Name: determination of reproductive competence by confirming pubertal onset and performing a fertility assay in mice and rats
Uploaded: 2018-10-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats at JoVE.com

이 게시의 기초는 초기 작업에 기여 하는 저자를 감사 합니다. Aitor 아구, 제네 비 브 중 라이언과 에리카 L. Schoeller 원고를 준비 하는 도움 원고와 기술 지원에 대 한 제시카 소라 리와 오스틴 턱에 감사. H.M.H. 유 니스 케네디 슈 라이버 국립 연구소의 아동 건강 및 보너스 번호 R00HD084759에서 건강의 국가 학회의 인간 발달에 의해 지원 되었다.

여기에 설명 된 모든 메서드를 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 미시간 주립 대학에 의해 승인 하 고 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에 따라 실시 되었습니다.
1. 확인할 Pubertal 발병
<ol><li>의류, 최소한 기관 지침에 따라, 그것은 깨끗 한 실험실 외 투 및 깨끗 한 장갑을 착용 하는 데 필요한. 항상 깨끗 한 장갑을 착용 하는 마우스를 처리 합니다.</li>
	<li>테이블에 ?...

<ol>
	<li>Schneider, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+balance+and+reproduction.">Energy balance and reproduction.</a> Physiology and Behavior. 81 (2), 289-317 (2004).</li><li>Walton, J. C., Weil, Z. M., Nelson, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+photoperiod+on+hormones,+behavior,+and+immune+function.">Influence of photoperiod on hormones, behavior, and immune function.</a> Frontiers Neuroendocrinology. 32 (3), 303-319 (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility:+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance.">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, (2016).</li><li>Kauffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+differentiation+and+the+Kiss1+system:+Hormonal+and+developmental+considerations.">Sexual differentiation and the Kiss1 system: Hormonal and developmental considerations.</a> Peptides. , (2009).</li><li>Bronson, F. H., Dagg, C. P., Snell, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reproduction. , (1966).</li><li>Chehab, F. F., Mounzih, K., Lu, R., Lim, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+onset+of+reproductive+function+in+normal+female+mice+treated+with+leptin.">Early onset of reproductive function in normal female mice treated with leptin.</a> Science. , (1997).</li><li>Yoshimura, S., Yamaguchi, H., Konno, K., Ohsawa, N., Noguchi, S., Chisaka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+of+Preputial+Separation+is+a+Useful+Tool+for+Evaluating+Endocrine+Active+Chemicals.">Observation of Preputial Separation is a Useful Tool for Evaluating Endocrine Active Chemicals.</a> J Toxicologic Pathology. 18, 141-157 (2005).</li><li>Ahima, R. S., Dushay, J., Flier, S. N., Prabakaran, D., Flier, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+accelerates+the+onset+of+puberty+in+normal+female+mice.">Leptin accelerates the onset of puberty in normal female mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 99 (3), 391-395 (1997).</li><li>Bohlen, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+short-day+photoperiod+delays+the+timing+of+puberty+in+female+mice+via+changes+in+the+kisspeptin+system.">A short-day photoperiod delays the timing of puberty in female mice via changes in the kisspeptin system.</a> Frontiers in Endocrinology. 9 (FEB), 1-9 (2018).</li><li>Shahab, M., Mastronardi, C., Seminara, S. B., Crowley, W. F., Ojeda, S. R., Plant, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+hypothalamic+GPR54+signaling:+A+potential+mechanism+for+initiation+of+puberty+in+primates.">Increased hypothalamic GPR54 signaling: A potential mechanism for initiation of puberty in primates.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. , (2005).</li><li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility:+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance.">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, 5-9 (2016).</li><li>Navarro, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Neurokinin+B+in+the+Control+of+Female+Puberty+and+Its+Modulation+by+Metabolic+Status.">Role of Neurokinin B in the Control of Female Puberty and Its Modulation by Metabolic Status.</a> Journal of Neuroscience. 32 (7), 2388-2397 (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Tamrazian, A., Xie, H., P&#233;rez-Mill&#225;n, M. I., Kauffman, A. S., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterozygous+deletion+of+ventral+anterior+homeobox+(Vax1)+causes+subfertility+in+mice.">Heterozygous deletion of ventral anterior homeobox (Vax1) causes subfertility in mice.</a> Endocrinology. 155 (10), 4043-4053 (2014).</li><li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Kisspeptin+Receptor+GPR54+Is+Required+for+Sexual+Differentiation+of+the+Brain+and+Behavior.">The Kisspeptin Receptor GPR54 Is Required for Sexual Differentiation of the Brain and Behavior.</a> Journal of Neuroscience. 27 (33), 8826-8835 (2007).</li><li>Teles, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brief+report:+A+GPR54-activating+mutation+in+a+patient+with+central+precocious+puberty.">Brief report: A GPR54-activating mutation in a patient with central precocious puberty.</a> New England Journal of Medicine. , (2008).</li><li>Korenbrot, C. C., Huhtaniemi, I. T., Weiner, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preputial+separation+as+an+external+sign+of+pubertal+development+in+the+male+rat.">Preputial separation as an external sign of pubertal development in the male rat.</a> Biology of reproduction. , (1977).</li><li>Gaytan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+validation+of+a+method+for+precise+dating+of+female+puberty+in+laboratory+rodents:+The+puberty+ovarian+maturation+score+(Pub-Score).">Development and validation of a method for precise dating of female puberty in laboratory rodents: The puberty ovarian maturation score (Pub-Score).</a> Scientific Reports. 7 (March), 1-11 (2017).</li><li>Caligioni, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 1-11 (2010).</li><li>Mayer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Timing+and+completion+of+puberty+in+female+mice+depend+on+estrogen+receptor+-signaling+in+kisspeptin+neurons.">Timing and completion of puberty in female mice depend on estrogen receptor -signaling in kisspeptin neurons.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (52), 22693-22698 (2010).</li><li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+Vaginal+Lavage,+Crystal+Violet+Staining,+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification.">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), 4-9 (2012).</li><li>Hedrich, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Mouse. , (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Trang, C., Gong, P., Kimura, I., Pandolfi, E. C., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+Vax1+from+Gonadotropin-Releasing+Hormone+(GnRH)+Neurons+Abolishes+GnRH+Expression+and+Leads+to+Hypogonadism+and+Infertility.">Deletion of Vax1 from Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) Neurons Abolishes GnRH Expression and Leads to Hypogonadism and Infertility.</a> Journal of Neuroscience. 36 (12), 3506-3518 (2016).</li><li>Sloboda, D. M., Howie, G. J., Pleasants, A., Gluckman, P. D., Vickers, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-+and+postnatal+nutritional+histories+influence+reproductive+maturation+and+ovarian+function+in+the+rat.">Pre- and postnatal nutritional histories influence reproductive maturation and ovarian function in the rat.</a> PLoS ONE. , (2009).</li><li>Manual, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+Strategies+for+Maintaining+Colonies+of+Laboratory+Mice.">Breeding Strategies for Maintaining Colonies of Laboratory Mice.</a> Management. , (2007).</li><li>Kennedy, G. C., Mitra, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+weight+and+food+intake+as+initiating+factors+for+puberty+in+the+rat.">Body weight and food intake as initiating factors for puberty in the rat.</a> The Journal of Physiology. , (1963).</li><li>Sisk, C. L., Foster, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+basis+of+puberty+and+adolescence.">The neural basis of puberty and adolescence.</a> Nature Neuroscience. 7 (10), 1040-1047 (2004).</li><li>Nelson, J. F., Karelus, K., Felicio, L. S., Johnson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+influences+on+the+timing+of+puberty+in+mice.">Genetic influences on the timing of puberty in mice.</a> Biology of reproduction. , (1990).</li><li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+I.+Cycle+frequency,+length+and+vaginal+cytology.">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biology of reproduction. , (1982).</li><li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weight+and+age+at+puberty+in+female+and+male+mice+of+strains+selected+for+large+and+small+body+size.">Weight and age at puberty in female and male mice of strains selected for large and small body size.</a> Genetical Research. , (1984).</li><li>Rodriguez, I., Araki, K., Khatib, K., Martinou, J. C., Vassalli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+vaginal+opening+is+an+apoptosis-dependent+process+which+can+be+prevented+by+the+overexpression+of+Bcl2.">Mouse vaginal opening is an apoptosis-dependent process which can be prevented by the overexpression of Bcl2.</a> Developmental Biology. , (1997).</li><li>Lomniczi, A., Wright, H., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulation+of+female+puberty.">Epigenetic regulation of female puberty.</a> Frontiers in Neuroendocrinology. 36, 90-107 (2015).</li><li>Selmanoff, M. K., Goldman, B. D., Ginsburg, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+serum+luteinizing+hormone,+follicle+stimulating+hormone+and+androgen+levels+in+males+of+two+inbred+mouse+strains.">Developmental changes in serum luteinizing hormone, follicle stimulating hormone and androgen levels in males of two inbred mouse strains.</a> Endocrinology. 100 (1), 122-127 (1977).</li><li>Larder, R., Clark, D. D., Miller, N. L. G., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothalamic+Dysregulation+and+Infertility+in+Mice+Lacking+the+Homeodomain+Protein+Six6.">Hypothalamic Dysregulation and Infertility in Mice Lacking the Homeodomain Protein Six6.</a> Journal of Neuroscience. 31 (2), 426-438 (2011).</li><li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+yield+and+composition+in+mice:+Effects+of+litter+size+and+lactation+number.">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comparative Biochemistry and Physiology -- Part A: Physiology. 84 (1), 127-133 (1986).</li><li>Chahoud, I., Paumgartten, F. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+litter+size+on+the+postnatal+growth+of+rat+pups:+is+there+a+rationale+for+litter-size+standardization+in+toxicity+studies.">Influence of litter size on the postnatal growth of rat pups: is there a rationale for litter-size standardization in toxicity studies.</a> Environmental research. 109 (8), 1021-1027 (2009).</li><li>Pandolfi, E. C., Hoffmann, H. M., Schoeller, E. L., Gorman, M. R., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haploinsufficiency+of+SIX3+Abolishes+Male+Reproductive+Behavior+Through+Disrupted+Olfactory+Development,+and+Impairs+Female+Fertility+Through+Disrupted+GnRH+Neuron+Migration.">Haploinsufficiency of SIX3 Abolishes Male Reproductive Behavior Through Disrupted Olfactory Development, and Impairs Female Fertility Through Disrupted GnRH Neuron Migration.</a> Molecular Neurobiology. , (2018).</li></ol>

쥐의 전반적인 복지21성공적인 불 임 분석 결과 대 한 중요 하다. 다 산 분석 결과 수행할 때 육체적으로 확인 하는 쥐에 매일이 스트레스를 일으킬 수로 중요 하다. 이들은 스트레스도 더 자주 케이지 변경을 하지 마십시오. 이상적으로 케이지 변화는 주당 1-2 회 더 이상 해질 것 이다. 어두운 단계 빛 노출 야행성 설치류에 번 식에 부정적인 영향을 미칩니다. 어두운 시간 동안 사...

사춘기를 통해 전환 성적 성숙 및 생식 능력을 달성 하기 위해 필요 합니다. Pubertal 전환 및 성인에서 비 옥의 정비 hypothalamic-뇌 하 수 체-gonadal 축 (그림 1) 불리는 생식 축에 의해 통제 된다. Pubertal 개시의 타이밍 및 비 옥의 정비 단단히 자손과 부모1,2의 생존의 기회를 높이기 위해 내부 뿐만 아니라 환경 요인에 의해 통제 된다. 이 프로토콜에는 생쥐와 쥐 생식 능력을 평가 하는 불 임 연구를 설정 하기 전에 성적 성숙 확인 pubertal 발병을 확인 하는 비-침략 적 접근 방식을 제공 합니다.
불 임 연구는 성적으로 성숙한 동물에서 수행 되 고 동물 사춘기를 통해 간 후에 시작 될 수 있다. Pubertal 발병 전에 생식 축, 이며 사춘기 (그림 1)를 시작에 부족 금액에 뇌 하 수 체에 성적인 성숙, 생식 샘 자극 호르몬-방출 호르몬 (GnRH)의의 핵심 드라이버 릴리스입니다. Pubertal 발병 증가 GnRH 릴리스 중간 예 하에서 발생 하는 복잡 한 프로세스입니다. GnRH 황 호르몬 (LH)과 여 포 자극 호르몬 (FSH) 분 비 뇌 하 수 체에서 2 개의 호르몬 gonadal 성숙 및 생식 기능 (그림 1)3,,45 에 대 한 필수적인 촉진 .
생식 축에 모욕 감소 다 산 되며 또한 사전 또는 지연 pubertal 발병 할 수 있다. Pubertal 발병과 생식 능력의 타이밍에 영향을 알려진 조건 포함 화학6,7, 증가/감소 몸 무게1,8에 변화를 방해 하는 내 분 비에 노출 날 길이2,9 그리고 유전자 변이10,11,12,13,,1415.
성적인 성숙의 개시 다 산 분석 결과를 설정 하기 전에 완료 해야 할 중요 한 단계 이다. Preputial 분리, 질 및 첫 발 정기를 통해 pubertal 개시 결정의 장점은 이러한 절차의 비-침략 적 특성으로 혈액 또는 동물16, 의 희생을 요구 하지 않기 17.
Pubertal 개시 결정 후 불 임 연구를 제대로 설정 생식 축의 무결성에 대 한 중요 한 정보를 제공 합니다 있으며 일반적으로 생성 하는 추가 연구 (수정)에 대 한 실험 동물의 두 번째 장점은 18.이 프로토콜에서 설명 하는 불 임 연구 설치 남성과 여성 생식 능력에서 미성년자와 주요 적자를 검색할 수 있습니다. 키 매개 변수 계산 포함 1) 첫 번째 쓰레기, 2) 주어진된 시간 프레임 및 3) 담가 크기에서 생성 하는 새끼의 수를 시간. 마지막으로, 후속 불 임 장애의 원인을 파악 하기 위해 실시 수 있는 연구의 유형에 대 한 권장 사항이 포함 되어 있습니다.
유전자 변형 쥐에 일을 반영 하는 대표적인 데이터 및 설명된 프로토콜 마우스를 말합니다. 그러나, 모든 포함된 프로토콜은 쥐에서 동등 하 게 유효 합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1092">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Sterile Cotton Balls</td>
			<td style="width:167px;">Fisher</td>
			<td style="width:280px;">22456885</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Surface protector</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>1420637</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Light meter</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21800-014</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Methylene blue&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M9140</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Microscope Slides</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>29-101</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Optimouse rack with cages</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C89100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Water Bottle Basket&#160;</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C61011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Filtered Cage Tops</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C78210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Optimice Standard Feeder</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C40100SG</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cage Card Holder</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C43251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cage Cards</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>M52010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Bottle Assambley</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C79122P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Bed R&#39;Nest Nesting</td>
			<td style="width:167px;">The Andersons</td>
			<td style="width:280px;">BRN4WSR</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1/8&#34; Corn Cob bedding&#160;</td>
			<td style="width:167px;">The Andersons</td>
			<td style="width:280px;">8B</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Standard mouse chow</td>
			<td>Teklad</td>
			<td style="width:280px;">7904 (7004)</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Scale</td>
			<td>VWR</td>
			<td style="width:280px;">10205-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Polypropylene Beaker</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-955-111F</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

determination of reproductive competence by confirming pubertal onset and performing a fertility assay in mice and rats

생식 능력의 평가 치료 또는 또한 불린 hypothalamic-뇌 하 수 체-gonadal 축 생식 축에 유전자 조작의 영향을 이해 하는 데 중요 하다. 생식 축 다 산 재생산에 유리한 조건에 적응 하는 환경 및 내부 입력의 주요 통합 이다. 쥐 및 쥐에 불 임 연구에 착수, 이전 성적 성숙 평가 제외 가능성 관찰된 생식 고기에 의해 발생 하는 지연 또는 pubertal 발병 결 석. 이 프로토콜 pubertal 발병 preputial 분리의 결정을 통해 남성 및 질 및 첫 발 정기를 통해 여성을 평가 하는 비-침략 적 접근 방식을 설명 합니다. 사춘기의 성적 성숙의 공적 및 확인 후 불 임 연구를 시작할 수 있습니다. 절차는 쥐와 쥐, 불 임 연구를 설정 하는 방법 및 어떤 매개 변수를 평가 하 고 치료 또는 유전자 삭제 다 산에의 영향을에 있는지 확인에 대 한 최적의 번 식 조건을 설명 합니다.

발표 결과 녹음 방송 요인 복 부 앞쪽 homeobox 1 (Vax1) 여기 라고도 heterozygote 쥐 (HET)13또는 Vax1 1 개의 대립 유전자에 몸 전체에서 삭제 된 두 개의 서로 다른 유전자 변형 마우스 모델에서 조건에 따라 GnRH 신경 세포22, 여기 조건부 코 (cKO)를 되 나 이내 삭제 되었습니다. 불 임 연구를 설정 하기 전에 모든 쥐에 pubertal 발병을 확?...

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Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats

Pubertal 발병을 확인 하 고 쥐 및 쥐에 다 산 분석 결과 수행 하 여 생식 능력의 결정

많은 치료 및 유전자 변이 성적 성숙과 다 산의 타이밍에 영향을. 이 프로토콜 pubertal 발병 쥐 및 쥐에 성적으로 성숙한 동물 불 임 연구를 설정 하는 이전에 평가 하는 비-침략 적 방법을 설명 합니다.

Assessment of reproductive competence is critical for understanding the impact of a treatment or genetic manipulation on the reproductive axis, also ...

이 방법은 생식 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다, 예컨대 preputial 분리를 통해 마우스와 쥐의 사춘기 발병을 결정하는 방법과 같은, 질 개구부, 불임 연구를 수행하기 전에 첫 번째 에스트루를 확립. 이 기술의 주요 장점은 입증 된 비 침습적 접근법을 사용하여 사춘기 발병을 확립함으로써 성적으로 성숙한 동물에서 불임 연구를 따르고 수행 할 수 있다는 것입니다. 이 기술의 의미는 화학 물질을 방해하는 내분비와 같은 생식 능력에 영향을 받기 쉬운 유전 돌연변이 또는 처리에 기인하는 재생에 있는 적자의 진단을 향해 확장합니다.이 방법은 마우스에 있는 생식 능력에 통찰력을 제공할 수 있더라도, 또한 쥐와 햄스터와 같은 그밖 모형 시스템에 적용될 수 있습니다. 이 방법의 시각적 데모는 좋은 섬세한 동물 처리 기술이 필요하기 때문에 매우 중요합니다. 미리 분리 및 질 개방의 다음 시각적 식별을 위해 마우스를 올바르게 유지하는 것이 특히 중요합니다.작업 영역을 준비하려면 패드를 테이블에 놓습니다. 그런 다음 깨끗한 마우스 케이지 위에 그리드가 위를 향하여 패드에 놓습니다. 다음으로 작업 영역에 스케일을 설정합니다.깨끗한 500 ~1000 밀리리터 비커를 스케일에 놓고 그것을 잘 어울럽힙거라. 그런 다음 작업 영역 옆에 시트를 배치하여 데이터를 기록합니다. 이 후 마우스 케이지를 작업 영역에 배치합니다.케이지를 열고 뚜껑, 물병 및 음식 홀더를 테이블에 제거합니다. 꼬리에 마우스를 들고있는 동안, 깨끗한 마우스 케이지 상단에 놓습니다. 꼬리를 잡는 동안 마우스가 케이지 상단의 격자를 탐색하도록 합니다.꼬리를 부드럽게 뒤로 당기고 다른 손으로 목과 귀에 가까운 피부에 접근합니다. 엄지와 집게 손가락으로 어깨와 목 사이의 느슨한 피부를 잡습니다. 그런 다음 나머지 손가락으로 뒷면의 피부를 잡고 부드럽게 손에 눌러 마우스를 잡습니다.무료 손으로, 부드럽게 다시 음경 주위에 피부를 밀어. 현존적 분리에서, preputial 피부는 뒤로 미끄러져, 글랜 음경을 노출. 검사 후, 사전 분리의 존재 또는 부재를 기록합니다.이 후, 마우스의 무게와 무게를 기록합니다. 그런 다음 케이지 바닥에 비커를 잡고 마우스가 자체적으로 종료할 수 있도록 하여 하우징 케이지에 마우스를 다시 소개합니다. 작업 공간에 면공, 대형 비커, 멸균수 한 병을 배치합니다.비커에 멸균물을 붓습니다. 그런 다음, 비커에 멸균물로 면공을 가습하고 깨끗한 케이지 탑 옆에 놓습니다. 작업 영역에 마우스 케이지를 배치합니다.그런 다음 꼬리의 베이스로 마우스를 잡고 케이지 상단으로 옮김합니다. 마우스의 꼬리를 부드럽게 당겨 마우스로 전진하는 움직임을 장려합니다. 그 후, 세 손가락으로 엉덩이를 지지하면서 꼬리를 들어 올립니다.가습된 면공으로 외음부를 부드럽게 청소한 다음 외음부를 검사하여 질이 완전히 열려 있는지 확인합니다. 질 개구부가 발생한 경우 기록합니다. 그런 다음 마우스의 무게를 측정하고 홈 케이지로 돌아갑니다.각 번식 쌍의 쥐에 대해 뚜껑, 물, 음식, 침구 및 중첩 재료로 깨끗한 마우스 케이지를 준비하십시오. 그런 다음 필요한 정보와 함께 케이지 카드를 작성합니다. 준비된 침구 케이지를 깨끗한 테이블에 놓고 천천히 장갑을 낀 손을 마우스 케이지에 넣고 짧은 시간 동안 케이지에 둡니다.장갑을 낀 손으로 마우스에 천천히 접근하십시오. 마우스가 손 위로 달릴 때 엄지와 검지 손가락 사이에 마우스 한 마우스의 꼬리를 잡은 다음 꼬리로 마우스를 들어 올립니다. 마우스는 최대 2~3초 동안 바디의 지지 없이 꼬리에 의해 보관될 수 있습니다.준비된 사육 케이지에 마우스를 놓고, 수컷과 암컷 마우스에 음식, 물 및 중첩 물질이 있는지 확인 한 후 케이지를 닫습니다. 제시된 방법을 사용하여, 두 개의 상이한 형질전환 마우스 모형이 연구되었다. 질 개구부 및 예의 분리는 이종화 마우스와 대조마우스 모두에서 동일한 연령과 무게에서 발생하였다.반대로, 질 개구부 및 preputial 분리는 조건부 녹아웃 여성과 남성에서 현저하게 지연되었고, 체중 증가와 관련이 있었다. 나이의 4.5 주에, 여성 컨트롤및 조건부 녹아웃 마우스는 비교 체중을 했다, 조건부 녹아웃 남성 컨트롤 보다 약간 무거운 동안. 이는 조건부 녹아웃 마우스의 질 개구부 및 전량적 분리의 지연이 체중 증가지연과 관련이 없다는 것을 나타낸다.사춘기 발병이 끝난 후, 불임 연구는 10주에서 16주에 시작되었습니다. 남성과 여성 이테로지고테 마우스는 모두 비옥하였다. 이테로지고테 암컷은 3개월 간의 연구에서 더 적은 쓰레기를 발생시켰으며, 남성과 여성 이종조 마우스는 모두 더 작은 쓰레기를 생성했습니다.불임 분석서를 설치하기 전에 사춘기 발병을 확인하는 것의 중요성을 설명하기 위해, 생식 능력은 조건부 녹아웃 마우스에서 평가되었다. 70일 간의 불임 연구에서 조건부 녹아웃 남성이나 암컷모두 쓰레기를 생성하지 않았습니다. 이 절차를 시도하는 동안, 주의마우스를 처리하고 접근하고 동물을 처리하는 동안 침착유지하는 것이 중요합니다.이 절차에 따라, 순환 성 호르몬 수준을 측정 하는 같은 다른 방법은 추가 질문에 대답 하기 위해 수행 될 수 있습니다., 불 임 또는 다른 비 모 는 비정상적인 남성 호르몬에 의해 발생 했다 여부, 에스트로겐, 여 포 자극 호르몬, 그리고 황 호르몬 수준. 마우스와 함께 일하는 것은 알레르기의 물고 발달의 위험 때문에 유해할 수 있다는 것을 잊지 마십시오. 노출을 줄이기 위해 장갑과 실험실 코트를 착용하는 것과 같은 예방 조치와 마우스의 주의 깊게 다루어질 때 항상 이 절차를 수행해야합니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats

수동 규제와 마우스 및 쥐 일반적인 합성 관리 경로

Being able to safely and effectively restrain mice and rats is an important part of conducting research.  Working confidently and humanely with mice and ...

연구

생물학

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

진단 검시와 고양이와 마우스의 선택 조직 및 샘플 수집

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Ovariectomy and 17&beta;-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Ovariectomy and 17ÃƒÅ½Ã‚Â²-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

고양이와 쥐의 Ovariectomy 및 17β-estradiol 대체 : 비주얼 데모

Estrogens are a family of female sexual hormones with an exceptionally wide spectrum of effects. When rats and mice are used in estrogen research they are ...

A Rapid and Specific Microplate Assay for the Determination of Intra- and Extracellular Ascorbate in Cultured Cells

배양 된 세포의 내부와 세포 외 아스 코르 빈산의 결정에 대한 신속하고 특정 마이크로 분석

Vitamin C (ascorbate) plays numerous important roles in cellular metabolism, many of which have only come to light in recent years. For instance, within ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

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성인 마우스 두개골 골수에서 조혈 줄기 및 전구 세포의 생체 내 4 차원 추적에서

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

마우스 고환의 생체 내 미세 주입 및 Electroporation에에서

This video and article contribution gives a comprehensive description of microinjection and electroporation of mouse testis in vivo. This particular ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

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본래 동맥의 내피 층에서 산화 질소와 활성 산소의 욕실 얼굴 인식

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

마우스입니다 관류 신장 기법

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

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야생형과 간암의 시알 산의 결정<em&gt; CMAH</em&gt; 넉 아웃 마우스.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

양서류에서 난소 모니터링 및 제어를위한 생식 기술

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...