع كل مكون من مكونات لها وظيفة محددة ومتكاملة. وهكذا، والفورمالديهايد يتفاعل مع الأمينات الأولية لت?...

المني من جميع أنواع الثدييات اكتساب القدرة على عرض الحركة التقدمية إلى الأمام وتسميد البويضة خلال تلك النسب المطول عن طريق البربخ، منطقة متخصصة للغاية من النظام الذكور مجرى الهواء خارج الخصية، التي قد 7-14 يوما للتنقل (تبعاً للأنواع الأحيائية)1. بسبب التكثيف الشديد من الكروماتين الأب وسفك معظم السيتوبلازم الذي يصاحب سيتوديفيرينتييشن المني في الخصيتين، مدفوعة نضج الفنية اللاحقة حصرا بتفاعلها مع المكروية البربخيه. هذا الوسط، يخلق بدوره، بنشاط سوما البربخيه بطانة افرازية والاستيعاب ويعرض مستوى استثنائي من تباين الجزء-الجزء1. وهكذا، الجزء الأكثر نشاطا من حيث البروتين وإفراز تلك الواقعة في الجزء الأقرب من البربخ (أي نصيب الفرد والاحضار)2. هذا النشاط يعكس الشخصية الوظيفية للمني، مع بداية أول الخلايا لعرض السمات المميزة للاختصاص الوظيفي (أي.، الحركة التقدمية، والقدرة على ربط حمض سولوبيليزيد زونا glycoproteins) التالية على المرور عبر البربخ نصيب3. هذه السمات الفنية مواصلة تطوير قبل الوصول إلى المستويات المثلى كما الحيوانات المنوية تصل إلى الجزء البربخيه القاصي (كودا)، حيث يتم تخزينها في حالة هادئة في الاستعداد للقذف. تكوين وصيانة هذا الخزان في تخزين الحيوانات المنوية يرتبط ارتباطاً وثيقا أيضا ظهارة بطانة، التي يهيمن عليها النشاط الاستيعابية قوية4،5في كودا. رغم الاختلافات التشريحية عنها6،،من78، يبدو أن هذه الشعبة أقاليميا للعمل سمة من سمات البربخ مشترك بين معظم أنواع الثدييات ودرس بالتاريخ، بما في ذلك الخاصة بنا9،10. في الواقع، من وجهة نظر سريرية، فمن المعروف أن الخلل البربخيه يجعل مساهمة هامة إلى المسببات عامل الذكور العقم11، ومن ثم تسليط الضوء على أهمية فهم تنظيم هذه الأنسجة المتخصصة.
ولذلك فمن المؤسف أن فهمنا البربخيه علم وظائف الأعضاء، والآليات التي تنظم مراحل متتابعة لنضوج الحيوانات المنوية وتخزينها داخل هذا النسيج، لا يزال يتم حلها بالكامل. من بين العوامل المساهمة، هي تحد من التقدم في البحوث البربخيه الشاملة تعقد هذا النسيج ومعرفة الآليات التي تمارس التحكم به المكروية لومينال التنظيمية. تشريحيا، ونحن نعلم أن وراء تمييز شرائح نصيب والاحضار وكاودا، يمكن تقسيم في البربخ كذلك إلى عدة مناطق (الشكل 1A)، كل فصل بواسطة سيبتا12 وتتميز بالتشكيلات الجانبية منفصلة من الجينات/البروتين التعبير13،،من1415،16،،من1718. في الواقع، على أساس مفصلة النسخي التنميط التعبير الجيني القطاعي في البربخ وأبلغ ما يصل إلى 6 و 9 مناطق البربخيه متميزة في نماذج الماوس وفار، على التوالي19،20. هذا التعقيد يفترض أن يعكس تكوين سوما البربخيه، ظهارة بسيودوستراتيفيد تتألف من العديد من أنواع الخلايا المختلفة؛ كل اختلاف فيما يتعلق بأنشطتها الوفرة والتوزيع والافرازيه/الاستيعاب على طول المسالك. وهكذا، هي الخلايا الرئيسية حتى الآن الأكثر وفرة خلية البربخيه نوع التي تشكل ما يزيد عن 80 في المائة من كافة الخلايا الظهارية. وبناء على ذلك، الخلايا الرئيسية المسؤولة عن الجزء الأكبر من البروتين البربخيه الحيوي وإفراز5. وفي المقابل، السكان الخلية واضحة، وهي مرتبة حسب نوع الخلية الثانية الأكثر وفرة داخل سوما البربخيه، أساسا تشارك في انتقائية امتصاص مكونات لومينال وتحمض هذا المكروية5. إضافة مستوى آخر من التعقيد، الاندروجين وغيرها من العوامل لوميكريني من أصل الخصية تمارس سيطرة التفاضلية على كل نوع من أنواع هذه الخلية البربخيه اعتماداً على تحديد المواقع على طول المسالك.
على الرغم من القيود التي تفرضها هذه الدرجة من التعقيد، تواصل نجاحات كبيرة إلى حل أساس الميكانيكية للدالة البربخيه. مفتاح لهذه الدراسات تم تطبيق استراتيجيات متقدمة الطيف الكتلي لإنشاء قوائم جرد واسعة النطاق من البروتين البربخيه، بالترادف مع تحليلات مفصلة للبروتينات الفردية يختارون من بين هذه الدراسات الأولية. مثال على هذا النهج هو لدينا توصيف الأخيرة لعائلة ميتشانوينزيميس في نموذج الفأر21ازدحاما. كان يغذيها اهتمامنا الأولى ازدحاما العمل المزدوج في الاقتران أكسو-والعمليات اندوسيتوتيك. وبناء على هذه الملاحظات، كنا قادرين على إثبات أن isoforms المتعارف عليه ثلاثة من ازدحاما (DNM1-DNM3) أعرب عن درجة عالية في البربخ الماوس والمتمركزة على النحو المناسب للوفاء بأدوار تنظيمية في إفراز البروتين وامتصاص21 . وعلاوة على ذلك، كنا قادرين على التمييز بوضوح كل isoform ازدحاما على أساس بهم التعريب الخلوية ودون الخلوية، مما يشير إلى أن لديهم متكاملة، بدلاً من نشاط زائدة عن الحاجة، داخل ظهارة البربخيه21.
وهنا، يمكننا وصف المنهجية التجريبية المستخدمة لدراسة التعبير ازدحاما في البربخ الماوس مع الأمل في أن هذه المعلومات سوف تجد تطبيقها على نطاق أوسع في توصيف البروتينات البربخيه البديلة والمساهمة بالتالي في موقعنا فهم وظيفة هذا العنصر الهام من المسالك التناسلية الذكور. على وجه التحديد، يمكننا وصف وضع منهجية قوية لوسم الفلورة البروتينات المستهدفة في الفروع البربخيه جزءا لا يتجزأ من البارافين والكشف عن اللاحقة للتوزيع المكاني لهذه البروتينات عبر الفلورة الفحص المجهري. ونحن كذلك الوثيقة بروتوكولات مؤخرا الأمثل لدينا22 لعزل وتوصيف ابيديديموسوميس؛ حويصلات اكسوسومي مثل الصغيرة التي تشكل العناصر الرئيسية للشخصية الافرازية البربخيه والاحتفاظ بدور بارز في تعزيز نضوج الحيوانات المنوية23على ما يبدو. كنهج تكميلي، ونحن أيضا وصف الفلورة الكشف عن البروتينات المستهدفة في خط خلية الظهارية البربخيه (mECap18) نصيب مخلدة ماوس واستخدام هذا المورد كنموذج لاستكشاف تنظيم البربخيه نشاط افرازي في المختبر.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dynamin 1 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108458</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 2 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-6400</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 3 antibody</td>
			<td>Proteintech</td>
			<td>14737-1-AP</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP6V1B1 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-21206</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD9 antibody</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>553758</td>
			<td>Host species: Rat, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flotillin-1 antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1180</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALOX15 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab80221</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUBB antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-5274</td>
			<td>Host species: Mouse, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSMD7 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab11436</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11008</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11055</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11058</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11007</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC03L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC01L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Mouse HRP</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-2005</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 4-88</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>475904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Bovogen</td>
			<td>SFBS-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#945;-androstan-17&#946;-ol-3-oneC-IIIN</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium pyruvate</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11360-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S1804</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Astral</td>
			<td>0497-5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1, 4-diazabicyclo-(2.2.2)-octane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-gysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4832</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>78787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloroacetic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T9159</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>A6-2.5 L GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly (vinyl alcohol)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>783-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiPrep Density Gradient Medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Zeiss Axio Imager A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>Optima Max-XP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuges</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Heracell</td>
			<td>150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Orbital Shaker</td>
			<td>Ratek</td>
			<td>OM7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave</td>
			<td>LG</td>
			<td>MS3840SR /00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab pH Meter</td>
			<td>MeterLab</td>
			<td>PHM220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid-repellent slide marker</td>
			<td>Daido Sangyo</td>
			<td>Mini</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>665180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide</td>
			<td>Mikro-Glass</td>
			<td>SF41296PLMK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m filter</td>
			<td>Millox-HV</td>
			<td>SLHV033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes Dustfree Paper</td>
			<td>KIMTECH</td>
			<td>34155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (2.2 ml, 11 &#215; 35 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>347356</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (3.2 ml, 13 &#215; 56 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>362305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer 70 &#181;m Nylon</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 35 &#215; 10 mm with cams</td>
			<td>SARSTED</td>
			<td>82.1135.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide jar</td>
			<td>TRAJAN</td>
			<td>#23 319 00</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of epididymal protein synthesis and secretion

البربخ الثدييات يولد واحد من السوائل intraluminal أعقد من أي الغدة الصماء بغية دعم الخصية بعد نضوج وتخزين المني. وينشأ هذا التعقيد نظراً لنشاط الخلايا الظهارية بطانة افرازية والاستيعابية مجتمعة. هنا، يمكننا وصف تقنيات لتحليل البروتين البربخيه وإفراز بالتركيز على نموذج الأسرة البروتين من ميتشانوينزيميس دينامين (الإدارة)؛ جتباسيس الكبيرة التي لديها إمكانات لتنظيم الاتجار الأحداث غشاء ثنائي الاتجاه. لدراسة التعبير البروتين في الأنسجة البربخيه، يمكننا وصف منهجية قوية لوسم الفلورة البروتينات المستهدفة في أقسام جزءا لا يتجزأ من البارافين والكشف عن اللاحقة للتوزيع المكاني لهذه البروتينات عن طريق مجهر الفلورة. ونحن أيضا وصف المنهجية الأمثل لعزل وتوصيف اكسوسومي مثل حويصلات، المعروفة باسم ابيديديموسوميس، وهي تفرز في التجويف البربخيه للمشاركة في الاتصالات بين الخلايا مع نضوج الخلايا المنوية. كنهج تكميلي، يصف لنا أيضا كشف الفلورة البروتينات المستهدفة في خط خلية الظهارية البربخيه (mECap18) نصيب خلد SV40 ماوس. وعلاوة على ذلك، فإننا نناقش الأداة خط الخلية mECap18 كنموذج مناسب في المختبر لاستكشاف تنظيم نشاط افرازي البربخيه معها. لهذا الغرض، يصف لنا تثقيف متطلبات الصيانة خط الخلية mECap18 واستخدام أنظمة انتقائية تثبيط الدوائية القادرة على التأثير على بروتين افرازي الشخصية. سهولة تقييم هذه الأخيرة عن طريق الحصاد مكيفة الثقافة المتوسطة، وتركيز البروتينات يفرز عن طريق ترسيب حمض التريكلوروسيتيك/الأسيتون وتحليلها لاحقاً عبر الحزب الديمقراطي الصربي صفحة و immunoblotting. نؤكد أن هذه الأساليب مجتمعة مناسبة لتحليل الأهداف البديلة البروتين البربخيه تمهيدا لتحديد دورها الوظيفي في نضوج الحيوانات المنوية و/أو تخزين.

الشكل 1 و الشكل 2 النتائج ممثلة لتوطين الفلورة ازدحاما في البربخ نصيب الماوس. بالتحقيق في كل من isoforms ازدحاما ثلاثة ملامح متميزة ومسلم عرض. وهكذا، يتسم DNM1 بوسم منتشر متواضعة نسبيا من الخلايا البربخيه طوال البربخ الجزء ونصيب الأولى ...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion

هنا، نحن تقرير توطين الفلورة دينامين لتوضيح البروتوكولات للكشف عن البروتينات في الفروع البربخيه جزءا لا يتجزأ من البارافين الماوس وتلك الخلية البربخيه مخلدة خط (mECap18). ونحن أيضا وصف البروتوكولات من أجل عزل البروتينات الافرازية من السوائل البربخيه وخلية مكيفة وسائل الإعلام.

تحليلاً تخليق البروتين البربخيه وإفراز

The mammalian epididymis generates one of the most complex intraluminal fluids of any endocrine gland in order to support the post-testicular maturation ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Quantitative Analysis of Protein Expression to Study Lineage Specification in Mouse Preimplantation Embryos

تحليل كمي للتعبير البروتين لدراسة النسب مواصفات في ماوس سابق للانغراس الأجنة

This protocol presents a method to perform quantitative, single-cell in situ analyses of protein expression to study lineage specification in mouse ...

Simultaneous Assessment of Cardiomyocyte DNA Synthesis and Ploidy: A Method to Assist Quantification of Cardiomyocyte Regeneration and Turnover

تقييم في وقت واحد Cardiomyocyte الحمض النووي تحضير والصيغة الصبغية: طريقة لمساعدة الكمي لCardiomyocyte التجديد ودوران

Although it is accepted that the heart has a limited potential to regenerate cardiomyocytes following injury and that low levels of cardiomyocyte turnover ...

A Simple Method to Identify Kinases That Regulate Embryonic Stem Cell Pluripotency by High-throughput Inhibitor Screening

طريقة بسيطة لتحديد الحركات التي تنظم تعدد القدرات الجذعية للخلايا الجذعية من خلال فحص المانع عالي الإنتاجية

Embryonic stem cells (ESCs) can self-renew or differentiate into all cell types, a phenomenon known as pluripotency. Distinct pluripotent states have been ...

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

التصور والتحليل الكمي من الأوعية الدموية الجنينية في<em&gt; زينوبوس تروبيكاليس</em

Blood vessels supply oxygen and nutrients throughout the body, and the formation of the vascular network is under tight developmental control. The ...

Analysis of Protein-protein Interactions and Co-localization Between Components of Gap, Tight, and Adherens Junctions in Murine Mammary Glands

تحليل التفاعلات البروتين البروتين والمشاركة في توطين بين مكونات الفجوة، ضيق، والمالطيون تقاطعات في الغدد الثديية الفئران

Cell-cell interactions play a pivotal role in preserving tissue integrity and the barrier between the different compartments of the mammary gland. These ...

Correlative Super-resolution and Electron Microscopy to Resolve Protein Localization in Zebrafish Retina

القرار فائقة الارتباطية والميكروسكوب الإلكتروني لحل التعريب البروتين في الشبكية الزرد

We present a method to investigate the subcellular protein localization in the larval zebrafish retina by combining super-resolution light microscopy and ...

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

تحليل الحركية فاسكولوجينيسيس يقد ديناميات فاسكولوجينيسيس والأوعية في المختبر

Vasculogenesis is a complex process by which endothelial stem and progenitor cells undergo de novo vessel formation. Quantitative assessment of ...

Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

عزل وتلطيخ الخلايا الكيراتينية الجلد الماوس لدورة الخلية تحليل محدد للتعبير البروتين الخلوي عن طريق قياس الخلايا الشامل

The goal of this protocol is to detect and quantify protein expression changes in a cell cycle-dependent manner using single cells isolated from the ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

التصوير الحي وتحليل تقلصات العضلات في جنين دروسوفيلا

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

إعداد استخراج البروتين و إعادة التأهيل المناعي المشترك من الإيغانات Caenorhabditis

Co-immunoprecipitation methods are frequently used to study protein-protein interactions. Confirmation of hypothesized protein-protein interactions or ...