Name: analysis of epididymal protein synthesis and secretion
Uploaded: 2018-08-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

Forfatterne ønsker å erkjenne National Health and Medical Research Council av Australia prosjektet Grant APP1103176 til støtte for dette arbeidet.

Alle eksperimentelle prosedyrer som involverer dyr tissue samling ble godkjent av University of Newcastle's Animal Care og etikk.
1. immunofluorescence farging av parafin-embedded Epididymal deler (tall 1 og 2)
<ol><li>Umiddelbart etter eutanasi voksen mus via CO2 innånding (sveitsisk mus, over 8 uker gamle), nøye analysere bitestikkel (med kirurgisk saks og pinsett) gratis overliggende bindevev og fett og dyppe i Bouins bindemiddel løsning (> ti ganger volum/vev vekt) for natt...

Disse studiene innlemmet bruken av Bouins fast epididymal vev som hadde vært utsatt for parafin innebygging og snitting standardprotokoller. Bouins etappe, den stabiliserende løsningen består av en blanding av formaldehyd, pikrinsyre og eddiksyre, med hver komponent har en bestemt og utfyllende funksjon. Dermed formaldehyd reagerer med primære aminer til protein cross-links, pikrinsyre trenger sakte vevet danner salter og dermed koagulering av grunnleggende proteiner og omvendt, eddiksyre raskt trenger vevet og føre...

Spermatozoa av alle pattedyrarter erverve potensial til å vise frem progressiv motilitet og befrukte egget under deres langvarig nedstigning bitestikkel, et høyt spesialisert område av mannlige ekstra testicular Ledningskanalsystemet, som kan ta 7-14 dager å navigere (avhengig av arten)1. Ekstreme kondens på farssiden chromatin og blodsutgytelse flertallet av cytoplasma som følger cytodifferentiation spermatozoa i testiklene, er deres påfølgende funksjonelle modning drevet av deres samspill med den epididymal microenvironment. Dette miljøet er, igjen, skapt av sekretoriske og absorberende aktiviteten til fôr epididymal soma og viser en enestående nivå av segmentet-segmentet variant1. Dermed er de mest aktive delene proteinsyntese og sekresjon ligger i den proksimale delen av bitestikkel (nemlig caput og corpus)2. Denne aktiviteten gjenspeiler funksjonelle profilen spermatozoa, med celler første begynnelsen vise kjennetegner funksjonell kompetanse (dvs., progressiv motilitet og muligheten til å binde til syre-solubilized zona glykoproteiner) følgende deres passasje gjennom caput bitestikkel3. Disse funksjonelle attributtene fortsette å utvikle før optimale nivåer som sperm nå den distale epididymal segmentet (cauda), der de er lagret i en passivisert tilstand i beredskap for utløsning. Dannelsen og vedlikeholdet av denne sperm lagring reservoaret er også nært knyttet til fôr epitel, som i cauda domineres av sterke absorberende aktivitet4,5. Selv om anatomiske forskjeller har vært rapportert6,7,8, synes slike regionene arbeidsdeling å være karakteristisk for bitestikkel som deles blant fleste pattedyrarter studerte til dato, inkludert vår egen9,10. Faktisk, fra en klinisk perspektiv, det er kjent at epididymal dysfunksjon er et viktig bidrag til etiologien av mannlig faktor ufruktbarhet11, dermed fremhever viktigheten av å forstå regulering av denne spesialisert vev.
Det er derfor beklagelig at vår forståelse av epididymal fysiologi og mekanismer som regulerer sekvensiell faser av sæd modning og lagring i denne tissue, forblir fullt løses. Blant de medvirkende faktorene er begrensende fremskritt innen epididymal forskning generelle kompleksiteten i dette vevet og kunnskap om mekanismene som utøver regulatoriske kontroll over sine luminal microenvironment. Anatomisk, vet vi at utover æren av caput, corpus og cauda segmenter, bitestikkel kan videre deles inn i flere soner (figur 1A), hver atskilt med septa12 og preget av separate profiler av genet/protein uttrykket13,14,15,16,17,18. Basert på detaljerte transcriptional profilering av Segmentinformasjon genuttrykk i bitestikkel, har faktisk som 6 og 9 forskjellige epididymal soner rapportert i musen og rotte modeller, henholdsvis19,20. Slik kompleksitet antagelig gjenspeiler sammensetningen av den epididymal soma, en pseudostratified epitel består av mange forskjellige celletyper; hver forskjellige forhold til sine overflod, distribusjon og sekretoriske/absorberende aktiviteter langs i tarmkanalen. Dermed er viktigste celler langt den mest tallrike epididymal celle type utgjør opp 80% av alle epitelceller. Følgelig er viktigste celler ansvarlig for mesteparten av epididymal protein biosyntesen og sekresjon5. Derimot er klare celle befolkningen, som rangerer som den nest mest rikelig celle typen innen den epididymal soma, hovedsakelig involvert i selektiv absorpsjon av luminal komponenter og forsuring av denne microenvironment5. Legger til et annet nivå av kompleksitet, utøve androgener og andre lumicrine faktorer av testicular opprinnelse differensial kontroll over hver av disse epididymal celletyper avhengig av deres plassering langs tarmkanalen.
Til tross for begrensningene pålagt av slik kompleksitet, fortsetter betydelig innhugg gjøres i løse mekanistisk grunnlaget for epididymal funksjonen. En nøkkel til disse studiene er anvendelse av avanserte massespektrometri strategier for å etablere bred skala lagerbeholdning på den epididymal proteom, sammen med detaljerte analyser av personlige proteiner valgt blant disse innledende undersøkelser. En illustrasjon av denne tilnærmingen er vår siste karakterisering av DNM mechanoenzymes i mus modell21. Vår første interesse DNM var drevet av sin dual action i koplingen exo - og endocytotic prosesser. Bygge på disse observasjonene, kunne vi vise at de tre kanoniske isoformene av DNM (DNM1 - DNM3) er svært uttrykt i musen bitestikkel og riktig plassert for å oppfylle forskriftsmessige roller i protein sekresjon og absorpsjon21 . Videre kunne vi skille hver DNM isoformen basert på deres mobilnettet og sub mobilnettet lokalisering, dermed antyder at de har utfyllende, i motsetning til redundant aktivitet innen epididymal epitel21.
Her beskriver vi eksperimentell metodikk ansatt for studier av DNM uttrykk i mus bitestikkel med håp om at denne informasjonen vil finne omfattende program i karakterisering av alternativ epididymal proteiner og dermed bidra til vår forståelse av funksjonen av denne viktige delen av mannens reproduksjonsevne skrift. Spesielt beskrive vi utviklingen av robust metode for immunofluorescence merking av målet proteiner i parafin-embedded epididymal deler og den etterfølgende oppdagelsen av den romlige fordelingen av disse proteinene via immunofluorescence mikroskopi. Vi ytterligere dokumentere våre nylig optimalisert protokoller22 for isolering og karakterisering av epididymosomes; små exosome som blemmer som utgjør viktige elementer av epididymal sekretoriske profilen og synes å holde en fremtredende rolle i å fremme sperm modning23. Som en komplementær tilnærming beskriver vi også immunofluorescence deteksjon av mål proteiner i en udødeliggjort musen caput epididymal epitel (mECap18) cellen linje og bruk av denne ressursen som modell med å utforske regulering av epididymal sekretoriske aktivitet i vitro.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dynamin 1 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108458</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 2 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-6400</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 3 antibody</td>
			<td>Proteintech</td>
			<td>14737-1-AP</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP6V1B1 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-21206</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD9 antibody</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>553758</td>
			<td>Host species: Rat, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flotillin-1 antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1180</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALOX15 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab80221</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUBB antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-5274</td>
			<td>Host species: Mouse, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSMD7 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab11436</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11008</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11055</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11058</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11007</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC03L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC01L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Mouse HRP</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-2005</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 4-88</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>475904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Bovogen</td>
			<td>SFBS-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#945;-androstan-17&#946;-ol-3-oneC-IIIN</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium pyruvate</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11360-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S1804</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Astral</td>
			<td>0497-5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1, 4-diazabicyclo-(2.2.2)-octane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-gysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4832</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>78787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloroacetic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T9159</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>A6-2.5 L GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly (vinyl alcohol)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>783-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiPrep Density Gradient Medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Zeiss Axio Imager A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>Optima Max-XP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuges</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Heracell</td>
			<td>150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Orbital Shaker</td>
			<td>Ratek</td>
			<td>OM7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave</td>
			<td>LG</td>
			<td>MS3840SR /00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab pH Meter</td>
			<td>MeterLab</td>
			<td>PHM220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid-repellent slide marker</td>
			<td>Daido Sangyo</td>
			<td>Mini</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>665180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide</td>
			<td>Mikro-Glass</td>
			<td>SF41296PLMK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m filter</td>
			<td>Millox-HV</td>
			<td>SLHV033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes Dustfree Paper</td>
			<td>KIMTECH</td>
			<td>34155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (2.2 ml, 11 &#215; 35 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>347356</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (3.2 ml, 13 &#215; 56 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>362305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer 70 &#181;m Nylon</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 35 &#215; 10 mm with cams</td>
			<td>SARSTED</td>
			<td>82.1135.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide jar</td>
			<td>TRAJAN</td>
			<td>#23 319 00</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of epididymal protein synthesis and secretion

Pattedyr bitestikkel genererer en av de mest komplekse intraluminal væskene av alle endokrine kjertel for å støtte den nye testicular modning og lagring av spermatozoa. Slik kompleksitet oppstår på grunn av kombinerte sekretoriske og absorberende aktiviteten til fôr epitelceller. Her beskriver vi teknikker for analyse av epididymal proteinsyntese og sekresjon ved å fokusere på modellen protein familien dynamin (DNM) mechanoenzymes; store GTPases som har potensial til å regulere toveis membran menneskehandel hendelser. For studier av protein uttrykk i epididymal vev beskriver vi robust metode for immunofluorescence merking av målet proteiner i parafin-embedded deler og den etterfølgende oppdagelsen av den romlige fordelingen av disse proteinene via immunofluorescence mikroskopi. Vi beskriver også optimalisert metodikk for isolering og karakterisering av exosome som blemmer, kjent som epididymosomes, som utskilles i den epididymal lumen til å delta i intercellulære kommunikasjon med modne sædceller. Som en komplementær tilnærming beskriver vi også immunofluorescence deteksjon av mål proteiner i en SV40-udødeliggjort musen caput epididymal epitel (mECap18) cellen linje. Videre har diskutere vi verktøyet av mECap18 celle linjen som passer i vitro modell med å utforske regulering av epididymal sekretoriske aktivitet. For dette formålet beskriver vi culturing kravene for vedlikehold av mECap18 celle linjen og bruk av selektiv farmakologiske hemming regimer som kan påvirke deres sekretoriske protein profil. Sistnevnte er vurdert lett via høsting av betinget kultur medium, konsentrasjonen av utskilles proteiner via Trekloredikksyre/aceton nedbør og deres påfølgende analyse via SDS-side og immunoblotting. Vi hevder at disse kombinerte metodene er egnet for analyse av alternativ epididymal protein mål som et forspill til å bestemme sin funksjonelle rolle i sperm modning og/eller lagring.

Figur 1 og Figur 2 viser representant resultatene av immunofluorescence lokalisering av DNM i musen caput bitestikkel. Hver av de tre DNM isoformene undersøkt vise forskjellige lokalisering profiler. Dermed er DNM1 preget av relativt beskjeden diffus merking av epididymal celler i første segmentet og caput bitestikkel (figur 2A). I motsetning DNM2 isoformen ble først oppdaget i ce...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion

Her rapporterer vi immunofluorescence lokalisering av dynamin å illustrere protokollene for påvisning av proteiner i parafin-innebygd mus epididymal inndelinger og de av en udødeliggjort epididymal celle linje (mECap18). Vi beskriver også protokollene for isolering av sekretoriske proteiner fra både epididymal væske og betinget cellen media.

Analyse av Epididymal proteinsyntese og sekresjon

The mammalian epididymis generates one of the most complex intraluminal fluids of any endocrine gland in order to support the post-testicular maturation ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Quantitative Analysis of Protein Expression to Study Lineage Specification in Mouse Preimplantation Embryos

Kvantitativ analyse av Protein Expression å studere Lineage Spesifikasjon i Mouse Før implantasjon Embryoer

This protocol presents a method to perform quantitative, single-cell in situ analyses of protein expression to study lineage specification in mouse ...

Simultaneous Assessment of Cardiomyocyte DNA Synthesis and Ploidy: A Method to Assist Quantification of Cardiomyocyte Regeneration and Turnover

Samtidig Vurdering av kardiomyocytt DNA syntese og ploidiundersøkelse: En metode for å hjelpe Kvantifisering av kardiomyocytt Regeneration og Omsetning

Although it is accepted that the heart has a limited potential to regenerate cardiomyocytes following injury and that low levels of cardiomyocyte turnover ...

A Simple Method to Identify Kinases That Regulate Embryonic Stem Cell Pluripotency by High-throughput Inhibitor Screening

En enkel metode for å identifisere kinaser som regulerer embryonisk stamcellepluripotens ved høy gjennomstrømningsinhibitor screening

Embryonic stem cells (ESCs) can self-renew or differentiate into all cell types, a phenomenon known as pluripotency. Distinct pluripotent states have been ...

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualisering og kvantitativ analyse av embryonisk angiogenese i<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Blood vessels supply oxygen and nutrients throughout the body, and the formation of the vascular network is under tight developmental control. The ...

Analysis of Protein-protein Interactions and Co-localization Between Components of Gap, Tight, and Adherens Junctions in Murine Mammary Glands

Analyse av protein-protein-interaksjoner og samlokalisering mellom komponenter av gap-, tett- og adherens-junks i murine mammarykjertler

Cell-cell interactions play a pivotal role in preserving tissue integrity and the barrier between the different compartments of the mammary gland. These ...

Correlative Super-resolution and Electron Microscopy to Resolve Protein Localization in Zebrafish Retina

Correlative super-oppløsning og elektronmikroskop løse Protein lokalisering i sebrafisk netthinnen

We present a method to investigate the subcellular protein localization in the larval zebrafish retina by combining super-resolution light microscopy and ...

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

Kinetisk analyse av Vasculogenesis kvantifiserer dynamikken i Vasculogenesis og angiogenese In Vitro

Vasculogenesis is a complex process by which endothelial stem and progenitor cells undergo de novo vessel formation. Quantitative assessment of ...

Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Isolasjon og farging av mus Skin keratinocytter for celle syklus spesifikk analyse av Cellular protein uttrykk ved Mass flowcytometri

The goal of this protocol is to detect and quantify protein expression changes in a cell cycle-dependent manner using single cells isolated from the ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging og analyse av muskelsammentrekninger i Drosophila embryo

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

Protein ekstrakt forberedelse og co-immunoprecipitation fra Caenorhabditis elegans

Co-immunoprecipitation methods are frequently used to study protein-protein interactions. Confirmation of hypothesized protein-protein interactions or ...