Name: in vivo two-photon imaging of cortical neurons in neonatal mice
Uploaded: 2018-10-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice at JoVE.com

Авторы благодарят т. Сато, м. Kanbayashi и S. Kouyama за их технической помощи. Эта работа была поддержана JSP-страницы KAKENHI Грант номера JP15K14322 и JP16H06143, научный фонд Такэда, Уэхара Мемориальный фонд и проект совместных исследований Ниигата университета мозга исследовательский институт 2017-2923 (H.M.) и по KAKENHI JP16K14559, JP15H01454 и JP15H04263 и Грант в научных исследований в области инноваций «Динамическое регулирование функции мозга на металлолом и построения системы» (JP16H06459) от МПКСНТ (T.I.).

Эксперименты следует проводить в соответствии с руководящими животных, установленном учреждением экспериментатора.
1. Подготовка щенков для изображений
Примечание: Щенков с редкой помечены корковых нейронов может быть получено в утробе матери элект?...

<ol>
	<li>Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience-dependent+plasticity+of+dendritic+spines+in+the+developing+rat+barrel+cortex+in+vivo.">Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing rat barrel cortex in vivo.</a> Nature. 404 (6780), 876-881 (2000).</li><li>Grutzendler, J., Kasthuri, N., Gan, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+dendritic+spine+stability+in+the+adult+cortex.">Long-term dendritic spine stability in the adult cortex.</a> Nature. 420 (6917), 812-816 (2002).</li><li>Carrillo, J., Nishiyama, N., Nishiyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+translocation+establishes+the+winner+in+cerebellar+climbing+fiber+synapse+elimination.">Dendritic translocation establishes the winner in cerebellar climbing fiber synapse elimination.</a> The Journal of Neuroscience. 33 (18), 7641-7653 (2013).</li><li>Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., De Paola, V., Caroni, P., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diverse+modes+of+axon+elaboration+in+the+developing+neocortex.">Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex.</a> PLoS Biology. , e272 (2005).</li><li>Mizuno, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMDAR-regulated+dynamics+of+layer+4+neuronal+dendrites+during+thalamocortical+reorganization+in+neonates.">NMDAR-regulated dynamics of layer 4 neuronal dendrites during thalamocortical reorganization in neonates.</a> Neuron. 82 (2), 365-379 (2014).</li><li>Luo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supernova:+A+Versatile+Vector+System+for+Single-Cell+Labeling+and+Gene+Function+Studies+in+vivo.">Supernova: A Versatile Vector System for Single-Cell Labeling and Gene Function Studies in vivo.</a> Scientific Reports. 6, 35747 (2016).</li><li>Mizuno, H., Hirano, T., Tagawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+activity-dependent+cortical+wiring:+formation+of+interhemispheric+connections+in+neonatal+mouse+visual+cortex+requires+projection+neuron+activity.">Evidence for activity-dependent cortical wiring: formation of interhemispheric connections in neonatal mouse visual cortex requires projection neuron activity.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (25), 6760-6770 (2007).</li><li>Saito, T., Nakatsuji, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+transfer+into+the+embryonic+mouse+brain+using+in+vivo+electroporation.">Efficient gene transfer into the embryonic mouse brain using in vivo electroporation.</a> Developmental Biology. 240 (1), 237-246 (2001).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+in+utero+gene+transfer+system+to+the+developing+mouse+brain+using+electroporation:+visualization+of+neuronal+migration+in+the+developing+cortex.">Efficient in utero gene transfer system to the developing mouse brain using electroporation: visualization of neuronal migration in the developing cortex.</a> Neuroscience. 103 (4), 865-872 (2001).</li><li>Mizuno, H., Hirano, T., Tagawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-synaptic+and+post-synaptic+neuronal+activity+supports+the+axon+development+of+callosal+projection+neurons+during+different+post-natal+periods+in+the+mouse+cerebral+cortex.">Pre-synaptic and post-synaptic neuronal activity supports the axon development of callosal projection neurons during different post-natal periods in the mouse cerebral cortex.</a> European Journal of Neuroscience. 31 (3), 410-424 (2010).</li><li>Matsui, A., Yoshida, A. C., Kubota, M., Ogawa, M., Shimogori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+in+utero+electroporation:+controlled+spatiotemporal+gene+transfection.">Mouse in utero electroporation: controlled spatiotemporal gene transfection.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3024 (2011).</li><li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term,+high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window.">Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nature Protocols. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li><li>Nakai, J., Ohkura, M., Imoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high+signal-to-noise+Ca(2+)+probe+composed+of+a+single+green+fluorescent+protein.">A high signal-to-noise Ca(2+) probe composed of a single green fluorescent protein.</a> Nature Biotechnology. 19 (2), 137-141 (2001).</li><li>Chen, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasensitive+fluorescent+proteins+for+imaging+neuronal+activity.">Ultrasensitive fluorescent proteins for imaging neuronal activity.</a> Nature. 499 (7458), 295-300 (2013).</li><li>Mizuno, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patchwork-Type+Spontaneous+Activity+in+Neonatal+Barrel+Cortex+Layer+4+Transmitted+via+Thalamocortical+Projections.">Patchwork-Type Spontaneous Activity in Neonatal Barrel Cortex Layer 4 Transmitted via Thalamocortical Projections.</a> Cell Reports. 22 (1), 123-135 (2018).</li><li>Zong, H., Espinosa, J. S., Su, H. H., Muzumdar, M. D., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+double+markers+in+mice.">Mosaic analysis with double markers in mice.</a> Cell. 121 (3), 479-492 (2005).</li><li>Young, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-neuron+labeling+with+inducible+Cre-mediated+knockout+in+transgenic+mice.">Single-neuron labeling with inducible Cre-mediated knockout in transgenic mice.</a> Nature Neuroscience. 11 (6), 721-728 (2008).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+Repeated+Exposure+to+Isoflurane+not+Sevoflurane+in+Mice+Reversibly+Impaired+Spatial+Cognition+at+Juvenile-Age.">Neonatal Repeated Exposure to Isoflurane not Sevoflurane in Mice Reversibly Impaired Spatial Cognition at Juvenile-Age.</a> Neurochemical Research. 42 (2), 595-605 (2017).</li><li>Kondo, M., Kobayashi, K., Ohkura, M., Nakai, J., Matsuzaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+calcium+imaging+of+the+medial+prefrontal+cortex+and+hippocampus+without+cortical+invasion.">Two-photon calcium imaging of the medial prefrontal cortex and hippocampus without cortical invasion.</a> eLIFE. 6, e26839 (2017).</li><li>Nakazawa, S., Mizuno, H., Iwasato, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+dynamics+of+cortical+neuron+dendritic+trees+revealed+by+long-term+in+vivo+imaging+in+neonates.">Differential dynamics of cortical neuron dendritic trees revealed by long-term in vivo imaging in neonates.</a> Nature Communications. 9 (1), 3106 (2018).</li></ol>

Важнейшие шаги в протоколе и устранения неполадок:
Наиболее важным этапом протокола является удаление черепа (протокол шаг 3.2). После вставки лезвие бритвы часто придерживается Дура, вызывая дурального кровотечение и повреждение головного мозга. Этого можно избежать путе...

Точное проводки нейронных цепей в коре имеет важное значение для высших мозговых функций, включая восприятие, познание и обучения и памяти. Корковых цепи динамически уточняются во время послеродового развития. Исследования изучали процесс корковых цепи формирования с использованием гистологических и в пробирке анализа культуры. Однако динамика формирования цепи в жизни млекопитающих оставалась главным образом неизученными.
Двух Фотон микроскопии широко используется для анализа в vivo нейронных цепей в1,мозг взрослой мыши2. Однако из-за технических проблем, только ограниченное количество исследований рассматривались нейронные цепи формирования у новорожденных мышей. К примеру Каррильо et al. исполнил покадровой съемки восхождения волокна мозжечка в втором послеродовой неделю3. Portera-Кайо et al. сообщили изображений аксоны в коркового слоя 1 в первом послеродовой неделю4. В настоящем исследовании мы суммируем протокол для наблюдения слой 4 корковых нейронов и их дендритов новорожденных мышей. Результаты, полученные путем применения настоящего Протокола, которая включает в себя две методологии, сообщается в нашей недавней публикации5. Во-первых мы используем сверхновой вектор системы5,6 для маркировки отдельных нейронов в головном мозге новорожденных. В системе сверхновой флуоресцентных белков, используется для маркировки нейронов нокдаун гена клеток конкретных сменные и помечены и редактирования/нокаут анализы также возможны. Во-вторых мы описываем хирургическая процедура подготовки черепной окно в хрупких новорожденных мышей. Вместе эти методологии позволяют наблюдения в естественных условиях отдельных нейронов в мозге новорожденных.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>pK031. TRE-Cre</td>
			<td>Authors</td>
			<td>-</td>
			<td>Available from RIKEN BRC and Addgene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pK029. CAG-loxP-STOP-loxP-RFP-ires-tTA-WPRE</td>
			<td>Authors</td>
			<td>-</td>
			<td>Available from RIKEN BRC and Addgene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pK273. CAG-loxP-STOP-loxP-CyRFP-ires-tTA-WPRE</td>
			<td>Authors</td>
			<td>-</td>
			<td>Available from authors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Wako</td>
			<td>099-06571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>410 Anaesthesia Unit (isoflurane gas machine)</td>
			<td>Univentor</td>
			<td>8323101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond (tissue adhesive)</td>
			<td>3M</td>
			<td>084-1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M&#181;ltiFlex Round (loading tip)</td>
			<td>Sorenson</td>
			<td>13810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam (gelatin sponge)</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>09-0353-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9793</td>
			<td>Low melting point</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round-shaped coverslip</td>
			<td>Matsunami</td>
			<td>-</td>
			<td>Custom made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unifast 2 (dental cement)</td>
			<td>GC</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanium bar</td>
			<td>Authors</td>
			<td>-</td>
			<td>Custom made (see Figure 1G)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl (carprofen)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>-</td>
			<td>Injectable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-photon microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM7MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanium-sapphire laser</td>
			<td>Spertra-Physics</td>
			<td>Mai-Tai eHPDS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanium plate</td>
			<td>Authors</td>
			<td>-</td>
			<td>Custom made (see Figure 2A)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IMARIS, FilamentTracer, MeasurementPro</td>
			<td>BITPLANE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goniometer stage</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>GN2/M</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo two-photon imaging of cortical neurons in neonatal mice

Двух фотонных изображений является мощным инструментом для анализа нейронных цепей в мозге млекопитающих в естественных условиях . Однако ограниченное количество в vivo тепловизионные методы существуют для изучения мозговой ткани живых новорожденных млекопитающих. Здесь мы кратко протокол для визуализации отдельных корковых нейронов в живых новорожденных мышей. Этот протокол включает в себя следующие две методологии: (1) системе Сверхновая для разреженных и яркие маркировки корковых нейронов в развивающийся мозг и (2) хирургическая процедура для хрупких новорожденного череп. Этот протокол позволяет наблюдение временных изменений отдельных корковых невритов новорожденных этапах с высоким соотношением сигнал шум. Приклеенные этикетку клеток конкретных генов и нокаут также могут быть достигнуты путем объединения сверхновой РНК-интерференции и ТРИФОСФАТЫ/Cas9 гена систем редактирования. Этот протокол может таким образом, использоваться для анализа динамики развития корковых нейронов, молекулярные механизмы, которые управляют нейрональных динамики и изменения в динамике нейронов в модели заболеванием.

2D фигуры - 2F представитель результаты двух Фотон покадровой изображений корковых нейронов слоя 4 с использованием настоящего Протокола. Для целей анализа выберите нейронов с четкой дендритных морфологии на протяжении периодов изображений. Мы проан?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice at JoVE.com

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

Мы представляем в естественных условиях двух фотонных изображений протокол для визуализации коры головного мозга у новорожденных мышей. Этот метод подходит для анализа динамики развития корковых нейронов, молекулярные механизмы, которые управляют нейрональных динамики и изменения в нейрональных динамика в модели заболеванием.

В естественных условиях Двух фотонных изображений корковых нейронов в новорожденных мышей

Two-photon imaging is a powerful tool for the in vivo analysis of neuronal circuits in the mammalian brain. However, a limited number of in vivo imaging ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в неврологии, особенно те, которые связаны с образованием гнезда нейронов. Основным преимуществом этой методики является то, что исследователи могут анализировать морфологические изменения отдельных нейронов у живых неонатальных мышей. Начните с анестезированной послеродовой день пять щенка и продолжить только при отсутствии реакции на тест щепотку хвоста.Во-первых, стерилизовать кожу головы, вытирая его 70% этанола. Затем используйте ножницы стерилизованные с 70% этанола, чтобы удалить около 20 квадратных миллиметров кожи, покрывающей череп. Затем используйте стерильные типсы и чистый ватный тампон, пропитанный буфером коры головного мозга, чтобы удалить фасцию черепа.Используйте наконечник загрузки, чтобы применить клей ткани к наклонной поверхности кожи, чтобы остановить кровотечение, избегая при этом области, которые будут изображены. Поместите щенка на другую грелку, установленную до 37 градусов по Цельсию, и дайте ему оправиться от анестезии. Подождите около 30 минут, пока клей ткани высохнет и затвердеет.Как только клей ткани высохнет, начните подготовку черепного окна на повторно анестезироваемой мыши. Нанесите одну каплю буфера коры на череп, затем используйте стерильное лезвие бритвы, чтобы тщательно открыть область диаметром один миллиметр черепа, оставив дуру нетронутой. Нанесите буфер коры, чтобы сохранить поверхность мозга влажной.Используйте небольшой кусочек желатиновой губки, пропитанной буфером коры, чтобы остановить кровотечение. Используйте свежий кусок, чтобы сжать одну сторону краниотомии и слить любой буфер и кровь из дуральной поверхности, не касаясь дуры. Это самый важный шаг для подготовки четкого окна.Дура должна быть неповрежденной и кисть должна быть удалена из открытой дуры. Затем используйте наконечник пипетки, чтобы нанесите тонкий слой в один процент низкоплавильной агарозы, растворенный в буфере коры головного мозга. Нанесите круглую трехмиллиметровую стеклянную крышку на слой агарозного геля.Удалите все пузырьки между крышкой скольжения и агарозы гель слой, наливая сверх агарозы гель между ними. Используйте пинцет, чтобы удалить избыток геля, выступающий из-под крышки скольжения. Смешайте цементный порошок и цементную жидкость.Используйте наконечник пипетки, чтобы применить смесь к черепу, прежде чем он затвердеет. Затем прикрепите изготовленный на заказ титановый бар к черепной кости с помощью зубного цемента. Выровняйте титановый бар, и крышка скользит параллельно, чтобы легко захватить изображения.Обложка подвергаются черепа с зубным цементом. Затем подкожно вводят обезболивающее. Поместите щенка в клетку восстановления на 37 градусов по Цельсию тепловой площадки в течение часа, пока зубной цемент затвердеет.Чтобы начать визуализацию, сначала установите двухкориновую лазерную длину волны. Для возбуждения RFP используйте длину волны 1000 нанометров. Протрите поверхность крышки скольжения с 70% этанола.Прикрепите обезболивающего щенка к титановой пластине на стадии визуализации, используя титановый батончик. Используйте этап гониометра, чтобы настроить голову, так что крышка скольжения параллельно объектива. Поддерживайте температуру тела щенка во время визуализации с помощью грелки, установленной до 37 градусов по Цельсию, и уменьшите концентрацию изофлюрана до 0,7%-1%Поместите стадию визуализации под 20-х объективом двух фотонной микроскопа.Нанесите одну каплю воды на крышку скольжения. Установите программное обеспечение для получения изображений с интервалом в 1,4 микрона. Для визуализации нейронов слоя 4 установите ширину от 150 до 300 микрон для изображения всей дендритической морфологии.Используйте медленное сканирование и усреднение, чтобы получить четкие изображения, показывающие нейрональной морфологии. Это обычно занимает более 20 минут, чтобы приобрести всю дендритную морфологию. На этом снимке показано репрезентативное изображение слоя четырех корковых нейронов щенка P5.Стрелка указывает на нейрон, который будет проанализирован. Нейроны с размытыми дендритами должны быть удалены из анализа. На этом изображении показано более высокое увеличение изображения указанного нейрона на предыдущем изображении.Синие наконечники стрел указывают на дендритные наконечники, которые будут отозваны в следующую точку времени, а маленькие белые наконечники стрел указывают на аксон соседней ячейки. Через 4,5 часа дендритные наконечники с синими наконечниками стрел убираются, а дендритические наконечники с желтыми наконечниками стрел удлинены. Здесь показана репрезентативная дендритная морфологическая реконструкция, нейроны, показывающие отключенные дендриты, как показано здесь, должны быть исключены из анализов.При попытке этой процедуры, важно, чтобы сохранить дуру нетронутыми, во время процесса. Используя эту процедуру, другие методы, как в двигательной визуализации могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы, связанные с моделью активности нейронов в неонатальном мозге.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

Тонкие черепа Window Техника для Хронический Двухфотонное В естественных условиях Визуализация мышей микроглии в моделях Neuroinflammation

Traditionally in neuroscience, in vivo two photon imaging of the murine central nervous system has either involved the use of open-skull1,2 or ...

In vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord Using Two-photon Microscopy

In vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord Using Two-photon Microscopy

В естественных условиях Визуализация Мышь спинного мозга с использованием двух-фотонной микроскопии

In vivo imaging using two-photon microscopy 1 in mice that have been genetically engineered to express fluorescent proteins in specific cell types 2-3 has ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

В Vivo Двухфотонные изображений зависящие от опыта молекулярные изменения в корковых нейронов

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

In Vivo Two-Photon Microscopy of Single Nerve Endings in Skin

In Vivo Two-Photon Microscopy of Single Nerve Endings in Skin

В Vivo Двухфотонное микроскопии Одноместный нервных окончаний в коже

Nerve endings in skin are involved in physiological processes such as sensing1 as well as in pathological processes such as neuropathic pain2. Their ...

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

Двухфотонное<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Визуализация дендритных шипиков в мыши Cortex Использование разреженных черепа Подготовка

In the mammalian cortex, neurons form extremely complicated networks and exchange information at synapses. Changes in synaptic strength, as well as ...

Two-photon Imaging of Cellular Dynamics in the Mouse Spinal Cord

Два-Фотон изображений клеточной динамики в спинном мозге мыши

Two-photon (2P) microscopy is utilized to reveal cellular dynamics and interactions deep within living, intact tissues. Here, we present a method for ...

Simultaneous Two-photon In Vivo Imaging of Synaptic Inputs and Postsynaptic Targets in the Mouse Retrosplenial Cortex

Simultaneous Two-photon In Vivo Imaging of Synaptic Inputs and Postsynaptic Targets in the Mouse Retrosplenial Cortex

Одновременная Двухфотонное<em&gt; В Vivo</em&gt; Визуализации синаптических входов и Постсинаптических цели в коре головного мозга мыши ретроспленальной

This video shows the craniotomy procedure that allows chronic imaging of neurons in the mouse retrosplenial cortex (RSC) using in vivo two-photon ...

Quantification of Filamentous Actin (F-actin) Puncta in Rat Cortical Neurons

Quantification of Filamentous Actin F-actin Puncta in Rat Cortical Neurons

Количественное нитевидных актина (F-актин) Puncta на крысиной корковых нейронов

Filamentous actin protein (F-actin) plays a major role in spinogenesis, synaptic plasticity, and synaptic stability. Changes in dendritic F-actin rich ...

Two-photon Calcium Imaging in Neuronal Dendrites in Brain Slices

Двух Фотон кальция изображений в нейрональных дендритов в срезах головного мозга

Calcium (Ca2+) imaging is a powerful tool to investigate the spatiotemporal dynamics of intracellular Ca2+ signals in neuronal dendrites. Ca2+ ...

Visualizing Protein Kinase A Activity In Head-fixed Behaving Mice Using In Vivo Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

Визуализация белка киназы активность в голову фиксированной вести мышей, используя в Vivo двухфотонная флуоресценция Пожизненная микроскопия изображений

Neuromodulation exerts powerful control over brain function. Dysfunction of neuromodulatory systems results in neurological and psychiatric disorders. ...