Name: analysis of epididymal protein synthesis and secretion
Uploaded: 2018-08-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

Författarna vill erkänna de nationella hälso- och medicinsk forskning rådet av Australien Project Grant APP1103176 till stöd för detta arbete.

Alla experimentella rutiner som innefattar djurvävnad samling godkändes av den University of Newcastle's Animal Care och etikkommittén.
1. immunofluorescens färgning av Paraffin-inbäddat Epididymal avsnitten (figur 1 och 2)
<ol><li>Omedelbart efter dödshjälpen för vuxna möss via CO2 inandning (schweiziska möss, över 8 veckor gamla), noggrant dissekera bitestiklarna (med kirurgisk sax och pincett) gratis överliggande bindväv och fett och fördjupa i Bouins fixativ Lös...

Dessa studier ingår användning av Bouins fasta epididymal vävnad som hade utsatts för paraffin inbäddning och snittning standardprotokoll. Bouins fixativ lösningen består av en blandning av formaldehyd, pikrinsyra och ättiksyra, med varje komponent för att ha ett specifikt och kompletterande funktion. Således, formaldehyd reagerar med primära amines bildar protein tvärbindningar, pikrinsyra penetrerar sakta vävnaden bildar salter och därmed koagulation av grundläggande proteiner och omvänt, ättiksyra sna...

Spermier av alla däggdjursarter förvärva potential att Visa framåt progressiv motilitet och att befrukta en äggcell under sin långvariga härkomst genom bitestiklarna, en högt specialiserad region av manliga extra testikelcancer kanalsystem, som kan ta 7-14 dagar att navigera (beroende på Art)1. På grund av extrema kondensation av det paternal kromatinet och avgivande av majoriteten av cytoplasman som medföljer cytodifferentiation av spermier i testiklarna, drivs deras efterföljande funktionell mognad uteslutande av deras interaktion med den epididymal mikromiljö. Denna miljö är, i sin tur skapat av sekretoriska och absorptive aktiviteten av de foder epididymal soma och visar en exceptionell nivå av segment-segmentet variant1. De mest aktiva segment när det gäller proteinsyntesen och sekretion är således de som ligger i den proximala delen av bitestiklarna (nämligen, caput och corpus)2. Denna aktivitet speglar den funktionella profilen av spermier, med celler första början att Visa kännetecknar funktionell kompetens (dvs., progressiv motilitet och förmågan att binda till syra-solubilized zona glykoproteiner) följande deras passage genom caput bitestiklarna3. Dessa funktionella attribut fortsätta att utveckla innan nå optimala nivåer som spermier når distala epididymal segmentet (cauda), vari de lagras i en quiescent stat i beredskap för utlösning. Bildandet och underhållet av denna sperma lagringsbehållare är också intimt knuten till foder epitel, som i cauda domineras av stark absorptive verksamhet4,5. Även om anatomiska skillnader har varit rapporterade6,7,8, verkar sådana regionaliseras arbetsfördelningen vara ett kännetecken av bitestiklarna som delas bland majoriteten av däggdjursarter studerade hittills, inklusive vår egen9,10. Faktiskt från ett kliniskt perspektiv, är det känt att epididymal dysfunktion är ett viktigt bidrag till etiologin av manlig faktor infertilitet11, vilket belyser vikten av att förstå regleringen av denna specialiserade vävnad.
Det är därför beklagligt att vår förståelse av epididymal fysiologi och de mekanismer som reglerar de sekventiella faserna av spermier mognad och lagring inom denna vävnad, återstår helt. Bland de bidragande faktorerna är begränsande framsteg i epididymal forskning övergripande komplexiteten i denna vävnad och kunskap om de mekanismer som utövar tillsyn över dess luminala mikromiljö. Anatomiskt, vet vi att bortom skillnaden av caput, corpus och cauda segment, bitestiklarna kan ytterligare uppdelas i flera zoner (figur 1A), varje avskilda genom septa12 och kännetecknas av diskreta profiler av genen och protein uttryck13,14,15,16,17,18. Faktiskt, på grundval av detaljerade transkriptionell profilering av segmentell genuttryck i bitestiklarna, så många som 6 och 9 distinkta epididymal zoner har rapporterats hos mus och råtta modellerna, respektive19,20. Sådan komplexitet förmodligen återspeglar sammansättningen av den epididymal soma, en pseudostratified epitel bestående av många olika celltyper; varje olika vad gäller överflöd, distribution och sekretoriska/absorptive verksamheten längs längden av tarmkanalen. Huvudsakliga celler är alltså överlägset den mest förekommande epididymal cell typ som utgör uppemot 80% av alla epitelceller. Följaktligen är huvudsakliga celler ansvariga för huvuddelen av epididymal protein biosyntes och sekretion5. Däremot är befolkningens klarcellig, som rankas som den näst vanligast förekommande celltypen inom den epididymal soma, primärt inblandade i selektiv absorption av luminala komponenter och försurning av denna mikromiljö5. Lägga till en annan nivå av komplexitet, utöva androgener och andra lumicrine faktorer av testikelcancer ursprung differentiell kontroll över var och en av dessa epididymal celltyper beroende på deras placering längs tarmkanalen.
Trots de begränsningar som införts av sådan komplexitet, betydande inbrytningar i fortsättningen göras till lösa den mekanistiska grunden för epididymal funktion. En nyckel till dessa studier har varit tillämpning av avancerad masspektrometri strategier att upprätta storskaliga inventeringar av de epididymal proteomet, tillsammans med detaljerade analyser av enskilda proteiner utvalda bland dessa inledande undersökningar. En illustration av detta tillvägagångssätt är vår senaste karakterisering av DNM familjen av mechanoenzymes i mus modell21. Vårt inledande intresse för DNM drevs av dess dubbelverkande i kopplingen av exo- och endocytotic processer. Bygga på dessa observationer, har vi kunnat visa att de tre kanoniska isoformerna av DNM (DNM1 - DNM3) är starkt uttryckt i mus bitestiklarna och lämpligt placerade för att uppfylla regulatoriska roller i protein sekretion och absorption21 . Dessutom kunde vi tydligt skilja varje DNM isoform på grundval av deras cellulära och sub cellulär lokalisering, vilket tyder på att de har kompletterande, i motsats till redundant, aktivitet inom den epididymal epitel21.
Här beskriver vi de experimentell metodik som används för studier av DNM uttryck i mus bitestiklarna med hopp om att denna information kommer att hitta bredare tillämpning i karakterisering av alternativa epididymal proteiner och därmed bidra till vår förståelse för funktionen av denna viktiga del av manliga genitalia. Specifikt, beskriver vi utvecklingen av robust metod för immunofluorescens märkning av målproteiner i paraffin-inbäddat epididymal sektioner och efterföljande detektion av den rumsliga fördelningen av dessa proteiner via immunofluorescens mikroskopi. Vi ytterligare dokumentera våra nyligen optimerad protokoll22 för isolering och karakterisering av epididymosomes; små exosome-liknande blåsor som utgör viktiga delar av epididymal sekretoriska profilen och verkar hålla en framträdande roll i att främja spermier mognad23. Som en kompletterande strategi beskriver vi också immunofluorescens detektion av målproteiner i en cellinje för förevigade mus caput epididymal epitelial (mECap18) och användningen av denna resurs som en modell att utforska regleringen av epididymal sekretoriska aktivitet in vitro.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dynamin 1 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108458</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 2 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-6400</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamin 3 antibody</td>
			<td>Proteintech</td>
			<td>14737-1-AP</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP6V1B1 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-21206</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD9 antibody</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>553758</td>
			<td>Host species: Rat, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flotillin-1 antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1180</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ALOX15 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab80221</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUBB antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-5274</td>
			<td>Host species: Mouse, Isotype: IgG, Class: monoclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSMD7 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab11436</td>
			<td>Host species: Rabbit, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11008</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11055</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Goat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11058</td>
			<td>Host species: Donkey, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>A11007</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rabbit HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC03L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Rat HRP</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>DC01L</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Mouse HRP</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-2005</td>
			<td>Host species: Goat, Isotype: IgG, Class: polyclonal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D9564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 4-88</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>475904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Bovogen</td>
			<td>SFBS-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin/streptomycin</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5&#945;-androstan-17&#946;-ol-3-oneC-IIIN</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium pyruvate</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11360-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S1804</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Astral</td>
			<td>0497-5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1, 4-diazabicyclo-(2.2.2)-octane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-gysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4832</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>78787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloroacetic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T9159</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>A6-2.5 L GL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly (vinyl alcohol)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Ajax Finechem</td>
			<td>783-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiPrep Density Gradient Medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscopy</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Zeiss Axio Imager A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>Optima Max-XP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuges</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Heracell</td>
			<td>150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Orbital Shaker</td>
			<td>Ratek</td>
			<td>OM7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave</td>
			<td>LG</td>
			<td>MS3840SR /00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab pH Meter</td>
			<td>MeterLab</td>
			<td>PHM220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid-repellent slide marker</td>
			<td>Daido Sangyo</td>
			<td>Mini</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 well plate</td>
			<td>CELLSTAR</td>
			<td>665180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide</td>
			<td>Mikro-Glass</td>
			<td>SF41296PLMK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m filter</td>
			<td>Millox-HV</td>
			<td>SLHV033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes Dustfree Paper</td>
			<td>KIMTECH</td>
			<td>34155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (2.2 ml, 11 &#215; 35 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>347356</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge tube (3.2 ml, 13 &#215; 56 mm)</td>
			<td>BECKMAN COULTER</td>
			<td>362305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer 70 &#181;m Nylon</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 35 &#215; 10 mm with cams</td>
			<td>SARSTED</td>
			<td>82.1135.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide jar</td>
			<td>TRAJAN</td>
			<td>#23 319 00</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of epididymal protein synthesis and secretion

Däggdjur bitestiklarna genererar en av de mest komplexa intraluminal vätskorna av något endokrin körtel för att stödja efter testikelcancer mognad och lagring av spermier. Sådan komplexitet uppstår på grund av den kombinera sekretoriska och absorptive aktiviteten av epitelceller lining. Här beskriver vi teknikerna för analys av epididymal proteinsyntes och utsöndringen genom att fokusera på familjen modell protein dynamin (DNM) mechanoenzymes; stora GTPases som har potential att reglera dubbelriktad membran människohandel händelser. För att studera proteinuttryck i epididymal vävnad beskriver vi robust metod för immunofluorescens märkning av målproteiner i paraffin-inbäddat sektioner och efterföljande detektion av den rumsliga fördelningen av dessa proteiner via immunofluorescens mikroskopi. Vi beskriver också optimerad metod för isolering och karakterisering av exosome som blåsor, känd som epididymosomes, som utsöndras till epididymal lumen att delta i kommunikationen med mognar spermierna. Som en kompletterande strategi beskriver vi också immunofluorescens detektion av målproteiner i en cellinje för SV40-förevigade mus caput epididymal epitelial (mECap18). Dessutom diskuterar vi verktyget av raden mECap18 cell som lämpliga in vitro- modell att utforska regleringen av epididymal sekretoriska aktivitet. För detta ändamål beskriver vi de culturing krav för underhåll av mECap18 cell linjen och användning av selektiva farmakologisk hämning regimer som kan påverka deras sekretoriska protein profil. Dessa utvärderas lätt via skörd av konditionerat odlingsmedium, koncentration av utsöndrade proteiner via triklorättiksyra/aceton utfällning och deras efterföljande analys via SDS-PAGE och immunoblotting. Vi hävdar att dessa kombinerade metoder är lämpliga för analys av alternativa epididymal protein mål som ett förspel till att bestämma deras funktionella roll i spermier mognad och/eller lagring.

Figur 1 och Figur 2 visar representativa resultat av immunofluorescens lokalisering av DNM i mus caput bitestiklarna. Var och en av de tre DNM-isoformerna undersökt display distinkta lokalisering profiler. Således kännetecknas DNM1 av relativt blygsamma diffusa märkning av epididymal cellerna i hela inledande segmentet och caput bitestiklarna (figur 2A). Den DNM2 isoformen upptä...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion at JoVE.com

Analysis of Epididymal Protein Synthesis and Secretion

Vi rapporterar här, immunofluorescens localizationen av dynamin att illustrera protokollen för påvisande av proteiner i paraffin-inbäddat mus epididymal sektioner och de av en förevigade epididymal cellinje (mECap18). Vi beskriver också protokoll för isolering av sekretoriska proteiner från både epididymal vätska och konditionerat cell media.

Analys av Epididymal proteinsyntes och utsöndring

The mammalian epididymis generates one of the most complex intraluminal fluids of any endocrine gland in order to support the post-testicular maturation ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Quantitative Analysis of Protein Expression to Study Lineage Specification in Mouse Preimplantation Embryos

Kvantitativ analys av proteinuttryck att studera Lineage Specifikation i mus Preimplantatorisk embryon

This protocol presents a method to perform quantitative, single-cell in situ analyses of protein expression to study lineage specification in mouse ...

Simultaneous Assessment of Cardiomyocyte DNA Synthesis and Ploidy: A Method to Assist Quantification of Cardiomyocyte Regeneration and Turnover

Samtidig Bedömning av cardiomyocyte DNA-syntes och ploiditet: En metod för att Assist Kvantifiering av cardiomyocyte Regeneration och omsättning

Although it is accepted that the heart has a limited potential to regenerate cardiomyocytes following injury and that low levels of cardiomyocyte turnover ...

A Simple Method to Identify Kinases That Regulate Embryonic Stem Cell Pluripotency by High-throughput Inhibitor Screening

En enkel metod för att identifiera kinaser som reglerar embryonisk stamcellspluripotens genom genomströmningshämmande screening

Embryonic stem cells (ESCs) can self-renew or differentiate into all cell types, a phenomenon known as pluripotency. Distinct pluripotent states have been ...

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualisering och kvantitativ analys av embryonisk angiogenes i<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Blood vessels supply oxygen and nutrients throughout the body, and the formation of the vascular network is under tight developmental control. The ...

Analysis of Protein-protein Interactions and Co-localization Between Components of Gap, Tight, and Adherens Junctions in Murine Mammary Glands

Analys av protein-proteininteraktioner och samlokalisering mellan komponenter av gap-, täta och adherens-föreningar i murina mammalkörtlar

Cell-cell interactions play a pivotal role in preserving tissue integrity and the barrier between the different compartments of the mammary gland. These ...

Correlative Super-resolution and Electron Microscopy to Resolve Protein Localization in Zebrafish Retina

Korrelat super-upplösning och elektronmikroskopi för att lösa Protein lokalisering i zebrafiskar näthinna

We present a method to investigate the subcellular protein localization in the larval zebrafish retina by combining super-resolution light microscopy and ...

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

Kinetic Analysis of Vasculogenesis Quantifies Dynamics of Vasculogenesis and Angiogenesis In Vitro

Kinetic analys av Vasculogenesis kvantifierar dynamiken i Vasculogenesis och angiogenes In Vitro

Vasculogenesis is a complex process by which endothelial stem and progenitor cells undergo de novo vessel formation. Quantitative assessment of ...

Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Isolering och färgning av mus hud keratinocyter för cell Cycle specifik analys av cellulära protein uttryck av Masscytometry

The goal of this protocol is to detect and quantify protein expression changes in a cell cycle-dependent manner using single cells isolated from the ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Levande avbildning och analys av muskelsammandragningar i Drosophila embryo

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

Protein Extract Preparation and Co-immunoprecipitation from Caenorhabditis elegans

Protein extrakt beredning och co-immunoprecipitation från Caenorhabditis elegans

Co-immunoprecipitation methods are frequently used to study protein-protein interactions. Confirmation of hypothesized protein-protein interactions or ...